前列腺癌(PCa)在西方世界非常流行;这在癌症中排名第六的关于男性的死亡率( 1]。有1276106例新病例的PCa和358年,2018年全世界989人死亡由于PCa ( 2]。尽管五年生存戏剧性的改善,死亡率PCa将仍然是一个主要的健康问题是由于增加寿命,特别是在西方国家。与发病率和死亡率的最重要的因素是转移扩散到其他器官的发展,尤其是骨,和新兴抵抗治疗。

在分子水平上,PCa几乎总是最初由过度通过雄激素受体(AR)信号通路(了 3])。因此,男性转移PCa将雄激素剥夺疗法(ADT)作为主要治疗。中位数约18 - 24个月后,病情往往成为抗激素操纵和对所谓的转移性前列腺癌castration-resistant (mCRPC)。在mCRPC,当前的浓度blood-based临床PCa生物标志物,前列腺特异性抗原(PSA),随着时间的推移继续增加。PSA是监管 通过基于“增大化现实”技术的信号,这表明,在一般情况下,常见的基于“增大化现实”技术的持续参与信号在疾病进展mCRPC [ 4- - - - - - 7]。Abiraterone [ 8, 9]和enzalutamide [ 10, 11开发用于mCRPC,作为“第二代”ADT治疗,和响应一般都不错,但平均无进展生存5.6个月( 8确实]表明抵抗再次治疗。事实上,尽管行动机制的差异,阿比特龙抗力移转enzalutamide之间,是很常见的 8, 12- - - - - - 14),这意味着真正的激素抵抗的发展后二线ADT治疗,而不是阉割阻力。因此,雄性激素信号的上下文中通过基于“增大化现实”技术的其他信号通路的致癌效应仍然是一个重要的研究领域,然而,没有有效的治疗方法或标记为真正的激素抵抗。在这里,我们审查的参与两个关键信号通路,phosphatidylinositol-3-kinase / AKT (PI3K / AKT)和河马/ YAP通路,这与基于“增大化现实”技术的交互途径在mCRPC epithelial-to-mesenchymal过渡(EMT)的链接。EMT被认为发挥重要作用的发展转移和治疗抵抗( 15, 16]。我们的文献研究表明,分析循环肿瘤细胞(ctc)隔绝PCa病人可能允许ctc作为一个工具来定义如何将这些信号通路与基于“增大化现实”技术的交互途径导致ADT阻力,从而调查这些通路的机制可能导致阉割阻力。此外,ctc可能因此成为一个有用的PCa生物标志物的个性化治疗。

转移在PCa mCRPC整体的联系。在细胞水平上,转移包括一系列的步骤,目前的证据表明,EMT和相反的过程mesenchymal-to-epithelial过渡(遇到)(综述( 17])是重要的机制,肿瘤细胞迁移和重建自己遥远的地点。癌细胞被认为失去紧密相邻细胞粘附和变得更加移动接受EMT的时候,这反过来,有利于肿瘤的能力从质量,intravasate到血液中,因此成为ctc。满足,另一方面,认为援助ctc离开血管系统后能够解决在其他组织和形成新的肿瘤( 18, 19)(图 1)。因此,CTC数量被认为是转移性疾病的标志,和重要的是,EMT标记在病人筛查CTC包括54 PCa患者,53%的病人患有晚期转移性疾病和间歇epithelial-to-mesenchymal CTC的表型与转移在这些患者中,而另一项研究发现,间充质CTC表型相关进展率增加的108年一群CRPC PCa患者招募了大量转移性疾病在荷尔蒙疾病阶段和纵向之后在研究[ 20.- - - - - - 22]。

转移性癌症扩散被认为涉及不同阶段(图 1(一)),癌细胞(我)失去信息紧密连接和分离从主站点/器官,(ii)穿透基底膜,进入附近的组织,(3)逃避细胞程序性死亡通常由衬底附着力损失(女性),(iv)违反血液或淋巴血管和迁移到其他网站 通过血液和淋巴循环,(v)离开血管或淋巴管在遥远的器官,(vi)形成一个micrometastatic核心,最后(七)调整和重组周围基质形成可检测macrometastases [ 23]。在分子水平上,EMT涉及各种癌症,包括主成分分析。mCRPC的发展,提出激活转录因子(TFs)导致的损失上皮间充质特征的特性和收购以及细胞形状的变化,导致增强的入侵和死亡率上升 24, 25]。

EMT是由环境因素如辐射或缺氧诱导(图 1 (b)),有越来越多的证据表明放疗或化疗,用于治疗早期PCa,可能诱发EMT的变化( 26, 27]。缺氧导致低氧诱导因子(HIF)的生产,和HIF-1 α刺激转录因子(TFs),如蜗牛和扭曲,引发EMT ( 28, 29日]。EMT然后激活的结果引起的间叶细胞转录程序的特定转录因子(EMT-TFs) [ 26]。从力学上看,中央EMT-TFs ZEB1、蜗牛、蛞蝓和扭曲等TFs TCF4和FOXC2抑制等关键上皮标记的表达细胞角蛋白,钙occludin,和claudin而导致upregulation间充质标记如N-cadherin、纤连蛋白、波形蛋白,使癌细胞更加能动的,因此更激进(图 1 (c))。

调节和信号级联信号分子包括EGF、刺猬,Wnt, FGF,一级,TGF - β,HGF诱导信号 通过NF - κB, MAPK、PI3K / AKT或Wnt / β连环蛋白通路调节EMT-TFs,最终诱发EMT表型变化。最近,河马通路调节EMT都会涉及到 通过其下游转录调制器Yes-associated蛋白质(笨蛋)和转录辅激活小胡子( 28, 30.- - - - - - 38]。重要的是,有证据表明在文献中,这些途径可以成功地分析了ctc虽然在某些情况下,这些分析对PCa ctc可能还没有被报道。表 1总结的一些证据暗示信号通路EMT的PCa分析这些途径在ctc主要来自其他癌症。CTC包括其他癌症,因为他们的研究表明在PCa CTC调查这些途径的可行性。

几项研究已经评估了EMT标志物的临床重要性的不同阶段人类PCa。表 2显示了典型的EMT标记在主成分分析中发现组织。这些EMT标记的一个可能的临床效用在疾病的不同阶段提出的预后相关性recurrence-free和总生存期。例如,EMT标记扭曲和波形蛋白以在根治性前列腺切除术样本是独立的标记免疫组织化学生化复发所定义的复苏在血清前列腺特异性抗原(PSA)水平参与( 84年, 90年]。最近的一项研究发现,组织蛋白酶L L (Cat),这是一个EMT-associated EMT-TF蜗牛的目标,可能是一个生物标志物的PCa过程( 83年]。此外,损失的膜结合钙粘蛋白染色似乎与更高的格里森评分,先进的临床分期和预后不良在PCa ( 91年]。EMT标记如Zeb1、钙粘蛋白和波形蛋白扮演重要角色在疾病进展的不同阶段,从原发肿瘤CRPC阶段2。在CRPC Zeb1表达的增加与减少生存( 84年]。此外,108年的一项研究新诊断患者castrate-sensitive PCa,表达间充质标记在ctc基线被发现是一个独立的预后因子,预测的时间进程ADT CRPC以下标准。患者间充质ctc在基线显示显著短时间进展CRPC患者比没有ctc和ctc为阴性的患者间充质标记( 21]。一些研究表明,钙粘蛋白抑制入侵和转移 在体外符合这些发现,钙粘蛋白染色在肿瘤组织与总生存期( 84年]。然而,钙粘蛋白的关系转移还不清楚在所有情况下,因为在最近的一项研究中,它已经表明,钙粘蛋白减少损失转移潜力浸润性导管癌( 92年),这表明钙粘蛋白在肿瘤进展中扮演对立的角色通过抑制癌细胞的入侵,同时促进转移。然而,总的来说,数据显示,EMT标记可能有预测价值对复发和整体生存在组织和ctc ( 84年]。不同的研究表明,钙粘蛋白抑制入侵和转移。然而,在最近的一项研究中,它已经表明,钙粘蛋白减少损失转移潜力浸润性导管癌( 92年]。

基于“增大化现实”技术,位于X染色体(图 2(一个)),是一种激素依赖性转录因子( 93年]。如果状态,受体细胞质和受热休克蛋白的 94年]。当它的配体,二氢睾酮(DHT)或睾丸激素,结合 通过基于“增大化现实”技术的配体结合域(小黑裙(图) 2(一个)),结构变化导致分离的基于“增大化现实”技术的热休克蛋白90(一半)复杂,homodimerization受体,和核易位。

在细胞核中,基于“增大化现实”技术作为转录因子通过绑定androgen-response元素(战神)雄激素调节基因的启动子区域( 95年, 96年]。AR transactivates基因负责细胞生长,分化,细胞存活率( 97年]。因此,基于“增大化现实”技术的信号可能会增加正常前列腺细胞转化为恶性PCa细胞。此外,它已被证明,ADT治疗可以选择的癌细胞进一步增加的基于“增大化现实”技术的活动,例如,由于AR基因扩增 98年]。

另类的表达AR拼接变异提出了作为一个机制抵抗ADT [ 99年, One hundred.]。大部分拼接变异导致截断AR蛋白的翻译缺乏功能性c端小黑裙,但包含一个功能transactivating n端结构域。不能够结合配体,由此产生的蛋白质是既定的活跃转录因子,能够促进某些目标基因的表达( 97年, 101年]。至少20拼接变异的基于“增大化现实”技术已确定在人类前列腺组织和参与的发展mCRPC [ 101年- - - - - - 104年]。在基于“增大化现实”技术的变异,AR-V7 mCRPC中高度表达,是临床最常见的疾病相关变异识别( 105年, 106年]。AR-V7记录结果的可变剪接AR基因记录包含了外显子1,2,和3一起神秘的外显子3 e (CE3)导致截断成绩单(U),导致过早的转录终止(图 2 (b))。AR-V7持续活跃无论雄激素绑定,这是一个逃离ADT的提议机制( 107年, 108年]。

没有明确的共识对雄激素的作用信号EMT的规定。使用细胞系的早期研究表明,雄激素刺激促进EMT LNCaP和曲泽细胞,但有一个逆关系AR受体水平和androgen-mediated EMT标记表达和EMT-associated细胞骨架变化。成分促进了PCa细胞引起的低水平的基于“增大化现实”技术转移能力诱导EMT虽然高水平没有( 109年]。相比之下,最近的一项研究表明,AR mRNA和蛋白表达高于原发性肿瘤和转移性肿瘤组织中增加肿瘤阶段和格里森评分。患者更高的基于“增大化现实”技术的表达显示短recurrence-free生存,表明积极的AR表达和肿瘤恶化之间的联系。此外,廉价的基于“增大化现实”技术的使用核C4-2B细胞抑制EMT的功能标记, 即细胞迁移和入侵和间叶细胞标记与EMT相关的蛋白质,同时增加上皮钙粘蛋白标志。这些影响戒律与抗雄激素治疗bicalutamide [ 39]。因此,基于“增大化现实”技术的刺激诱导或抑制细胞培养中EMT cell-type-dependent时尚。

研究前列腺正常老鼠和人类前列腺肿瘤小鼠模型表明,雄激素剥夺通过手术阉割,而抑制肿瘤生长,诱导间充质EMT的标记和标记的干细胞表型,而抑制上皮标记。这些变化也出现在患者的组织ADT [ 110年),支持基于“增大化现实”技术的信号抑制EMT的视图,而ADT促进它。

进一步支持这一观点,与enzalutamide ADT C4-2细胞,但不是在曲泽细胞,诱导EMT Snail-dependent的方式标记。感应所需的EMT AR信号抑制和激活的蜗牛。有趣的是,蜗牛是由雄激素在AR表达下调C4-2 VCaP细胞但不是曲泽细胞。重要的是,基于“增大化现实”技术的信号之间的负相关和蜗牛表达式中观察到C4-2异种移植和castration-resistant patient-derived转移在小鼠和在临床样本支持这样的观点,即诱导EMT是一种适应性反应与enzalutamide ADT [ 40]。ADT可能有利于收购干细胞和EMT特征,致癌基因的表达,或肿瘤抑制基因的抑制AR-positive PCa细胞,这意味着mCRPC至少部分是通过EMT ( 41, 110年- - - - - - 114年]。

其他数据表明,AR拼接变异参与耐药性的发展PCa ( 105年, 115年- - - - - - 117年]。这个假设的一个推论是,抑制的基于“增大化现实”技术的变异或他们的特定的函数可能会导致EMT表型逆转,可能会反过来抑制肿瘤扩散( 41, 118年]。总的来说,然而,这一领域仍然可以理解,需要更多的数据来完全理解如何基于“增大化现实”技术的途径及其操纵在治疗期间可能调节EMT,因此潜在的转移。由于mCRPC最终在很多患者死亡的主要原因,发展和建立的基本生物过程mCRPC需要被理解( 119年]。值得注意的是现在越来越多的证据在ctc EMT标志物的表达与mCRPC [ 120年, 121年),突出ctc的潜在好处在分析解决基于“增大化现实”技术的转移和耐药的作用。

如上所示,由于hormone-independent mCRPC的性质,这是对所有当前的ADT形式。在这个阶段,AR表达甚至可能完全失去了( 122年- - - - - - 124年),提高PCa的问题是如何生存和增殖细胞发生在这个阶段。主要涉及致癌信号通路在这个节骨眼上是PI3K / akt途径,主要通过频繁的功能激活的抑制肿瘤抑制磷酸酶和tensin同族体(PTEN),这是不太常见的在本地化PCa(20 - 30%),但越来越占主导地位,在mCRPCs的50 - 60%。结果是无法控制的,致癌Akt信号(了 125年, 126年])。PI3K / AKT和基于“增大化现实”技术的途径是高度网络化与正面和负面反馈循环( 125年),在mCRPC,当前的文献表明,负面的反馈控制。也就是说,抑制途径导致相互激活另一个( 127年- - - - - - 130年]。卡佛和他的同事们已经阐明这种交互的一部分,证明基于“增大化现实”技术可以减少通过中介PHLPP AKT激活,虽然AKT可以转录表达下调基于“增大化现实”技术的输出通过她的激酶活性( 127年]。PTEN的确切作用调解这种交互是有争议的。一方面,PTEN缺失与AKT激活和AR水平降低有关( 128年, 131年),另一方面,它可能独立AR基因表达增加删除转录镇压[ 130年, 132年- - - - - - 134年]。考虑到相互关联的信号网络,AR和AKT信号或沉默的结果可能会影响整体结果上下文相关的方式,可能依赖于其他蛋白质的存在和活动,会影响反馈循环的平衡。例如,它已经表明,基于“增大化现实”技术可以转录抑制PCa细胞中PTEN的表达而增加PTEN表达在乳腺癌细胞和报告认为这可能是由于tissue-dependent转录辅因子的可用性 135年]。此外,ADT的平衡也会影响这些相互关联的信号通路。重要的是,失去了 PTEN与EMT有关驱动与RAS信号通过AKT通路或合作;因此,缺乏PTEN功能可能促进转移( 136年, 137年]。

如上所示,几个信号通路可能导致最终EMT的感应和转移,AKT通路的PCa上下文中的重要性。最近,河马YAP1转录辅激活规范的途径已成为一个重要的球员在这个场景中,在调节PCa细胞活性( 138年]。在胃癌中,PTEN失活提出了链接河马和PI3K / Akt途径促进癌症发展和肿瘤发生 139年]。在正常组织中,河马信号通路出现中央细胞生长控制和限制器官大小协调细胞增殖、生长和死亡( 140年]。不同的信号如细胞极性,信息接触,细胞外基质的特点,和压力可能导致河马通路的激活(了 141年])。河马信号通过磷酸化的激酶级联结果致癌cotranscription因素称为YAP和小胡子,促进他们的细胞质保留和蛋白酶体降解[ 142年- - - - - - 144年)(图 3)。

河马的失活途径允许YAP和小胡子激活 通过去磷酸化,所需易位到细胞核。尽管小胡子和YAP缺乏内在的dna结合域,它们被和增强其他转录因子的活动目标启动子( 145年, 146年]。

河马信号可以作为肿瘤抑制。功能障碍的河马信号通常是由于MST1/2 LATS1/2函数或由于损失 YAP1基因扩增。YAP1是研究最多的YAP同种型,异常YAP1激活与各种恶性肿瘤的病因包括胃( 147年)、甲状腺( 148年)、肺( 149年),结肠( 150年),头部和颈部 151年)卵巢( 152年),肝脏( 153年),和前列腺癌 154年]。

最有趣的是,在PCa细胞YAP1和基于“增大化现实”技术的直接互动。一项研究表明,与荷尔蒙前列腺癌细胞,YAP1-AR交互androgen-insensitive和可能导致耐药性enzalutamide mCRPC细胞。WW / SH3 YAP1领域最有可能促进与AR氨基末端的交互领域(元) 155年]。

一项研究提出,增加核YAP1,可能由于河马信号的损失,可能导致复杂的AR和YAP1导致androgen-independent绑定之间形成复杂的阿瑞斯在AR-driven启动子导致异常的基于“增大化现实”技术的目标基因表达可能促进mCRPC [ 58]。

重要的是,YAP已被证明通过几种机制包括EMT,促进转移,有证据表明,PTEN-AKT轴参与YAP1-induced EMT ( 145年, 156年, 157年]。EMT的底层机制监管,YAP仍出现,但鉴于转录coregulator狂吠的角色,它是不足为奇的途径集中涉及EMT-TFs。至关重要的是,YAP1已被证明与主EMT-TFs网络。例如,高glucose-induced polyubiquitination PTEN导致变更磷酸酶的目标,包括EMT的关注去磷酸化,激活增加监管机构如麻花,蜗牛,YAP1 [ 158年]。YAP1也开车EMT和可能TEAD-dependent转录诱导的非小细胞肺癌转移 鼻涕虫( 159年]。关注YAP在成骨细胞分化的作用,研究发现两个笨蛋和蜗牛和蛞蝓之间的联系。在蜗牛/ Slug-null骨骼干细胞/基质细胞,YAP和小胡子的水平降低 通过蛋白质降解由于河马通路的激活,而YAP蜗牛和蛞蝓的直接交互显示改变YAP /而转录活动( 160年]。另一项研究发现,Twist-induced EMT在乳腺癌细胞是依赖小胡子的活动。河马的机制涉及增加表达途径抑制剂PAR-1三杆,哪个驱动器小胡子核本地化。人会认为YAP核本地化也可能诱导 通过PAR-1 / 3在这种背景下,尽管这是不检查 161年]。另一项研究显示,增加细胞外基质硬度可以诱导乳腺癌细胞中EMT阻塞 β1-integrin-mediated刚度矩阵避免扭曲和核易位尽管狂吠,有趣的是,通过不同的机制( 162年]。

在上皮细胞,细胞彼此连接的膜结构称为紧密连接,,粘合连接处并且细胞桥粒。这些连接的失调与转移和EMT ( 163年, 164年]。带occludens-1 (ZO-1)是一个紧密连接蛋白存在于正常的上皮细胞。虽然没有在主成分分析研究,在黑色素瘤、肺癌细胞,和乳腺癌,ZO-1表达与癌细胞的入侵属性( 165年- - - - - - 167年]。一项研究发现,YAP超表达的差别导致了对这些ZO-1和诱导转移EMT在非小细胞肺癌 159年]。

YAP(但不是小胡子)已被证明与ZEB1直接交互,值得注意的是,这种交互这转录阻遏变成一个催化剂。这是ZEB1-mediated所反映出的事实是携带者(上皮)镇压独立于YAP绑定。至关重要的是,基因upregulation ZEB1-YAP复杂的基因表达与签名的claudin-low乳腺癌乳腺癌亚型整体表现出急诊医疗表型。更重要的是,ZEB1-YAP complex-mediated基因表达与病人生存hormone-independent乳腺癌,与耐药性和转移( 168年]。ZEB1镇压几个EMT-related microrna包括miR375而闻名,这是与上皮表型有关。然而,miR375已知YAP目标,通常在PCa实际上已经表明PCa的等离子体标记。建议机制miR375支持一个上皮表型是通过反馈调节,这样它的目标和抑制YAP成绩单,因此YAP蛋白质含量,从而扭转EMT在PCa细胞。然而令人惊讶的是,高血浆miR375水平与CTC积极性[ 169年),这表明需要进一步调查了解YAP之间的复杂网络,ZEB1, miR375, EMT, CTC的形成。至少部分,此外,缺氧可能诱发EMT稳定YAP及其核易位PCa细胞系( 170年]。

毫不奇怪,另一项研究表明,抑制上皮组织的关键特征,即E-cadherin-mediated和信息交互,导致EMT和增加传播Madin-Darby犬肾细胞。有趣的是,传播可以部分避免YAP击倒。同样的研究发现,不仅是YAP要求允许核条目的启动肿瘤蛋白1 (WT1)会面,但WT1和狂吠的复杂形式 背景(上皮)启动子和抑制其转录。这些数据,连同确认粘附抑制移植YAP水平,表明双重否定反馈,钙粘蛋白和YAP相互抑制。这可能是部分EMT之间切换,满足,所以可能会解释的可塑性EMT过程( 171年]。

有趣的是,一个可能的机制PTEN的损失函数是由狂吠。途径包括核YAP-mediated而家族转录因子的激活,导致转录阻遏miRNA29c PTEN的合成。相反,当笨蛋是通过磷酸化灭活,PTEN水平恢复,狂吠的致癌作用是抑制 172年]。此外,如上所述,PTEN泛素化可以脱去磷酸,从而激活YAP导致其核积累表示一个可能的正反馈调节( 158年]。

另一方面,PTEN被确认为负的基于“增大化现实”技术活动的监管机构,AR / PTEN交互可能调解PTEN通过抑制肿瘤抑制作用的基于“增大化现实”技术和PCa细胞凋亡诱导 173年]。然而,如前所述,PTEN和基于“增大化现实”技术的网络仍然知之甚少,和数据是相互矛盾的。这是反对以另一项研究发现,在PTEN缺失降低AR表达和PCa (AR转录活动 131年]。

综上所述,新兴的证据表明,YAP是复杂的一部分功能网络连接AR和AKT通路,从而调节PCa和mCRPC-at——至少在部分 通过EMT(图 4)。然而,还需要更多的工作来更好地理解这种相互作用及其影响治疗先进PCa的发展策略。

评估潜在的分子通路mCRPC是具有挑战性的,因为组织切片一般不可以从疾病晚期阶段,动物模型;进一步,虽然考试的组织可以提供一些信号通路的信息,这种模式的研究主成分分析有一定的局限性。液体活检,mCRPC ctc的分析,可能是一个选择。尽管诊断CTC分析PCa仍处于起步阶段,有充足的证据表明这种疾病的效用。当然,调查了ctc成像和分子技术的蛋白质的表达,基因扩增,突变,和转录表达目标和综合水平( 174年]。PCa,增加CTC计数与早期的疾病进展和较短的操作系统相关联,枚举的PCa CTC使用CellSearch CTC平台获得FDA批准作为预后指标( 175年]。而常见的CTC隔离和分析技术支持上皮CTC,有很多的进步提高捕获、检测和分析EMT-CTCs筛查上皮和间充质标记表达式( 176年- - - - - - 181年]。同样,如表 1所示,几个主要信号通路参与EMT,在某种程度上,在CTC样本分析。在本文中,我们集中在基于“增大化现实”技术,一种蛋白激酶,和河马通路mCRPC核心,至少在部分 通过EMT的监管。现在重要的是要考虑如何将这些通路一直在探索CTC,为了衡量潜在的CTC分析mCRPC推进我们对这些通路的理解。因此,我们注意到DNA、RNA、和protein-centric分析AR和孤立的ctc AR-V7水平已经成为一个繁忙的PCa研究领域。此外,正在努力CTC-based AR和AR-V7检测转化为临床设置最初针对患者定义合格标准或临床试验的结果标记( https://clinicaltrials.gov)[ 182年]。

mCRPC-associated AR放大和突变分析已经完成了ctc使用杂交技术,如荧光 原位杂交(鱼)和其他分子的方法。总的来说,这些研究可以验证协会CTC-based AR与mCRPC放大或突变,而基于“增大化现实”技术的相关性细胞本地化ctc mCRPC所示,为了应对紫杉烷( 46, 47, 183年- - - - - - 186年]。完整的基于“增大化现实”技术和AR-V7 RNA在ctc也已经有了很广泛的研究水平和CTC-based AR-V7特别是被发现与mCRPC阿比特龙主要阻力和enzalutamide [ 45, 182年, 184年, 187年, 188年]。有趣的是,也有努力检测AR和AR-V7生物标志物在其他液体活检的实体,包括plasma-derived循环肿瘤核糖核酸(ctRNA),液,甚至尿液。我们最近这些策略相比,发现完整的基于“增大化现实”技术和V7 RNA检测更敏感,如果CTC上执行特定样本,相比ctRNA或液。我们也证明了AR-V7 CTC-RNA检测到48 h后抽血到常见的EDTA vacutubes [ 189年, 190年]。通过改进AR-V7-specific抗体可用性、CTC immunocytostaining最近透露,具体检测AR-V7 CTC核是一个更好的预测操作系统和PFS CRPC患者( 191年, 192年]。一般来说,似乎核AR在大多数ctc AR-V7 RNA阳性发现,反映了主要倾向于AR-V7在mCRPC核本地化组织( 188年, 193年]。在CRPC患者中,AR-V7-positive ctc已被证明与enzalutamide阿比特龙和电阻( 187年]。在任何情况下,当调查基于“增大化现实”技术的相互作用/ AR-V7与其他途径,尤其是转录辅活化因子,在ctc immunocytodetection似乎是最符合逻辑的策略。

几项研究也分析了PTEN在ctc,损失,如前所述,可能允许致癌AKT通路的激活和是一个重要的PCa生物标志物。的损失 PTEN并获得AR在PCa ctc复制数据报告( 194年- - - - - - 197年),而测试的激活AKT通路已经完成例如phosho-Akt或phospho-S6激酶免疫染色在乳腺癌和多发性骨髓瘤ctc ( 198年]。

报告在ctc河马信号和YAP1分析,相比之下,仍然稀缺。一项研究评估表达式的小胡子使用RNA原位杂交(RNAish) NSCLC ctc的探索。小胡子更频繁地检测EGFR的表达野生型肿瘤细胞的癌症而其表达与淋巴结状态的疾病 60]。YAP1可以分析很可能以类似的方式在ctc或使用immunocytostaining优先,因为后者也将揭示细胞本地化,因此活动以及与其他蛋白质colocalisation。然而,据我们所知,直接检测YAP1 ctc尚未报道,虽然EMT YAP1的关系表明,激活YAP1应该与增加ctc的形成。一些间接的证据进一步的力量借给这个想法,在最近的一份报告显示,ρGTPase激活蛋白29 (ARHGAP29)是一个转录YAP1在胃癌的目标。高ARHGAP29水平调节细胞骨架肌动蛋白和细胞迁移。重要的是,作者还演示了使用鼠标模型ctc展出ARHGAP29 RNA水平增加网站与原发肿瘤细胞( 61年, 199年]。最后证明YAP1-ARHGAP29连接ctc仍然悬而未决,然而。另一个转录狂吠的目标是miR375与CTC积极性,然而又没有显示的直接连接在CTC ( 169年]。

综上所述,回顾了数据表明AR-AKT-YAP1网络可以分析在ctc。由于肿瘤组织是很少在mCRPC设置,并可以很容易地采集血样未来努力CTC的分析可能会更好地理解ADT阻力,从而通知的发展改进的诊断,预后和治疗功能。

ctc的分析提供了一个基础液体活检,尤其是在缺乏活检组织。然而,CTC隔离有严峻的挑战,下游检测和分析。一是CTC在庞大的人口数量相对较小的血细胞和可以采取的血液量取决于病人的一般情况。ctc非常异构的物理特性(尺寸、弹性和表面电荷),生物学特性,表达不同的肿瘤标志物进行浓缩或隔离的ctc困难(了 200年])。一般来说,低CTC CTC的数字让下游分析另一个挑战。蛋白质检测通常限于immunocytostaining这依赖于基于抗体的检测和可用显微镜通道的数量与3通常用于检测CTC标记(通常是细胞角蛋白),核标记,如DAPI和排斥的血液细胞通常CD45标记。然而,一些研究发现额外的蛋白质如EMT标记( 21, 22, 176年pFAK]或转译后的修改,如磷酸化,pPI3K, pSRC, pEGFR, pAkt [ 53, 201年- - - - - - 204年]。

在这里,我们回顾了AR通路之间的连接和AKT河马途径,探索一个潜在作用信号nexus EMT mCRPC。尽管当前文献支持这三方关系的重要性,现在需要进一步的研究来更好地评估其重要性在PCa,以及其临床潜力定义生物标记物或药物靶点。分析PCa ctc可能促进深入调查AR / AKT河马通路相互作用,以及如何将这些驱动EMT ADT阻力。这种分析可能最终调解的出现新的诊断/预测分析针对PCa,尽管此时数据建立不足这一概念的可行性。事实上,虽然这些通路已经被调查的某些方面在CTC,现在需要更全面的CTC的优化分析方法,允许这些通路的解剖互动,作为这一重要目标的前兆。