SCI 干细胞国际 1687 - 9678 2090 - 966 x Hindawi出版公司 691605年 10.1155 / 2012/691605 691605年 研究文章 在活的有机体内半月板撕裂伤的治疗使用骨骨髓来源间充质干细胞和纤维蛋白胶 摩天 朵拉 傅强恩 大卫 Kisiday 约翰 McIlwraith c·韦恩 汗 Wasim年代。 盖尔·霍姆斯骨科研究中心 兽医学院和生物医学科学 科罗拉多州立大学 西瑞路300号 柯林斯堡,80523年公司 美国 colostate.edu 2012年 27 10 2011年 2012年 16 06 2011年 19 10 2011年 19 10 2011年 2012年 版权©2012年多拉摩天et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

纤维蛋白胶由病人自身的血液可以作为载体传递细胞受伤的具体地点。这方面的一个实验模型优化各种排列输送系统 在活的有机体内在这项研究中测试。收获马半月板部分与纤维蛋白胶或纤维蛋白胶reapposed和马骨骨髓来源间充质干细胞(bmsc)。这些结构被植入裸小鼠皮下注射。收获后的结构,包含结构显示显著增加血管化BMSC,组织学显示总结合主观修复组织的厚度降低,增加纤维蛋白相比单独结构。这个模型允许直接比较不同的半月板治疗组在使用少量的动物。这 在活的有机体内模型可以在未来有价值的优化纤维蛋白和细胞治疗半月板损伤的马和潜在的人类。

 1。介绍

半月板是位于femorotibial关节内纤维软骨结构( 1]。在提供稳定关节(积分 2在运动期间,润滑,吸收和耗散冲击的 2, 3]。半月板损伤会导致各种各样的原因,尤其是慢性磨损,急性损伤,和十字或侧韧带松弛 4]。随着时间的推移,半月板损伤的负面影响包括关节不稳定和关节软骨退化。内侧半月板损伤占81%的报道在人类受损半月板,和体育活动的主要原因( 5]。严重的马的半月板撕裂导致减少回归函数尽管外科治疗( 6, 7]。半月板切除术和部分半月板切除术的严重受损半月板并非没有长期影响关节,导致骨关节炎(OA)和关节残疾( 8]。治疗或修复半月板的同时避免半月板切除术可以使病人恢复与降低长期障碍在膝盖或抑制( 9, 10]。

努力创建一个合成替代半月板通常导致表现不佳与间接退行性关节植入物的变化在几周内个月测试对象( 11, 12尽管最近的一些进展( 13]。有前途的选择使用捐赠者出现半月板生物支架和将这些纳入病人半月板结构,或维护病人的半月板 原位通过各种方法和鼓励细胞重新和血管增长( 14- - - - - - 20.]。临床医生已经开始植入干细胞或富血小板血浆通过超声或关节镜检查可见病变。纤维蛋白胶来自病人自己的血可以用作载体遵守细胞受损地区( 17, 21]。一项研究在兔子石等。 22)将纤维蛋白胶和全骨髓吸入到半月板的缺陷无血管区。这导致成熟的治疗12周内大大超过纤维蛋白单独或空的缺陷。这种细胞的一个版本/纤维蛋白治疗开创了Scotti et al。 20.]在纤维蛋白胶使用软骨细胞植入reappose尸体半月板部分。他们的研究显示,增加焊接部分的软骨细胞和纤维蛋白胶样品。

上述研究表明植入的可能性可行的细胞在纤维蛋白胶直接损伤可以引起细胞半月板治疗方面的新进展。我们实验室用关节内注射自体骨骨髓来源间充质干细胞(bmsc)治疗半月板损伤的马过去4年( 23, 24),看到了令人鼓舞的结果为马严重的半月板损伤。关节内注射的成体干细胞从骨髓扩张显示显著的半月板组织的再生在山羊的实验模型和人类临床病例( 25, 26]。关节内注射bmsc不是受伤网站具体,依靠炎症归巢机制( 21, 27, 28)细胞迁移到受损的组织。当前项目开发,进一步检查的影响更直接特有的细胞治疗使用纤维蛋白作为载体。利用小鼠模型发布的Scotti et al。 20.)提供了各种福利,使它成为一个合适的步骤之间 在体外和更大的规模 在活的有机体内工作。模型提供了试验半月板的能力结构的控制大小,类型,与群体控制和治疗足够多数量,提供足够的统计能力。这种模型允许检测各种治疗排列在一个相对短的时间。这些包括剂量(手机号码),类型或纤维蛋白浓度、多功能细胞系分化程度,增加生长因子或其他生物物质的控制 在活的有机体内设置。结果将使研究人员能够确定最佳治疗策略利用这些模式在更大的动物模型。当前研究的目的是确定是否有益的治疗效果的bmsc移植相比,都可以看到纤维蛋白纤维蛋白。

 2。材料和方法

所有程序涉及活的动物和本研究收集的组织批准的科罗拉多州立大学动物保健和使用委员会。

2.1。半月板组织集合

八内侧半月板收集从四匹马安乐死的原因与膝关节或其他因素会影响学习。半月板收获无菌地从尸体的四肢后6小时内安乐死(一系列6小时30分钟),在磷酸缓冲盐(PBS)(卡尔斯巴德英杰公司集团(总部)、钙、美国),提前在液态氮冷冻,然后储存在−80°C至少1周(范围从1星期8个月)。样品在25°C水浴解冻,修剪只保留半月板的轴向2/3,分段进一步切成0.4厘米宽三角形楔形。部分被放置到PBS和PSA(青霉素、链霉素和两性霉素B)(卡尔斯巴德英杰公司集团(总部)、钙、美国),通过两个额外的冻融循环( 29日),改变了媒体新鲜PBS(卡尔斯巴德英杰公司集团(总部)、钙、美国)与每个冻融循环,确保没有可行的细胞。

 2.2。骨髓

从髂骨骨髓收集的一匹马安乐死CSUVTH(科罗拉多州立大学兽医教学医院)不相关的原因在30分钟的安乐死8-gauge卷套管针使用无菌技术。大约20 cc骨髓被卷入2-35cc注射器3000单位的肝素(美国Schaumbeurg应用制药有限责任公司,IL)抗凝血因子在每个注射器。骨髓间充质干细胞培养获得的殖民地有核细胞分数根据Kisiday描述的技术et al。 30.]。达到60 - 70%融合后,每个文化被提升通道bmsc与胰蛋白酶(卡尔斯巴德英杰公司集团(总部)、钙、美国),再播在10000个细胞/厘米2,允许bmsc生长融合到60 - 70%。bmsc低温贮藏在95%自体血清/ 5% DMSO(西格玛奥德里奇,圣路易斯,密苏里州,美国)。

 2.3。纤维蛋白

马的四百毫升静脉血无菌的方式收集从捐献者的颈静脉采血(约根森实验室)和柠檬酸钠抗凝血剂和储存在4°C几个小时。全血在1000 G离心10分钟和等离子体删除和存储−80°C,直到需要。等离子体在室温下解冻,纤维蛋白每乙醇沉淀提取协议被吉田et al。 31日]。

 2.4。构建准备

Preprepared半月板部分,bmsc,纤维蛋白构造创建之前立即解冻。构造对每个鼠标(集团0和1)创建相同的半月板部分的控制变化。组1构造,解冻颗粒状细胞悬液,然后用最少的纤维蛋白原resuspended自由等离子体(大约50 μL)需要返回细胞悬液。细胞悬液混合着225 μL纤维蛋白原沉淀和额外fibrinogen-free等离子(大约175 μL),直到最后一个细胞的浓度 10 × 10 6 细胞每毫升的纤维蛋白原/等离子/细胞混合物。相等的部分(0.02毫升)的纤维蛋白原/等离子/细胞混合物混合等量的牛凝血酶(MP生物医学,圣安娜、钙、美国)(0.02毫升),应用于减少表面组1半月板部分。第二个半月板部分放置在纤维蛋白原/等离子/细胞和纤维蛋白混合允许30分钟。

使用50 0组样本创建 μL (PBS代替BMSC /等离子体悬挂。这是混合了225 μL纤维蛋白原沉淀和175年 μL(自由血浆纤维蛋白原。相等的部分(0.02毫升)纤维蛋白原/ PBS /等离子体混合物的混合牛凝血酶(MP生物医学,圣安娜、钙、美国)(0.02毫升),应用于减少组0半月板部分的表面。第二个半月板部分放置在纤维蛋白/ PBS /凝血酶和纤维蛋白混合物允许30分钟。外套的外部结构,纤维蛋白原沉淀(225 μL)和纤维蛋白原免费等离子(225 μ与同等数量的凝血酶L)和混合。这种涂料是应用于减少皮下组织入侵 在活的有机体内( 20.]。大约0.1毫升的血纤蛋白和凝血酶混合物被用来完全覆盖住每一个构建。外部纤维蛋白涂层被允许前30分钟完成构造被转移到无菌盘运输手术套件。结构组装,在每个治疗组6组完成植入前15分钟和45分钟之间。

 2.5。外科手术

十二只10周大的男性裸体小鼠麻醉,维护在异氟烷吸入剂麻醉,和管理5毫克/公斤carprofen(辉瑞动物保健,麦迪逊,新泽西,美国)皮下注射。老鼠放在胸骨准备休息和双边paralumbar地区有2%洗必泰擦洗和无菌水。外科手术是仿照前所述协议( 20., 32]。1厘米水平皮肤切口是在每个paralumbar区域和一个口袋直言不讳地解剖皮下组织。半月板构造是插入到每个口袋,一边随意接收BMSC fibrin-treated样本和其他纤维蛋白只控制样品( 32]。与伤口缝合切口关闭剪辑(AUTOCLIP) (Becton,迪克森和Co。富兰克林湖,新泽西,美国)。耳朵等级被用来唯一地标识每一个鼠标。老鼠恢复,手术后连续三天每天两次监测。老鼠收到5毫克/公斤Carprofen皮下注射手术后3天。三天后,他们曾经为剩下的4周每日监测研究术后并发症和一般健康的迹象。

 2.6。收获的构造

在手术后4周,老鼠放在一个有限公司2毒气室和人道安乐死逐渐增加CO的浓度2(从室内空气),直到老鼠停止呼吸。缺乏心跳被证实之前,老鼠完全从箱中删除。结构被移除,立即中性缓冲福尔马林固定在10%(美国StatLab医疗ProductsMcKinney TX)和分级组织粘连,附着的船只,感知强度之间的债券部分时直言不讳地探索。二十四半月板样品总共收获来自12个动物,和一群1和组0收获从每个动物建模的Peretti et al。(2001) 32]。评分分数和标准见表的标题 1。

解释在当前的研究中使用的分级标准和使用的编码结果。

类别/分 0 1 2 3
总值的观察
附着的船只 船1一侧 船2面 多种血管在多个方面
组织粘连 没有组织粘连 外部组织遵循的地区
债券 没有债券 灵活的债券 公司附件
他走时观测部分
细胞生长情况 非细胞沿切割边缘 不完整的细胞重新 50%的增长 完整的重新切割边缘
主要的细胞类型 小圆细胞(纤维细胞) 较大的密度较低的细胞(炎症的起源) 一半对一半分散
纤维组织 无组织的 平行纤维50% 超过70%的组织
纤维蛋白的组织之间的部分 大量的纤维组织 现在没有大纤维组织部分
SOFG部分观测
SOFG %阳性染色 没有一个 不到50% 超过50% 近100%
修复组织的厚度 薄 媒介 厚
细胞的重新 罕见的 温和的 频繁的
总键长 25% 25 - 50% 50 - 75% 75 - 100%
2.7。得分

修改后的竞技et al。 33评分系统是使用。见表 1完整的标题。结果参数“附着船只”分级在0 - 2皮下血管的程度坚持每个表面构造。结果参数“组织粘连”(0 - 1)评分依从性小鼠皮下组织的表面结构。结果参数“债券”取得了明显的两个部分之间的附着力时轻轻探测沿结的两个部分(0 - 2)。分类“没有债券”的决心,如果用温和的调查两个部分完全分离,“灵活的债券”被确定为一个维护并列,但部分可能略有变化的相互关系,和一个“公司”附件没有运动探测时指出之间的部分。

 2.8。组织学

5微米的部分从石蜡包埋创建构造在平面垂直于保税边缘。两个随机组织部分从每个样本选择和放置的中心区域分成两个不同的染色组。组织用于幻灯片和苏木精和伊红染色());(Anatech有限公司;巴特尔克里克,美国MI)和红色染料O-Fast绿色(SOFG)(美国电子显微镜科学,哈特菲尔德,PA)染色和显微镜下检查。

结果参数“细胞向内成长”分级细胞渗透修复半月板组织组织界面重新填充非细胞(0 - 3)。结果参数“主要细胞类型”评估细胞的修复组织的人口和他们的相对频率(1 - 3)。结果参数“纤维组织”分级修复组织为组织或紊乱(0 - 2量表)。结果参数“部分”之间的纤维蛋白的组织分级之间的纤维蛋白的组织指出当时的半月板部分的分析(0 - 1)。这个组织被认为是残留的纤维蛋白胶放置构造创建期间之间的部分。参数“SOFG %阳性染色结果评估的修复组织表现出SOFG阳性染色(0 - 3)。结果参数修复组织的“厚度”评估修复组织的厚度之间存在半月板部分(0 - 2)。结果参数“细胞的重新分析了存在半月板部分的全身的细胞(0 - 2)。

结果参数“总百分比保税”是在显微镜下完成20 x-40x权力和数字捕获的图像幻灯片上测量部分(Adobe Photoshop CS扩展版10.0.1)额外的图像得到了出版(徕卡DFC 425相机,拉斯维加斯核心软件,布法罗格罗夫,美国)。幻灯片的图像部分测量修复区域的总长度(面积削减部分之间的接口)。图像被明显的证据结合(桥接和半月板纤维掺入到修复组织)指出沿长度的修复。保税测量记录和转换为百分比总数的修复部分。这些总百分比被分为4组,分配基于表0 - 3分 1。

 2.9。统计分析

渔民精确测试和表卡方分析进行所有的数据(SAS v.9.2。SAS研究所合并,卡里,NC)。统计学意义是 P ≤ 0.05 和被定义为一个统计趋势 P ≤ 0.1 。

 3所示。结果

没有任何研究动物的发病率或死亡率。在三天的术后检查指出视觉上的两只老鼠通过皮肤的两个结构已经发生变化,这部分不再在切割表面附着(一个坐在边对边,一个坐在边缘切割面)。两样本cell-treated组(组1)。一旦削减组织学,这些样本之间的结合体现了部分和分级以及其余的样品。完成结果为每个样本的评分标准,见表 2。

0是纤维蛋白只有治疗;组1与综合治疗纤维蛋白。见表 1分级评分标准。

类别/分 集团 0 1 2 3 P 价值
总值的观察
附着的船只 组0 4 (33.3%) 3 (25%) 5 (41.7%) 0.0094
组1 0 (0%) 10 (83.3%) 2 (16.7%)
组织粘连 组0 5 (41.7%) 7 (58.3%) 1.00
组1 5 (41.7%) 7 (58.3%)
债券 组0 2 (16.7%) 10 (83.3%) 0.640
组1 4 (33.3%) 8 (66.7%)
他走时观测部分
细胞生长情况 组0 3 (25.0%) 6 (50.0%) 3 (25.0%) 1.000
组1 3 (25.0%) 5 (41.7%) 4 (33.3%)
主要的细胞类型 组0 8 (66.7%) 1 (8.3%) 3 (25.0%) 0.822
组1 6 (50.0%) 1 (8.3%) 5 (41.7%)
纤维组织 组0 3 (25.0%) 7 (58.3%) 2 (16.7%) 1.000
组1 2 (16.7%) 7 (58.3%) 3 (25.0%)
纤维蛋白的组织之间的部分 组0 7 (58.3%) 5 (41.7%) 0.214
组1 3 (25.0%) 9 (75.0%)
总键长 组0 0 3 (25.0%) 4 (33.3%) 5 (41.7%) 0.569
组1 0 1 (8.35) 7 (58.3%) 4 (33.3%)
SOFG部分观测
SOFG %阳性染色 组0 5 (41.7%) 3 (25.0%) 4 (33.3%) 0 0.428
组1 5 (41.7%) 5 (41.7%) 1 (8.3%) 1 (8.3%)
修复组织的厚度 组0 5 (41.7%) 6 (50.0%) 1 (8.3%) 0.680
组1 8 (66.7%) 3 (25.0%) 1 (8.3%)
细胞的重新 组0 5 (41.7%) 6 (50.0%) 1 (8.3%) 0.520
组1 7 (58.3%) 3 (25.0%) 2 (16.7%)
3.1。总值的观察

所有结构纤维蛋白的剩余涂料,指出从鼠标。有一个统计上的显著差异( P = 0.0094 )的“附着船只”构造的表面。组0有四个(4/12,33.3%)与血管结构目前只在一边而组1构造都有船只出现在双方(10/12,83.3%)和多个侧面(2/12,16.7%)。请参见表 2完成评分结果。参见图 1(一)组1构造图像的多个血管表面附着和图 1 (b)一组0构造以最小的船只现在只能在一个表面。没有统计学差异( P = 1。0 )在外部组织粘连治疗组之间。组1结构不存在组织粘附在5/12(41.7%)和有组织的粘附在7/12结构(58.3%)。组0也有5/12结构与没有证据表明外部组织粘连和7/12结构与组织粘连。没有显著的统计学差异( P = 0.64 )治疗组之间的“债券”的主观程度。虽然有些部分有一个灵活的债券,这是指出,所有的部分都粘在一起,更耐分离与压力比之前他们被植入切边,说明发生的焊接结构。请参见表 2分解的全部结果,这些结果参数。

(一)多个容器外部坚持组1半月板结构。可以看到血管进入切两个部分之间的区域。(b)组0构造以最小的血管表面上只有一个的证据。

 3.2。H&E-Stained部分

没有统计学意义( P = 1。0 )从修复组织细胞向内成长”到半月板治疗组之间的部分。没有统计上的显著差异( P = 0.822 )“主要细胞类型”出现在修复治疗组之间的组织。有些部分很有组织的修复与平行纤维组织;然而,这些平行纤维主要是面向垂直于半月板纤维。虽然主观似乎治疗组之间的关系和纤维组织,这不是统计学意义( P = 1。0 )。没有统计学差异( P = 0.214 )的纤维蛋白的组织修复地区剩余部分在比较治疗组之间。主观地,大量的纤维蛋白的组织出现在non-cell-treated部分比cell-treated部分与7/12(58.3%)的集团0构造有大量纤维蛋白的组织现在只有3/12(25%)相比,在组1构造。图 2(一个)显示了一个组织学部分组1说明缺席的纤维蛋白的组织和显示血管的生成到修复组织和进步之间的部分。图 2 (b)显示了一个组织学部分从组0显示厚纤维蛋白的组织。仍然有一些船向内成长中纤维蛋白的组织。没有统计学差异治疗组之间的“总债券距离”( P = 0.569 )。然而,组1(图 3(一个))主观显示更好的结合整体11/12(91.7%)的部分展示在大于50%的成键特征明显修复面积相比,9/12(75.0%)的组0(图 3 (b))结构与成键特征在50%或更多的修复区域。

(一个)显示薄修复组织和血管组1在半月板部分。(b)显示了一个分组的小血管内大量纤维蛋白的组织之间的两个半月板部分组0构造。

(一)cell-treated(组1)半月板部分非细胞的细胞重新半月板组织和证据之间的桥接两个半月板部分,特别是在图像上的一面。(b) non-cell-treated部分(0)组与半月板修复组织分离纤维右边(表明一个不太健壮的附件)。虽然这分离发生在处理,缺乏结合可以看到左侧的修复组织。

 3.3。SOFG-Stained部分

数据 4(一)和 4 (b)展示SOFG-stained部分的两个例子。没有显著差异之间SOFG %阳性染色组( P = 0.428 )与组0负SOFG表现出相同数量的结构(即。、绿色计数器染色)(5/12,41.7%)相比,组1 (5/12,41.7%)。而组0有更多的构造(4/12,33.3%)表现出50%或更多积极SOFG染色相比,组1(2/12,16.6%),这种差异不显著。当检查修复组织的“厚度”,治疗组之间没有统计上的显著差异组( P = 0.680 )。基于主观评分,现在似乎更少的修复组织之间的部分在1组(8/12(66.7%)与薄修复组织)相比,组0(5/12(41.7%)与薄修复组织)。最后,无统计差异时指出检查的体内细胞的重新“半月板部分(远离切边)治疗组( P = 0.520 )。

(a)和(b)显示SOFG-stained部分积极SOFG-stain吸收。之间没有显著差异群体之间的SOFG染色。细胞重新沿着切割边缘很明显在这两个部分。

 4所示。讨论

这项研究允许修复的比较和结合不同的非细胞半月板部分当接受bmsc和纤维蛋白相比,纤维蛋白单独控制 在活的有机体内模型。总的来说,结果表明显著增加血管坚持BMSC, fibrin-treated部分( P = 0.0094 )。主观结果显示改进增加焊接的特点和治疗用干细胞治疗的构造与纤维蛋白和纤维蛋白相比,结构只在结果参数的部分”之间的“纤维蛋白的组织,修复组织的“厚度”,“总%保税”。要指出的是,本研究统计结果有可能受到治疗组之间的细微差别和小样本大小。

结合的程度在构造处理纤维蛋白只在当前的研究中出现的不同与以前相比出版工作。具体来说,Scotti et al。 20.]认为没有证据之间的结合部分仅在纤维蛋白组和未报告的证据血管浸润的实验结构在他们的研究。相比之下,目前的研究显示,多种迹象的结合在纤维蛋白只治疗组以及BMSC-added组。有血管存在之间的部分在两个治疗组在当前的研究中。目前还不清楚导致这两项研究的结果之间的差异。潜在的可能是由于纤维蛋白源的差异。Scotti et al。 20.)使用商业准备猪血纤蛋白产品,而当前的研究利用马纤维蛋白和准备现场,一般会表现在临床设置。另一个潜在的差异研究是纤维蛋白涂层的厚度。发布的图片Scotti et al。 20.]显示厚层构造比周围的纤维蛋白在当前的研究中来实现。一层厚的纤维蛋白可能会限制血管侵犯和改变外生的扩散和交付氧气,细胞因子和细胞结构。

在人类,而血管外三分之一的半月板是由于关节囊连接,轴向部分基本上是无血管的( 34, 35]。由于这种差异,外层部分半月板更有可能治愈的一个可行的修复( 34, 35]。薄无血管的部分和半月板韧带附件更可能有一个次优的修复和更有可能成为戈瑞特回到剧烈活动( 14, 34]。治疗bmsc的构造似乎导致更大的和更一致的结构组织的血管再生。有显著( P = 0.0094 )血管外部坚持1组结构相比,0组构造在当前的研究中。例如,请参见图 1(一)和 1 (b)。可能是血管生长因子释放的bmsc [ 21, 36, 37)导致刺激cell-treated容器增长的部分,这些生长因子不在Scotti et al .(在前面的研究 20.)利用软骨细胞的细胞结构。也是合理的,这些生长因子可能也影响了non-BMSC(0)部分植入老鼠一样。有两组0和1构造相同的鼠标将允许系统吸收或生长因子局部通过皮下空间传播。这可能增加占多血管相比,当前的研究中发现Scotti et al。 20.]。增加血管的形成往往是半月板愈合治疗的目标为了提供生理修复半月板组织的支持。因此增加多血管看到这里可能是一个利益在临床使用 38, 39]。

Scotti在al。 20.报道更线性纤维修复组织和更少的纤维蛋白chondrocyte-treated构造遗迹。这些结果反映在当前研究的结果BMSC-treated构造:薄修复组织(66.6%的第1组相比,41.75%的组0构造薄修复组织)和更少的纤维蛋白的残余(25%的组1构造部分之间有大量纤维蛋白的材料相比,58.3%组0)。这一结果的一个解释是,cell-treated样品无关的疤痕组织创建了一个修复组织与低于那些没有细胞。

成熟的半月板包含住fibrochondrocytes尽管轴部分的无血管的性质。如果发生损伤和可行的细胞仍然存在,这些细胞可以被疗愈。然而,研究表明,fibrochondrocyte凋亡密切相关,甚至可能先于,半月板损伤( 40]。细胞凋亡发生在受伤区域大大减少了fibrochondrocytes用于修复,以及缺乏多血管限制了细胞迁移的机会从其他地方 41]。在一个大型的回顾性研究人类与半月板受伤,英格伦et al。 10]发现退行性半月板损伤是不太可能有一个令人满意的回归函数相比,去撞墙受伤的半月板。大部分的结构在这两个组0(9/12)和组1(9/12)在当前的研究中从切割边缘细胞的生成和修复组织。这些细胞可能导致重新的无血管的半月板部分并最终增加愈合。非细胞的重新半月板组织也会在治疗中至关重要,因为存在fibrochondrocytes将必要的半月板移植的长期生存能力。这是超出了本研究的范围来确定引进的起源细胞。

这里的研究帮助进一步描述这个模型和导致显著的结果可能具有临床意义。利用该模型可以进一步调查更好地定义纤维蛋白的最优条件和综合治疗在活的动物。未发表的研究 在体外在我们的实验室已经表明,特定的纤维蛋白的浓度可能是最优的bmsc的移民;然而,这些更稀释浓度可能不会提供尽可能多的支持维护组织附着在愈合的早期阶段。利用该模型和细胞标记( 38, 42]跟踪迁移的细胞在不同时间点可以帮助确定最生理上纤维蛋白利用的有效浓度 在活的有机体内。理想的治疗剂量的细胞表面积可能调查。进一步研究细胞标记技术还将提供信息来源的细胞参与修复组织和援助之间的部分在确定半月板组织的细胞重新繁衍。这可能使医务人员更好地治疗目标增加积极成果在困难半月板损伤。

 确认

作者要感谢美国夸特马基金会对金融支持这个项目的费用和Sushan汉博士D.V.M.博士,DACVP收购图像。他们会感谢珍妮弗·菲利普斯,克里斯蒂娜·李,泵房D,苏珊·詹姆斯·t·k·教皇,盖尔·霍姆斯马骨科研究中心的工作人员和科罗拉多州立大学实验动物资源不可或缺的援助项目。

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