SCI 干细胞国际 1687 - 9678 1687 - 966 x Hindawi 10.1155 / 2019/1602751 1602751 研究文章 胰岛素增强屈肌Tendon-Derived祖细胞的体外成骨的能力 https://orcid.org/0000 - 0002 - 5804 - 0406 Durgam Sushmitha年代。 奥特曼 Nadine N。 Coughlin 哈雷E。 罗林斯 奥黛丽 Hostnik Laura D。 Mussano 费德里科• 兽医临床科学 兽医学院 美国俄亥俄州立大学 弗农·l·Tharp街601号 哥伦布 哦 43210年 美国 osu.edu 2019年 27 12 2019年 2019年 04 08年 2019年 17 11 2019年 30. 11 2019年 27 12 2019年 2019年 版权©2019 Sushmitha Durgam et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

肌腱疾病的发病率有增加和减少肌腱治疗糖尿病(DM)患者的能力。最近的研究也表明在修复肌腱的DM患者病理骨化。因此,本研究的目的是探讨胰岛素补充的影响,糖尿病的一个重要病理生理的刺激,在肌腱祖细胞(TPC)体外增殖和成骨的能力。通过3 tpc collagenase-digested隔绝,马肤浅的指屈肌腱。TPC扩散测量通过MTT试验后3天的单层培养中补充了0、0.007、0.07和0.7纳米胰岛素。tpc体外成骨的能力(茜素红染色、成骨的mRNA表达和碱性磷酸酶生物活性)评估了0,0.07和0.7 nM insulin-supplemented成骨诱导介质。胰岛素(0.7海里)显著增加TPC扩散后3天的单层培养。茜素红染色来TPC成骨的文化展示了强大的细胞聚集和矿化基质分泌,剂量依赖性的方式。Runx2、碱性磷酸酶和骨粘连蛋白mRNA和碱性磷酸酶的生物活性来TPC文化的第14天显著高于骨比未经处理的控制。添加picropodophyllin (PPP),选择性IGF-I受体抑制剂,减轻tpc成骨的能力的增加,表明IGF-I信号扮演重要的角色。我们的研究结果表明,高胰岛素血症可能改变TPC表型和随后影响修复肌腱组织的质量。

 1。介绍

腱炎和病变是常见和衰弱受伤的人 1- - - - - - 4]。最近的研究表明,糖尿病(DM)患者的发病率增加了肌腱疾病和介导在一定程度上是由于结构性变化( 5, 6]。此外,糖尿病患者与肌腱损伤肌腱愈合能力下降和复发性损伤的风险更大 5- - - - - - 7]。增加肌腱大小( 8, 9),无组织的胶原纤维( 8, 9),异常骨化修复肌腱( 10, 11)是一些在DM患者病理报告。增加钙沉积在跟腱插入DM患者中观察到,后来导致腱断裂。病理修复肌腱内骨化减少肌腱弹性,增加重复受伤的风险,是一种慢性疼痛和不适的人( 12, 13]。虽然最近的研究表明增加肌腱在DM患者病理生理和细胞负责机制还缺乏了解。

肌腱的细胞分数,由成熟的tenocytes和多功能肌腱祖细胞(tpc)非常小(< 1%),但负责合成和细胞外基质(ECM)周转,形成大量的肌腱组织( 14]。肌腱祖细胞演示clonogenicity万能干细胞特征,多能——和自我更新,它们的生物活性是严重依赖当地的环境/矩阵相互作用[ 14- - - - - - 16]。体外和体内腱祖细胞的表型在健康和病态的肌腱组织明显不同( 15- - - - - - 17]。体内,tpc修复肌腱愈合期间涉及chondrodegeneration指出[ 17, 18]。同样,tpc孤立的体外multipotency受伤跟腱受到限制和转向chondroosteogenic表型( 17, 19]。施等人所做的最近的一项研究表明,tpc隔绝DM有减少tenogenic chondroosteogenic基因的表型和表达水平较高( 20.]。综上所述,异常分化的tpc病理刺激的影响下出现在DM可能会负责病理性钙化组织出现在/治疗肌腱受伤。

外源性胰岛素用于临床管理DM。此外,系统性高胰岛素血次要受损的胰岛素敏感性可以发生在糖尿病早期。而tpc tenogenic表现型的DM肌腱受伤组织在离体培养与high-glucose浓度明显降低,高胰岛素浓度的影响在tpc没有调查( 20., 21]。外源性胰岛素和胰岛素样生长因子重组(IGF-I)增加成骨细胞的体外成骨的能力和牙周韧带成纤维细胞( 22, 23]。因此,我们假设外源性胰岛素影响TPC扩散和提高其体外成骨的能力。在第一组实验中,外源性胰岛素的影响(Humulin™0, 0.07,和0.7海里)在体外增殖和成骨的能力马屈肌tendon-derived tpc进行评估。其次,为了确定微分的影响胰岛素/胰岛素IGF-I信号存在,骨生成实验的胰岛素和picropodophyllin (PPP) IGF-I受体的选择性抑制剂。

 2。方法 2.1。腱祖细胞(TPC)隔离

tpc是从表面孤立数字屈肌肌腱的三(4 - 6岁)健康成年马使用[描述协议之前 14- - - - - - 16, 24]。这些细胞通过细胞表面标记特征表达式(CD 44+、CD29+,CD90+、CD45- - - - - -如前所述)和体外trilineage分化( 15, 16, 24]。一个完整的前肢浅屈肌肌腱从成年马安乐死肌肉骨骼疾病无关的原因。1 - 2厘米的长度研究肌腱标本,免费peritendinous组织,被丁为0.25厘米3块,并以0.2%胶原酶消化(沃辛顿)与2%胎牛血清的DMEM补充(双子座生物医学)37°C 16小时。释放细胞被过滤和离心分离和细胞被播种在500细胞/厘米2在单层文化high-glucose DMEM补充10%胎牛血清,37.5 μ300年抗坏血酸,g / mL μ克 l谷氨酰胺/毫升100 U的青霉素钠/毫升,和100年 μ硫酸链霉素的g / mL(基础培养基)。这些细胞被播种到细胞培养瓶和孵化在37°C公司为5%2使殖民地的形成。媒介是每三天更换一次。一旦形成明显的殖民地(> 200个细胞/殖民地),这些细胞被分离胰蛋白酶EDTA为0.02%和0.05%。细胞数量计算通过计算一个整除的暂停使用血球计和一个倒置光学显微镜。台盼蓝染料排斥被用来评估细胞的可行性。主细胞隔离受移植者在 5 × 10 3 细胞 /厘米2并通过两次在80 - 90%融合扩大祖细胞的细胞数量和丰富。

 2.2。细胞增殖

通道3 tpc镀 3 × 10 3 细胞 /厘米2在96孔板基础培养基。天文化后,胰岛素(0.007 0纳米,纳米,0.07 nM,和0.7纳米浓度;美国礼来公司Humulin™u - 100)添加治疗和培养3天。三个复制每个治疗组井是用来测量细胞数量通过线粒体代谢试验(细胞浓度测定肝癌96细胞增殖测定水一个解决方案,Promega)是按照制造商的指示使用。总之,20 μL包含四唑的测定试剂添加到每个包含100的96孔板 μL在37°C的新媒体和孵化2.5小时。吸光度测量在490 nm标(Tecan™无限200 PRO板读者)检测代谢产物的浓度,甲瓒。复制的平均值计算井提供一个数据点。这些光密度值从镀tpc从每个马被报道。

 2.3。成骨分化

通道3 tpc镀 5 × 10 3 细胞/厘米2在6-well细胞培养板和维护完全DMEM %融合,直到他们达到80 - 90%。完整的DMEM当时取代与成骨的介质(完整的DMEM补充10毫米 β-glyceraldehyde-3-phosphate 50 μg / mL抗坏血酸,100 nM地塞米松)或成骨的媒介与0.07或0.7纳米胰岛素(Humulin®u - 100,莉莉,美国)。媒介是48 - 72小时更换一次 15, 16]。文化是维持14天。此外,TPC成骨的文化(0,0.07,和0.7纳米胰岛素)也保持有或没有100 nM picropodophyllin(购买力平价;Selleckchem # S766802) IGF-I受体的小分子抑制剂。控制成骨的文化培养(+ / -胰岛素)和等量的DMSO溶液。

 2.4。茜素红染色成骨的文化

在天0 7和14成骨的文化媒介是吸气的单层细胞培养和细胞与1毫升4%福尔马林固定在室温下30分钟。固定后,细胞层与PBS洗了三次。一毫升的2%茜素红(Sigma-Aldrich)解决方案(2 g茜素红染料溶解在100毫升Milli-Q水;pH值调整到4.2)被添加到每个好,室温下孵化15分钟。飘散的污点被移除,细胞被用水洗了3 - 4次,直到冲洗液是清楚的。细胞内的矿床层彩色鲜艳的红色。低放大率(10 x)图像得到前成骨分化成骨的文化的和天7和14。一个倒置光学显微镜(徕卡微系统,徕卡应用Suite-LAS-version 6.0)被用来评估矿化基质沉积。

 2.5。RNA分离和定量rt - pcr

总RNA分离使用先前描述的协议( 15, 25]。样品均质在胍盐thiocyanate-phenol-chloroform溶液试剂(试剂盒,英杰公司)根据制造商的建议协议。合成颗粒纯化使用RNeasy硅列,包括列DNase消化。核糖核酸的浓度决定通过测量吸光度在260 nM (A260)和320海里(A320) NanoDrop一个/一个®(热费希尔科学)。一个 μ从每个样本reverse-transcribed g的RNA(上标IV,英杰公司)使用益生元(dT)引物。马gene-specific引物设计从基因库和使用ClustalW发表序列多重序列比对(可用 http://www.ebi.ac.uk)(表 1)。证实了克隆和测序引物特异性扩增子在优化实验,如前所述。PCR扩增被聚合催化DNA聚合酶(ABI QuantStudio 3™,热费希尔科学)的SYBR绿色。使用2相对基因表达是量化- - - - - - ΔΔCT参考的方法,规范化表达基因,伸长因子- 1 α(EF1 α)[ 26]。

用于实时PCR扩增引物。

基因 序列 扩增子(bp)
Runx2 年代一个 5 ′ CAG ACC AGC AGC CCA助教5 ′ CAG CGT CAA CAC猫猫TC 177年
碱性磷酸酶 年代一个 5 ′ TGG GGT棉酚GGC TAA TGA GG5 ′ TCG GGC ATC TTG苑插科打诨的助教 221年
骨粘连蛋白(OSN) 年代一个 5 ′ AAC CTT CTG ACC GAG亚美大陆煤层气有限公司CA5 ′ TGG广汽gg TAC CCA柠檬酸 190年
胰岛素受体 年代一个 5 ′ 注册会计师GGA CTA TCT GCA CAA TG5 ′ ACC GTC ACA TTC 20 ACA TC 182年
IGF-I受体 年代一个 5 ′ 太极拳TAA CCC TGA CTT CGG CG5 ′ TTC TTG GCA TGT CTG TGT GG 212年
EF1-alpha 年代一个 5 ′ CCC GGA CAC AGA广汽TTC5 ′ AGC ATG TTG柠檬酸CCA TTC CA 328年
2.6。碱性磷酸酶(ALP)生物活性测量

高山生物活性测定如前所述[ 27]。简单地说,在第14天,成骨的文化之前,细胞在300年收获 μL裂解缓冲(盐酸20毫米三、150毫米氯化钠和1% Triton x - 100)。每个样品均质、离心机600 rcf 15分钟在4°C,并保持在冰上30分钟。上层清液的化验高山活动使用商用高山化验设备和光化学物质(kouichi)测量的转换p-nitrophenylphosphate p-nitrophenol。这个反应生成的黄色强度10分钟后的孵化为405 nm波长(Tecan®无限200 PRO板读者)。

每个样本的相对高山生物活性是由规范测量p-nitrophenol释放DNA /分钟到相应的内容。

 2.7。DNA测量

DNA含量测定用Quant-iT PicoGreen dsDNA工具包(表达载体)。样本稀释1:5 1 x TE缓冲(10毫米三羟甲基氨基甲烷HCl液,1毫米EDTA, pH值7.5)。连续稀释λ的DNA被用来生成一个标准曲线。复制100 μL整除的每个样品和标准被转移到一个黑色的96孔酶标。一百年 μL PicoGreen试剂(1 μ200年L PicoGreen试剂稀释 μL 1 x TE缓冲)添加到每个样本和标准。微型板块是放置在黑暗中防止试剂光降解。5分钟的孵化后,荧光波长为485纳米(Tecan®无限200 PRO板读者)。

 2.8。统计分析

定量数据的正态分布(相对mRNA表达碱性磷酸酶活动)被证实使用Kolmogorov-Smirnov测试使用SigmaPlot 14软件(Systat软件®)。数据代表至少有三个独立的实验,每一式三份完成。所有的结果都表示为 的意思是 ± 标准 偏差 。单向方差分析是用来比较0.07和0.7纳米胰岛素补充与未经治疗的骨的成骨的文化在第14天。一个 p ≤0.05被认为是具有统计学意义的价值。

 3所示。结果 3.1。胰岛素会增加体外TPC扩散(图< xref掉=“图一”ref-type = "图" > < / xref > 1)

(a) TPC扩散测量通过MTT测定单层培养3天后在基础培养基补充0,0.007,0.07,和0.7 nM / L胰岛素。 ∗ 代表一个显著区别0和0.7 nM / L胰岛素( p ≤ 0.05 )。相衬显微照片(b)代表TPC单层文化基础培养基中维护和基础培养基为0.7纳米胰岛素3天。显著增加在tpc insulin-supplemented媒介。规模 酒吧 = One hundred. 微米。

经过3天的单层培养与胰岛素,TPC扩散为0.7 nM胰岛素显著增加(~ 2倍, p = 0.003 )比未经处理的控制。没有显著差异TPC扩散与0.007和0.07纳米胰岛素相比,未经处理的控制。

 3.2。胰岛素增加成骨分化的tpc体外(图< xref掉=“公文包”ref-type = "图" > < / xref > 2)

(一)茜素红点的TPC成骨的文化补充了0,0.07和0.7 nM / L胰岛素。胰岛素促进细胞聚合和矿化基质分泌茜素红染色强度吸收就证明了这一点。规模 酒吧 = 500年 微米。(b) mRNA水平(标准化EF1a) RUNX2的高山,和骨粘连蛋白(OSN) TPC成骨的文化补充了0,0.07和0.7 nM / L胰岛素。胰岛素治疗显著增加成骨基因表达。 ∗ 代表一个显著差异( p ≤ 0.0 5)治疗组之间。(c)碱性磷酸酶生物活性(归一化总DNA含量)的TPC成骨的文化补充了0,0.07和0.7 nM / L胰岛素。 ∗ 代表一个显著增加碱性磷酸酶活动( p ≤ 0.05 )。

 3.2.1之上。茜素红染色

胰岛素增加聚合形成和相关茜素红染色TPC成骨的文化(图 2(一个))。较大的矿化结节被发现在成骨的文化中包含0.07和0.7纳米胰岛素剂量依赖性的方式,在每天7和14比未经处理的控制。第14天,强烈的矿化结节染色,表明健壮的成骨分化,很明显在成骨的文化中包含胰岛素相比,未经处理的控制。

 3.2.2。成骨的基因表达

在第14天的成骨的文化中,Runx2 mRNA水平显著增加( p < 0.001 (图)和增加胰岛素浓度 2 (b))。Runx2 mRNA水平的成骨的文化为0.7纳米胰岛素( 5。5 量 褶皱 ± 1.25 0.07)显著高于纳米胰岛素( 2.8 量 褶皱 ± 0.9 ; p = 0.019 )和未经处理的控制(1; p = 0.002 )。没有显著差异的Runx2 mRNA水平0.07纳米胰岛素和控制成骨的文化。同样,成骨的文化的高山mRNA水平的第14天为0.7纳米胰岛素( 6.0 量 褶皱 ± 2.2 )明显高于0.07纳米胰岛素( 2.56 量 褶皱 ± 0.49 ; p = 0.045 )和未经处理的控制(1; p = 0.010 )。没有显著差异的高山mRNA水平0.07纳米胰岛素和控制成骨的文化。成骨的文化的第14天骨粘连蛋白mRNA水平为0.7纳米胰岛素( 5。8 量 褶皱 ± 1.04 0.07)显著高于纳米胰岛素( 3所示。3 量 褶皱 ± 0.35 ; p = 0.004 )和未经处理的控制(1; p < 0.001 )。成骨的文化的第14天骨粘连蛋白mRNA水平为0.07纳米胰岛素明显高于( p = 0.003 )比未经处理的控制。

 3.2.3。碱性磷酸酶(ALP)活性

碱性磷酸酶的生物活性成骨的文化符合上面的转录结果报告。高山生物活性(更易/ L p-nitrophenol)第14天的成骨的文化与0.7纳米胰岛素( 23.0 + 4.24 0.07)显著高于纳米胰岛素( 6.25 ± 1.49 ; p = 0.009 )和未经处理的控制( 4.47 + 1.73 ; p = 0.009 )。没有显著差异在高山生物活性为0.07纳米胰岛素和控制成骨的文化。

 3.3。胰岛素不同移植IGF-I受体信使rna在成骨分化的tpc(图< xref掉= "知道" ref-type = "图" > 3 < / xref >)

EF1a mRNA水平(标准化)IGF-I受体,胰岛素受体TPC控制单层的文化基础培养基中维护(Ctrl)和TPC成骨的文化补充了0,0.07和0.7 nM / L胰岛素。 ∗ 代表一个显著增加( p ≤ 0.05 )。

成骨分化的tpc(没有胰岛素补充)没有诱导upregulation IGF-I受体或胰岛素受体信使rna。在成骨的文化的第14天,0.07和0.7纳米胰岛素组显著增加( 8.1 量 褶皱 ± 1。1 ; p = 0.02 ; 13.3 量 褶皱 ± 1。3 ; p = 0.001 )IGF-I受体信使rna水平。相反,胰岛素补充TPC成骨的文化没有上调胰岛素受体信使rna水平。

 3.4。Picropodophyllin效果(PPP) Insulin-Mediated成骨分化的tpc(图< xref掉= "名片" ref-type = "图" > < / xref > 4日)

(一)茜素红点的TPC成骨的文化与0,0.07和0.7 nM / L胰岛素和100 nM picropodophyllin (PPP)。购买力平价减轻聚合和矿化基质分泌的tpc胰岛素治疗。规模 酒吧 = 500年 微米。(b) mRNA水平(标准化EF1a) RUNX2的高山,和骨粘连蛋白(OSN) TPC成骨的文化没有胰岛素(Ctrl),补充0.7 nM / L胰岛素(INS)和0.7 nM / L胰岛素和100毫米picropodophyllin (INS + PPP)。购买力平价返回增加成骨的基因表达在来tpc回到基线。 ∗ 代表一个治疗组之间的显著增加( p ≤ 0.05 )。(c)碱性磷酸酶生物活性(归一化DNA)的TPC成骨的文化没有胰岛素(Ctrl),补充0.7 nM / L胰岛素(INS)和0.7 nM / L胰岛素和100毫米picropodophyllin (INS + PPP)。 ∗ 代表一个治疗组之间的显著增加( p ≤ 0.05 )。

 3.4.1。茜素红染色(图< xref掉=“fig4a ref-type =“无花果”> 4 (a) < / xref >)

类似成骨的文化的tpc 0.07和0.7纳米胰岛素也保持在100 nM PPP的存在,一个特定的IGF-I受体抑制剂。添加PPP控制成骨的文化并没有阻止细胞聚合和矿化基质的分泌。然而,增加购买力平价成骨的文化包含胰岛素阻止聚合和沉积矿化矩阵。有最小的茜素红染色吸收成骨的第14天的文化与购买力平价和0.07和0.7纳米胰岛素治疗。

 3.4.2。成骨的基因表达

鉴于,0和0.07纳米胰岛素组没有始终彼此不同,以及购买力平价的影响评估在0.7纳米胰岛素组。在第14天成骨的文化接受购买力平价和0.7纳米胰岛素,信使rna Runx2的水平,高山,骨钙素0.7纳米胰岛素组相比显著降低。3成骨的标记的mRNA水平的14天成骨的文化对待购买力平价和0.7纳米胰岛素和成骨的对照组没有显著不同。

 3.4.3。高山生物活性

与转录结果一致,高山生物活性成骨的第14天的文化对待购买力平价和0.7纳米胰岛素单独胰岛素相比显著减少,类似于成骨的控制。

 4所示。讨论

鉴于胰岛素/ IGF-I在间充质干细胞(MSC)成骨的作用( 22, 23, 28- - - - - - 30.),我们假设胰岛素促进tpc的体外增殖和成骨分化。我们的研究结果表明,胰岛素显著增加TPC扩散后3天的单层培养。其次,胰岛素显著增加tpc的体外成骨的能力来控制成骨的文化相比,在剂量依赖性的方式。这些结果支持我们的假设。添加picropodophyllin,有趣的是,文化选择性IGF-I受体抑制剂,来减轻tpc的增强成骨分化能力,回到基线水平作为控制成骨的文化。

我们的实验都集中在评估的影响持续高胰岛素血或在tpc受损的胰岛素敏感性。本研究中使用的胰岛素浓度推断从血浆胰岛素浓度的高胰岛素血症/胰岛素抵抗[ 31日, 32]。胰岛素已被证明有一个前导影响多种细胞类型,包括间充质干/祖细胞( 33- - - - - - 38]。胰岛素和IGF-I配体和分享各自的受体明显相似的信号属性在真核细胞 22]。胰岛素细胞增殖增加绑定胰岛素和/或IGF-I受体和随后的Akt激活和/或ERK途径( 33, 34, 37]。同样,IGF-I抑制细胞周期阻滞在tpc通过Akt通路,从而增加细胞增殖( 39- - - - - - 42]。虽然我们没有调查机制参与的前导胰岛素对tpc的影响,类似的机制可能涉及。另一方面,林等人证明了高葡萄糖减少体外TPC增殖和凋亡 21]。同一组的后续研究表明,tpc隔绝与实验性糖尿病大鼠体外增殖率下降控制tpc相比。在两个研究中,高血糖单独作为一个病理生理的刺激在DM tpc是评估的特征。根据这些发现,评估高胰岛素和葡萄糖的TPC可行性/扩散是十分必要的。

胰岛素起着至关重要的作用在骨骼骨形成和维护 43]。胰岛素刺激内源性IGF-I IGF-I受体信号通过绑定,也为成骨分化和骨骼发育的关键因素( 44, 45]。在这项研究中,胰岛素增强TPC Runx2的移植mRNA表达成骨的能力,掌握转录监管机构的成骨分化,剂量依赖性的方式。Runx2 upregulation对于后续关键矩阵的表达式是必要的蛋白质如胶原蛋白I型、骨钙蛋白、骨桥蛋白。成骨分化和矿化由IGF-I配体发生在其他MSC类型通过激活一种蛋白激酶和/或ERK途径( 22, 23, 34, 46]。鉴于胰岛素和IGF-I激活相似的细胞内信号通路,胰岛素可能提高tpc成骨的能力通过激活一种蛋白激酶和/或ERK途径。

我们的数据表明,胰岛素补充(在本研究中使用的浓度)在TPC骨生成不同移植IGF-I受体信使rna表达胰岛素受体信使rna表达无明显变化。为此,购买力平价来添加TPC成骨的文化阻碍了增加成骨分化(成骨的mRNA水平,矿化基质分泌与茜素红染色,评估和碱性磷酸酶生物活性)TPC。由于购买力平价没有干扰tpc的基底成骨的能力,一个复杂的相互作用条件有利于成骨tenogenesis为代价是可能的。江等人所做的一项最新研究表明,IGF-I强BMP9在骨骨髓来源的成骨分化诱导msc ( 47]。接受骨形成蛋白(BMP)信号的角色失调(受体调节BMP receptor-1a, BMP 2 Smad1和Smad5 mrna)在肌腱病理骨化和tpc进行体外和体内骨生成 12, 48, 49在胰岛素治疗),评估BMP信号tpc是十分必要的。

这些体外的临床重要性结果需要进一步调查,鉴于受损的胰岛素敏感性/高胰岛素血是经常出现在结合糖尿病患者的高血糖。关于TPC扩散,我们的研究中,其中,表明高胰岛素血的前导,而高血糖减少扩散。相比之下,tpc的整体成骨的能力增加两个病理生理的刺激下DM(高胰岛素和葡萄糖)和可能支持TPC-mediated病理骨化。接受肌腱ECM的关键角色和机械负荷肌腱体内平衡和TPC生物活性,这些结果需要证实体内。受损的胰岛素敏感性单独或结合高血糖代表一个重要的触发是退化的过程在心血管组织,具体地说,打扰ECM大会导致糖尿病患者钙化。虽然机制导致异常的TPC炎症/治疗条件下表型差别很大,这些实验代表的第一步确定高胰岛素血TPC活动和表型的影响。

 5。结论

总之,胰岛素增加屈肌tendon-derived祖细胞的增殖和成骨的能力在体外。选择性IGF-I受体增加picropodophyllin,减轻tpc成骨的能力的增加,表明IGF-I信号在tpc insulin-mediated成骨分化中起着重要的作用。这些发现表明,高胰岛素血症可能改变TPC表型和随后影响修复肌腱组织的质量。进一步的研究是必要的来识别细胞和生物过程参与糖尿病病变。

 数据可用性

所有数据用于支持本研究的结果包括在本文中。

 信息披露

本文提出了部分作为一个骨科研究学会2019年年会海报,奥斯汀,得克萨斯州(2月2 - 5)。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

 确认

作者要感谢身体Durgam党卫军中描述的工作。2016年“体外特性和体内评价马Tendon-Derived祖细胞“论文提交给伊利诺斯州大学的哲学博士的部分要求。

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