OMCL 氧化医学和细胞寿命 1942 - 0994 1942 - 0900 Hindawi出版公司 486419年 10.1155 / 2013/486419 486419年 研究文章 Antigenotoxic和凋亡活动的绿茶多酚提取物对六价Chromium-Induced DNA损伤小鼠的外周血cd:分析与微分吖啶橙/溴化乙锭染色 Garcia-Rodriguez Maria del Carmen Carvente-Juarez 而蒙特塞拉特 Altamirano-Lozano 马里奥•奥古斯汀• Vauzour 大卫 1 失去de Investigacion en遗传y Toxicologia环境(UNIGEN) Facultad de Estudios优越的“萨拉戈萨”,大学根据墨西哥(自治),Batalla 5 de Mayo s / n, 09230年,DF 墨西哥 unam.mx 2013年 2 12 2013年 2013年 05年 08年 2013年 29日 10 2013年 30. 10 2013年 2013年 版权©2013 Maria del Carmen Garcia-Rodriguez et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

本研究调查的调制效应进行绿茶多酚对基因毒性损伤和凋亡活动引起的六价铬铬(VI) cd -老鼠。动物被分成以下组:(i)注入车辆;(2)接受绿茶多酚通过填喂法(30毫克/公斤);(3)注射阴极射线示波器3(20毫克/公斤)腹腔内;(iv)接受绿茶多酚除了阴极射线示波器3。不会损坏是评估通过检查血细胞多色红细胞(MN-PCEs)从外周血中获得0,治疗后24、48和72 h。诱导细胞凋亡和细胞生存能力评估由微分吖啶橙/溴化乙锭(AO / EB)染色。绿茶多酚治疗导致MN-PCEs无显著变化。然而,阴极射线示波器3治疗显著增加MN-PCEs在24和48 h后注入。绿茶多酚治疗CrO之前3注射导致减少MN-PCEs CrO治疗组相比3只有。凋亡细胞的平均增加在治疗后48 h控制老鼠相比,表明细胞凋亡可能有助于消除铬(VI)引起的DNA受损细胞。我们的研究结果支持拟议中的保护作用的绿茶多酚对基因毒性损害引起的铬(VI)。

 1。介绍

绿茶(<我talic> 茶树)是一种最古老的饮料,消耗了世界人口的三分之二。的主要成分是咖啡因,丹宁酸和精油。单宁包含多种多酚类化合物,包括重要的黄酮类化合物,如儿茶素:(−)表儿茶素(EC),(−)儿茶素(EGC)和(+)儿茶素没食子酸盐形式(GC), (−) epicatechin-3-gallate (ECG)和(−)epigallocatechin-3-gallate (EGCG) [ 1, 2]。吡喃酮,这些化合物化学分为dibenzpyrans及其衍生品。核心结构包含一个diphenylpropane骨架(图 1(一))。主要的类黄酮中发现新鲜的绿茶儿茶素(flavan-3-ols或黄烷醇)和黄酮醇(数字 1 (b)和 1 (c)职责。) 1]。此外,绿茶含有其他多酚类物质,如茶黄素(图 1 (d)),但在较低浓度比儿茶素。多酚也自然存在于水果和蔬菜,以及在红酒和啤酒等饮料( 1, 2]。

黄酮类化合物的分类。(一)黄酮类diphenylpropane骨架;(b)茶黄烷醇(flavan-3-ols);(c)茶黄酮醇;茶茶黄素(d)。

绿茶最近吸引了大量关注,在科学和消费者对其健康的社区与氧化应激相关的各种疾病,如癌症、心血管疾病、神经退行性疾病( 3, 4]。绿茶的好处是由于多酚类化合物的抗氧化性能。除了癌症chemopreventive属性,绿茶多酚显示抗炎,antiallergenic,抗菌和抗病毒属性( 4- - - - - - 6),以及抗诱变剂的活动( 7]。

多酚化合物也有激进的食腐动物和金属螯合剂的直接影响和间接影响通过调制的转录因子和酶( 8, 9]。事实上,这些抗氧化剂可以抑制8-hydroxydeoxyguanosine的形成(8-OH-dG 7 8-dihydro-8-oxodeoxyguanosine)<我talic> 在活的有机体内( 10, 11]。因此,物质具有抗氧化特性已成为公认的预防和协作的治疗慢性退化性疾病相关的氧化应激和DNA损伤。

相比之下,六价铬(铬(VI))化合物尤其有效地诱导基因毒性导致几种类型的DNA损伤和基因突变。铬(VI)化合物已经被广泛研究,因为他们有不同的工业应用,包括镀铬、冶金、色素制造、皮革鞣制,木材防腐,因为他们与癌症的感应( 12]。Cr通常存在于各种氧化态,主要是铬(III)和铬(VI)。尽管如此,铬(III)是一个重要的微量营养素中发挥着重要作用的蛋白质、糖和脂肪代谢( 13]。铬(VI)尤其有效地诱导基因毒性导致几种类型的DNA损伤和基因突变。全身的铬(VI) DNA DNA interstrand交叉连接,DNA氧化损伤,和肿瘤抑制基因的突变<我talic> p53的一些主要因素,可能扮演了一个重要的角色在决定细胞基因毒性( 14, 15]。根据先前的研究,Cr-induced基因组DNA损伤包括8-hydroxydeoxyguanosine (8-OH-dG 7 8-dihydro-8-oxodeoxyguanosine),这是一种氧化DNA损伤( 16]。Maeng et al。 17]观察8-OH-dG水平变化在DNA老鼠被暴露于铬(VI)和表明,DNA损伤引起的铬(VI)化合物可能部分与氧化应激有关。铬(VI)生成活性氧自由基(ROS)和(FRs)通过其胞内还原铬(III)通过芬顿Haber-Weiss反应( 15, 18, 19]。虽然DNA-ROS之间的直接关系和chromium-induced DNA损伤严重争论和不清楚,已经有一些研究支持全身的ROS在铬(VI)基因毒性和细胞毒性 20.]。此外,它已被观察到,铬(VI)口服老鼠可以诱导剂量和时间影响肝脏氧化应激和肝细胞凋亡 21]。细胞凋亡过程中,细胞死亡开始,通过激活以有序的方式完成和/或基因产物的合成所必需的细胞破坏( 22]。细胞凋亡中起着至关重要的作用在许多生理和病理过程,伴随着形态特征变化,包括细胞质收缩、等离子体膜起泡、冷凝或原子核的分裂,和广泛的染色体DNA的降解。事实上,许多chemopreventive代理行为诱导细胞凋亡的机制来抑制致癌作用[ 23]。罗伊et al。 24)观察到EGCG不仅保护正常细胞免受基因毒性变化引起MNNG也消除了通过诱导肿瘤细胞凋亡<我talic> 在体外。我们以前观察到<我talic> 在活的有机体内管理的绿茶(<我talic> 随意10天)减少MN-PCEs在治疗CrO的感应3。这个结果支持绿茶对基因毒性损伤的保护作用引起的金属化合物,如铬(VI)。然而,CrO MN-PCEs诱导3只有部分被添加绿茶(大约42%)在天1和2 25]。这个发现可能相关的因素,如茶的起源,因为它已被观察到的数量在茶多酚植物受环境因素的影响(即。、天气、光线、营养成分、制备过程中,存储、园艺叶年龄,等等)。此外,据报道,多酚占30%以上的茶叶的干重;90%的这些化合物是儿茶素和黄酮醇(10% 26- - - - - - 28]。因此,作为我们的研究项目的一部分,评估chemopreventive和chemoprotective组件在饮食,获得更高效的调制的基因毒性铬(VI)诱导的损害<我talic> 在活的有机体内,我们直接研究绿茶多酚提取物含有的多酚类化合物的混合物(最低60%的总抗氧化活性较高的儿茶素[Polyphenon 60]),我们分析了其凋亡活性的外周血cd -老鼠使用分析与微分吖啶橙/溴化乙锭染色。

 2。材料和方法 2.1。化学物质

以下测试化学药品和试剂从西格玛化工有限公司(圣路易斯,密苏里州,美国):阴极射线示波器3(CAS no。1333-82-0),吖啶橙(AO) [CAS no。10127-02-3),溴化乙锭(EB) [CAS no。1239-45-8),和绿茶多酚提取物(Polyphenon 60) [CAS no。138988-88-2)。

 2.2。动物

两到三个月大的雄性老鼠cd (28-35 g)被用于实验。动物被保存在控制温度(22°C)与12-12 h明暗周期(光07:00-19:00 h)。老鼠有免费的食物(小型啮齿动物Purina-Mexico chow)和水。所有的老鼠从哈伦获得“Facultad de Quimica大学根据墨西哥”(自治),进行为期两周的适应了。生物伦理学委员会”Facultad de Estudios Superiores-Zaragoza”,自治批准在这项研究中使用的实验协议。

 2.3。实验设计

绿茶茶多酚提取的用量(Polyphenon 60)是基于之前的研究结果,利用其他商用Polyphenon 60体重(0.625 -1.25%)( 29日)和我们的初步研究,以确定最大耐受剂量(MTD)没有诱导MN-PCEs。的阴极射线示波器3剂量根据先前的研究,腹腔内被选中(i.p)管理20毫克/公斤。这种阴极射线示波器3剂量诱导MN-PCEs小鼠的外周血中( 30.]。

绿茶多酚提取物和阴极射线示波器3被溶解在溶液中准备无菌蒸馏水的干物质。制备的化合物后,立即解决方案(0.25毫升)的管理。对照组与车辆仅以相同的方式对待。评估标准和工作条件设置根据经合组织的准则(474年),食品和药物管理局(FDA)的指导方针,环境保护署(EPA)的指导方针,为指定的化学测试和指导方针的协作学习小组微核测试(CSGMT)和哺乳动物诱变研究小组的日本社会环境(JEMS.MMS)短期小鼠外周血微核测试( 31日- - - - - - 35]。

建立治疗剂量后,绿茶多酚提取的影响在作物基因毒性损害3治疗小鼠评估。这个评估是使用MN-PCEs执行动态分析( 31日]。老鼠被随机分配给一个下面的组(<我nline-formula> n = 5 老鼠每组)。

给动物注射车辆(对照组)。

动物对待绿茶多酚提取填喂法(30毫克/公斤)。

给动物注射CrO3(20毫克/公斤)。

动物对待绿茶多酚提取物(30毫克/公斤)填喂法,然后注射CrO (4 h后)3(20毫克/公斤)。

2.4。微核测定

幻灯片满是AO和准备根据Hayashi描述的技术et al。 36]。短暂,AO溶解在蒸馏水在1毫克/毫升的浓度,和10<我talic> μ这个解决方案的L是放在预热(大约70°C)干净的载玻片。AO是均匀在幻灯片上通过移动玻璃棒来回滑动,然后风干。AO-coated玻璃幻灯片被存储在一个黑暗的,在室温下干燥的位置之前,实验使用。

评估MN治疗后,5<我talic> μL外周血样本收集的血管穿刺尾巴的老鼠每24小时为期四天的期间(0 - 72 h)。样本直接放置于幻灯片之前对待AO根据Hayashi et al。 36]。样品放置在幻灯片上后,盖玻片(<我nline-formula> 24 × 50 毫米)立即被放置在幻灯片上,其边缘密封橡胶胶水。所有的幻灯片准备在黑暗中被保存在塑料盒在4°C。这些幻灯片准备不能永久保存,但他们可以存储在冰箱如果盖玻片已被查封。两张幻灯片准备每个鼠标,和幻灯片12 h后进行分析。

电脑、生均MN-PCEs被确定是在荧光显微镜下(尼康OPTIPHOT-2)使用蓝色激发过滤器过滤和一个黄色的障碍。从生均微分AO着色杰出的pc, pc染色荧光桔红色是由于核糖体RNA的存在。AO着色还指出MN-PCEs,彩色荧光绿色由于其DNA含量(图 2(一个))。MN-PCEs分析的结果是基于2000细胞/鼠标,MN-PCEs的存在是用来标记基因毒性损害 36]。

(一)cd -小鼠外周血细胞的荧光图片采用AO涂层法(NCEs、pc和MN-PCEs)。(b)形态学的可行的细胞(细胞凋亡和nonapoptotic)和不能存活的细胞(细胞凋亡和nonapoptotic)作为评估吖啶橙/溴化乙锭染色。可行的细胞染色均匀绿色(I),早期凋亡细胞与完整的等离子体膜呈现出绿色,与“点”的凝聚染色质高度可见的(2)内,晚期凋亡细胞染色鲜艳green-orange因为膜起泡开始发生,EB可以进入细胞(III)和凋亡不能存活的细胞染色明亮的橙色,因为溴化乙锭进入这些细胞(VI)。

 2.5。细胞凋亡和细胞生存能力分析

细胞凋亡和细胞生存能力评估我们使用了微分吖啶橙/溴化乙锭(AO / EB)染色。血液样本(100<我talic> μL)收集通过穿刺尾巴的老鼠血管治疗前和治疗后48 h。肝素(10<我talic> μL)被添加到血液样本,20<我talic> μL (AO / EB染料混合(100<我talic> μL /毫升AO和100年<我talic> μL /毫升EB,准备在PBS)随后补充道。暂停集中通过离心(5000 rpm),和细胞颗粒resuspended在10<我talic> μL和镀上一个干净的幻灯片;盖玻片(<我nline-formula> 24 × 24 毫米)立即被放置在幻灯片上。两张幻灯片准备/鼠标,并立即进行了分析。

通过识别凋亡,细胞凋亡是评估可行的和不能存活的细胞荧光显微镜下(尼康OPTIPHOT-2)蓝色激发(480海里)和吸收滤光片(515 - 530海里)。微分AO / EB染色能够区分可行的和不能存活的细胞基于膜的完整性。当细胞是可行的,AO插入到DNA,细胞绿色外观。相反,当细胞是不能存活的,海尔哥哥也插入到DNA,使细胞出现橙色。因此,不能存活的细胞将包含一个明亮的橙色核EB颠覆了AO着色。健康的和可行的细胞凋亡细胞核发出荧光明亮的绿色。相比之下,健康或凋亡细胞核不能存活的细胞会发出荧光明亮的橙色( 33]。凋亡和细胞生存能力评估是基于200细胞/鼠标。

 2.6。统计分析

MN-PCEs归纳结果和可行的细胞凋亡和nonapoptotic不能存活的细胞凋亡和nonapoptotic数据表示为平均值±标准偏差(美国)和结果从各个治疗组比较,方差分析测试图基测试紧随其后。净感应频率(NIF)分析了MN-PCEs使用卡方检验( 30., 37]。SPSS / PC V18TM和Statistica / PC 6.0 V tm软件被用于统计分析。所有的分析,<我nline-formula> P < 0.05 被认为是重要的。

 3所示。结果

本研究的结果如表所示 1。车辆和绿茶多酚提取没有修改的平均数诱导MN-PCEs治疗的老鼠。阴极射线示波器3治疗增加了MN-PCEs的平均数量在所有的样本,但统计学意义只是观察到48小时时间点相比,0 h和对照组的样本。此外,阴极射线示波器3治疗的平均数量增加MN-PCEs(大约13 MN-PCEs)相比vehicle-treated老鼠。当治疗包括绿茶多酚提取和阴极射线示波器3,我们观察到的平均数量减少MN-PCEs在24日,48和72 h治疗后相比,CrO MN-PCEs感应3只治疗组,但MN-PCEs感应观察到48仍与对照组相比显著(表 1)。比较MN-PCE感应不同治疗组、动力学分析的数据计算NIF价值,这是计算如下( 30.]: (1) NIF = 数量 的 MN-PCEs 测量 在 时间 x 我 - - - - - - 数量 的 MN-PCEs 测量 在 时间 0 , 在哪里<我nline-formula> x 我 = 评估在24、48或72 h。时间<我nline-formula> 0 = 评估在0 h(治疗前)。

平均的感应MN-PCEs治疗组小鼠的外周血多酚提取的绿茶和阴极射线示波器3。

治疗 剂量(毫克/公斤) n 分析时间(小时) MN-PCEs 2000个细胞(平均±道。) 方差分析
控制 0 5 0 0.6 ± 0.9
24 0.8 ± 0.8
48 1。2 ± 0.8
72年 1。6 ± 1。5
多酚提取的绿茶 30. 5 0 1。0 ± 1。2
24 1。8 ± 1。9
48 1。2 ± 1。3
72年 1。4 ± 0.5
阴极射线示波器3 20. 5 0 0.2 ± 0.5
24 3所示。0 ± 1。6
48 13.2 ± 3所示。8 a, b, c, d
72年 3所示。4 ± 1。1
多酚提取绿色tea-CrO3 30-20 5 0 1。2 ± 1。3
24 0.6 ± 0.5
48 5.2 ± 1。8 a、b、e
72年 1。2 ± 1。1

一个 P < versuscontrol 48小时;b P < 与多酚提取的绿茶48小时;c P < 与阴极射线示波器30 h;d P < 与多酚提取绿色tea-CrO348小时;e P < 与多酚提取绿色tea-CrO30 h。

NIF计算时,净MN-PCEs感应可以更容易观察到。这个计算减去之前MN-PCEs治疗的频率从治疗后的频率,从而消除基线MN-PCEs可变性之间发生治疗组0时刻美国南达科他州(见表 1)。图 3介绍了所有治疗NIF值在24日,48和72 h后治疗。治疗组与绿茶多酚类黄酮提取物表现出减少本金MN-PCEs在24和72 h治疗后(约121%和100%,分别地)。

绿茶多酚提取物对MN-PCEs频率降低(%)对小鼠外周血在不同时间:24 h (a) (b) 48 h, CrO治疗后(c) 72 h3。数据代表MN-PCEs频率获得24、48和72 h - MN-PCEs频率在0 h (NIF)。<我nline-formula> P 一个 < 0.05 相对于对照组;<我nline-formula> P b < 0.05 与多酚提取的绿茶组;<我nline-formula> P c < 0.05 与阴极射线示波器3绿茶多酚提取物组。<我nline-formula> n = 5 老鼠的细胞(2000)。

细胞凋亡和细胞生存能力进行评估直接在小鼠的外周血(0 h)之前和之后(48小时)治疗。诱导细胞凋亡和细胞生存能力评估通过AO / EB染色治疗小鼠的外周血收集。该技术显示了微分吸收的dna结合蛋白荧光染料AO和EB确定可行的和不能存活的细胞。这些染料用于识别细胞经历细胞凋亡和区分细胞凋亡的早期或晚期阶段基于膜完整性(图 2 (b))。AO插入到DNA,给它一个绿色的外表。这种染料也与RNA结合,而是因为它不能插入,RNA斑点红橙色。因此,一个可行的细胞将会有一个明亮的绿色外观。海尔哥哥只是被不能存活的细胞。这种染料也插入到DNA,使它显得橙色;然而,EB只结合弱RNA,这看起来有点红。因此,不能存活的细胞将会有一个明亮的橙色核,EB颠覆了AO着色,其细胞质中会出现暗红色(如果任何内容)。正常的和可行的细胞凋亡细胞核发出荧光亮绿色(图 2 (b)》)。相比之下,正常或凋亡细胞核在明亮的橙色(图不能存活的细胞会发出荧光 2 (b)IV)。因此,一个人可以区分早期和晚期凋亡细胞使用这个系统。可行的细胞完整膜均匀沾绿核(图 2 (b)我)。早期凋亡细胞与完整的膜,但已经开始他们的DNA片段仍然有绿核因为EB不能进入细胞,但染色质缩合可以可视化为亮绿色补丁在核(图 2 (b)II)。随着细胞的发展通过凋亡途径和膜起泡开始发生,EB可以进入细胞,导致细胞染色绿橙(图 2III)。晚期凋亡细胞会有明亮的橙色的补丁在细胞核染色质浓缩,区分这些细胞和坏死细胞,将均匀染色橙色(图 2(四)。

所有的治疗增加凋亡的细胞的平均数量,但统计学意义只有在阴极射线示波器实现的3治疗组和绿茶多酚extract-CrO相结合3组与对照组相比。细胞凋亡的增加更大的绿茶多酚extract-CrO相结合3组比阴极射线示波器3组(12.8和10.2细胞,职责)。绿茶多酚提取只有治疗组增加了大约4凋亡可行的细胞与对照组相比。细胞凋亡的平均数字不能存活的细胞和nonapoptotic持平在所有治疗组(表中 2)。

平均水平的可行的细胞凋亡和nonapoptotic和不能存活的细胞(凋亡和nonapoptotic)与多酚治疗组小鼠的外周血提取的绿茶和阴极射线示波器3。

治疗 剂量(毫克/公斤) n Nonapoptotic可行的细胞*(意思是美国南达科他州±) 凋亡的细胞*(平均±。) 凋亡细胞不能存活的*(意思是美国南达科他州±) Nonapoptotic不能存活的细胞*(意思是美国南达科他州±)
控制 0 5 197.2 ± 2。2 2。4 ± 1。8 0.0 ± 0.0 0.4 ± 0.9
多酚提取的绿茶 30. 5 192.8 ± 4.9 6.0 ± 4.1 0.8 ± 1。3 0.4 ± 0.6
阴极射线示波器3 20. 5 189.2 ± 3所示。3 一个 10.2 ± 3所示。6 c 0.2 ± 0.5 0.4 ± 0.6
多酚提取绿色tea-CrO3 30-20 5 187.2 ± 6.3 b 12.8 ± 6.3 d 0.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0

一个 P < 0.05 与控制;b P < 0.01 与控制;c P < 0.04 与控制;d P < 0.007 与控制。

* 200年评估细胞。

 4所示。讨论

多酚的抗氧化特性的存在使他们可能有助于抵消氧化应激诱导的DNA损伤剂如铬(VI)化合物。在这项研究中,我们评估的能力从绿茶多酚提取物抑制基因毒性铬(VI)诱导的损害<我talic> 在活的有机体内和分析细胞凋亡在外周血cd -老鼠。

基因毒性的铬(VI)的观测证明了显著增加在MN-PCEs CrO 24和48 h后治疗3治疗组(表 1)。增加很明显观察到所有的样品相比,消极的控制,和这一发现证实了之前报道基因毒性的铬(VI),特别是阴极射线示波器3( 15, 30., 38]。基因毒性的机理为铬(VI)化合物与铬(VI)的胞内还原铬(III)。铬(VI)化合物可以通过非特异性跨细胞膜离子转运蛋白和减少他们的交互与细胞内的胞质分子。在这个过程中,FRs生成,能够诱导基因毒性的改变( 15, 18, 19]。因此,我们建议这些影响会导致MN-PCEs的形成。

然而,MN-PCEs显示增加的平均数量小于1 MN-PCEs在治疗后24小时绿茶多酚提取物治疗组(表 1),计算NIF值证实这些提取物的nongenotoxic效果(图 3)。据报道,奥巴马政府从绿茶多酚和类黄酮不诱导基因毒性;此外,这些化合物的政府在很长一段时间在实验动物的高剂量对基因毒性(没有影响 4, 39, 40]。

的<我talic> 在活的有机体内阴极射线示波器前政府的绿茶多酚提取物3注入MN-PCEs形成降低了121%、69%和100%,24日,48岁和72 h后治疗,分别比MN-PCEs形成阴极射线示波器治疗组3单(图 3)。这一结果表明,绿茶多酚提取物保护全身的细胞对铬(VI)基因损害比绿茶的管理更有效<我talic> 随意( 25]。由于酚醛绿茶多酚提取物(图的结构 1),它是可能的,这些黄酮类化合物可以作为氢体抑制脂质自由基和FRs的形成,包括超氧化物和芬顿反应产生的羟基自由基。这些黄酮类化合物也可能通过ortho-hydroxy-phenolic螯合金属集团( 41, 42]。因此,治疗药物,增强内部和细胞外的抗氧化水平和阻止铬(VI)介导代ROS和全身的FRs可能阻止或减弱铬(VI)基因毒性。

在我们的实验中,平均凋亡的细胞数量增加(表48 h后治疗 2)。增加在所有治疗组相比,消极的控制,这一发现支持之前报道的观察后铬(VI)治疗( 43- - - - - - 45]。细胞内氧化状态的改变有一个潜在的触发或以使敏感细胞凋亡;因此,ROS产生铬(VI)在其减少在凋亡信号通路中起着重要作用[ 45, 46]。绿茶多酚提取的管理导致凋亡的细胞的平均数量的增加(大约4),但这并不显著增加。其他研究已经表明,绿茶多酚如EGCG和ECG抑制人类肺癌的生长(细胞系中冲) 47]。研究进一步表明,抑制增长伴随着细胞周期阻滞于G2 / M期( 48),这可能与凋亡这些多酚类物质的活动。细胞凋亡的诱导儿茶素人类淋巴白血病细胞中也得到了证实,人类表皮样癌细胞,人类角质细胞癌,和人类前列腺癌的细胞 3, 49, 50];因此,细胞凋亡起着至关重要的作用作为一个保护机制与致癌作用通过消除基因受损的细胞。

绿茶多酚提取管理时前CrO的注入3,凋亡的细胞的平均数量增加到一个水平高于阴极射线示波器后观察3治疗,但这些交互显示效果没有添加剂或对立的(表 2)。高et al。 51观察到抗坏血酸可以提高EGCG和theaflavin-3-30-digallate诱导细胞凋亡在人类肺腺癌SPC-A-1细胞和食管癌eca - 109细胞。其他研究已经表明,EGCG的凋亡诱导活动在人类肺腺癌(中冲细胞),可以实现协同增强与代理chemopreventive联合治疗(包括苏灵大、顺铂和三苯氧胺)( 3, 52, 53]。增强诱导细胞凋亡后综合治疗表明,这个过程可能有助于消除细胞受损DNA铬(VI)引起的。

总之,目前的研究表明,阴极射线示波器3通过腹腔注射小鼠可以导致外周血DNA损伤和细胞凋亡,而这些影响是与时间有关的。ROS和FRs形成中可能发挥重要作用在铬(VI)介导的DNA损伤和细胞凋亡<我talic> 在活的有机体内。此外,绿茶多酚提取物能够降低基因毒性损害引起的铬(VI)。最大程度的保护是阴极射线示波器观察注射后24小时3所示。保护给出的大小依次为:121%在24 h,在48 h > 69%, > 100%,注射后72 h。基于这些结果,绿茶多酚提取物能有效防止基因毒性损伤小鼠处理铬(VI)。绿茶多酚提取物的有益效应可能会抑制ROS和FRs链式反应生成的氧化应激引起的铬(VI)和提取凋亡的活动。

有有限的证据表明经常食用绿茶可以减少基因毒性损害。因此,本研究的贡献<我talic> 在活的有机体内证据表明,绿茶多酚提取物可以预防基因毒性致癌物诱导的损害与氧化应激有关,如铬(VI)化合物。

 缩写 AO:

吖啶橙

 铬(VI):

六价铬

 海尔哥哥:

溴化乙锭

 电子商务:

表儿茶素

 心电图:

Epicatechin-3-gallate

 EGC:

儿茶素

 EGCG:

(−)-epigallocatechin-3-gallate

 食品药品监督管理局:

食品和药物管理局

 FRs:

自由基

 GC:

(+)儿茶素

 i.p。

腹腔内

 MNNG:

N-methyl-N”-nitro-N-nitrosoguanidine

 MN-PCEs:

血细胞多色的红细胞

 道理:

Normochromatic红细胞

 NIF:

净感应频率

 电脑:

多色的红细胞

 ROS:

活性氧物种。

 利益冲突

论文的作者宣称他们没有直接金融与商业的关系本文中提到的身份可能会导致利益冲突。

 确认

作者要感谢亚历杭德罗•戈迪略马丁内斯对他相当大的帮助在本文的准备和桑切斯卢尔德埃尔南德斯为她优秀的技术援助。金融支持是来自DGAPA-UNAM IN217712。

 cadena E。 封隔器 l 手册的抗氧化剂 2002年 2 纽约,纽约,美国 德克 神 H。 本田 Y。 中川昭一 年代。 太空 H。 金泽 K。 同时测定多酚的蔬菜、水果和茶 农业与食品化学杂志》上 2003年 51 3 571年 581年 2 - s2.0 - 0037471608 10.1021 / jf020926l 罗伊 M。 Siddiqi M。 巴塔查里亚 r·K。 癌症化学预防:茶多酚诱导细胞和分子反应 亚洲太平洋癌症预防杂志》上 2001年 2 109年 116年 Zaveri n . T。 绿茶及其多酚儿茶素:药用使用在癌症和癌的应用程序 生命科学 2006年 78年 18 2073年 2080年 2 - s2.0 - 33644928754 10.1016 / j.lfs.2005.12.006 Braicu C。 Ladomery m·R。 Chedea 诉。 Irimie 一个。 Berindan-Neagoe 我。 之间的关系结构和绿茶儿茶素的生物学行为 食品化学 2013年 141年 3282年 3289年 我和我的朋友 年代。 穆勒 N。 Stehle P。 Ulrich-Merzenich G。 消费的绿茶或绿茶产品:有抗氧化效果的证据从控制介入研究? 植物学期刊 2011年 18 11 903年 915年 2 - s2.0 - 80051879284 10.1016 / j.phymed.2011.06.006 黑田 Y。 Hara Y。 抗诱变剂的茶多酚和抗癌的活动 突变的研究 1999年 436年 1 69年 97年 2 - s2.0 - 0032901351 10.1016 / s1383 - 5742 (98) 00019 - 2 卡布瑞拉 C。 Artacho R。 Gimenez R。 有益的绿色茶审查 美国营养学院杂志》上 2006年 25 2 79年 99年 2 - s2.0 - 33747166198 Khalaf) 答:一个。 Moselhy w·A。 阿卜杜勒•哈米德• m . I。 绿茶提取物的保护作用在老鼠大脑铅诱导氧化和DNA损伤 神经毒理学 2012年 33 3 280年 289年 2 - s2.0 - 84858718120 10.1016 / j.neuro.2012.02.003 Inagake M。 Yamane T。 Kitao Y。 欧雅 K。 松本 H。 Kikuoka N。 Nakatani H。 高桥 T。 西村 H。 Iwashima 一个。 抑制1,2-dimethylhydrazine-induced绿茶提取物在大鼠氧化DNA损伤 日本癌症研究杂志》上 1995年 86年 11 1106年 1111年 2 - s2.0 - 0028970699 徐 M。 贝利 a . C。 Hernaez j·F。 Taoka c·R。 Schut h·a·J。 达什伍德 r·H。 保护,绿茶、红茶和反对2-amino-3-methylimidazo吲哚- 3 -甲醇(4、5 f) quinoline-induced DNA加合物和F344大鼠结肠异常的隐窝 致癌作用 1996年 17 7 1429年 1434年 2 - s2.0 - 0029900928 10.1093 / carcin / 17.7.1429 IACR 国际癌症研究机构:专著对人类致癌风险的评估,铬,镍和焊接 1990年 法国里昂 EPA(美国环保署) 六价铬的毒性评估 中科院 2010年 18540-29-9 美国华盛顿特区 辛格 J。 卡莱尔 d . L。 普里查德 d E。 Patierno s R。 Chromium-induced基因毒性和细胞凋亡:铬致癌作用的关系(审查) 肿瘤的报道 1998年 5 6 1307年 1318年 2 - s2.0 - 0031695225 O ' brien t·J。 Ceryak 年代。 Patierno s R。 铬致癌作用的复杂性:细胞反应的作用,修复和恢复机制 突变的研究 2003年 533年 1 - 2 3 36 2 - s2.0 - 0345708258 10.1016 / j.mrfmmm.2003.09.006 祖文萃 苏耿赋。 陈 C.-L。 刘 T.-Y。 杨 J.-L。 诱导DNA的8-hydroxydeoxyguanosine铬(III)加过氧化氢及其预防的食腐动物 致癌作用 1996年 17 1 103年 108年 2 - s2.0 - 0029987897 10.1093 / carcin / 17.1.103 Maeng s E。 钟 h·W。 余 i . J。 DNA 8-OH-dG水平的变化和它的基本切除修复活动后大鼠肺吸入六价铬 突变的研究 2003年 539年 109年 116年 史 X。 毛 Y。 正在 答:D。 丁 M。 Rojanasakul Y。 甘尼特 p . M。 中间人 N。 刘 K。 铬(VI)和抗坏血酸盐的反应和过氧化氢生成羟基自由基,导致DNA损伤:角色的Cr (IV)介导Fenton-like反应 致癌作用 1994年 15 11 2475年 2478年 2 - s2.0 - 0027998060 史 X。 中间人 n S。 超氧化物自由基的作用在铬(VI)生成的氢氧自由基:铬(VI) Haber-Weiss周期 生物化学和生物物理学的档案 1992年 292年 1 323年 327年 2 - s2.0 - 0026595833 10.1016 / 0003 - 9861 (92)90085 - b Patlolla 答:K。 巴恩斯 C。 哈科特 D。 Tchounwou p . B。 重铬酸钾诱导细胞毒性、基因毒性和氧化应激在人类肝细胞癌(HepG2) 国际环境研究和公共卫生杂志》上 2009年 6 2 643年 653年 2 - s2.0 - 61449204007 10.3390 / ijerph6020643 丁 M。 史 X。 全身的分子机制铬(VI)的致癌作用 分子和细胞生物化学 2002年 234 - 235 293年 300年 2 - s2.0 - 4243735675 10.1023 /:1015975218920 白色的 E。 生命、死亡和细胞凋亡的追求 基因和发展 1996年 10 1 1 15 2 - s2.0 - 0030046508 Taraphdar 答:K。 罗伊 M。 巴塔查里亚 r·K。 天然产物诱导的细胞凋亡:癌症治疗和预防 当前的科学 2001年 80年 11 1387年 1396年 2 - s2.0 - 0012285509 罗伊 M。 Chakrabarty 年代。 Sinha D。 巴塔查里亚 r·K。 Siddiqi M。 Anticlastogenic, antigenotoxic儿茶素和凋亡活动:绿茶多酚 突变的研究 2003年 523 - 524 33 41 2 - s2.0 - 0037293952 10.1016 / s0027 - 5107 (02) 00319 - 6 Garcia-Rodriguez m . C。 Vilches-Larrea r·E。 Nicolas-Mendez T。 Altamirano-Lozano m·A。 El te佛得角en la quimioprevencion体内del端午genotoxico inducido为什么金属cancerigenos (cromo (VI)) Nutricion Hospitalaria 2012年 27 4 1188年 1196年 卡尔玛 D。 Horžic D。 Belšcak 一个。 Kovacevic g·K。 Vulic 我。 绿茶的制备及其生物活性化合物的影响的内容 食品研究国际 2010年 43 167年 176年 Neckvapil T。 Kopriva V。 Boudny V。 Hostovsky M。 德沃夏克 P。 Malota l 饮料包含茶提取物的抗氧化能力下降在存储 科学世界杂志 2012年 2012年 5 361698年 10.1100 / 2012/361698 Ananingsih 诉K。 沙玛 一个。 周 W。 绿茶儿茶素在食品加工和储存:回顾稳定和检测 食品研究国际 2013年 50 469年 479年 2 - s2.0 - 79952992009 10.1016 / j.foodres.2011.03.004 坂本 Y。 Mikuriya H。 Tayama K。 高桥 H。 Nagasawa 一个。 矢野 N。 Yuzawa K。 Ogata 一个。 青木 N。 Goitrogenic效果的绿茶提取物儿茶素膳食管理的老鼠 档案的毒理学 2001年 75年 10 591年 596年 2 - s2.0 - 0035668335 10.1007 / s00204 - 001 - 0286 - 6 Garcia-Rodriguez m . C。 Lopez-Santiago V。 Altamirano-Lozano M。 叶绿酸对铬的影响trioxide-induced在多色在小鼠外周血红细胞微核 突变的研究 2001年 496年 1 - 2 145年 151年 2 - s2.0 - 0035922186 10.1016 / s1383 - 5718 (01) 00225 - x 综丝 j . A。 海特 M。 Kirkhart B。 诱导的微核作为衡量基因毒性。美国环境保护署的报告gene-tox程序 突变的研究 1983年 123年 1 61年 118年 2 - s2.0 - 0020511885 阿伊达 M。 Birukawa Y。 Hachiya N。 全 郭宏源。 Suma J。 Takizawa Y。 田中 N。 Kuramochi M。 塞其 H。 Tazawa T。 天野之弥 一个。 藤原 M。 Haruta Y。 北泽俊美 M。 Nakijima M。 Oba K。 铃木 K。 Ukai Y。 Sutuo 年代。 推荐的协议CSGMT /杰姆。MMS的短期小鼠外周血微核测试 诱变 1995年 10 3 153年 159年 2 - s2.0 - 0028850906 McGahon a·J。 马丁 美国J。 Bissonnette r P。 Mahboubi 一个。 史 Y。 Mogil r . J。 西冈 w·K。 绿色 d·R。 第九章的结尾(细胞)线:细胞凋亡研究的方法<我talic> 在体外 方法在细胞生物学 1995年 46 153年 185年 2 - s2.0 - 0029199452 10.1016 / s0091 - 679 x(08年)61929 - 9 经济合作与发展组织 指导测试的化学物质。474号:哺乳动物红细胞微核测试 1997年 食品及药物管理局 食品和药物管理局:生殖研究药物安全评价指南供人类使用 美国马里兰州银泉,2000 http://www.oecd.org/env/ehs/testing/section4healtheffects.htm 哈亚希 M。 盛田昭夫 T。 小玉 Y。 Sofuni T。 Ishidate M。 Jr。 小鼠外周血网织红细胞的微核测定用吖啶orange-coated幻灯片 突变的研究 1990年 245年 4 245年 249年 2 - s2.0 - 0025203206 阿德勒 法定量。 Bootman J。 忙 J。 钩 G。 Schriever-Schwemmer G。 Welzl G。 沃顿 E。 Yoshimura 我。 哈亚希 M。 建议统计设计体内诱变试验对后续的统计分析 突变的研究 1998年 417年 1 19 30. 2 - s2.0 - 0031658881 10.1016 / s1383 - 5718 (98) 00091 - 6 Garcia-Rodriguez m . C。 Altamirano-Lozano M。 叶绿酸的研究影响基因毒性和致畸铬(VI)诱导的损害 环保分子诱变 2006年 47 6日,第460条 Isbrucker r。 博士伦 J。 爱德华兹 j . A。 Wolz E。 安全研究儿茶素(EGCG)准备。第1部分:基因毒性 食品和化学毒物学 2006年 44 5 626年 635年 2 - s2.0 - 33645237951 10.1016 / j.fct.2005.07.005 许 Y.-W。 蔡 张炳扬。 陈 W.-K。 黄 张炳扬。 日元 c c。 绿茶的亚急性毒性评价(<我talic> 茶树)提取小鼠 食品和化学毒物学 2011年 49 10 2624年 2630年 2 - s2.0 - 80051867088 10.1016 / j.fct.2011.07.007 Aherne 美国一个。 O ' brien n·M。 机制保护的类黄酮、槲皮素和芦丁,对tert-butylhydroperoxide——menadione-induced Caco-2细胞DNA单链断裂 自由基生物学和医学 2000年 29日 6 507年 514年 2 - s2.0 - 0034665533 10.1016 / s0891 - 5849 (00) 00360 - 9 Caillet 年代。 余 H。 Lessard 年代。 Lamoureux G。 Ajdukovic D。 拉克鲁瓦 M。 芬顿反应申请筛选天然抗氧化剂 食品化学 2007年 One hundred. 2 542年 552年 2 - s2.0 - 33745289099 10.1016 / j.foodchem.2005.10.009 卡莱尔 d . L。 普里查德 d E。 辛格 J。 Patierno s R。 铬(VI)细胞凋亡p53-dependent在人类肺二倍体和鼠标真皮成纤维细胞 分子致癌作用 2000年 28 111年 118年 Bagchi D。 Bagchi M。 Stohs 美国J。 全身的铬(VI)氧化应激,凋亡细胞死亡和p53肿瘤抑制基因的调制 分子和细胞生物化学 2001年 222年 1 - 2 149年 158年 2 - s2.0 - 0034807853 10.1023 /:1017958028256 哈亚希 Y。 近藤 T。 赵 Q.-L。 小川 R。 崔 Z.-G。 Feril l . B。 Jr。 Teranishi H。 Kasuya M。 信号转导的p53-independent凋亡通路诱导U937细胞的六价铬 毒理学和药理学应用 2004年 197年 2 96年 106年 2 - s2.0 - 2442417777 10.1016 / j.taap.2004.02.011 叶 J。 王 年代。 伦纳德 美国年代。 太阳 Y。 巴特沃斯 l 安托尼尼 J。 丁 M。 Rojanasakul Y。 Vallyathan V。 Castranova V。 史 X。 活性氧和p53在铬(VI)全身的细胞凋亡 生物化学杂志 1999年 274年 49 34974年 34980年 2 - s2.0 - 0033520938 10.1074 / jbc.274.49.34974 冈 年代。 菅沼 M。 哈亚希 M。 Sueoka E。 小森 一个。 Fujiki H。 机制的人类肺癌细胞株的生长抑制,中冲茶多酚 日本癌症研究杂志》上 1997年 88年 7 639年 643年 2 - s2.0 - 0030847456 Fujiki H。 菅沼 M。 冈 年代。 Sueoka N。 小森 一个。 Sueoka E。 Kozu T。 的大作 Y。 日本须贺 K。 Imai K。 Nakachi K。 抑制癌症的绿茶 突变的研究 1998年 402年 1 - 2 307年 310年 2 - s2.0 - 0032543342 10.1016 / s0027 - 5107 (97) 00310 - 2 Hibasami H。 Achiwa Y。 藤川 T。 Komiya T。 诱导细胞程序性死亡(凋亡)在人类淋巴白血病细胞由儿茶素化合物 抗癌的研究 1996年 16 4 1943年 1946年 2 - s2.0 - 0029769675 艾哈迈德 N。 异常兴奋的 d·K。 Nieminen A.-L。 阿加瓦尔 R。 穆赫塔尔 H。 绿茶成分epigallocatechin-3-gallate和诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞在人类细胞癌 美国国家癌症研究所杂志》上 1997年 89年 24 1881年 1886年 2 - s2.0 - 0031444312 高 Y。 李 W。 李 B。 陈 y . C。 你 Y。 增强(-)-epigallocatechin-3-gallate和theaflavin-3-3′-digallate诱导细胞凋亡,抗坏血酸在人类肺腺癌SPC-A-1细胞和食管癌eca - 109细胞通过MAPK通路 生物化学和生物物理研究通信 2013年 438年 370年 374年 菅沼 M。 冈 年代。 凯 Y。 Sueoka N。 Sueoka E。 Fujiki H。 的协同效应(-)和(-)-表儿茶素没食子酸儿茶素酯,苏灵大,或他莫昔芬在预防癌症的活动在人类肺癌细胞系中冲 癌症研究 1999年 59 1 44 47 2 - s2.0 - 0032953802 辛格 M。 Bhui K。 辛格 R。 舒克拉 Y。 茶多酚增强顺铂化学敏感性在宫颈癌细胞通过诱导细胞凋亡 生命科学 2013年 93年 7 16