SCI 干细胞国际 1687 - 9678 SAGE-Hindawi访问研究 429187年 10.4061 / 2011/429187 429187年 研究文章 葡萄糖的作用,血清,三维细胞培养在骨骨髓来源间充质干细胞的新陈代谢 Deorosan 拜伦 1 Nauman 埃里克。 1、2、3 Boheler 肯尼斯·R。 1 韦尔登生物医学工程学院 普渡大学 585年普渡购物中心 西拉法叶,在47907 - 2088年 美国 purdue.edu 2 机械工程学院 普渡大学 585年普渡购物中心 西拉法叶,在47907 - 2088年 美国 purdue.edu 3 基本的医学科学 普渡大学 585年普渡购物中心 西拉法叶,在47907 - 2088年 美国 purdue.edu 2011年 17 03 2011年 2011年 03 12 2010年 07年 02 2011年 2011年 版权©2011拜伦Deorosan和埃里克·a·Nauman。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

间充质干细胞(msc)已经成为组织工程的关键除了所有方面。虽然大多数 在体外二维文化的研究都集中在他们的行为,相对很少有人知道细胞的行为在三维文化,尤其是关于他们的代谢状态。评估MSC的新陈代谢将二维文化,在小鼠骨骨髓来源MSC是培养一周使用十二个不同的介质成分、不同葡萄糖和胎牛血清(的边后卫)浓度。结果表明,葡萄糖浓度是更重要的因素在维持细胞生长和生存能力。评估在三维文化的代谢状态,msc是培养一周使用两种不同的介质成分和两种不同浓度的胶原蛋白凝胶矩阵。媒介作品只在葡萄糖浓度变化。结果表明,葡萄糖和细胞外基质是细胞的代谢反应的重要因素。然而,细胞在低密度培养的胶原蛋白表现出相当大的细胞死亡,可能是因为身体收缩的胶原蛋白水凝胶中没有观察到高密度胶原蛋白。这些发现将有用的的发展 在体外细胞培养模型正确模拟 在活的有机体内生理过程。 1。介绍<gydF4y2Ba/title> <p>组织工程的应用集成工程和生物原理研究、设计、开发、和修复生物结构。迭代,objective-driven过程促使生产人造皮肤(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B1"> 1<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B3"> 3<gydF4y2Ba/xref>),导致平滑肌组织的发展进步(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B4"> 4<gydF4y2Ba/xref>,<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B5"> 5<gydF4y2Ba/xref>],人造血管[<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B6"> 6<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B8"> 8<gydF4y2Ba/xref>),心脏组织类似物(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B9"> 9<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B11"> 11<gydF4y2Ba/xref>),肾小管(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B12"> 12<gydF4y2Ba/xref>,<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B13"> 13<gydF4y2Ba/xref>),肠段(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B14"> 14<gydF4y2Ba/xref>,<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B15"> 15<gydF4y2Ba/xref>),膀胱替代(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B16"> 16<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B18"> 18<gydF4y2Ba/xref>],骨组织支架(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B19"> 19<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B21"> 21<gydF4y2Ba/xref>]。长期成功的组织工程治疗需要与宿主组织的生物相容性和功能分化细胞在植入组织的发展。干细胞对这些应用程序很重要,因为它们分化成各种细胞类型的能力。<gydF4y2Ba/p> <p>骨骨髓来源间充质干细胞(msc)有争议的获得和容易控制比胚胎干细胞(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B22"> 22<gydF4y2Ba/xref>]。但是,干细胞必须受到各种环境因素为了分化成特定的细胞类型。到目前为止,最常见的方法控制干细胞的分化是实现生理相关因子的蛋白质和分子线索设计利用msc的自然能力。这个过程导致了肝脏修复的发展(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B23"> 23<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B28"> 28<gydF4y2Ba/xref>),胰岛细胞再生(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B29"> 29日<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B34"> 34<gydF4y2Ba/xref>],骨骼增加[<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B35"> 35<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B37"> 37<gydF4y2Ba/xref>),和脊髓再生(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B38"> 38<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B40"> 40<gydF4y2Ba/xref>]。<gydF4y2Ba/p> <p>虽然这些进步的领域具有重要意义,目前的研究缺少与msc的三维文化,它们的代谢状态,以及这两个因素可能会影响他们的终端分化。是很重要的考虑在三维细胞会如何应对文化相比,二维文化因为它已经表明,细胞外基质的相互作用引起许多不同的细胞反应有关分化、增殖、生长、活性和基因表达(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B41"> 41<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B49"> 49<gydF4y2Ba/xref>]。此外,由于有氧代谢和无氧代谢产生能量的主要方式是细胞,因为得到更多的能量比厌氧耗氧,它是合理的假设的代谢状态细胞将经历重大影响终端分化的干细胞。证据表明,代谢状态可以影响蛋白质激活和蛋白质构象(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B50"> 50<gydF4y2Ba/xref>,<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B51"> 51<gydF4y2Ba/xref>),这两个在细胞分化是至关重要的。这也会影响生长因子的能力和其他刺激体内产生想要的结果。<gydF4y2Ba/p> <p>因此,本系列的整体动力实验旨在探讨msc在文化的代谢状态,以应对变化葡萄糖和胎牛血清(的边后卫)浓度在二维和三维培养条件。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="section" id="sec2"> <title>2。材料和方法<gydF4y2Ba/title> <sec sec-type="subsection" id="sec2.1"> <title>2.1。的二维细胞培养<gydF4y2Ba/title> <p>小鼠msc(写明ATCC crl - 12424)被用于这些实验(写明ATCC马纳萨斯,弗吉尼亚州,美国)。msc在维护培养介质组成的glutamine-free杜尔贝科的修改鹰的介质(DMEM) (90 - 113 pb, Mediatech荷顿,弗吉尼亚州)补充10%的边后卫(美国表达载体,加州卡尔斯巴德),1% penicillin-streptomycin(10毫克/毫升,Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国),和0.1%的两性霉素b (250<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M1"> <mml:mrow> <mml:mi> μ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>g / mL, Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州)。葡萄糖浓度在这个媒介是通过添加葡萄糖25.0毫米(4912、Mallinckrodt Phillipsburg,新泽西,美国)。msc被播种在6-well或24-well板块(美国BD生物科学,加州圣何塞)密度为1.5×10<gydF4y2Basup>4<gydF4y2Ba/sup>/厘米<gydF4y2Basup>2<gydF4y2Ba/sup>。6-well盘子是用来测量样本的代谢分析,和24-well板被用来获取细胞在不同天数在整个实验。在这个密度,细胞近汇合的播种后,为了减少细胞增殖的实验。种子细胞,井6-well和24-well盘子满心2.4毫升和0.5毫升的维护中分别,中等身高相同的两个板块之间的类型。细胞被允许连接和稳定12小时后播种。这段学习的直接结论对应于“天0。“这项研究持续了六天。十二个实验介质组在这部分研究中使用对应十二葡萄糖浓度(0.5毫米、1.0毫米、5.0毫米和25.0毫米)和血清浓度(2%、5%、10%)的组合。每组12个样本给予,除了丙酮酸组(请见下文)。随后,1.0毫升中获得的样本4和6天的葡萄糖,乳酸和丙酮酸的分析。细胞数量是衡量天0、2、4、6。 Medium was refreshed in wells that were not analyzed on that particular experimental day.</p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec2.2"> <title>2.2。三维细胞培养<gydF4y2Ba/title> <p>圆形胶原凝胶面积2.0厘米<gydF4y2Basup>2<gydF4y2Ba/sup>和一个0.5毫米的高度被用作三维支架培养的msc。胶原蛋白从猪肌腱和放置在0.5米乙酸(Phillipsburg Mallinckrodt Baker, NJ)。酸溶性胶原蛋白是2.0 M氢氧化钠中和(氢氧化钠)(Phillipsburg Mallinkrodt Baker, NJ)。高密度凝胶在5.0毫克/毫升和低密度在2.5毫克/毫升凝胶在24-well盘子。每个凝胶使用100年成立<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M2"> <mml:mrow> <mml:mi> μ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>L的胶原蛋白溶液和含有250000 msc。四个实验小组在这部分研究中使用对应于两个葡萄糖浓度(0.5毫米和25.0毫米)和最终的胶原蛋白浓度(2.5毫克/毫升和5.0毫克/毫升)的组合。每组12个样本给予。每个病例的血清浓度为5%。对于每一个媒介组合,体积为0.5毫升用于每个24-well板块。随后,中收集4和6天的葡萄糖和乳酸鉴定。细胞数量是衡量天0、2、4、6。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec2.3"> <title>2.3。细胞群<gydF4y2Ba/title> <p>24-well板块被用于细胞数量确定两和三维文化。简单地说,赫斯特染料(美国表达载体,加州卡尔斯巴德)加入DMEM最终浓度为5.0<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M3"> <mml:mrow> <mml:mi> μ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>克/毫升。一个100<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M4"> <mml:mrow> <mml:mi> μ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>L体积的赫斯特的解决方案是添加到每个24-well板块。随后,盘子被置于37°C, 5%的公司<gydF4y2Basub>2<gydF4y2Ba/sub>孵化器了15分钟。每个板是读入一个荧光计(热电子,芬兰)使用355 nm的激发和发射测量在460海里。背景使用空井游离测量二维颗粒凝胶三维文化的文化或。荧光计的读数,结合实验确定校准曲线,被用来计算细胞群在每个。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec2.4"> <title>2.4。细胞生存能力<gydF4y2Ba/title> <p>同一24-well盘子用来评估细胞群被用来使用荧光成像技术观察细胞生存能力定性。短暂,calcein-AM和溴化乙锭(丙烯酰胺、圣路易斯、钼)加入DMEM最终浓度为2.5<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M5"> <mml:mrow> <mml:mi> μ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>m . Calcein-AM表明活细胞通过发射517纳米光兴奋时494海里,坏死细胞和溴化乙锭表明通过发射617纳米光兴奋时528海里。一个100<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M6"> <mml:mrow> <mml:mi> μ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>L体积的这种解决方案添加到每个好24-well盘子。随后,盘子被置于37°C, 5%的公司<gydF4y2Basub>2<gydF4y2Ba/sub>孵化器了15分钟。观察井使用10倍和40 x放大目标在一个IX71荧光显微镜(奥林巴斯,中心山谷,Pa,美国),和TIFF图像使用QColor 5相机(奥林巴斯,中心山谷,Pa)和QCapture Pro版本5.0.1.26软件(打印大师、萨里、BC、加拿大)。TIFF图像被转换为位图图像使用Irfanview 4.25版本软件(iran Skiljan, 2009),然后使用我合并版本0.3.9.9软件(Boris Eyrich, 2005)。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec2.5"> <title>2.5。葡萄糖测定<gydF4y2Ba/title> <p>媒介样本检测葡萄糖浓度使用荧光测定工具包(表达载体,卡尔斯巴德,CA)。装备表明葡萄糖的存在通过激活荧光resorufin,吸收最大值在571 nm和发射最大值在585海里。样本与去离子水稀释,以便最佳探测范围内的葡萄糖浓度会下降的装备,在3.0之间<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M7"> <mml:mrow> <mml:mi> μ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>M和50.0<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M8"> <mml:mrow> <mml:mi> μ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>m .荧光测量使用与激发荧光计530海里和排放检测在590海里。背景使用测量glucose-free DMEM(表达载体,卡尔斯巴德,CA)。排放值转化为葡萄糖浓度使用校准曲线。然后,这些浓度乘以稀释系数得到葡萄糖浓度在每一个细胞外样品。这产生的浓度是减去实际初始葡萄糖浓度的原始生长介质获得葡萄糖消耗。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec2.6"> <title>2.6。乳酸测定<gydF4y2Ba/title> <p>媒介样本检测乳酸浓度使用分光光度分析工具包(Instruchemie、荷兰)。装备决定了乳酸的浓度检测吸光度的增加的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)在340 nm,表明乳酸最初出现在样本的数量。340海里的NAD吸光度测定的分光光度计(热电子、芬兰)。细胞外样本稀释与等量的去离子水,乳酸浓度会下降最佳探测范围内的设备,0.22毫米和13.32毫米之间。背景测量细胞外使用普通DMEM采集标本。这些背景测量减去从各自吸收测量。Background-subtracted测量转化为乳酸浓度使用校准曲线。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec2.7"> <title>2.7。丙酮酸测定<gydF4y2Ba/title> <p>细胞外和细胞内的样本检测丙酮酸浓度使用分光光度分析工具包(Instruchemie、荷兰)。装备决定了丙酮酸的浓度检测减少氧化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的吸光度<bgydF4y2Baold> (<gydF4y2Ba/bold>NAD) 340海里,表明丙酮酸最初出现在样本的数量。340 nm的NADH吸光度测定,分光光度计(热电子、芬兰)。装备的最佳探测距离是0.011毫米和0.340毫米之间。<gydF4y2Ba/p> <p>丙酮酸使用测量细胞内和细胞外的方法。细胞外的方法进行两和三维条件下有六个样品给予每个条件。细胞外的方法包括测量丙酮酸浓度在同一介质样品用于葡萄糖和乳酸测量。细胞内的方法只是对二维情况下执行的。短暂,每个6-well板块是冲洗两次后与PBS中样本中提取的细胞外测量。接下来,这些细胞被从井中除去细胞刮刀,0.5毫升的冷高氯酸添加到每个好,和细胞/酸溶液放置在微型离心机管。接下来,样品受到漩涡三十秒钟,放置在一个−20°C冰箱五分钟,然后离心10分钟1700×g(贝克曼库尔特,富勒顿,CA)。得到的上层清液是用来测定丙酮酸浓度。样品没有被稀释在细胞外或细胞内的情况。背景测量细胞内使用去离子水样本采集标本。 Background measurements for extracellular samples were taken using ordinary DMEM. These background measurements were subtracted from their respective absorption measurements. Background-subtracted measurements were converted to lactate concentrations using a calibration curve.</p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec2.8"> <title>2.8。表征凝胶的传输特性<gydF4y2Ba/title> <p>粘性阻力系数均获得锥虫蓝(Sigma-Aldrich、圣路易斯、钼)扩散通过2.5毫克/毫升和5.0毫克/毫升胶原凝胶。明确1.0厘米直径试管被用来存放每个凝胶浓度(2.0毫升的<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M9"> <mml:mi> N<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 3<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>每个浓度)。管被限制和放置在一个37°C孵化器了两个小时。孵化后,每个收到1.0毫升的0.13%台盼蓝的解决方案。台盼蓝的解决方案是允许通过胶原凝胶扩散而管保持在37°C。超过3天,张成的空间管道定期拍照(佳能EOS叛军数字EF-S 18-55;日本东京)和图像被用来确定距离,台盼蓝先进解决方案通过凝胶使用QCapture Pro软件(版本5.0.1.26;打印大师;萨里,加拿大BC)。台盼蓝的过程重复一组解决方案纯水。所有的数据收集后,台盼蓝进步是策划和时间。 A second-order polynomial curve was fit to the data points, and the equation was used to find values for both the velocity and acceleration of the dye through the gels. A force balance on the trypan blue molecules was used to estimate values of the drag coefficient<disp-formula id="EEq1"> <label>(1)<gydF4y2Ba/label> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M10"> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mi> ζ<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mi> *<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> v<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 漂移<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> ρ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 凝胶<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mi> V<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mi> g<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> +<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> ρ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 锥虫<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mi> V<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mi> g<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> ρ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 锥虫<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mi> V<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mi> 一个<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> ,<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:math> </disp-formula>在哪里<gydF4y2Baitalic> <italic> ζ<gydF4y2Ba/italic> </italic>阻力系数,<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M11"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> v<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 漂移<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>台盼蓝分子的漂移速度,<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M12"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> ρ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 凝胶<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>凝胶的密度,<gydF4y2Baitalic> V<gydF4y2Ba/italic>是分子的体积扩散通过矩阵,<gydF4y2Baitalic> g<gydF4y2Ba/italic>重力加速度,<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M13"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> ρ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 锥虫<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>台盼蓝粉的密度,<gydF4y2Baitalic> 一个<gydF4y2Ba/italic>台盼蓝的实验确定加速度通过胶原蛋白矩阵。这些实验,常量的值(<gydF4y2Baxref ref-type="disp-formula" rid="EEq1"> 1<gydF4y2Ba/xref>)如下:<gydF4y2Baitalic> V<gydF4y2Ba/italic>是<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M14"> <mml:mn> 1.20<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 28<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> </mml:mi> <mml:msup> <mml:mrow> <mml:mtext> 米<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn> 3<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>,<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M15"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> ρ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 锥虫<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>1667公斤/米<gydF4y2Basup>3<gydF4y2Ba/sup>,<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M16"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> ρ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 凝胶<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>1000公斤/米<gydF4y2Basup>3<gydF4y2Ba/sup>,<gydF4y2Baitalic> g<gydF4y2Ba/italic>是9.8 m / s<gydF4y2Basup>2<gydF4y2Ba/sup>。相同的值被用来估计台盼蓝在水中的阻力系数。随后,(<gydF4y2Baxref ref-type="disp-formula" rid="EEq1"> 1<gydF4y2Ba/xref>)被用来求解相对阻力系数组成的台盼蓝的阻力系数胶原凝胶规范化的台盼蓝在水里。至关重要,实验台盼蓝分子的加速度值远小于重力加速度。因此,含有这个词<gydF4y2Baitalic> 一个<gydF4y2Ba/italic>是可以忽略不计的解决相对阻力系数。相对扩散系数值计算相应的阻力系数的倒数。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec2.9"> <title>2.9。统计数据<gydF4y2Ba/title> <p>StatView v5.0.1被用来应用一个因素方差分析(方差分析)和Tukey-Kramer事后测试之间的数据来评估统计学意义组的显著性水平<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M17"> <mml:mi> P<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> <<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> 。<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>。<gydF4y2Ba/p> </sec> </sec> <sec sec-type="section" id="sec3"> <title>3所示。结果<gydF4y2Ba/title> <sec sec-type="subsection" id="sec3.1"> <title>3.1。细胞群<gydF4y2Ba/title> <p>二维实验的细胞群开始时甚至不同的实验组,每组之间(图<gydF4y2Baxref ref-type="fig" rid="fig1"> 1<gydF4y2Ba/xref>)。人口数据开始表现出显著差异之间的血清浓度葡萄糖浓度之间的第二天,第四天。然而,在第六天血清组之间没有显著差异。此外,更高的细胞群产生的葡萄糖浓度高于葡萄糖浓度越低。三维细胞群之间的数据并没有表现出显著差异的两个胶原蛋白密度或两个葡萄糖浓度(图<gydF4y2Baxref ref-type="fig" rid="fig2"> 2<gydF4y2Ba/xref>)。然而,值得注意的是高标准差的数据。<gydF4y2Ba/p> <fig-group id="fig1"> <p>细胞群(平均值±标准偏差)的六天在二维文化(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M18"> <mml:mi> n<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 12<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>每组)。较高的血糖和血清浓度似乎随着时间的推移产生更高的细胞群。(答:5%组的对应值之间的意义;b: 10%组的对应值之间的意义;c:意义之间的对应值5%和10%组;d: 5.0和25.0毫米葡萄糖值显著区别在同一血清组;<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M19"> <mml:mi> P<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> 。<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig1a"> <label>(一)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.001a"></graphic> </fig> <fig id="fig1b"> <label>(b)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.001b"></graphic> </fig> <fig id="fig1c"> <label>(c)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.001c"></graphic> </fig> <fig id="fig1d"> <label>(d)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.001d"></graphic> </fig> </fig-group> <fig-group id="fig2"> <p>细胞群(平均值±标准偏差)的六天在三维文化(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M20"> <mml:mi> n<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 12<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>每组)。培养的细胞在不同的三维环境中没有产生任何特定的趋势的细胞群。统计学意义并没有观察到<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M21"> <mml:mi> P<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> 。<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>的水平。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig2a"> <label>(一)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.002a"></graphic> </fig> <fig id="fig2b"> <label>(b)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.002b"></graphic> </fig> <fig id="fig2c"> <label>(c)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.002c"></graphic> </fig> <fig id="fig2d"> <label>(d)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.002d"></graphic> </fig> </fig-group> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec3.2"> <title>3.2。细胞生存能力<gydF4y2Ba/title> <p>二维,天零细胞生存能力表明高细胞数量和confluency细胞暴露在任何实验治疗前(图片没有显示)。然而,白天两个0.5毫米和1.0毫米的细胞环境中表现出低生存能力而在5.0毫米和25.0毫米环境表现出高生存能力(图<gydF4y2Baxref ref-type="fig" rid="fig3"> 3<gydF4y2Ba/xref>)。这一趋势一直持续到4和6天。三维文化,有明显的细胞生存能力差异胶原蛋白密度和环境的葡萄糖浓度。在天零,细胞生存能力和confluency高细胞放置在2.5毫克/毫升胶原蛋白基质(图片没有显示)。一旦应用,0.5毫米葡萄糖环境引起的细胞表现出低可行性和confluency实验期间无论胶原蛋白密度(图<gydF4y2Baxref ref-type="fig" rid="fig4"> 4<gydF4y2Ba/xref>)。25.0毫米葡萄糖组细胞生存能力和confluency稳步下降2.5毫克/毫升组而可行性和confluency增加5.0毫克/毫升(图组<gydF4y2Baxref ref-type="fig" rid="fig4"> 4<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> <fig-group id="fig3"> <p>荧光显微镜图像显示bmsc的可行性在二维文化在第二天(增加葡萄糖浓度从左到右;增加血清浓度从上到下)。Calcein-AM表示活细胞通过发射绿光,而溴化乙锭表明死细胞通过发射红光。0.5毫米和1.0毫米环境导致低可行性和稀疏的细胞分布。5.0毫米和25.0毫米环境导致高生存能力和高confluency的维护。不同血清浓度没有产生显著影响的可行性。这个结果是一致的在本周的课程(20 x客观;比例尺代表250<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>米)。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig3a"> <label>(一)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.003a"></graphic> </fig> <fig id="fig3b"> <label>(b)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.003b"></graphic> </fig> <fig id="fig3c"> <label>(c)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.003c"></graphic> </fig> <fig id="fig3d"> <label>(d)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.003d"></graphic> </fig> </fig-group> <fig-group id="fig4"> <p>荧光显微镜图像显示bmsc的可行性后在三维文化第二和第六天(增加葡萄糖浓度从左到右;增加胶原蛋白密度从上到下)。Calcein-AM表示活细胞通过发射绿光,而溴化乙锭表明死细胞通过发射红光。第二天后,0.5毫米环境导致生存能力低,而25.0毫米环境导致高生存能力。通过6天,0.5毫米环境和25.0毫米−2.5毫克/毫升组导致生存能力低,而25.0毫米−5.0毫克/毫升组导致高可行性和confluency。(40 x客观;比例尺代表100<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>米)。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig4a"> <label>(一)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.004a"></graphic> </fig> <fig id="fig4b"> <label>(b)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.004b"></graphic> </fig> </fig-group> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec3.3"> <title>3.3。葡萄糖消耗<gydF4y2Ba/title> <p>在两和三维情况下,葡萄糖消费最高的25.0毫米组(数据未显示)。对于二维的情况,有3例血清组之间的显著差异和葡萄糖组之间的显著差异。三维情况下胶原蛋白组之间并没有产生显著差异或葡萄糖组到第六天,消费时高5.0毫克/毫升的细胞胶原基质比2.5毫克/毫升细胞胶原蛋白矩阵。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec3.4"> <title>3.4。乳酸生产<gydF4y2Ba/title> <p>组与高葡萄糖消耗会产生乳酸生产糖酵解的端点。这种行为是乳酸生产数据所示,与乳酸生产增加增加葡萄糖消耗两和三维文化(数据未显示)。在所有的边后卫层次4和6天的0.5毫米和1.0毫米葡萄糖组表现出显著降低乳酸生产比15毫米的小组<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M22"> <mml:mi> P<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> <<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> 。<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>的水平。同样,乳酸生产的葡萄糖消耗在三维文化这两天四个和六个。没有明显效果的边后卫乳酸生产的二维文化。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec3.5"> <title>3.5。丙酮酸生产<gydF4y2Ba/title> <p>丙酮酸是不可能积累,被转化为乳酸或乙酰辅酶A,丙酮酸生产的数量不应该有一个一致的模式在实验葡萄糖组。这个随机行为是显示在细胞内和细胞外,二维文化数据,尤其是统计学意义(图<gydF4y2Baxref ref-type="fig" rid="fig5"> 5<gydF4y2Ba/xref>)。然而,整体丙酮酸水平并降低血清浓度在两个二维情况下增加。丙酮酸生产水平在三维文化都为25.0毫米葡萄糖组高于0.5毫米葡萄糖组。<gydF4y2Ba/p> <fig-group id="fig5"> <p>细胞外的丙酮酸生产后的最后两天二维文化(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M23"> <mml:mi> n<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 12<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>每组)。生产数据不显示一个明显的趋势。(答:从5%组的对应值明显不同;b:从10%组的对应值明显不同;e:在同一血清组明显不同于其他值;f:明显不同于5.0毫米在同一血清组值;旅客:明显不同于25.0毫米在同一血清组值;h:明显不同于1.0毫米值在同一血清组;<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M24"> <mml:mi> P<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> 。<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig5a"> <label>(一)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.005a"></graphic> </fig> <fig id="fig5b"> <label>(b)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2011/429187.fig.005b"></graphic> </fig> </fig-group> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec3.6"> <title>3.6。代谢率<gydF4y2Ba/title> <p>Lactate-to-pyruvate比二维文化均呈增长趋势与初始葡萄糖浓度的增加,表明高葡萄糖文化更有厌氧(表<gydF4y2Baxref ref-type="table" rid="tab1"> 1<gydF4y2Ba/xref>)。lactate-to-glucose比率的二维文化,2%血清组中的值表现出相似的增长趋势与葡萄糖浓度(表开始<gydF4y2Baxref ref-type="table" rid="tab2"> 2<gydF4y2Ba/xref>)。然而,的值在5%和10%血清组没有。值得注意的是实际的样本数量的差异在评估统计学意义。许多样品显示没有丙酮酸生产,导致计算lactate-to-pyruvate比率成为不可能。此外,一些样品显示没有葡萄糖消耗0.5和1.0 mM组,导致lactate-to-glucose比率的计算成为可能。这就解释了为什么很多实验群体缺乏预期的12个样品。lactate-to-pyruvate和lactate-to-glucose比率的三维文化没有任何明显的趋势(表<gydF4y2Baxref ref-type="table" rid="tab2"> 2<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> <table-wrap-group id="tab1"> <label>表1<gydF4y2Ba/label> <p>总结二维L / P比值和L / G比率。L / P比值表明初始葡萄糖浓度较高的组表现出更厌氧特性。这一趋势在L / G相似比率为2%的血清组,但不是5%或10%血清组。(答:显著不同相应的值在5.0毫克/毫升组;b:明显不同于25.0毫米值在同一个胶原蛋白组;f:明显不同于5.0毫米在同一血清组值;<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M25"> <mml:mi> P<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> 。<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Ba/p> <table-wrap id="tab1a"> <label>(一)<gydF4y2Ba/label> <p>二维lactate-phosphate (L / P)比率。<gydF4y2Ba/p> <table> <tbody> <tr> <td align="left"></td> <td align="center" colspan="4">葡萄糖浓缩的。2%血清<gydF4y2Ba/td> <td align="center" colspan="3">5%血清<gydF4y2Ba/td> <td align="center" colspan="3">10%血清<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left"></td> <td align="center"></td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">圣开发。<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <italic> N<gydF4y2Ba/italic></td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">圣开发。<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <italic> N<gydF4y2Ba/italic></td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">圣开发。<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <italic> N<gydF4y2Ba/italic></td> </tr> <tr> <td align="center" colspan="11"> <hr></td> </tr> <tr> <td align="left" rowspan="4">第四天<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.5毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.41<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.36<gydF4y2Ba/td> <td align="center">3<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.85<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.92<gydF4y2Ba/td> <td align="center">6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">5.92<gydF4y2Ba/td> <td align="center">3.48<gydF4y2Ba/td> <td align="center">3<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">1.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.59<gydF4y2Basup>b<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">0.93<gydF4y2Ba/td> <td align="center">9<gydF4y2Ba/td> <td align="center">4.77<gydF4y2Basup>b<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">4.18<gydF4y2Ba/td> <td align="center">10<gydF4y2Ba/td> <td align="center">5.61<gydF4y2Ba/td> <td align="center">3.02<gydF4y2Ba/td> <td align="center">7<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">5.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8.79<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8.52<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">23.46<gydF4y2Ba/td> <td align="center">17.01<gydF4y2Ba/td> <td align="center">10<gydF4y2Ba/td> <td align="center">52.48<gydF4y2Ba/td> <td align="center">34.08<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">25.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">14.98<gydF4y2Ba/td> <td align="center">13.12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">36.05<gydF4y2Ba/td> <td align="center">34.25<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">50.01<gydF4y2Ba/td> <td align="center">32.62<gydF4y2Ba/td> <td align="center">11<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center" colspan="11"> <hr></td> </tr> <tr> <td align="left" rowspan="4">一天6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.5毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.17<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.34<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8<gydF4y2Ba/td> <td align="center">9.57<gydF4y2Ba/td> <td align="center">17.89<gydF4y2Ba/td> <td align="center">4<gydF4y2Ba/td> <td align="center">4.15<gydF4y2Ba/td> <td align="center">4.83<gydF4y2Ba/td> <td align="center">4<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">1.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">10.06<gydF4y2Ba/td> <td align="center">25.28<gydF4y2Ba/td> <td align="center">11<gydF4y2Ba/td> <td align="center">26.58<gydF4y2Ba/td> <td align="center">11.34<gydF4y2Ba/td> <td align="center">6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">31.76<gydF4y2Ba/td> <td align="center">37.43<gydF4y2Ba/td> <td align="center">4<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">5.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">51.37<gydF4y2Ba/td> <td align="center">17.22<gydF4y2Ba/td> <td align="center">6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">134.35<gydF4y2Ba/td> <td align="center">111.21<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8<gydF4y2Ba/td> <td align="center">234.68<gydF4y2Ba/td> <td align="center">549.5<gydF4y2Ba/td> <td align="center">10<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">25.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">71.49<gydF4y2Ba/td> <td align="center">59.71<gydF4y2Ba/td> <td align="center">10<gydF4y2Ba/td> <td align="center">113.18<gydF4y2Ba/td> <td align="center">76.5<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">114.8<gydF4y2Ba/td> <td align="center">152.36<gydF4y2Ba/td> <td align="center">9<gydF4y2Ba/td> </tr> </tbody> </table> </table-wrap> <table-wrap id="tab1b"> <label>(b)<gydF4y2Ba/label> <p>二维lactate-glucose (L / G)比率。<gydF4y2Ba/p> <table> <tbody> <tr> <td align="left"></td> <td align="center" colspan="4">葡萄糖浓缩的。2%血清<gydF4y2Ba/td> <td align="center" colspan="3">5%血清<gydF4y2Ba/td> <td align="center" colspan="3">10%血清<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left"></td> <td align="center"></td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">圣开发。<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <italic> N<gydF4y2Ba/italic></td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">圣开发。<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <italic> N<gydF4y2Ba/italic></td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">圣开发。<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <italic> N<gydF4y2Ba/italic></td> </tr> <tr> <td align="center" colspan="11"> <hr></td> </tr> <tr> <td align="left" rowspan="4">第四天<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.5毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.72<gydF4y2Basup>一个<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">0.45<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.47<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.09<gydF4y2Ba/td> <td align="center">6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.57<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.62<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">1.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.52<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.55<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.81<gydF4y2Basup>b<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">1.44<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.71<gydF4y2Ba/td> <td align="center">3.65<gydF4y2Ba/td> <td align="center">10<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">5.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.19<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.89<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2。2<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.42<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.09<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.44<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">25.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.53<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.56<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1。9<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.49<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.85<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.67<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center" colspan="11"> <hr></td> </tr> <tr> <td align="left" rowspan="4">一天6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.5毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.65<gydF4y2Basup>f<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">0.49<gydF4y2Ba/td> <td align="center">9<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.94<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.52<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.59<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.63<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">1.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.47<gydF4y2Basup>f<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">0.49<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">3.65<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2。6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">13.53<gydF4y2Ba/td> <td align="center">22.57<gydF4y2Ba/td> <td align="center">9<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">5.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.39<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.75<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.99<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.29<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.69<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.07<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">25.0毫米<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.56<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1。2<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.95<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.45<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.32<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.91<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> </tbody> </table> </table-wrap> </table-wrap-group> <table-wrap id="tab2"> <label>表2<gydF4y2Ba/label> <p>总结三维的代谢率。没有明显的趋势数据。(答:显著不同相应的值在5.0毫克/毫升组;b:明显不同于25.0毫米值在同一个胶原蛋白组;<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M26"> <mml:mi> P<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mi> </mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mi> </mml:mi> <mml:mo> 。<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Ba/p> <table> <tbody> <tr> <td align="left"></td> <td align="center" colspan="4">实验组L / P比值<gydF4y2Ba/td> <td align="center" colspan="3">L / G比<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left"></td> <td align="center"></td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">圣开发。<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <italic> N<gydF4y2Ba/italic></td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">圣开发。<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <italic> N<gydF4y2Ba/italic></td> </tr> <tr> <td align="center" colspan="8"> <hr></td> </tr> <tr> <td align="left" rowspan="4">第四天<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.5毫米/低密度<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.30<gydF4y2Basup>b<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">5.66<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.93<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.29<gydF4y2Ba/td> <td align="center">6<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">25.0毫米/低密度<gydF4y2Ba/td> <td align="center">11.92<gydF4y2Basup>一个<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">5.41<gydF4y2Ba/td> <td align="center">7<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.92<gydF4y2Basup>一个<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">0.97<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">0.5毫米/高密度<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.15<gydF4y2Basup>b<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">2.42<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">15.47<gydF4y2Basup>b<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">11.20<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">25.0毫米/高密度<gydF4y2Ba/td> <td align="center">18.73<gydF4y2Ba/td> <td align="center">4.95<gydF4y2Ba/td> <td align="center">6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.11<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.88<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center" colspan="8"> <hr></td> </tr> <tr> <td align="left" rowspan="4">一天6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.5毫米/低密度<gydF4y2Ba/td> <td align="center">74.75<gydF4y2Basup>a、b<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">77.85<gydF4y2Ba/td> <td align="center">3<gydF4y2Ba/td> <td align="center">17.30<gydF4y2Basup>一个<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">47.92<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">25.0毫米/低密度<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8.49<gydF4y2Ba/td> <td align="center">9.85<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.34<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.44<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">0.5毫米/高密度<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.92<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.15<gydF4y2Ba/td> <td align="center">6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">11.04<gydF4y2Basup>b<gydF4y2Ba/sup></td> <td align="center">8.60<gydF4y2Ba/td> <td align="center">8<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center">25.0毫米/高密度<gydF4y2Ba/td> <td align="center">6.32<gydF4y2Ba/td> <td align="center">7.23<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.02<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.22<gydF4y2Ba/td> <td align="center">12<gydF4y2Ba/td> </tr> </tbody> </table> </table-wrap> </sec> <sec sec-type="subsection" id="sec3.7"> <title>3.7。凝胶传输特性<gydF4y2Ba/title> <p>漂移速度和加速度表明,台盼蓝分子更快通过2.5毫克/毫升旅行比5.0毫克/毫升凝胶凝胶(表<gydF4y2Baxref ref-type="table" rid="tab3"> 3<gydF4y2Ba/xref>)。这些特点反映在平均阻力系数,5.0毫克/毫升的凝胶是大于2.5毫克/毫升的凝胶。<gydF4y2Ba/p> <table-wrap id="tab3"> <label>表3<gydF4y2Ba/label> <p>总结的结果与锥虫蓝通过胶原凝胶扩散。扩散系数的细胞密度是大致相同的。*相对阻力系数和相对扩散系数值的计算是通过正火与水(没有明显区别的扩散系数值2.5毫克/毫升和5.0毫克/毫升组)。<gydF4y2Ba/p> <table> <tbody> <tr> <td align="left"></td> <td align="center" colspan="2">水<gydF4y2Ba/td> <td align="center" colspan="2">2.5毫克/毫升<gydF4y2Ba/td> <td align="center" colspan="2">5.0毫克/毫升<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left"></td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">范围<gydF4y2Ba/td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">范围<gydF4y2Ba/td> <td align="center">的意思是<gydF4y2Ba/td> <td align="center">范围<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="center" colspan="7"> <hr></td> </tr> <tr> <td align="left">漂移速度(米/秒)<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.04<gydF4y2Ba/td> <td align="center">N /一个<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M27"> <mml:mn> 2。8<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 07年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M28"> <mml:mn> 2。5<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 07年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>来<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M29"> <mml:mn> 3所示。0</mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 07年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M30"> <mml:mn> 2。5<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 07年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M31"> <mml:mn> 2。3<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 07年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>来<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M32"> <mml:mn> 2。7<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 07年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> </tr> <tr> <td align="left">Accel。(米/秒<gydF4y2Basup>2<gydF4y2Ba/sup>)<gydF4y2Ba/td> <td align="center">0.0<gydF4y2Ba/td> <td align="center">N /一个<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M33"> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 3所示。9<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 12<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M34"> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 4.4<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 12<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>来<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M35"> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 3所示。3<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 12<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M36"> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 2。6<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 12<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M37"> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 2。8<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 12<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>来<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M38"> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 2。2<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 12<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> </tr> <tr> <td align="left">相对阻力系数。*<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1。0</td> <td align="center">N /一个<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M39"> <mml:mn> 5.9<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> +<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 04<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M40"> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 1。6<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> +<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>来<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M41"> <mml:mn> 3所示。3<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> +<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M42"> <mml:mn> 2。1<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> +<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M43"> <mml:mn> 1。8<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> +<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>来<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M44"> <mml:mn> 2。3<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> +<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 05年<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> </tr> <tr> <td align="left">相对扩散系数*<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1。0</td> <td align="center">N /一个<gydF4y2Ba/td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M45"> <mml:mn> 6.9<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 06<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M46"> <mml:mn> 6.4<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 06<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>来<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M47"> <mml:mn> 7.6<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 06<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M48"> <mml:mn> 6.3<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 06<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> <td align="center"> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M49"> <mml:mn> 5.8<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 06<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>来<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M50"> <mml:mn> 6.7<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mi> E<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 06<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula></td> </tr> </tbody> </table> </table-wrap> </sec> </sec> <sec sec-type="section" id="sec4"> <title>4所示。讨论<gydF4y2Ba/title> <p>本研究的总体目的是调查可能的代谢状态的差异msc在普通二维培养文化与collagen-based三维文化。对细胞的二维实验包括各种介质类型,不同血糖和血清浓度。三维实验受到细胞两种不同葡萄糖浓度和两个胶原蛋白密度。三维文化只接受葡萄糖在葡萄糖浓度变化似乎对细胞生长的影响最关键,生存能力,和代谢状态。适度的5%血清浓度被选中,是因为在2%和10%之间血清组。结果突出msc的代谢状态的相对差异在这些不同的培养条件。总的来说,最重要的两个因素影响细胞群开始葡萄糖浓度和添加一个三维矩阵。<gydF4y2Ba/p> <p>这个结果可以为干细胞治疗有着重要的意义,随着代谢状态在文化的差异可能会影响终端分化的msc。人类脂肪干细胞已经显示出这方面的证据是他们分化为成骨细胞改变通过改变它们的代谢条件(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B52"> 52<gydF4y2Ba/xref>]。分化是一个复杂的过程由干细胞,它是合理的假设实现任何特定终端分化取决于大量的能源使用情况。细胞有氧代谢和无氧代谢产生的能量,所有的细胞都取决于生理过程。此外,证据表明,细胞表现出偏爱一个代谢状态的其他特定过程(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B50"> 50<gydF4y2Ba/xref>,<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B51"> 51<gydF4y2Ba/xref>]。<gydF4y2Ba/p> <p>无氧糖酵解和有氧柠檬酸循环的两个主要手段是细胞获得能量。他们可以区分细胞葡萄糖消耗的命运。在糖酵解,葡萄糖转化为丙酮酸,然后转化为乳酸作为终端产品。然而,在柠檬酸循环,结束时糖酵解产生的丙酮酸进入三羧酸循环的形式乙酰辅酶a。相对代谢说明有氧或anaerobic-of细胞培养可以测量葡萄糖消耗和乳酸生产的后评估;乳酸量越高,越有可能相对厌氧代谢状态。<gydF4y2Ba/p> <p>这些数据说明的能力增长中葡萄糖和血清浓度改变的代谢状态msc。它已经表明,脂肪中提取干细胞从兔子<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B53"> 53<gydF4y2Ba/xref>)和人(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B52"> 52<gydF4y2Ba/xref>)提高乳酸的生产、扩散和可行性暴露在高葡萄糖环境。这一系列的实验的结果与对应的结果。代谢率二维实验表明,血清和生长培养基中葡萄糖浓度有助于确定细胞的代谢状态,高血清浓度和高葡萄糖浓度导致更多的厌氧文化。lactate-to-pyruvate比率表明,葡萄糖比血清更有影响力,随着增加葡萄糖的浓度产生显著增加代谢率没有增加复制的血清浓度。三维实验的比率并没有显示一个明确的趋势在过去的两天。但总的来说,lactate-to-pyruvate比率低得多的比二维三维文化文化,表明三维文化厌氧。在二维文化的结果预期,在牛奶中添加三维细胞外基质意想不到的影响L / P和L / G比率,表明这些影响必须更仔细的研究。<gydF4y2Ba/p> <p>这些实验的设置有几个优势。主要优势是使用相同的细胞类型为三文化,以避免潜在的显著差异在不同细胞类型之间的新陈代谢。这一事实强调了砂光机和Nauman发现培养大鼠星形胶质细胞产生lactate-to-glucose比率低于两猪板cribrosa细胞和猪巩膜成纤维细胞经过一个星期的文化环境和不同的葡萄糖和氧含量(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B54"> 54<gydF4y2Ba/xref>]。此外,在二维实验的情况下,血糖和血清浓度变化同时,这样的影响中组件可以被孤立。葡萄糖测定,分辨率为3.0<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M51"> <mml:mrow> <mml:mi> μ<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>M d -葡萄糖,乳酸测定,分辨率0.22毫米的乳酸,丙酮酸测定,分辨率为0.011 mM,灵敏度高。在未来,这种性质的研究将补充活细胞内NADH估计的实时成像的位置和强度相对细胞内的代谢活动。<gydF4y2Ba/p> <p>这些实验也拥有很多的局限性。台盼蓝扩散实验的目的是调查的可能性代谢物被困在胶原基质,从而避免检测化验。然而,锥虫blue-molecular ~ 960克/ mol被能够渗透的重量大约1.0毫米到2.5毫克/毫升和5.0毫克/毫升胶原凝胶在大约15分钟(数据没有显示)。因此,它是合理的假设,葡萄糖,乳酸,pyruvate-all分子量小于200 g / mol-were胶原蛋白能够遍历矩阵和检测。有两个其他情形表明,凝胶的厚度并没有阻止足够的运输乳酸凝胶。首先是承认calcein-AM-molecular体重~ 995克/ mol-did没有任何麻烦扩散进入凝胶在十五分钟内,以荧光的细胞图像。第二个来自霍纳的营养供给研究的结果和城市(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B55"> 55<gydF4y2Ba/xref>]。在这项研究中,研究人员嵌入式核电池在1%琼脂糖矩阵和监控细胞的生存能力作为他们的距离函数扩散室内的营养供应。荷马和城市显示嵌入式5.0毫米内细胞仍然可行的营养供应。然而,有不确定性的相似性之间的扩散和机械性能1%琼脂糖凝胶和胶原凝胶的研究。另一个缺点是,胶原凝胶收缩过程中无法避免本周长实验,大多数凝胶压缩到原始尺寸的75%。这可能尤其反映在细胞图像,可行性较高的细胞死亡是在2.5毫克/毫升样品而不是5.0毫克/毫升样品的实验结论。很可能硬胶减毒的收缩程度,给予细胞更好地获取营养/废物运输通过矩阵的过程中。<gydF4y2Ba/p> <p>这一系列实验的结果作为基准特征的msc在文化受到细胞外基质或分化方案,他们将特别有利于组织工程领域。虽然能够很好的证明,细胞外基质产生重大影响多种细胞类型(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B56"> 56<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B59"> 59<gydF4y2Ba/xref>),细胞外基质对细胞代谢的影响还有待研究。因为细胞代谢改变在三维文化相比,二维文化,这可能产生重大影响的细胞外基质,因为细胞代谢影响所有的细胞生理学。因此,未来的研究对干细胞终端分化的细胞代谢的影响是必要的。此外,这将是同样重要的是执行一项研究调查不同的细胞代谢和细胞外基质材料的类型。在这里,我们表明,影响细胞代谢葡萄糖是主要因素,但的边后卫也调节这种效果,和文化的长期影响条件在表型和表型的潜力仍然必须阐明。预计在分化的边后卫可用性可能会发挥更重要的作用,它的蛋白质含量的边后卫可能发挥作用在耦合的代谢和分化途径。<gydF4y2Ba/p> <p>时,总是有很大的风险与过渡从体外到体内研究,因为环境在许多方面是不同的,从实际和伦理观点,这将是有利的手段调查一组实验变量在一个人工组织模拟实现相同的变量之前在动物系统;这中间步骤可能会加速研究成果,防止不必要的死亡的动物应该从这种体外组织结果揭示危险的影响,二维情况下并没有透露。因此,这中间步骤有可能降低成本与vitro-to-in体内实验。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="section" id="sec5"> <title>5。结论<gydF4y2Ba/title> <p>这项研究的结果表明,葡萄糖提供的数量和细胞外基质的存在的确影响细胞的代谢状态和生存能力的文化。提供更大的葡萄糖浓度可能是一种细胞向厌氧状态,其他条件都相同。此外,结果表明,三维msc的文化可能发生在一个相对僵硬的矩阵或复合胶原蛋白水凝胶和胶原纤维(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B60"> 60<gydF4y2Ba/xref>,<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B61"> 61年<gydF4y2Ba/xref>),以防止减少细胞生存能力,需要进一步研究来阐明细胞外基质对MSC代谢的影响。扩散结果表明,整体运输两个高密度胶原凝胶的性质在本质上是相同的,所以结果实验小组在三维文化之间的差异不能归因于不同的传输特性。进一步的研究需要阐明代谢状态的影响在表型和表型的潜力。<gydF4y2Ba/p> </sec> <back> <ack> <title>确认<gydF4y2Ba/title> <p>作者要感谢美国国家科学基金会的资助研究生研究奖学金计划。他们还要感谢雪莉Voytik-Harbin博士在韦尔登普渡大学生物医学工程学院的msc的为她捐款用于这些实验。<gydF4y2Ba/p> </ack> <ref-list> <ref id="B1" content-type="article"> <label>1<gydF4y2Ba/label> <nlm-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 梅特卡夫<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 答:D。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 弗格森<gydF4y2Ba/surname> <given-names> m·w·J。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> 更换皮肤组织工程:生物材料的十字路口,伤口愈合、胚胎发育、干细胞和再生<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 《英国皇家学会界面<gydF4y2Ba/italic> <year> 2007年<gydF4y2Ba/year> <volume> 4<gydF4y2Ba/volume> <issue> 14<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 413年<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 417年<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 34249823651<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1098 / rsif.2006.0179<gydF4y2Ba/pub-id> </nlm-citation> </ref> <ref id="B2" content-type="article"> <label>2<gydF4y2Ba/label> <nlm-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 梅特卡夫<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 答:D。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 弗格森<gydF4y2Ba/surname> <given-names> m·w·J。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> 生物工程皮肤使用的再生和修复机制<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 生物材料<gydF4y2Ba/italic> <year> 2007年<gydF4y2Ba/year> <volume> 28<gydF4y2Ba/volume> <issue> 34<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 5100年<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 5113年<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 34748859797<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / j.biomaterials.2007.07.031<gydF4y2Ba/pub-id> </nlm-citation> </ref> <ref id="B3" content-type="article"> <label>3<gydF4y2Ba/label> <nlm-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Llames<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 年代。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 加西亚<gydF4y2Ba/surname> <given-names> E。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 加西亚<gydF4y2Ba/surname> <given-names> V。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 德尔里奥<gydF4y2Ba/surname> <given-names> M。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 落叶松<gydF4y2Ba/surname> <given-names> F。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Jorcano<gydF4y2Ba/surname> <given-names> j·L。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 洛佩兹<gydF4y2Ba/surname> <given-names> E。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 奥尔金市中心<gydF4y2Ba/surname> <given-names> P。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 产生<gydF4y2Ba/surname> <given-names> F。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 奥特罗<gydF4y2Ba/surname> <given-names> J。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Meana<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 一个。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> 临床结果的自体皮肤设计<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 细胞和组织的银行<gydF4y2Ba/italic> <year> 2006年<gydF4y2Ba/year> <volume> 7<gydF4y2Ba/volume> <issue> 1<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 47<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 53<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 33644770363<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1007 / s10561 - 004 - 7253 - 4<gydF4y2Ba/pub-id> </nlm-citation> </ref> <ref id="B4" content-type="article"> <label>4<gydF4y2Ba/label> <nlm-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Opitz<gydF4y2Ba/surname> <given-names> F。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Schenke-Layland<gydF4y2Ba/surname> <given-names> K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Cohnert<gydF4y2Ba/surname> <given-names> t U。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 股票<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 美国一个。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> 表型可塑性的血管平滑肌cells-effect体外和体内组织工程血管的剪切应力<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 组织工程<gydF4y2Ba/italic> <year> 2007年<gydF4y2Ba/year> <volume> 13<gydF4y2Ba/volume> <issue> 10<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 2505年<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 2514年<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 35348869153<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1089 / ten.2006.0424<gydF4y2Ba/pub-id> </nlm-citation> </ref> <ref id="B5" content-type="article"> <label>5<gydF4y2Ba/label> <nlm-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 梁<gydF4y2Ba/surname> <given-names> b . 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