OMCL 氧化医学和细胞寿命 1942 - 0994 1942 - 0900 Hindawi 10.1155 / 2018/2370617 2370617 研究文章 银杏叶叶提取物预防心肌损伤通过衰减的内质网应激在体外糖尿病的载脂蛋白e<年代up>−−/老鼠 http://orcid.org/0000 - 0002 - 3610 - 6814 田 刑事 1 2 http://orcid.org/0000 - 0001 - 7706 - 6495 刘 Yanfei 3 4 http://orcid.org/0000 - 0002 - 0084 - 863 x 刘 悦 3 程ydF4y2Ba 科基 3 http://orcid.org/0000 - 0003 - 4843 - 2761 律 Shuzheng 1 2 里索 Paola 1 心内科 北京安贞医院 首都医科大学 北京100029年 中国 ccmu.edu.cn 2 北京理工大学的心 肺和血管疾病 北京100029年 中国 heartinsti.com 3 心血管疾病中心 西苑医院 中国中医科学院 北京100091年 中国 cacms.ac.cn 4 研究生院 北京中医药大学 北京100029年 中国 bucm.edu.cn 2018年 25 2 2018年 2018年 23 09年 2017年 26 11 2017年 26 12 2017年 25 2 2018年 2018年 版权©2018年刑事、田等。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

糖尿病在高脂饮食诱导的载脂蛋白e<年代up>−−/老鼠通过政府的低剂量链脲霉素(STZ)五天。对老鼠然后对待GBE(200或400毫克/公斤)胃强饲法每天12周。在未经治疗的糖尿病小鼠组盐相反,和非糖尿病的C57BL / 6 j小鼠作为控制。胶原蛋白І和ІІІmRNA表达是通过实时PCR来衡量的。肿瘤坏死因子- α,il - 1 β信使rna水平,和NF - κB表达测定分析心肌内的炎症。内质网应激的标志——(人)相关的细胞凋亡通路,包括磷酸化c-Jun n端激酶(p-JNK), C / EBP同源蛋白质(切),caspase-12,和caspase-3裂解,通过免疫印迹分析。糖尿病ApoE<年代up>−−/心肌损伤与增加心肌细胞凋亡(p-JNK表达的增加,剁碎,caspase-12和裂解caspase-3),间质纤维化(mRNA水平增加胶原蛋白І和ІІІ),和炎症(TNF - mRNA水平增加 α和il - 1 β和NF - κB表达)。GBE在200和400毫克/公斤/天明显减少心肌细胞凋亡,胶原蛋白沉积,并通过抑制炎症在糖尿病小鼠p-JNK,排骨,caspase-12通路。血清促炎细胞因子(il - 6、il - 1的水平 β和肿瘤坏死因子- α)、血糖和血脂水平也对受GBE治疗。GBE可能是有益的治疗糖尿病心肌损伤。

 北京心血管精密医学实验室 PXM2017_014226_000037 在国家科技重点项目支柱项目 2011年bai11b05 北京市自然科学基金 7162170 北京新星计划 Z171100001117027 1。介绍

糖尿病心肌病(DCM),主要的糖尿病心血管并发症之一,最终导致心力衰竭,这就增加了糖尿病患者的死亡率。糖尿病心肌损伤,包括心肌细胞凋亡,心肌纤维化和心肌内的炎症,是重要的扩张型心肌病的病理特征。Diabetes-induced经常出现心肌细胞凋亡与间质胶原蛋白沉积和肌纤维混乱 1]。此外,越来越多的证据表明,底物代谢改变,氧化应激,慢性炎症导致DCM和糖尿病心肌损伤( 2, 3]。

内质网应激(ERS)中扮演着一个关键的角色在糖尿病心肌损伤的发展,因为持续的展开的蛋白质反应(UPR)可以诱导细胞死亡( 4]。UPR由三个途径,inositol-requiring激酶1 (IRE1),蛋白激酶类似ER激酶(活跃),和激活转录因子6 (ATF6)通路。c-Jun ERS-mediated细胞死亡包括激活 N终端激酶(物),C / EBP同源蛋白质(切),caspase-12,因此激活caspase-3。

IRE1和物激活可能导致核因子的upregulation kappa-B (NF - κB)表达式通过IkB激酶的磷酸化(IKK) [ 5, 6]。Upregulation NF - κB表达导致增加促炎细胞因子的生产,如肿瘤坏死因子- α(肿瘤坏死因子- α),interleukin-1 β(il - 1 β),il - 6,导致心肌细胞凋亡和心肌纤维化 7]。

最近,草药治疗糖尿病心肌损伤得到了太多的关注。 银杏叶叶被用作传统草药几百年来在中国。的主要组件 银杏叶对叶提取物(GBE)包括两个活性物质,也就是说,萜类化合物(包括ginkgolides和bilobalide)和类黄酮(图 1)。GBE被证明具有抗氧化,自由基清除和membrane-stabilizing活动,导致其有利影响在糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤( 8]。此外,它显示,胰腺抗炎和抗氧化作用的链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病动物( 9, 10]。对此外,GBE增强胰岛素敏感性和预防胰岛素抵抗增加insulin-induced一种蛋白激酶磷酸化和胰岛素受体底物1表达[ 11]。GBE也在STZ-induced改善糖尿病肾病糖尿病大鼠( 12]。

对选民的GBE的化学结构。(一)Bilobalide ginkgolide (b)和(c)银杏黄酮醇苷。

目前,很少有研究调查的潜在对使用GBE治疗糖尿病心肌损伤。在目前的研究中,我们对旨在调查是否GBE可以防止糖尿病心肌损伤和阐明底层机制。

 2。材料和方法 2.1。药物

GBE粉末和阿托伐他汀是购自北京Handian制药有限公司和辉瑞制药有限公司,分别。GBE用于本研究包含44.9%银杏黄酮、萜类化合物6.3%,< 1 ppm银杏酸。

 2.2。实验动物

男性ApoE<年代up>−−/老鼠,年龄6 - 7周,体重19 g (C57BL / 6 j背景,引进美国杰克逊实验室由北京大学健康科学中心实验动物科学系;质量认证数量SCXK(北京),2016 - 0012年)被用于这项研究。小鼠的饲养条件是2级。老鼠保持受控条件下(室温22 - 24°C;相对湿度50%;和灯;从7点到19点)。实验协议是机构批准的动物保健和使用委员会西苑医院、中国中医科学院。动物实验进行了按照指南的护理和使用实验动物由美国国立卫生研究院出版。

 2.3。试验协议

ApoE<年代up>−−/老鼠被喂食高脂肪饮食(基本饮食,78.85%;脂肪,21%;和胆固醇,四个星期前糖尿病的0.15%)是诱导50毫克/公斤/天腹腔注射STZ(σ)和柠檬酸缓冲液稀释(pH值4.5;连续五天,最终浓度1%)中描述的一项研究[ 13]。老鼠表现出血浆葡萄糖水平> 12 L更易被认为是糖尿病和研究中使用( n = 58 )[ 13, 14]。然后糖尿病小鼠接受阿托伐他汀( 15, 16)(10毫克/公斤/天,胃内的(渐开线齿轮), n = 14 对),GBE低剂量(200毫克/公斤/天,渐开线齿轮, n = 16 对),或者GBE高剂量(400毫克/公斤/天,渐开线齿轮, n = 17 )。对剂量的GBE的选择是基于以前的研究( 17, 18]。治疗糖尿病鼠相同体积的生理盐水作为未经治疗的糖尿病组( n = 11 )。所有的载脂蛋白e<年代up>−−/老鼠维持在一个高脂肪饮食和牺牲后12周的治疗。C58BL / 6 j小鼠( n = 20. )作为对照组。研究时间如图 2。

时间轴的实验协议 在活的有机体内。

 2.4。体重和血糖的变化

测量体重、空腹血浆葡萄糖水平之前,对初始GBE剂量和每四个星期之后。血浆样本收集的切尾方法,和血浆葡萄糖水平测量使用一个(罗氏)。

 2.5。组织准备和组织学检查

所有的动物实施安乐死,心脏样本收集使用肝素生理盐水灌注前。横向剪切和4%多聚甲醛固定标本的标本24 h。然后他们被嵌入在石蜡,切成5 μ米厚的部分的苏木精和伊红和马森的染色。免疫组织化学染色的裂解caspase-3也执行(兔多克隆anti-cleaved caspase-3,春秋国旅,1:200稀释)。免疫组化半定量的分析进行了显微图像使用Image-pro + 6.0软件(媒体控制论Inc .,罗克维尔市,医学博士,美国)在200 x放大。积极的表达裂解caspase-3代表是积分光密度(IOD)。

 2.6。免疫印迹分析

心脏组织从液氮取出,体重和均质radioimmunoprecipitation化验(里帕)裂解缓冲。蛋白质浓度测定使用bicinchoninic酸的方法。等量的蛋白质(40 μg)从每个样本是由钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳(sds - page)和转移到硝化纤维膜。特异性的网站被孵化的膜5%脱脂乳和0.2%渐变20 Tris-buffered盐在室温下2小时。一夜之间,洗涤后,膜被孵化在4°C以下主要抗体:anti-CHOP (CST2895S, 1: 2000), anti-JNK (CST9252S, 1: 2000), anti-p-JNK (CST9251S, 1: 1000), anti-caspase-12 (CST2202S, 1: 1000), anti-cleaved caspase-3 (CST9664S, 1: 1000)和anti-NF - κ86299年B (Abcam 1: 2000)。膜的清洗TBS-T和孵化与辣根过氧化物酶(合)共轭二次抗体。然后,细胞膜是化验使用增强化学发光体系。3 -磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是用于确保平等的示例加载。切的表达水平,caspase-12 caspase-3裂解,和NF - κGAPDH B进行调整,在未经治疗的糖尿病组规范化的值。p-JNK的表达水平调整的总物然后规范化在未经治疗的糖尿病组。

 2.7。定量实时聚合酶链反应

实时聚合酶链反应(PCR)进行确定胶原蛋白的mRNA表达我和三世,TNF - α,il - 1 β。GAPDH是作为内部控制。引物序列如下:胶原蛋白我,5 ′ -TGGAAACCCGAGGTATGCTT-3 ′ (向前)和5 ′ -CATTGCATTGCACGTCATCG-3 ′ (反向);胶原蛋白三世,5 ′ -ACTGGTGAACGTGGCTCTAA-3 ′ (向前)和5 ′ -AACCTGGAGGACCTGGATTG-3 ′ (反向);肿瘤坏死因子- α,5 ′ -CTCATGCACCACCATCAAGG-3 ′ (向前)和5 ′ -ACCTGACCACTCTCCCTTTG-3 ′ (反向);il - 1 β,5 ′ -GAAGAAGAGCCCATCCTCTG-3 ′ (向前)和5 ′ -TCATCTCGGAGCCTGTAGTG-3 ′ (反向);和GAPDH 5 ′ -TGCCCCCATGTTTGTGATG-3 ′ (向前)和5 ′ -TGTGGTCATGAGCCCTTCC-3 ′ (反向)。相对mRNA水平在未经治疗的糖尿病组规范化。所有实验至少重复三次。

 2.8。血清血脂和血糖分析

在12周结束,所有老鼠他们牺牲前禁食过夜,和血液样本收集和离心机在3000转10分钟。血清葡萄糖、高密度脂蛋白胆固醇(hdl - c)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白)水平测定使用一个自动化的系统。

 2.9。测量血清炎性细胞因子水平

血清炎性细胞因子(il - 6、il - 1的水平 β和肿瘤坏死因子- α)测量使用商用ELISA试剂盒,购自北京方程贾庆林香港科技有限公司(目录号码FU-X0850 FU-X0840, FU-X1059职责)。血清收集如前所述。五个系列稀释的标准准备根据制造商的指示。空白和样品井,分别。样品稀释剂(40 μL)被添加到样本井预镀ELISA板,其次是附加的样本(10 μL)。密封板与后封板膜,他们孵化为30分钟37°C。HRP-conjugated试剂(50 μL)被添加到所有井,除了空白。孵化后37°C,井被液体,液体和盘子洗了洗。发色体解决方案(50 μ(50 L)和发色体解决方案B μL)被添加到每个。板块孵化在黑暗37°C,持续15分钟。空白也被认为是零,每个测量在450海里的吸光度后15分钟内添加控制解决方案。

 2.10。统计分析

使用SPSS 17.0统计分析。给出的数据意味着±标准差( x ¯ ± 年代 )。单向方差分析(方差分析)是用于执行组之间比较的意思,和最不显著差异(LSD)测试是用于多个未经治疗的糖尿病组和其他组之间的比较。 P < 0.05 被认为是具有统计学意义。5.0 GraphPad棱镜用于图形演示软件。

 3所示。结果 3.1。体重和血糖水平

STZ导致血糖水平显著增加,与对照组相比(14.8±2.2和5.3±0.8更易/ L, P < 0.01 )。最后12周填喂法,未经治疗的糖尿病小鼠显示严重高血糖相比对照组(23.4±6.4和7.5±1.0更易/ L, P < 0.01 )。GBE治疗200和400毫克/公斤/天抑制血浆葡萄糖水平;然而,只有对大剂量GBE导致统计上的显著差异(对低剂量GBE组与未经治疗的糖尿病组,18.8±6.5更易/ L和23.4±6.4更易/ L, P = 0.06 ;对高剂量GBE组与未经治疗的糖尿病组,15.3±7.1更易/ L和23.4±6.4更易/ L, P = 0.01 )。

在糖尿病小鼠有显著减肥相比对照组(22.37±11.67和26.58±11.56克, P < 0.01 )。身体减肥与高血糖和多尿症。未经治疗的糖尿病组小鼠的体重明显低于对照组的研究课程(30.01±1.35和26.38±22.72克, P < 0.01 )。对阿托伐他汀和GBE治疗并不影响糖尿病小鼠的体重。

 3.2。对影响GBE对血清脂质和葡萄糖概要文件

前血清血脂和血糖水平测量老鼠牺牲。低密度TC、TG和未经治疗的糖尿病组的血糖水平显著增加,与对照组相比。对阿托伐他汀和GBE(200和400毫克/公斤/天)显著降低低密度脂蛋白,TC, TG水平( P < 0.01 ,数据 3(一个)- - - - - - 3 (c))。GBE在200毫克/公斤/天血清葡萄糖水平降低,而那些在未经治疗的糖尿病组( P < 0.05 ,图 3 (e))。高密度脂蛋白胆固醇水平没有明显差异的控制,未经治疗的糖尿病患者,对阿托伐他汀,对低剂量GBE,高剂量GBE组(图 3 (d))。

血清血脂和血糖水平。 ∗ P < 0.05 和 ∗ ∗ P < 0.01 与未经治疗的糖尿病组。

 3.3。对影响GBE对血清炎性细胞因子水平

血清炎性细胞因子的水平,包括il - 6、il - 1 β和肿瘤坏死因子- α相比,显著提高糖尿病小鼠,控制老鼠。GBE(200和400毫克/公斤/天)显著降低血清il - 1 β肿瘤坏死因子- α和il - 6水平。此外,对高剂量GBE(400毫克/公斤/天)导致低水平的炎症细胞因子,与对低剂量GBE相比管理( P < 0.01 ,数据 4(一)- - - - - - 4 (c))。

血清促炎细胞因子由ELISA。 ∗ ∗ P < 0.01 与未经治疗的糖尿病组;<年代up># P < 0.01 对与200毫克/公斤/天GBE组。

 3.4。对影响GBE的组织形态学糖尿病的心

类似研究结果报道Ahmed et al。 19),他走时染色显示弥漫性心肌的中断,分散和羽毛DCM的外观。成纤维细胞和炎症细胞的渗透治疗糖尿病心肌,而对阿托伐他汀和GBE治疗能缓解他们的渗透(图 5(一个))。此外,马森的对染色显示GBE治疗使总心脏胶原蛋白含量(图 5 (b))。

对影响GBE的心脏histomorphological糖尿病ApoE的变化<年代up>−−/老鼠。(一))的横截面组织切片染色心肌。马森(b)的胶原蛋白在心肌染色。对红色的蓝色区域代表胶原沉积。箭头表示间质纤维。(c, d)疣状caspase-3分开。褐黄色区域代表的积极表达caspase-3分开。图片的样品只有二级抗体提供了相应的孵化。(1 a、1 b)对照组;(2、2)未经治疗的糖尿病组; (3A, 3B) atorvastatin group; (4A, 4B) 200 mg/kg/day GBE group; and (5A, 5B) 400 mg/kg/day GBE group. (A) 100x magnification; (B) 200x magnification. ∗ P < 0.05 和 ∗ ∗ P < 0.01 与未经治疗的糖尿病组。

疣状表明裂解caspase-3未经治疗的糖尿病小鼠表达显著增加,而在对照组,而对阿托伐他汀和GBE 200和400毫克/公斤/天显著减少的表达裂解caspase-3 ( P < 0.05 ,数据 5 (c)和 5 (d))。对低剂量和高剂量GBE的区别并不显著。

 3.5。对影响GBE对mRNA水平我和III的胶原蛋白

胶原蛋白我和III mRNA水平增加未经治疗的糖尿病小鼠。对阿托伐他汀和GBE(200和400毫克/公斤/天)治疗导致显著降低胶原蛋白我和III mRNA水平( P < 0.05 ,数据 6(一)和 6 (b))。对低剂量和高剂量GBE之间没有显著差异。

胶原蛋白的相对mRNA表达我和三世(归一化在未经治疗的糖尿病组)。 ∗ P < 0.05 和 ∗ ∗ P < 0.01 与未经治疗的糖尿病组。

 3.6。对影响GBE对心肌内的炎症

NF - κB在监管中扮演着关键角色扩张型心肌病心肌内的炎症的发展。未经治疗的糖尿病小鼠显示增加NF -的表达式 κ对阿托伐他汀和GBE显著降低NF -的表达 κB ( P < 0.05 ,数据 7(一)和 7 (b))。肿瘤坏死因子- α和il - 1 β未经治疗的糖尿病小鼠mRNA水平增加;对然而,GBE治疗剂量的200和400毫克/公斤/天显著抑制TNF - STZ-induced增加 α和il - 1 β信使rna水平( P < 0.05 ,数据 7 (c)和 7 (d))。研究结果对低剂量和高剂量GBE的区别并不显著。

对影响GBE对NF - κB-mediated心肌内的炎症。NF - (a, b) κ表达式是由西方墨点法。(c, d)相对的mRNA表达TNF - α和il - 1 β通过测量实时PCR。 ∗ P < 0.05 和 ∗ ∗ P < 0.01 与未经治疗的糖尿病组。

 3.7。对影响GBE ERS-Associated细胞凋亡的特征

免疫印迹分析显示表达式ERS-associated细胞凋亡的特征,包括p-JNK,排骨,caspase-12,和裂解caspase-3,显著提高糖尿病小鼠的心肌,在正常对照组相比。这表明p-JNK,排骨,caspase-12级联激活在糖尿病心肌。对阿托伐他汀和GBE(200和400毫克/公斤/天)显著降低p-JNK的表达,排骨,caspase-12,裂解caspase-3 ( P < 0.05 ,数据 8(一个)- - - - - - 8 (h))。没有对低剂量和高剂量GBE之间的统计学差异。

对影响GBE对ERS-related凋亡特征表达。表达水平p-JNK /物,剁碎,caspase-12,裂解caspase-3被西方墨点法确定。切的表达水平,caspase-12 caspase-3裂解,GAPDH调整,p-JNK调整了总物的表达。这些值是在未经治疗的糖尿病组规范化。(a, b)表达水平的p-JNK /物;排骨(c, d)表达式;(e, f) caspase-12的表达;和(g, h)的表达caspase-3分开。 ∗ P < 0.05 和 ∗ ∗ P < 0.01 与未经治疗的糖尿病组。1:对照组;2:治疗组;3:阿托伐他汀组;4:对200毫克/公斤/天GBE组;对,5:400毫克/公斤/天GBE组。

 4所示。讨论

糖尿病是一种代谢性疾病负责全球发病率和死亡率增加。糖尿病患者心血管疾病的风险高,动脉粥样硬化和扩张型心肌病等,这是糖尿病的并发症 20.]。STZ诱发糖尿病的常用在实验动物胰腺因其毒性作用 β肽及其潜在诱导氧化应激( 21]。因此,在目前的研究中,我们建立了一个糖尿病心肌损伤的载脂蛋白e<年代up>−−/小鼠模型通过注射STZ)结合高脂肪的饮食,如前所述[ 22, 23]。虽然它不是能够区分高脂血症,diabetes-induced心肌损伤,本研究旨在探讨对是否GBE减毒ApoE糖尿病心肌损伤<年代up>−−/老鼠,因此为糖尿病的治疗提供潜在的证据DCM患者动脉粥样硬化的并发症。我们发现,胶原蛋白我和III mRNA表达在糖尿病大鼠升高。肿瘤坏死因子- α和il - 1 β信使rna水平,代表心肌内的炎症,增加糖尿病的心脏由于增加了NF - κB激活。此外,ERS-related凋亡的标志,包括p-JNK,排骨,caspase-12,和caspase-3裂解,调节糖尿病患者的心。这些表明,间质胶原沉积,ERS-related凋亡和NF - κB-mediated炎症在糖尿病ApoE诱导<年代up>−−/老鼠。与以前的研究结果一致( 15, 16, 19, 24),阿托伐他汀治疗改善了组织学异常,纤维化和心肌细胞的凋亡,通过抑制NF - κB-induced炎症和裂解caspase-3-mediated糖尿病心脏细胞凋亡。据我们所知,目前的研究研究首次表明,中药GBE,可以防止糖尿病心肌损伤,尤其是细胞凋亡,心肌纤维化和NF - κB-mediated通过ERS-related凋亡抑制炎症,正如p-JNK下降,caspase-12,裂解caspase-3表达式。对此外,GBE调节血脂和血糖水平。

细胞死亡包括坏死和凋亡,高血糖反应已经被定义为糖尿病心肌损伤的重要病理生理特征之一( 1]。心肌细胞减少、心肌纤维化和炎症导致心肌重塑,导致心脏功能受损。与先前的研究的结果,目前的研究表明,高血糖导致心肌细胞的凋亡。UPR是一个自适应过程恢复正常功能。然而,过多的和长时间的UPR在高血糖的条件下诱导心肌细胞凋亡。三个proapoptotic通路与人相关联( 4]。第一个凋亡通路包括激活物的IRE-1-tumor坏死因子receptor-associated因素2 - (TRAF2)细胞凋亡信号调节激酶1 (ASK1)复杂。第二个凋亡通路在啮齿动物caspase-12通路。集群caspase-12内质网的膜可能被激活IRE-1归因于TRAF2招聘和活跃 25]。从ER细胞溶质,激活caspase-12把它劈开procaspase 9,随后激活下游效应caspase-3。切,这是由IRE1 ATF6,特别是活跃,是第三个proapoptotic通路与人有关。Caspase-12和排骨被认为是特定的凋亡通路相关的人( 26]。目前的研究表明,三个proapoptotic通路相关人在未经治疗的糖尿病ApoE调节<年代up>−−/老鼠,伴随着增加表达裂解caspase-3, caspase-12的效应。我们的研究结果是一致的张的结果等。 4),表明caspase-12的信使rna和蛋白质水平和砍在STZ-induced调节糖尿病大鼠。综上所述,人在糖尿病心肌损伤中起着重要的作用 27]。

早期研究Fitzl et al。 28对标准GBE)表明,EGb761,减毒肌原纤维的体积分数下降。据乔et al。 17对,GBE可以减弱缺血/ reperfusion-induced心脏肌细胞凋亡抑制线粒体细胞色素c的释放和阻塞caspase-3的激活。对目前的研究显示,GBE下调p-JNK的表情,切,对caspase-12,和caspase-3裂解,表明GBE通过衰减人对凋亡的影响。

据报道,IRE1 α和活跃的通路UPR可以触发NF - κB-mediated IKK的炎症通路被磷酸化;此外,ATF6通路与NF - κ激活,建议的三个途径UPR可以激活这个炎症级联( 5, 6, 29日]。核易位NF - κB导致增加下游促炎细胞因子的表达,包括il - 6、il - 1 β和肿瘤坏死因子- α。il - 1 β和肿瘤坏死因子- α进一步激活人队(积极的循环),导致一个更有力的炎症反应,心肌间质纤维化和心肌细胞凋亡。肿瘤坏死因子- α促进活性氧(ROS)生产和炎症( 30.)和介导物激活导致caspase-3激活和心肌细胞凋亡 14]。因此,炎症也能导致人队( 31日)(图 9)。对在目前的研究中,GBE减少胶原蛋白I型和III mRNA水平和间质胶原蛋白沉积,所揭示的马森的染色。肿瘤坏死因子的增加 α和il - 1 β对糖尿病的心被GBE的mRNA水平在200和400毫克/公斤/天。这是与NF -减少有关 κB的表达。总的来说,对我们的研究表明,GBE通过抑制炎症和人减毒间质纤维化,以及由于其直接的自由基清除活性和抑制能力注射的mPTP药物通道( 32]。虽然是不可能直接对确定GBE减毒人或通过调制行为的炎症,对明确,GBE阻止人的积极循环通过衰减和炎症的人(图 9)。

对机制的保护作用GBE对高血糖导致的心肌损伤。的三个途径UPR可以激活NF - κB IKK的磷酸化,促进炎症细胞因子的生产。肿瘤坏死因子- α激活NF - κB在ROS的存在在一个积极的反馈循环,导致更多的炎性细胞因子的产生,从而导致心肌内的炎症、心肌细胞凋亡,心肌纤维化。通过阻断人GBE减毒糖尿病心肌损伤。ROS:活性氧。

对在目前的研究中,我们观察到GBE在200和400毫克/公斤/天减少血浆葡萄糖水平研究结束的时期。GBE 200毫克/公斤/天老鼠牺牲前的血清葡萄糖水平下降;对另外,GBE 400毫克/公斤/天可以降低血清葡萄糖水平;然而,它没有达到统计学意义。程等。 9对]表明GBE恢复抗氧化酶的活动,包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(氧化酶)STZ-induced糖尿病大鼠的肝脏和胰腺。对其他的研究表明,GBE可以缓解STZ-induced通过抑制小鼠的胰腺损伤胰腺炎症和促炎细胞因子的表达,如il - 1 β肿瘤坏死因子- α,il - 6 ( 10, 33]。减少血清il - 6的水平,il - 1 β和肿瘤坏死因子- α在我们的研究表明,对由GBE治疗低血糖症的效果部分归因于炎症的抑制作用。

在目前的研究中,STZ-induced糖尿病的载脂蛋白e<年代up>−−/老鼠显示严重高脂血症,表现为血清低密度脂蛋白胆固醇升高,TC, TG水平,对扭转的GBE管理,对表明GBE能降低糖尿病患者的血脂水平的设置。Zhang et al。 34对]报道,GBE展出多向老鼠的降脂效果,包括减少胆固醇吸收,失活3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme(β),以及有利的监管档案的重要的多不饱和脂肪酸。姚明et al。( 35对]表明GBE剂量的48和96毫克/公斤/天规范化ethanol-induced失调的大鼠的血脂水平。根据这项研究由程et al。 9),降脂效应可能是归因于改善胰岛素抵抗。

对总之,GBE减毒糖尿病心肌损伤,包括心肌细胞凋亡、间质纤维化和心肌内的炎症的载脂蛋白e<年代up>−−/糖尿病小鼠通过抑制人队。有趣的是,在目前的研究中,对心血管效应的GBE糖尿病条件下不存在剂量依赖的相关性,这可能是因为在剂量的200 - 400毫克/公斤/天,消炎和凋亡对疗效GBE到达了一个高原。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突,关于这篇文章的出版。

 作者的贡献

刘曰Shuzheng律构思主题,共同起草了纸,相应的作者。刑事、田搜查了文学与Yanfei刘写的手稿。陈可冀陈帮助起草的手稿。所有作者阅读和批准最终的手稿。

 确认

作者欣然承认金融支持从北京新星计划(没有。Z171100001117027),北京市自然科学基金(批准号7162170)、关键项目国家科技支柱计划在第12个五年计划期间(没有。北京实验室2011 bai11b05),心血管精密医学(PXM2017_014226_000037)。

 黄齐的 K。 贝尔纳多 b . C。 McMullen j . 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