1。间充质基质细胞在细胞疗法
细胞疗法的视觉再生医学似乎显而易见:来代替患病、死亡,或失踪与健康细胞(细胞或组织
1 ]。干细胞在这方面的作用是在严格审查下,定义器官再生原理和开发创新新方法治疗器官衰竭。间充质干细胞或基质细胞(msc)成为关键候选细胞疗法,包括再生和免疫疗法。
msc有很大的吸引力对细胞和免疫治疗和组织工程有很多原因:
(1)
他们相对容易获得各种各样的组织(
2 ];
(2)
他们在细胞培养迅速扩张
3 ];
(3)
他们只显示小自发分化期间
体外 扩张(
4 ];
(4)
他们是多功能的
4 ,
5 ];
(5)
它们形成支持造血干细胞移植(造血基质和支持
6 ];
(6)
他们似乎主要免疫惰性,为同种异体移植(铺平了道路
7 ];
(7)
他们是免疫抑制(
8 ];
(8)
他们分泌大量的营养因素调节炎症、改造和细胞凋亡
9 ]。
基于初始Friedenstein和卡普兰,骨骨髓来源msc (BM-MSCs)是最好的描述和最先进的临床设置。在大多数比较研究,BM-MSCs作为黄金标准(
2 ]。对于治疗的应用程序,方便和高度丰富的来源是有利的。脂肪组织(在),经常获得lipoaspirate,已成为另一个组织,因为细胞发生在高频率和采购微创比(BM愿望
2 ]。血液显然是最容易成年细胞的组织来源。外周血,然而,不包含msc在非病理性的,至少不是在数字相关临床规模生产(
10 ]。同样的发现仍然适用于脐血(CB) [
2 ,
11 ]。逆的胎龄和收益率之间的相关性msc描述(
12 ]。因此msc在足月CB只出现在低频阻碍隔离成功(
2 ,
11 ,
13 ]。成功与CB、隔离保证当使用脐带矩阵或沃顿的果冻
14 ]。胎儿组织非常有趣,因为他们似乎包含相对不成熟的msc表达多能性标记SSEA - 3、4、Oct-4, Sox-2 Nanog [
15 ]。
2。对Clinical-Scale msc的制造业
msc正越来越多地使用在许多临床前以及在某些临床设置免疫调节或组织修复的相邻部分更详细地总结这个特殊的问题。重要的是要注意,最新的msc也被证明是安全的,有效的管理在各种疾病(
16 ]。这些疾病的几个特点是炎症和组织缺陷。经常不能切割的效果是否msc是由于他们生产营养因素刺激内源性修复机制,他们直接分化成不同类型的细胞或免疫调节作用。在一些模型,msc发布的因素显然是足以相当一部分山的影响(
9 ]。因此msc的功效是否需要长期坚持不懈的msc还有待阐明。
快速进展干细胞科学转化成创新的细胞疗法导致早期和晚期阶段的临床试验。然而转化过程的复杂性,从概念、先进的临床测试,最后新细胞治疗药物显示落后的标准和指导方针,经常遭受监管负担。增加监管机构审查的相互依赖越来越多的细胞疗法的临床试验。各种组织应对这种威胁提出最小集的标准或共识指南(
17 - - - - - -
21 ]。
争论的特点和效能存在很可能因为不仅不同实验室采用不同组织来源,而且提取方法、文化协议和描述工具。任何变化可能导致隔离和扩张不同亚种群的细胞或细胞的变化特征(
22 ]。因此Dominici等人提出的最小标准定义msc (
17 ),即
(1)
坚持塑料标准培养条件下,
(2)
CD73 CD105的表达,CD90、CD45和缺乏表情,CD34, CD14,或CD11b CD79alpha CD19和HLA-DR表面分子,
(3)
分化为成骨细胞、脂肪细胞和内层
在体外 。
考虑到即使msc用于生产临床试验和以各种不同的协议,复制或解释的临床结果可能会阻碍
21 ]。因此,标准化的协议必须保证生产开发的细胞行为仅在临床目的,不产生负面影响,例如,不受控制的分化或转换。通常可以培养的MSC 40 - 50人口倍增,直到增长率显著下降,衰老细胞进行复制(
23 ]。在某些情况下,然而,没有观察到msc改造自然。差异是解决,当实验室报道,msc的变换是由交叉污染与肿瘤细胞系(
24 ,
25 ]。
因此,一个基本要求是所有步骤在MSC制造从原材料到效能测试目标指示必须高度标准化,以确保所需的和可再生的细胞质量和效力。科学家针对面临的挑战为临床试验生产msc是定义最优有效隔离和细胞培养条件
体外 扩大同质msc在保持细胞所需品质不良事件的预期临床应用和最小化风险。例如,我们最近在人类血清验证是否AT-MSCs孤立和扩展(HS)与细胞培养在共享特征胎牛血清(的边后卫)[
22 ,
26 ]。尽管所有标准中定义的(
17 )已经完成,最小差异明显的关于细胞大小和基因表达谱。通过比较两个人类补充剂的边后卫,我们观察到的边后卫略有改变基因表达,但在分类的基因分化和粘附/细胞外基质(
22 ]。当前研究重点详细解剖补充剂是否改变细胞的行为在某种程度上影响预期的治疗应用。
治疗的目的是修复细胞或组织损伤但没有诱导肿瘤的风险,严重的免疫反应,或不必要的组织发展。因此两个安全性和有效性的措施应考虑建立的制造过程。msc通常需要不足
体外 扩张;大规模扩张的后果可能会导致无效的或退化细胞(
23 ]。因此重要的是要了解和仔细地控制生产过程和相应的定义措施,准确预测细胞疗法的安全性和有效性。
3所示。监管框架
成年干细胞类型的就业在临床研究中,一般来说,需要正式批准相应的监管机构。这个批准需要制造、加工和测试细胞产品根据当前国家法规,包括当前良好的组织实践(三磷酸鸟苷),良好生产规范(GMP)和良好的临床实践(GCP)。所有细胞产品应当遵守这些规则,确保产品是安全的,纯粹的和有效的。三磷酸鸟苷和GMP指通用标准,调节设施,人员、设备、试剂和供应,过程和最终控制(过程、最终产品和实验室控制)。这些标准应考虑尽快开始细胞产品的发展。因此,监管当局提供调查他们的建议来调整过程从早期开始。
在欧洲,msc被归类为先进的治疗药品(ATMPs) [
27 ,
28 ]。ATMPs包括基因治疗药品,体细胞治疗产品(如中定义的指令2001/83 / EC),和组织工程产品。细胞属于本条例,以防他们一直受到实质性的操纵,导致变化的生物学特性、生理功能或结构属性与目标相关的治疗应用程序,例如,再生,修复或更换。ATMP指细胞或组织不打算用于相同的基本功能在收件人的捐献者。这意味着msc可以被认为是体细胞治疗产品或组织工程产品根据指示和操纵在制造过程中。关于临床试验与msc的规则第六条(7)和第九条(4)和(6)适用的指令2001/20 / EC。在欧盟机构负责临床试验批准卫生当局在国家层面上。与美国相比,美国国立卫生研究院接管这部分(
28 ,
29日 ]。在欧盟,GMP和质量都比在美国更相关。1394/2007号欧洲监管是有效的2008年12月以来,直接绑定在其整体和适用于所有成员国。(监管(EC) 1394/2007号的欧洲议会和理事会
http://ec.europa.eu/health/human-use/advanced-therapies/index_en.htm 。主要元素是(我)一个集中化的营销授权过程,(2)委员会先进疗法(CAT)作为多学科科学致力于审查质量,安全和ATMP的监管方面,(3)技术要求适应特定ATMP激励中小企业特征。)这是符合2004/23 / EC指令捐赠,采购和测试的人类细胞和组织和指令2002/98 / EC对人类血液和血液成分。修改方针在细胞医药产品(EMEA CHMP / 410869/2006),专注于基于单元的药用产品的制造和质量控制以及临床前和临床发展。
在美国,FDA(美国食品和药物管理局)宣布1997年“建议的方法来调节细胞和组织的产品”(21 CFR 1271)。(
http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/cfcfr/CFRSearch.cfm?CFRPart=1271 。秒。1271.1:“…,这部分的目的是创建一个统一的注册机构和清单系统,制造人类细胞,组织,和细胞和组织的产品(HCT / P)和建立患者使用,当前良好的组织实践,和其他程序,以防止介绍、传播,和传播传染病的HCT / P”)。这个在2005年成为有效的规则对人类细胞,组织,细胞和组织的产品(HCT / Ps)。虽然只有一个细胞产品(Carticel,自体软骨细胞产品修复由Genzyme)已经被FDA许可,这并不反映试验与细胞产品的实际数量。这些细胞疗法不需要fda批准的“最低限度的操纵,标签或广告仅供相应的使用,而不是结合药物或设备”所指定的牧师,(
30. ]。相比之下,操纵自体的细胞结构使用满足体细胞疗法的定义产品,需要一个“试验性新药”(印第安纳州)免税或FDA-license批准。2007年“指导工业:调节人体细胞、组织、细胞和组织的产品(HCT / Ps) -实体合规指南”和2009年“指导行业当前良好的组织实践(cGTP)和额外的要求制造商的人类细胞,组织和细胞和组织的产品”(
http://www.fda.gov )已被释放。FDA提供建议支持制造业机构HCT / Ps更好地理解和遵守监管框架。临床研究采用msc是印第安纳州机制的基础。因此调查员必须做出一个印第安纳州应用程序,需要详细研究协议,描述了临床计划以及细胞治疗产品的制备和测试(
31日 ]。
管理框架在欧盟和美国都是为了保证安全,因此他们需要一个深入分析的关键步骤和方面。尽管仍有差异(
19 ,
28 ,
29日 ),当局联系,进一步协调。因此可以预计,通过提供一个社区的需求,完成他人的机会很高。
在以下参数相关msc制造作为例证。
4所示。生产过程
生产过程是高度分散的例证,如图
1 ,说明GMP-compliant MSC制造过程处理和测试步骤。因此,在启动前应完善和验证关键的临床试验,因为生产过程的变化可能会影响最终的临床试验结果。
图1
流程图说明基本在MSC制造加工和测试步骤。这计划总结GMP-compliant MSC扩张的生产过程分为处理和相关的测试活动。0天组织收割,并运送到处理实验室。这里受助者再次检查合格标准以及测试/接收控制启动(病毒、细菌、血型、条件、重量,如果适用细胞计数,等等)。验证接收控制开始处理GMP设备的先决条件。这里执行细胞隔离和扩大文化发起或产品直接应用于病人。预定义的进程内控制应当在任何关键处理步骤来验证细胞质量和不育。如果开始扩张,正常的协议包括一个媒介交换步骤与此同时消耗污染细胞。细胞生长可以直观地监控以及潜在的污染。使细胞可以在未来14天执行涉及控制形态、生存能力和不育。假设一天14天的收获和产品发布,细胞必须指定与预定义的最终产品发布标准。 The product can then be cryopreserved allowing for additional potency assays or directly transported to the recipient. Packaging, labeling, and shipment conditions again have to follow GMP rules.
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4.1。组织采购
一般来说,起始物料是一个关键问题,包括常见的捐赠者合格标准,如年龄和病毒测试。msc已经应用于自体和同种异体的设置和来自不同组织来源。由于免疫的特权地位,单个同种异体MSC捐献可能为多个接受者提高需求定义良好的合格标准(
32 ]。
最常用的细胞来源获得msc BM,其次是在和其他组织来源,这里我们将关注围产期组织。BM-derived msc穿刺后通过BM渴望收获捐助者髂骨。愿望战略和体积影响msc的收益率,这来自同一地点的多个愿望和较低的愿望体积(< 8毫升)应避免
33 ]。进一步的迹象表明,供体年龄影响细胞产量和msc的分化潜能(
34 ,
35 ]。吸气BM卷可以是一个关键问题是大量会导致与血液稀释,过低卷不过证明了低高度异构的产量msc (
33 ]。一些数据表明,从骨髓msc可分离滤波器褪色专用造血干细胞采购(
36 ]。大多数协议隔离,采用密度梯度离心法,虽然这一步是讨论的必要性和仍在优化(
37 ]。单核细胞培养在MSC培养基,直到成细胞显示结果。
代表一个可访问的msc的来源,通常被称为脂肪干细胞(对asc) [
38 ]。可以通过不同的技术采购,包括切除或愿望,从身体的地区,这在很大程度上是(腹部、转子地区,腹股沟,膝盖)。msc可以从组织胶原酶消化分离和离心分离和培养基质血管的分数给上升到msc (
2 ]。各种研究分析收获条件对细胞产生的影响。ASC的收益率似乎并不受影响的愿望技术比较syringe-based或pump-assisted吸脂
39 ),似乎仍然存在显著差异获取站点之间关于脂肪形成的属性(
40 )及其对细胞凋亡的敏感性(
41 ]。关于收获的产量ASC,有争议的结果:有一些报告更丰富的产量有核细胞集落形成单位臀部和腹部吸脂(
39 ),其他一些上级集落形成单位的产量相比,腹部吸脂后臀部吸脂(
42 ]。
比较研究中抽脂和组织切除,抽脂方法证明材料优越的细胞产生愿望保持稳定甚至24 h后存储在相反的excisates细胞产量下降。与这些结果后一项研究揭示了一个更高的细胞产量和可行性后切除(
43 ]。
有关负压的影响在抽脂负压−350毫米汞柱导致细胞产量大于低−700毫米汞柱压力
44 ]。
产后妊娠组织继承众多优势msc来自岁成年组织。早期关注围产期组织窝藏干细胞来自HSC和msc在CB [
11 ,
45 ]。随后胎儿肝、肺、脑、绒毛状胎盘,胎膜以及羊水被确定主机msc (
13 ,
15 ]。不讨论abortal组织,在大多数情况下围产儿出生时组织被丢弃,因此细胞收获的对宝宝没有任何风险或其母亲。因此,有一个无限供应,很容易访问和最低限度的道德/与围产期组织相关的法律问题。组织可以存储用于自体或同种异体设置immuno-privileged胎儿细胞已被证明。因此CB存储是一个策略在许多国家受到广泛关注,不仅对同种异体,也为潜在的自体应用(
46 ]。
4.2。生产在床边:减少体积和直接的应用
一些治疗的应用程序,例如,在心脏细胞疗法,使用完全最小加工组织,如体积减少单核细胞可以在病人的床边执行(
47 ]。这意味着一个有吸引力的和可能减少成本和时间选择自体治疗设置和属于不同的规定(ATMP所谓“医院豁免”)(“中定义的任何先进的治疗药品,监管(EC) 1394/2007号,这是准备nonroutine基础上根据具体的质量标准,并使用在相同的成员国在医院独家专业医生的责任,为了符合个人医疗处方定做的产品个别病人。”(欧盟法规1394/2007))。由于前体较高频率尤其在处理病人的床边(
48 ]。仍然有不同方面被认为是为了减少细胞治疗的风险(
49 ,
50 ]。但最低限度处理组织含有大量异构混合物的茎,祖细胞和成熟细胞,因此理想的成分(
51 ]。一些研究比较体积减少到扩大AT-derived细胞制剂显示不同的结果(
52 ,
53 ]。因此,当前日期所有临床应用指定的使用msc已经使用文化扩大了细胞。
4.3。制造一个GMP-Facility
4.3.1。隔离和扩张
为了满足细胞的监管标准制造产品需要使用安全、纯组件和材料。如果可能的话,应该使用许可或GMP-grade试剂,在research-grade试剂的情况下可能需要额外的内部测试,以确保安全和质量。试剂,包括补充剂,细胞因子,生长因子,用于扩张或分化的msc应该控制和记录。几个参数
体外 扩张的msc是至关重要的,以确保良好的扩张率以及维护multipotency msc。其中包括,例如,起始物料、方法用于浓缩或分离,电镀密度、设备用于MSC文化、媒体、补充和生长因子以及通道数量或人口倍增
54 ]。
4.3.2。细胞播种
电镀密度已成为MSC隔离和扩张的一个关键问题。低播种密度在初级文化似乎与更成熟的出现祖子集(
3 ]。此外,播种在低密度允许更高的膨胀率。为扩大,因此,提出了两种不同的协议。在一个协议细胞种子近克隆的水平。这允许扩大细胞倍增高累积人口在一个通道,但是需要大文化区(
55 ]。其他协议种子细胞浓度更高。由于减少了可能的人口倍增,这个过程需要一个通道,,然而,促进有效的消耗污染细胞(
56 ]。
4.3.3。媒体和补充
培养条件应当保留,甚至加速再生和msc的营养特性。协议的种类是巨大的和标准尚未定义。传统媒体组成由一个基础培养基(DMEM或alpha-MEM)和10% -20%的补充,通常的边后卫,在GMP级允许供临床使用。对于异种的争论,尤其是反刍动物蛋白质药品也适用于msc。的边后卫熊异基因的转移的风险,潜在的感染或免疫原性的蛋白质。免疫原性与妥协的边后卫蛋白质已经证明治疗的好处(
57 ,
58 ]。因此尽管GMP-compliant的边后卫批次是可用的和用于临床级生产监管当局要求替换的边后卫nonxenogeneic替代制造商如果可能的话。
到目前为止没有完全无血清媒体制定clinical-grade可用它允许隔离(关键问题:附件因素)和扩张的MSC (
59 ]。血清蛋白质提供附件因素不仅营养,而且至关重要的。几个实验室提出了人类的使用组件来补充MSC生长介质。自体或同种异体HS或者血小板源因素评估(
26 ,
54 ,
59 ,
60 ]。海关以及血小板溶解产物非常粗蛋白鸡尾酒。重要的生长因子最佳MSC文化尚未定义。PDGF, EGF, TGF -
β ,IGF受到调查。基本FGF表明最有前途的影响在扩大msc在维持干细胞特性,减少复制衰老(
61年 ]。最近,Pytlik等人描述了HS和生长因子补充clinical-grade媒介使得高细胞扩张由失去接触抑制(
62年 ]。
生产过程中的任何重大变化可能会影响细胞功能。因此,有必要分析可比性研究msc的品质确保细胞品质不妥协。在各种出版物,汇集人类血小板溶解产物成为合适的替代BM-MSC隔离和扩张(
26 ]。我们自己的数据表明,ASC相比之下混合商品有更好的影响扩张(
60 ]。但正如上面指定的,它必须是确定治疗的品质是否修改,改进或受损。可想而知,根据临床不同的协议(细胞来源、生产协议,质量控制/效能分析)来获得最优的产品。
4.3.4。设备扩张
msc贴壁细胞生长直到达到confluency然后通过串行使进一步扩大。因此,细胞的数量,可以收获的
体外 文化是由面积扩张。通常msc在传统的单层培养的文化。为了实现一个大表面积多层细胞工厂使用(
55 ,
56 ]。这种方法是劳动密集型和资金消耗。也通过使用生物反应器成为可能扩大msc (
63年 ,
64年 ]。封闭系统应该作为首选GMP-setting, Rojewski等人报告一个完全自动化的生物反应器允许大规模GMP-compliant制造(
65年 ]。
一个关键问题是msc的增殖年龄:msc有限制寿命和衰老状态的细胞功能成为减少和增加的风险积累突变(
32 ,
66年 ]。通常通过数字表达的增殖能力。通过数字与人口倍增不描述实际扩散历史当达成某些不明确的时间点是至关重要的(最多30人口倍增)(
66年 ]。
4.3.5。存储或低温贮藏
隔离后,volume-reduced细胞或
体外 文化扩大细胞可以直接移植或长期储存在低温条件下。各种各样的研究调查的影响的存储条件和低温贮藏方法和媒体
67年 - - - - - -
69年 ]证明msc可以低温贮藏和解冻而不丧失功能
70年 ]。低温贮藏提供了唯一的机会执行耗时的发布测试细胞的临床应用之前,几乎不可能实现,当细胞产品是用于立即释放。
4.4。产品规格
一如既往地需要仔细权衡风险与干细胞疗法的潜在好处。潜在的风险可以减少在应用适当的发布测试能够确保安全,产品的有效性和一致性。基于单元的产品需要特殊考虑制造过程,特别是当他们必须立即应用。在这种情况下是不可能获得实验室测试的结果前细胞应用程序,因此一组有限的控制,以确保产品满足所有预定义的质量标准。细胞产品一般来说足够数量的可行的、高质量的细胞是必需的。这些可以很容易地记录的简单、快速的细胞生存能力测试。
基于单元的产品不能被消毒,以避免将传染病。利用人类和/或异种的材料,有一个潜在的附着剂污染,因此检测细菌、真菌、支原体和病毒应该执行。无论使用自体或同种异体设置增加注意保证无菌处理是强制性的。
如上所示,可能影响长期的安全
体外 文化积累畸变。但只有零星的研究表明,msc可能发生自发的转换,与染色体畸变有关,诱导癌基因和移植后致瘤性
23 ,
71年 ]。临床经验表明,细胞,当出现衰老之前收获,证明肿瘤形成的概率极低(
66年 ]。当前测试系统包括核型分析、鱼、比较基因组杂交,或PCR检查表达式可能不够敏感的肿瘤标记物检测的预期低比例影响细胞(
72年 ),但即使发生改变,比如aneuploidity不预测转换,最近证明了挞挞等。不过这些数据有助于完善控制化验,容易执行,控制细胞周期/衰老和转换路径,例如,PCR为好,p16Ink4a p53、p21、hTERT和致癌基因像原癌基因。
进一步的临床安全问题与可能的异位组织形成或其他不良事件接收者。尽管总体上没有不良反应记录,这种可能性不能被忽视。老鼠发达钙化(本地与msc治疗心肌梗死
73年 ]。进一步相对大的单元尺寸已经观察到次引起肺和血管内移植后栓塞(
74年 ]。此外细胞应用程序的协议可以影响移植最近媒体演示当比较不同的细胞悬液(
75年 ]。最后,虽然在一些临床治疗目的设置,例如,预防或治疗移植物抗宿主病,免疫调节能力也可能有利于肿瘤生长和转移的形成,作为动物模型观察(
76年 - - - - - -
79年 ]。
欧盟和美国的标准测试程序是不同的。测试过程为例,对无菌试验,必须经FDA批准或在欧洲国家的监管当局。但随着需求并不相同,国际协调会议(我)打算协调(有关更多信息,请参见各自的主页)。
4.5。身份和杂质
细胞产品的身份可以确保在必要时通过基因型和表型分析。在MSC文化中,细胞的分数显示身份标记(间充质标记)和污染细胞的识别(造血标记)可以很容易地和迅速由流仪量化分析(
17 ,
80年 ]。高于这个形态对成纤维细胞的表型和扩散可以很容易地记录在扩张的文化。
产品相关杂质必须确定和指定,包括内毒素测试(
81年 ]。在适当情况下,杂质有关,例如,降解产物的结构或矩阵组件规定,以及流程相关杂质来自添加生物活性成分。
4.6。效力
产品描述必须考虑相关的功能能力预期的临床使用。ISCT要求的最低标准控制的能力msc坚持正常塑料文化表面,生成细胞与成纤维细胞的表型,表达或不表达一组典型的表面标记,并表现出multilineage分化潜力,至少到骨的,adipo和chondrogenic血统(
17 ]。虽然每个实验室雇佣这些化验,化验是耗时的,远非标准化,所以比较实验室和临床数据的读出是阻碍
80年 ]。如前所述发展临床前有效性测试的调查表明高度可取的msc似乎使用函数根据用途的不同模式。根据临床的意图,可以执行以下分析评估能力,但必须记住这些化验已经直接相关的治疗效率(
32 ]。
Clonogenicity
CFU-F试验是一个合适的但不是标准化工具量化前体的频率。分析要求适当稀释到克隆的水平因为CFU-F频率不遵循线性回归相关输入手机号(
54 ,
55 ]。
分化潜能
multilineage分化潜力是msc的标志,但其他地方的详细讨论
4 ,
5 ,
82年 ]。
在体外 化验可以执行使用自制或商用感应媒体。然而,越来越多的讨论是否和程度
在体外 数据关联
在活的有机体内 分化潜能(
82年 ,
83年 ]。
免疫调节能力
调节免疫反应的角度对紧密相联的,可能也自身抗原呈现msc具有吸引力的细胞免疫疗法。
在体外 ,建立了分析量化表面分子的表达,如HLA I和II类和costimulatory分子。在cocultures外周血单核细胞,msc不引发alloreactive反应。此外,当添加第三方在混合淋巴细胞反应或mitogen-driven文化,msc剂量依赖性抑制免疫细胞的反应。然而非常低浓度的msc可以刺激免疫反应(
84年 ]。虽然这尚未被观察到
在活的有机体内 ,数量过低的msc移植可能加速免疫反应而不是减轻GvHD或自身免疫性设置。
造血作用/基质支持
的有利影响cotransplanting msc在血液学的设置已经被证明
85年 ]。这种效应可以化验
在体外 coculture实验中使用造血干细胞和msc,因此这可能是一个适当的质量控制系统治疗指示(
86年 ]。
营养支持
在各种设置msc显示有前途的治疗效果即使输血细胞如果难以觉察的朋友受伤的器官。最近的数据进一步表明,特别是分泌因素积极调节衰弱局部炎症反应。细胞凋亡的减少,纤维组织改造以及招聘的当地居民再生细胞造成了有利影响(
9 ,
87年 ]。相应的一些研究已经证明治疗效果当注入MSC细胞条件培养基代替
88年 ,
89年 ]。根据治疗的设置,分析检查参与组成分泌腺的化疗或细胞因子的量化水平可能随后成为额外的效力试验(
26 ,
60 ]。
4.7。验证
细胞产品的安全性和有效性必须证明在人类之前,他们的政府。MSC应用在临床进展快128次点击进入“间充质干细胞”作为搜索词
http://www.clinicaltrials.org 。然而,有一种趋势,从床边回到板凳上更好地描述和改善msc和重要的是标准化协议隔离,扩张,最后描述。变化
在体外 需要将其转化为临床协议。因此这是一个临界点,协调临床医生需要与研究人员选择与制造实验室密切互动,概述了保证金由监管当局陷害。任何重大的变化制造协议需要验证
在体外 并在适当的
在活的有机体内 动物模型,以确保安全性和有效性(
28 ]以及没有毒性(相关的去分化或不必要的分化,迁移到不必要的网站)。动物模型所固有的局限性,例如,应用人体细胞在异种的环境(
82年 ]。这需要使用免疫系统严重受损的小动物防止相反分析的免疫反应。此外由于各种疾病模型,例如,在骨科,小动物不能造型。因此,必须定义一个妥协之间的所有要求:临床、监管、和实验室同意适当的验证策略。