NP 神经可塑性 1687 - 5443 2090 - 5904 Hindawi出版公司 10.1155 / 2016/4545826 4545826 研究文章 Prestin表达的同步发展和听觉脑干反应在大鼠生后发育 http://orcid.org/0000 - 0003 - 1375 - 5771 剑锋 1、2 2 http://orcid.org/0000 - 0002 - 0083 - 1950 Wenlu 1 http://orcid.org/0000 - 0001 - 9434 - 4768 Aoshuang 1 http://orcid.org/0000 - 0003 - 3159 - 1248 避开 3 http://orcid.org/0000 - 0002 - 2554 - 5766 Cuixian 1 http://orcid.org/0000 - 0001 - 8519 - 7989 明宇 1 http://orcid.org/0000 - 0001 - 7882 - 4462 1 1 生理学系 学校基本的医学科学 南方医科大学 广州510515 中国 fimmu.com 2 部门实验室药品 综合医院解放军广州军区 广州510010 中国 gzzyy.com 3 华南师范大学附属中学 广州510630 中国 2016年 21 12 2016年 2016年 08年 09年 2016年 08年 11 2016年 30. 11 2016年 2016年 版权©2016剑锋挂et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

Prestin马达蛋白表达在耳蜗外毛细胞(ohc)哺乳动物内耳。的electromotility ohc由prestin所需负责的耳蜗放大在成年动物正常听力。产后的表达prestin ohc和活动可能导致听力的成熟啮齿动物。然而,时间和空间的表达在耳蜗prestin发展不是很透彻了。在目前的研究中,我们审查的表达和功能prestin ohc的顶端,中间,和基底的cochleae产后老鼠。Prestin首次出现在产后6天(P6)基底,P7在中间,票数顶端的耳蜗。表达水平逐渐增加在接下来的几天里,好为所有三个部分达到成熟的水平。相比之下,当然对不同频率听觉脑干反应的发展,我们的数据显示,prestin表达式与听力同步发展。目前的研究表明,听力的发病时间可能需要prestin的表达,是由成熟ohc的函数。

973项目 2014年cb943002 中国国家自然科学基金 31271179,31500841
1。介绍</t我tle><p>哺乳动物的听觉特征是难以置信的敏感性和精致的频率选择性。然而,在许多物种包括啮齿动物,出生后的听觉功能开发。在老鼠身上,动作电位不能获得从初级听觉皮层的神经元在产后前几天10到11 (P10-P11) [<xref ref-type="bibr" rid="B1"> 1</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B2"> 2</xref>]。因此,这一时期大约在P10鼠听觉发展是一个重要的阶段,被描述为“听力开始。“在接下来的几天,听力灵敏度迅速增加,听力和最小阈值减少了大约30 - 50 dB P11-P14期间,达到成人水平(<xref ref-type="bibr" rid="B2"> 2</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B3"> 3</xref>]。听觉感知的成熟需要完成的结构和功能发展听觉周边和中枢听觉系统。一些重要研究调查中心神经元的成熟和突触连接的细化<xref ref-type="bibr" rid="B4"> 4</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B5"> 5</xref>]。体内膜片箝听觉输入数据表明,阈下观察在听力开始前皮质神经元(<xref ref-type="bibr" rid="B3"> 3</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B6"> 6</xref>]。这些报告表明,听力开始前耳蜗功能开发。</p><p>耳蜗的形态和功能的发展已被广泛研究。内毛细胞(包含ihc)和外毛细胞(ohc)是两种类型的哺乳动物耳蜗感觉细胞。ohc声音振动转换成电信号和改变他们的细胞长度在声波频率(<xref ref-type="bibr" rid="B7"> 7</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B8"> 8</xref>]。这些形状的变化,称为electromotility假定为机械反馈过程的一部分,放大低级声音(<xref ref-type="bibr" rid="B7"> 7</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B9"> 9</xref>]。运动性的耳蜗放大来自ohc增加的敏感性弱的声音- dB (<xref ref-type="bibr" rid="B9"> 9</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B10"> 10</xref>]。OHC electromotility是由一个马达蛋白称为prestin,驻留在侧膜上凸轮轴。由膜电压的变化,胞内氯离子出入的prestin分子,从而触发开关的构象prestin之间的长期和短期州(<xref ref-type="bibr" rid="B10"> 10</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B11"> 11</xref>]。有趣的是,ohc发生在产后的形态和功能的成熟年龄(<xref ref-type="bibr" rid="B12"> 12</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B13"> 13</xref>]。Belyantseva等人报道,prestin表达逐渐增加出生后的时间课程与electromotility [<xref ref-type="bibr" rid="B14"> 14</xref>]。这些发现暗示的electromotility包含ihc可能是一个重要的限制因素的发展成熟的听证会。</p><p>听觉脑干反应(核)可能全球神经反应的一个重要表现声音刺激和体内通常被认为是与听觉功能。因此,在本研究中,我们研究了ABR的发展和在产后prestin老鼠的表达。我们的研究结果表明,prestin配合时间的表达和功能上的发展。</p></sec> <sec id="sec2"> <title>2。材料和方法</t我tle><sec id="sec2.1"> <title>2.1。实验动物</t我tle><p>成人(2到3个月大)Sprague-Dawley老鼠和老鼠幼崽从出生后第0天(P0)好被用于这项研究。动物们保持12小时光/ 12小时黑暗时间表和免费的水和一个标准的饮食。所有的研究都是依照中国执行防止虐待动物行为和权限是来自南方医科大学实验动物中心。</p></sec> <sec id="sec2.2"> <title>2.2。上记录</t我tle><p>实验进行鼠崽P0-P14成年老鼠。简而言之,每个动物麻醉的腹腔内注射戊巴比妥钠(22毫克/公斤幼崽和成年人30毫克/公斤)。然后,动物被放在一个表在一个隔音室防振。动物的体温维持在37.5°C和加热垫在ABR录音。一个皮下的电极针放置在头骨顶点。地面被左腹外侧的外耳廓,和参考腹外侧向右外部耳廓。校准刺激生成使用TDT SigGenRP软件(Tucker-Davis技术)。语气破裂(1上升/下降女士3 ms高原)各种频率(1、2、4、8、16、24、32 kHz)和强度(0 - 90分贝每隔5 dB)提出了使用校准TDT ES1扬声器位于50厘米远离动物。frequency-amplitude扫描是计算机控制(TDT系统3、Tucker-Davis技术),并在一个随机序列。每个frequency-amplitude组合重复了256次的速度10脉冲/秒。 The ABR signals were filtered (100–1000 Hz), amplified and averaged using TDT hardware (TDT System 3, Tucker-Davis Technologies), and recorded using BioSigRP software (Tucker-Davis Technologies). Hearing thresholds were determined by visual inspection of ABR waveforms and defined as the minimum intensity at which averaged waveforms could be distinguished. Data were stored for offline analysis. The entire recording for one animal spanned about 40 minutes.</p></sec> <sec id="sec2.3"> <title>2.3。免疫荧光染色</t我tle><p>颞骨的幼崽和成人Sprague-Dawley老鼠孤立和媒体放在l - 15(表达载体,卡尔斯巴德,CA)。螺旋器被隔离和代表基底均匀切成三块,中间,顶端。组织与4%多聚甲醛固定在0.1 PBS (pH值7.4)25°C 2小时。用PBS洗净后,组织孵化在阻止溶液BSA在PBS山羊血清(10%和1%)与0.3% Triton x - 100在室温下20分钟,然后孵化与主要抗体prestin糖(1:200年,圣克鲁斯生物技术公司,圣克鲁斯,CA)一夜之间在4°C。后主要抗体与PBS完全冲毁,Alexa的组织样本孵化萤石488 -共轭二次抗体(1:600;表达载体,卡尔斯巴德,CA)阻止溶液在室温下1 h。静纤毛的对比染色使用phalloidin执行用四甲基异硫氰酸罗丹明标记(TRITC-phalloidin, 1: 200;σ,圣路易斯,密苏里州,美国)在室温下20分钟。在PBS清洗三次后,样本安装滑动和盖玻片之间使用延长不变色试剂(表达载体,卡尔斯巴德,CA)。荧光图像得到用尼康显微镜(日本尼康,A1 +)使用20或40 x的目标。</p></sec> <sec id="sec2.4"> <title>2.4。免疫印迹</t我tle><p>如我们之前所述执行免疫印迹研究[<xref ref-type="bibr" rid="B15"> 15</xref>]。总之,螺旋器的顶端将被隔离和均质裂解缓冲(50 mM Tris-HCl, pH值7.4,150毫米氯化钠,特里同x - 100 1%, 1%钠脱氧胆酸盐,和0.1% SDS)补充完整™蛋白酶抑制剂(罗氏)。孵化冰上30分钟后,样本离心机在12000 rpm 15分钟在4°C,和上层清液收集进行进一步分析。随后,20<我t一个l我c> μ</我t一个l我c>总人工耳蜗的g蛋白分离使用8% sds - page和转移到硝酸纤维素(微孔)。阻塞后5%的脱脂牛奶包含0.1%渐变20 TBS,细胞膜是孵化主要抗体(σ,圣路易斯,密苏里州,美国)一夜之间在4°C震动平台,其次是辣根peroxidase-conjugated二级抗体(表达载体,卡尔斯巴德,CA)在室温下1 h。免疫反应性的乐队是由增强化学发光检测和可视化Amersham成像仪™600(通用电气医疗集团)。Prestin GAPDH乐队和量化使用ImageQuant™TL图像分析软件(通用电气医疗集团)根据制造商的指示。</p></sec> <sec id="sec2.5"> <title>2.5。膜片箝记录和非线性电容测量</t我tle><p>动物麻醉的有限公司<sub>2</sub>吸入和斩首。耳蜗迅速远离颞骨,放置在培养皿中满是冰冷的莱博维茨的l - 15媒体(表达载体,卡尔斯巴德,CA)。螺旋器被隔离的顶端的耳蜗,经历了温和的酶和胶原酶消化5分钟(2毫克/毫升胶原酶IV,σ,圣路易斯,密苏里州)。温柔的移液后,细胞被转移到一个小塑料箱装满enzyme-free l - 15介质(~ 1.5毫升)补充10毫米玫瑰(pH值7.35和300 mOsm)。当时室放置在舞台上的尼康倒置显微镜(Eclipse Ti-S、尼康、日本),摄像机(DS-Fi1c、尼康、日本)。Healthy-appearing孤立ohc被选为电生理实验。细胞表现出任何收缩、肿胀或损害被排除在膜片箝记录。非线性电容(缴送工作)是衡量我们之前的出版物中描述(<xref ref-type="bibr" rid="B16"> 16</xref>- - - - - -<xref ref-type="bibr" rid="B19"> 19</xref>]。录音补丁吸管被一个吸管把拉杆(P97,萨特)和back-filled与细胞内的解决方案(140中海,10 EGTA, 2 MgCl<sub>2</sub>,10个消息灵通的mM, 305 mOsm和pH值7.35)。通常,补丁吸管的初始阻力在2.5 - -3.5 MΩ浴的解决方案。经典在全细胞膜片箝记录进行配置使用一个Axopatch 200 b放大器和1440 a / D转换器(分子器件、钙、美国)。使用two-sine-wave ohc的膜电容测量电压刺激协议控股的潜力0 mV [<xref ref-type="bibr" rid="B20"> 20.</xref>]。刺激控制和数据是使用jClamp软件(Scisoft,纽黑文,CT)。软件OriginPro (OriginLab公司,北安普顿,MA)是用于离线分析数据。nfl可以安装两个玻耳兹曼函数和能够反映非线性运动膜电压(<xref ref-type="bibr" rid="B21"> 21</xref>]。电容的玻耳兹曼函数拟合被描述为<disp-formula> <mml:math display="block" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M1"> <mml:mtable> <mml:mlabeledtr id="eq1"> <mml:mtd> <mml:mtext> (1)</米米l:mtext> </mml:mtd> <mml:mtd> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi> 米</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> =</米米l:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> +</米米l:mo> <mml:mfrac> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> 问</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 米</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 一个</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> x</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mi> α</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 经验值</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mo> ⁡</米米l:mo> <mml:mrow> <mml:mfenced open="[" close="]" separators="|"> <mml:mrow> <mml:mi> α</米米l:mi> <mml:mfenced separators="|"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> V</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi> 米</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> - - - - - -</米米l:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> V</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn mathvariant="normal"> 1</米米l:mn> </mml:mrow> <mml:mo> /</米米l:mo> <mml:mrow> <mml:mn mathvariant="normal"> 2</米米l:mn> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:mfenced> </mml:mrow> </mml:mfenced> <mml:msup> <mml:mrow> <mml:mfenced separators="|"> <mml:mrow> <mml:mn mathvariant="normal"> 1</米米l:mn> <mml:mo> +</米米l:mo> <mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 经验值</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mo> ⁡</米米l:mo> <mml:mrow> <mml:mfenced open="[" close="]" separators="|"> <mml:mrow> <mml:mo> - - - - - -</米米l:mo> <mml:mi> α</米米l:mi> <mml:mfenced separators="|"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> V</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi> 米</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> - - - - - -</米米l:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> V</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn mathvariant="normal"> 1</米米l:mn> </mml:mrow> <mml:mo> /</米米l:mo> <mml:mrow> <mml:mn mathvariant="normal"> 2</米米l:mn> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:mfenced> </mml:mrow> </mml:mfenced> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:mfenced> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn mathvariant="normal"> 2</米米l:mn> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:mfrac> <mml:mo> 。</米米l:mo> </mml:mtd> </mml:mlabeledtr> </mml:mtable> </mml:math> </disp-formula>四个参数(<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M2"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> 问</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 米</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 一个</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> x</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M3"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> V</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn> 1</米米l:mn> <mml:mo> /</米米l:mo> <mml:mn> 2</米米l:mn> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M4"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M5"> <mml:mrow> <mml:mi> z</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>)方程的相关prestin的机能活动:<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M6"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> 问</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 米</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 一个</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> x</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>是最大的跨膜电荷转移;<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M7"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> V</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn> 1</米米l:mn> <mml:mo> /</米米l:mo> <mml:mn> 2</米米l:mn> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>(或<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M8"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> V</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi> h</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>)是最大的膜电压电荷运动发生时,或者,等价于capacitance-voltage函数的峰值;<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M9"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>是线性电容;和<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M10"> <mml:mrow> <mml:mi> α</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>代表电压依赖的斜率(<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M11"> <mml:mi> α</米米l:mi> <mml:mo> =</米米l:mo> <mml:mi> z</米米l:mi> <mml:mi> e</米米l:mi> <mml:mo> /</米米l:mo> <mml:mi> k</米米l:mi> <mml:mi> T</米米l:mi> </mml:math> </inline-formula>,在那里<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M12"> <mml:mrow> <mml:mi> k</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>玻耳兹曼常量,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M13"> <mml:mrow> <mml:mi> T</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>绝对温度,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M14"> <mml:mrow> <mml:mi> z</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>价电荷运动的,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M15"> <mml:mrow> <mml:mi> e</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>是电子电荷)。<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M16"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>是由细胞膜的表面积。比较级nfl的值从ohc获得各种细胞大小,我们规范化缴送工作<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M17"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> 问</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 米</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 一个</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> x</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>来<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M18"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>。</p></sec> <sec id="sec2.6"> <title>2.6。OHC长度测量</t我tle><p>ohc被孤立于螺旋器如上所述。在短暂的,螺旋器迅速从耳蜗和均匀切成三块冰冷的l - 15的媒介。温和的酶消化后5分钟(2毫克/毫升胶原酶IV,σ,圣路易斯,密苏里州),组织被转移到一个小塑料箱装满enzyme-free l - 15中(pH值7.35,300 mOsm)。温和的磨碎头发细胞分离的组织,100年<我t一个l我c> μ</我t一个l我c>L汉密尔顿注射器和25 G针。通过使用这种技术,相当大量的孤立的毛细胞可以获得。包含毛细胞的室放置在舞台上的尼康倒置显微镜(Eclipse Ti-S、尼康、日本)配备一台摄像机(DS-Fi1c、尼康、日本)。因为他们的形态,在大多数准备,包含ihc, ohc很容易辨认。通常,ohc显示大axis-diameter比率,而包含ihc颈部紧(<xref ref-type="bibr" rid="B22"> 22</xref>]。角质层板与轴的夹角细胞的识别上凸轮轴与包含ihc是另一个重要的里程碑。图像healthy-appearing单独使用摄像机ohc被捕。细胞的长度上凸轮轴测量离线。</p></sec> <sec id="sec2.7"> <title>2.7。统计分析</t我tle><p>结果提出了均值±SD。学生的<我t一个l我c> t</我t一个l我c>以及用于检查的意义区别不同产后获得的数据。意义被定义为<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M19"> <mml:mi> p</米米l:mi> <mml:mo> <</米米l:mo> <mml:mn> 0.05</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>。程序Excel和OriginPro被用于计算,数据拟合和策划。</p></sec> </sec> <sec id="sec3"> <title>3所示。结果</t我tle><p>一个BR波形记录从老鼠幼崽在不同产后年龄从天0 (P0)好。在出生后的前几天,没有观察到信号上,不管声音刺激的频率和类型的声波刺激利用(语气破裂,点击,或噪音)。上的高频音破裂早在P6检测到。反应只是找刺激的频率高于20 kHz相对高强度(阈值> 75分贝;5 6的动物)。快速变化发生在接下来的三天,,通过票数,ABR可容易地确定所有频率测试。图<xref ref-type="fig" rid="fig1a"> 1(一)</xref>显示了破裂1代表ABR录音调,16和32 kHz频率从一只老鼠幼崽获得票数。因为波我最稳定和健壮的组件,它是用来估计ABR阈值(图<xref ref-type="fig" rid="fig1a"> 1(一)</xref>箭头)。阈值为基调的刺激在不同产后年龄如图<xref ref-type="fig" rid="fig1b"> 1 (b)</xref>。从票数到好,ABR阈值随着年龄的增长而逐渐减少,但不同的音调频率受到影响的阈值不同。频率高于24 kHz, ABR反应出现早在P6五六个动物。意味着阈值(±SD)针对32 kHz P6音调,P7,票数,侯,好<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M20"> <mml:mn> 76.3</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。5</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M21"> <mml:mn> 73.0</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。7</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M22"> <mml:mn> 72.5</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。8</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M23"> <mml:mn> 69.0</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。5</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M24"> <mml:mn> 51</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。2</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>分别为分贝(图<xref ref-type="fig" rid="fig1c"> 1 (c)</xref>)和阈值在好与成年动物之间没有显著性差异(<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M25"> <mml:mn> 47.5</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 5</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>分贝,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M26"> <mml:mi> p</米米l:mi> <mml:mo> ></米米l:mo> <mml:mn> 0.05</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我t一个l我c> t</我t一个l我c>以及)。核的中间频率(4-16千赫)首先观察到P7在7的7的动物。均值阈值(±SD)反应在P7 16赫兹的音调,票数,侯,好<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M27"> <mml:mn> 74.0</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。2</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M28"> <mml:mn> 67.5</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。8</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M29"> <mml:mn> 62.5</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。8</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M30"> <mml:mn> 40</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。2</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>分别为分贝(图<xref ref-type="fig" rid="fig1c"> 1 (c)</xref>)。成人阈值(<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M31"> <mml:mn> 17.1</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。6</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>分贝)明显低于观察好(<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M32"> <mml:mi> p</米米l:mi> <mml:mo> <</米米l:mo> <mml:mn> 0.01</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我t一个l我c> t</我t一个l我c>以及)。核低频率(< 2千赫)出现直到票数。均值阈值(±SD)在回应1 kHz音调在票数,侯,好<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M33"> <mml:mn> 75年</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。5</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M34"> <mml:mn> 71.3</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。5</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M35"> <mml:mn> 63.4</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 2。7</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>分别为分贝(图<xref ref-type="fig" rid="fig1c"> 1 (c)</xref>),阈值在成年人(好没有什么区别<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M36"> <mml:mn> 60.7</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 3所示。5</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>分贝,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M37"> <mml:mi> p</米米l:mi> <mml:mo> ></米米l:mo> <mml:mn> 0.05</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我t一个l我c> t</我t一个l我c>以及)。我们的数据表明,对于大多数频率测试,ABR阈值在好接近成人的水平。箭头在图<xref ref-type="fig" rid="fig1c"> 1 (c)</xref>显示第一天当上出现不同的频率。</p><fig-group id="fig1"> <label>图1</l一个bel> <p>在产后发展ABR阈值的变化。(一)ABR波形记录从一个票数老鼠幼崽。箭头表示ABR阈值1 kHz, 16赫兹,32 kHz音调。黑色的单杠上<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M38"> <mml:mrow> <mml:mi> x</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>设在表示5 ms的刺激。(b) ABR调谐曲线变化发展。数据表示为均值±SD。<我t一个l我c> n</我t一个l我c>表明评估的动物数量。(c) ABR阈值随时间减少产后期间的发展。箭头表示ABR的第一天出现在不同的频率。<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M39"> <mml:mmultiscripts> <mml:mrow> <mml:mi> p</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mprescripts></mml:mprescripts> <mml:none></mml:none> <mml:mrow> <mml:mi> ∗</米米l:mi> <mml:mi> ∗</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:mmultiscripts> <mml:mo> <</米米l:mo> <mml:mn> 0</米米l:mn> <mml:mo> 。</米米l:mo> <mml:mn> 01</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>;<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M40"> <mml:mmultiscripts> <mml:mrow> <mml:mi> p</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mprescripts></mml:mprescripts> <mml:none></mml:none> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> N</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 年代</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:mmultiscripts> <mml:mo> ></米米l:mo> <mml:mn> 0</米米l:mn> <mml:mo> 。</米米l:mo> <mml:mn> 05年</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>(学生的<我t一个l我c> t</我t一个l我c>以及)。</p><fig id="fig1a"> <label>(一)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.001a"></graphic> </fig> <fig id="fig1b"> <label>(b)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.001b"></graphic> </fig> <fig id="fig1c"> <label>(c)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.001c"></graphic> </fig> </fig-group> <p>因为ABR波形我代表响应引起的耳蜗,我们的数据表明,耳蜗功能开发P6和好之间的关系。ohc的electromotility导致耳蜗响应的重要原因。我们的结果表明,在此期间,ohc很可能参与了对声音的反应刺激耳蜗放大器。ohc的electromotility prestin电动机产生的蛋白质,这是位于外膜。调查的密度和位置prestin发展中ohc immunolabeling prestin的执行和图片收集沿着耳蜗的共焦显微镜。图<xref ref-type="fig" rid="fig2"> 2</xref>共焦显微图显示ohc顶端,中间,和基底的cochleae P5好老鼠幼崽。P5和P7顶端,rhodamine-phalloidin染色显示了头发包定义的顶表面上凸轮轴。DAPI染色法显示了核表明ohc的底部区域。如图<xref ref-type="fig" rid="fig2"> 2</xref>,没有发现prestin ohc沿整个耳蜗P5。表达prestin第一次被标记在P6 P7在ohc位于基底耳蜗和显示持续增长在未来的一周。Prestin表达时空上的进展,与基底ohc显示Prestin表达式比顶端ohc ~ 4天前。好,健壮的环形荧光观察到在所有三个部分。</p><fig id="fig2"> <label>图2</l一个bel> <p>共焦图像在ohc prestin表达各种产后。Prestin免疫反应性测量的三个部分(基底,中间,和顶端)沿着耳蜗。P5和P7顶端,头发束与rhodamine-phalloidin标记(红色),头发的细胞核与DAPI染色(蓝色),prestin是用绿色标记。三个不同的焦平面图像的头发束(ohc的顶端表面来表示),上部侧壁的,核被合并。没有在P0-P5 prestin荧光(绿色)。为了更好地说明的表达prestin ohc的侧壁上,只显示后P7绿色通道。Prestin表达时空上的进展。比例尺代表20<我t一个l我c> μ</我t一个l我c>m。</p><graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.002"></graphic> </fig> <p>为了量化prestin的观察表达水平变化在开发期间,我们测量了immunoband prestin强度在顶端ohc产后不同年龄段使用西方墨点法。由代表immunobands图如图所示<xref ref-type="fig" rid="fig3a"> 3(一个)</xref>的表达式prestin以年龄相关性的方式增加。图<xref ref-type="fig" rid="fig3b"> 3 (b)</xref>显示平均(±SD)表达水平四个独立实验规范化GAPDH后,内部控制蛋白质。prestin保持在低位的表达在出生后第一个五天,prestin强度和最突出的增加发生在票数,好。虽然好后prestin水平略有增加,没有观察到显著差异之间的水平好,成年。</p><fig-group id="fig3"> <label>图3</l一个bel> <p>表达prestin在大鼠耳蜗的发展。(一)代表prestin和GAPDH immunobands从西方的屁股被发现在81 kD和36 kD。GAPDH是用作内部控制。(b)的相对表达prestin (GAPDH所有规范化)在不同产后。比较上面所示的酒吧相关列。数据来自四个独立的实验,用平均数±标准差表示。<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M41"> <mml:mmultiscripts> <mml:mrow> <mml:mi> p</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mprescripts></mml:mprescripts> <mml:none></mml:none> <mml:mrow> <mml:mi> ∗</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:mmultiscripts> <mml:mo> <</米米l:mo> <mml:mn> 0</米米l:mn> <mml:mo> 。</米米l:mo> <mml:mn> 05年</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>;<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M42"> <mml:mmultiscripts> <mml:mrow> <mml:mi> p</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mprescripts></mml:mprescripts> <mml:none></mml:none> <mml:mrow> <mml:mi> ∗</米米l:mi> <mml:mi> ∗</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:mmultiscripts> <mml:mo> <</米米l:mo> <mml:mn> 0</米米l:mn> <mml:mo> 。</米米l:mo> <mml:mn> 01</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>;<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M43"> <mml:mmultiscripts> <mml:mrow> <mml:mi> p</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mprescripts></mml:mprescripts> <mml:none></mml:none> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> N</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 年代</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:mmultiscripts> <mml:mo> ></米米l:mo> <mml:mn> 0</米米l:mn> <mml:mo> 。</米米l:mo> <mml:mn> 05年</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>(学生的<我t一个l我c> t</我t一个l我c>以及)。</p><fig id="fig3a"> <label>(一)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.003a"></graphic> </fig> <fig id="fig3b"> <label>(b)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.003b"></graphic> </fig> </fig-group> <p>两个基本电生理属性通常用于探测的功能prestin表达哺乳动物ohc:缴送工作和electromotility。缴送工作和electromotility完全耦合的哺乳动物<xref ref-type="bibr" rid="B21"> 21</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B23"> 23</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B24"> 24</xref>]。因为缴送工作可以很容易地和准确地测量实验,它是用作分析评估的功能开发prestin在下面描述的实验。ohc的成年啮齿动物,缴送工作特点是钟形依赖膜电位峰值约−70 mV (<xref ref-type="bibr" rid="B21"> 21</xref>]。如图<xref ref-type="fig" rid="fig4"> 4</xref>nfl记录相比,我们从顶端ohc P6和成人ohc好。为了消除不同的细胞大小的影响,缴送工作是规范化的大小<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M44"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>(OHC)表面积的代表。图<xref ref-type="fig" rid="fig4a"> 4(一)</xref>表明缴送工作反应首次检测到在P6 4 9 ohc,很小的大小(图<xref ref-type="fig" rid="fig4a"> 4(一)</xref>,黑色线)。健壮的缴送工作反应在所有从票数上凸轮轴测量记录,和反应增加发展时期进行了研究。好,nfl达到一个水平可比的成年人。参数来自与总结了两国玻耳兹曼函数曲线拟合数据<xref ref-type="fig" rid="fig4b"> 4 (b)</xref>- - - - - -<xref ref-type="fig" rid="fig4e"> 4 (e)</xref>。很明显,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M45"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> V</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn> 1</米米l:mn> <mml:mo> /</米米l:mo> <mml:mn> 2</米米l:mn> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>在早期的开发(P6)相对较低(−<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M46"> <mml:mn> 83.96</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 8.79</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>mV);然而,在年龄以上票数,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M47"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> V</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn> 1</米米l:mn> <mml:mo> /</米米l:mo> <mml:mn> 2</米米l:mn> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>增加(−成人水平<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M48"> <mml:mn> 66.46</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 6.50</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>mV,图<xref ref-type="fig" rid="fig4b"> 4 (b)</xref>)。缴送工作/<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M49"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>和<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M50"> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> 问</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 米</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 一个</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> x</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> /</米米l:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:math> </inline-formula>都是与移动电荷密度或激活prestin的数量。值越大,费用越发生易位在电压刺激。如数据所示<xref ref-type="fig" rid="fig4c"> 4 (c)</xref>和<xref ref-type="fig" rid="fig4d"> 4 (d)</xref>,缴送工作/<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M51"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>和<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M52"> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> 问</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 米</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 一个</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> x</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> /</米米l:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:math> </inline-formula>增加P6 -好,好这些值达到成熟。电压灵敏度或价,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M53"> <mml:mrow> <mml:mi> z</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>所有年龄段的,保持稳定(图进行了研究<xref ref-type="fig" rid="fig4e"> 4 (e)</xref>,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M54"> <mml:mi> p</米米l:mi> <mml:mo> ></米米l:mo> <mml:mn> 0.05</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,<我t一个l我c> t</我t一个l我c>以及)。</p><fig-group id="fig4"> <label>图4</l一个bel> <p>缴送工作从顶端上凸轮轴测量各种产后年龄。(一)意味着NLC-voltage反应被安装了玻耳兹曼函数(颜色编码重线)。缴送工作规范化,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M55"> <mml:mrow> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi> C</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> l</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 我</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> n</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:msub> </mml:mrow> </mml:math> </inline-formula>和曲线绘制平均数±标准差。((b) - (e))四个参数来自与玻尔兹曼函数曲线拟合。有关详细信息,请参阅结果。数据表示为均值±SD。<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M56"> <mml:mi> n</米米l:mi> <mml:mo> =</米米l:mo> <mml:mn> 4</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>10、8、8、12和P6,票数,侯,好,分别和成人。<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M57"> <mml:mmultiscripts> <mml:mrow> <mml:mi> p</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mprescripts></mml:mprescripts> <mml:none></mml:none> <mml:mrow> <mml:mi> ∗</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:mmultiscripts> <mml:mo> <</米米l:mo> <mml:mn> 0.05</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>;<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M58"> <mml:mmultiscripts> <mml:mrow> <mml:mi> p</米米l:mi> </mml:mrow> <mml:mprescripts></mml:mprescripts> <mml:none></mml:none> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> N</米米l:mi> <mml:mi mathvariant="normal"> 年代</米米l:mi> </mml:mrow> </mml:mmultiscripts> <mml:mo> ></米米l:mo> <mml:mn> 0</米米l:mn> <mml:mo> 。</米米l:mo> <mml:mn> 05年</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>(学生的<我t一个l我c> t</我t一个l我c>以及)。</p><fig id="fig4a"> <label>(一)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.004a"></graphic> </fig> <fig id="fig4b"> <label>(b)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.004b"></graphic> </fig> <fig id="fig4c"> <label>(c)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.004c"></graphic> </fig> <fig id="fig4d"> <label>(d)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.004d"></graphic> </fig> <fig id="fig4e"> <label>(e)</l一个bel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.004e"></graphic> </fig> </fig-group> <p>因为electromotility发生沿纵轴上凸轮轴,人们普遍认为OHC长度对耳蜗放大至关重要。与相同prestin表达水平和活动,时间越长,ohc能产生更重要的能动性,因此进行耳蜗的放大。我们测量ohc孤立的细胞长度从不同段沿底膜。图<xref ref-type="fig" rid="fig5"> 5</xref>表明,OHC长度不断增加,表现出一个s形从P0上升到好。基底上凸轮轴的长度有微小的变化在这段时间虽然顶端ohc持续增长,直到约赛。基底、中间和顶端ohc达到了成人在P5长度,P8和侯(恒星在图所示<xref ref-type="fig" rid="fig5"> 5</xref>),顶端ohc成熟晚于中产和基底上凸轮轴。</p><fig id="fig5"> <label>图5</l一个bel> <p>OHC长度变化的函数产后的一天。绘制每个数据点的平均值和SD至少50上凸轮轴。恒星显示细胞达到成人的最早的一天长度(<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M59"> <mml:mi> p</米米l:mi> <mml:mo> ></米米l:mo> <mml:mn> 0.05</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>,学生的<我t一个l我c> t</我t一个l我c>以及)。</p><graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/np/2016/4545826.fig.005"></graphic> </fig> </sec> <sec id="sec4"> <title>4所示。讨论</t我tle><p>在这项研究中,我们使用ABR衡量听力灵敏度在发展中老鼠幼崽。ABR是一个复合诱发电位的声学响应中提取出来的不同阶段以及听觉系统的提升途径。人们普遍认为ABR波形的峰值与不同的时间延迟是由不同的脑干核(<xref ref-type="bibr" rid="B25"> 25</xref>]。耳蜗和听觉神经的反应主要是负责山峰I和II,分别。山峰三世到V(七峰出现在一些研究中)代表耳蜗神经核的反应和其他脑干核更高的水平。与录音从成年动物相比,我们的数据表明,ABR波形得到以下的幼崽好显示一些特殊的功能。只有三到四个不同的波识别后第一个8女士内刺激出现,如图<xref ref-type="fig" rid="fig1"> 1</xref>。峰的延迟我非常类似于先前发表的例子从成人(例如,<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M60"> <mml:mn> 1.4</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 0.24</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>P9小狗与女士<我nl我ne- - - - - -formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M61"> <mml:mn> 1.2</米米l:mn> <mml:mo> ±</米米l:mo> <mml:mn> 0.1</米米l:mn> <mml:mn> 5</米米l:mn> </mml:math> </inline-formula>女士在成人32 kHz, 90分贝音调)[<xref ref-type="bibr" rid="B26"> 26</xref>]。因此,我们的研究结果表明,更高层次的声学响应听觉核发展中老鼠的缺席。虽然我们没有检查开发单个原子核反应的中枢听觉系统,我们的研究结果暗示中央听觉神经元功能成熟后比cochleae和耳蜗信号输入是听觉系统的发展要求。这个假说是由最近的证据支持从体内膜片箝记录皮层听觉神经元。兴奋和抑制性突触输入不cotuned P12之前暂时不平衡;因此,动作电位是很少听到发作之前记录(<xref ref-type="bibr" rid="B3"> 3</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B6"> 6</xref>]。这些结果表明,耳蜗发生反应的发病早于听觉皮层的突触细化。我们的研究结果还表明,ABR反应检测早在P6-P9,虽然时间线各种不同频率(图<xref ref-type="fig" rid="fig1"> 1</xref>)。</p><p>然而,耳蜗的发病机制负责响应和确定耳蜗功能的成熟时间尚不清楚。显然,大量的形态和功能变化发生在耳蜗的发展。在大鼠,耳蜗的结构是在出生后早期阶段形成的;耳中耳发育良好,是开放的听证会开始前(<xref ref-type="bibr" rid="B27"> 27</xref>- - - - - -<xref ref-type="bibr" rid="B29"> 29日</xref>]。毛细胞和支持细胞的分化,以及螺旋神经节神经元的神经支配,在胚胎期间完成(<xref ref-type="bibr" rid="B13"> 13</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B30"> 30.</xref>- - - - - -<xref ref-type="bibr" rid="B35"> 35</xref>]。头发束的形态发展和mechanoelectrical转导功能成熟之前完成产后6天(<xref ref-type="bibr" rid="B13"> 13</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B28"> 28</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B29"> 29日</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B36"> 36</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B37"> 37</xref>]。由于耳蜗反应开始出现在P6-P9根据我们的ABR波形分析,上述过程是不可能确定的耳蜗的回应。在大鼠大脑皮层神经元的动作电位响应声音刺激在P10-P11第一个可记录的。只有相对高强度刺激反应被发现。快速变化发生在随后3天,,好,听觉皮层显示成人兴奋性反应。最重要的变化是40 - 50 dB阈值降低(<xref ref-type="bibr" rid="B1"> 1</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B2"> 2</xref>]。这戏剧性的变化在听力敏感性意味着一种机制的参与调节的敏感性听证制度在这一时期。</p><p>耳蜗放大赋予极高的灵敏度,我们听到一个巨大的强度范围(<xref ref-type="bibr" rid="B38"> 38</xref>]。哺乳动物耳蜗放大是归因于ohc,可以改变他们的细胞长度变化而在膜电位同步声波(<xref ref-type="bibr" rid="B7"> 7</xref>]。这个活动称为electromotility是由独特的马达蛋白prestin OHC侧膜(<xref ref-type="bibr" rid="B11"> 11</xref>]。我们的研究表明,prestin首先在P6(图表示<xref ref-type="fig" rid="fig2"> 2</xref>),达到成人表达水平好(数字<xref ref-type="fig" rid="fig3"> 3</xref>和<xref ref-type="fig" rid="fig4"> 4</xref>)。这一时期密切对应于耳蜗功能的出现(图<xref ref-type="fig" rid="fig1"> 1</xref>)。prestin发展表达模式,研究了在两个物种,老鼠和老鼠<xref ref-type="bibr" rid="B14"> 14</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B39"> 39</xref>]。Belyantseva等人报道,prestin表达开始于产后一天0和逐步增加的时间课程与electromotility [<xref ref-type="bibr" rid="B14"> 14</xref>]。我们的结果与这些数据似乎没有一致的。表达prestin ohc从耳蜗内的不同位置(基底、中间,顶端)并非同步:达到成熟的水平在基底在票数,P10-P11中间转,在顶端P12(数字<xref ref-type="fig" rid="fig2"> 2</xref>和<xref ref-type="fig" rid="fig3"> 3</xref>)。我们的研究结果支持函数测量ohc的其他物种。在老鼠和沙鼠,nfl和ohc electromotility首次检测到在P12-P15 P6和达到成人的水平(<xref ref-type="bibr" rid="B12"> 12</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B39"> 39</xref>]。然而,老鼠的表达prestin ohc的electromotility期间同步发展。</p><p>在目前的研究中,我们没有直接测量ohc的能动性。缴送工作和electromotility完全耦合在哺乳动物上凸轮轴(<xref ref-type="bibr" rid="B21"> 21</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B23"> 23</xref>,<xref ref-type="bibr" rid="B24"> 24</xref>)和前可以准确评估(<xref ref-type="bibr" rid="B16"> 16</xref>- - - - - -<xref ref-type="bibr" rid="B19"> 19</xref>]。我们缴送工作测量表明,对于顶端上凸轮轴,prestin的功能首先出现在票数和达到成熟水平好(图<xref ref-type="fig" rid="fig4"> 4</xref>)。这个结果是一致的数据记录鼠标(<xref ref-type="bibr" rid="B39"> 39</xref>]。这个功能测量也是整合与免疫荧光染色和免疫印迹结果(数据<xref ref-type="fig" rid="fig2"> 2</xref>和<xref ref-type="fig" rid="fig3"> 3</xref>)。因此,我们建议,听觉中枢神经系统的发展,指出通过ABR反应的敏感性增加,发生prestin功能成熟,ohc的马达蛋白。</p><p>除了表达水平和功能活动,ohc的细胞长度绝对是一个重要因素,影响整体运动性ohc级。如图<xref ref-type="fig" rid="fig5"> 5</xref>,《纽约时报》的成熟细胞长度达到P5, P8,和基底的侯,中间,和顶端上凸轮轴。这些时间点比早些时候prestin表达式。因此,我们得出这样的结论:细胞长度的发展不可能限制因素来确定耳蜗功能的起始时间。已是不争的基底段耳蜗回应高频刺激而更多的顶端部分调整到低频率。我们的数据显示,prestin的时空表达模式和发展听觉脑干反应高度整合。更可能的表达和功能发展成熟度prestin可能发挥关键作用的听证会。</p></sec> <sec id="sec5"> <title>5。结论</t我tle><p>总之,我们的结果表明,该表达式模式ohc prestin和nfl功能的听觉脑干反应的发展同步。这个发现表明prestin的表达和功能发展可能确定听到老鼠的发病。</p></sec> <back> <sec> <title>相互竞争的利益</t我tle><p>作者宣称没有利益冲突。</p></sec> <ack> <title>确认</t我tle><p>这项工作是由973项目支持(2014 cb943002)和中国国家自然科学基金(31271179,31271179)。</p></一个ck> <ref-list> <ref id="B1" content-type="article"> <label>1</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 张</surname> <given-names> l . I。</given-names> </name> <name> <surname> 保</surname> <given-names> 年代。</given-names> </name> <name> <surname> 梅泽尼奇</surname> <given-names> M . M。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 持久的和特定的早期以初级听觉皮层声学环境的影响</一个rticle-title> <source> <italic> 自然神经科学</我t一个l我c> <year> 2001年</year> <volume> 4</volume> <issue> 11</我ssue> <fpage> 1123年</fpage> <lpage> 1130年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1038 / nn745</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0035705285</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B2" content-type="article"> <label>2</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> de Villers-Sidani</surname> <given-names> E。</given-names> </name> <name> <surname> 常</surname> <given-names> e . F。</given-names> </name> <name> <surname> 保</surname> <given-names> 年代。</given-names> </name> <name> <surname> 梅泽尼奇</surname> <given-names> M . M。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 中定义的关键时期窗口光谱调谐初级听觉皮层(A1)老鼠</一个rticle-title> <source> <italic> 《神经科学杂志》上</我t一个l我c> <year> 2007年</year> <volume> 27</volume> <issue> 1</我ssue> <fpage> 180年</fpage> <lpage> 189年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1523 / jneurosci.3227 - 06.2007</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 33846158110</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B3" content-type="article"> <label>3</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 太阳</surname> <given-names> y . J。</given-names> </name> <name> <surname> 吴</surname> <given-names> g·K。</given-names> </name> <name> <surname> 刘</surname> <given-names> B.-H。</given-names> </name> <name> <surname> 李</surname> <given-names> P。</given-names> </name> <name> <surname> 周</surname> <given-names> M。</given-names> </name> <name> <surname> 肖</surname> <given-names> Z。</given-names> </name> <name> <surname> 道</surname> <given-names> h·W。</given-names> </name> <name> <surname> 张</surname> <given-names> l . I。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 微调听觉皮层的兴奋和抑制pre-balanced发展</一个rticle-title> <source> <italic> 自然</我t一个l我c> <year> 2010年</year> <volume> 465年</volume> <issue> 7300年</我ssue> <fpage> 927年</fpage> <lpage> 931年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1038 / nature09079</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 77953727704</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B4" content-type="article"> <label>4</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Sanes——</surname> <given-names> d . H。</given-names> </name> <name> <surname> 保</surname> <given-names> 年代。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 优化发展听觉中枢神经系统</一个rticle-title> <source> <italic> 目前在神经生物学的观点</我t一个l我c> <year> 2009年</year> <volume> 19</volume> <issue> 2</我ssue> <fpage> 188年</fpage> <lpage> 199年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / j.conb.2009.05.014</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 67650759648</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B5" content-type="article"> <label>5</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Froemke</surname> <given-names> r . C。</given-names> </name> <name> <surname> 琼斯</surname> <given-names> b . J。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 听觉皮质突触接受领域的发展</一个rticle-title> <source> <italic> 神经科学和生物行为的评论</我t一个l我c> <year> 2011年</year> <volume> 35</volume> <issue> 10</我ssue> <fpage> 2105年</fpage> <lpage> 2113年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / j.neubiorev.2011.02.006</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 80052705581</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B6" content-type="article"> <label>6</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Dorrn</surname> <given-names> a . L。</given-names> </name> <name> <surname> 元</surname> <given-names> K。</given-names> </name> <name> <surname> 巴克</surname> <given-names> a·J。</given-names> </name> <name> <surname> 的妇女不同</surname> <given-names> c, E。</given-names> </name> <name> <surname> Froemke</surname> <given-names> r . C。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 发展感官体验平衡大脑皮层兴奋和抑制</一个rticle-title> <source> <italic> 自然</我t一个l我c> <year> 2010年</year> <volume> 465年</volume> <issue> 7300年</我ssue> <fpage> 932年</fpage> <lpage> 936年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1038 / nature09119</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 77953690620</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B7" content-type="article"> <label>7</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 布劳内尔</surname> <given-names> w·E。</given-names> </name> <name> <surname> 贝德</surname> <given-names> c·R。</given-names> </name> <name> <surname> 贝特朗</surname> <given-names> D。</given-names> </name> <name> <surname> De Ribaupierre</surname> <given-names> Y。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 诱发的力学响应孤立耳蜗外毛细胞</一个rticle-title> <source> <italic> 科学</我t一个l我c> <year> 1985年</year> <volume> 227年</volume> <issue> 4683年</我ssue> <fpage> 194年</fpage> <lpage> 196年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1126 / science.3966153</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0021915137</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B8" content-type="article"> <label>8</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Dallos</surname> <given-names> P。</given-names> </name> <name> <surname> 埃文斯</surname> <given-names> b . N。</given-names> </name> <name> <surname> Hallworth</surname> <given-names> R。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 自然的运动元素动电的形状变化的耳蜗外毛细胞</一个rticle-title> <source> <italic> 自然</我t一个l我c> <year> 1991年</year> <volume> 350年</volume> <issue> 6314年</我ssue> <fpage> 155年</fpage> <lpage> 157年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1038 / 350155 a0</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0025911650</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B9" content-type="article"> <label>9</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Dallos</surname> <given-names> P。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 活跃的耳蜗</一个rticle-title> <source> <italic> 《神经科学杂志》上</我t一个l我c> <year> 1992年</year> <volume> 12</volume> <issue> 12</我ssue> <fpage> 4575年</fpage> <lpage> 4585年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0026442163</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B10" content-type="article"> <label>10</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Dallos</surname> <given-names> P。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 耳蜗放大,外毛细胞和prestin</一个rticle-title> <source> <italic> 目前在神经生物学的观点</我t一个l我c> <year> 2008年</year> <volume> 18</volume> <issue> 4</我ssue> <fpage> 370年</fpage> <lpage> 376年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / j.conb.2008.08.016</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 55349149640</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B11" content-type="article"> <label>11</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 郑</surname> <given-names> J。</given-names> </name> <name> <surname> 沈</surname> <given-names> W。</given-names> </name> <name> <surname> 他</surname> <given-names> d . Z Z。</given-names> </name> <name> <surname> 长</surname> <given-names> k B。</given-names> </name> <name> <surname> 麦迪逊</surname> <given-names> l D。</given-names> </name> <name> <surname> Dallos</surname> <given-names> P。</given-names> </name> </person-group> <article-title> Prestin是耳蜗外毛细胞的马达蛋白</一个rticle-title> <source> <italic> 自然</我t一个l我c> <year> 2000年</year> <volume> 405年</volume> <issue> 6783年</我ssue> <fpage> 149年</fpage> <lpage> 155年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1038 / 35012009</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0034636553</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B12" content-type="article"> <label>12</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 他</surname> <given-names> d . Z Z。</given-names> </name> <name> <surname> 埃文斯</surname> <given-names> b . N。</given-names> </name> <name> <surname> Dallos</surname> <given-names> P。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 第一次出现在新生儿和发展electromotility沙鼠外毛细胞</一个rticle-title> <source> <italic> 听力的研究</我t一个l我c> <year> 1994年</year> <volume> 78年</volume> <issue> 1</我ssue> <fpage> 77年</fpage> <lpage> 90年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / 0378 - 5955 (94)90046 - 9</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0028022597</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B13" content-type="article"> <label>13</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Waguespack</surname> <given-names> J。</given-names> </name> <name> <surname> 萨勒斯</surname> <given-names> f . T。</given-names> </name> <name> <surname> Kachar</surname> <given-names> B。</given-names> </name> <name> <surname> 里奇</surname> <given-names> a·J。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 逐步转导的形态和功能的成熟大鼠外毛细胞</一个rticle-title> <source> <italic> 《神经科学杂志》上</我t一个l我c> <year> 2007年</year> <volume> 27</volume> <issue> 50</我ssue> <fpage> 13890年</fpage> <lpage> 13902年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1523 / jneurosci.2159 - 07.2007</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 37249014360</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B14" content-type="article"> <label>14</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Belyantseva</surname> <given-names> 我一个。</given-names> </name> <name> <surname> 阿德勒</surname> <given-names> h·J。</given-names> </name> <name> <surname> Curi</surname> <given-names> R。</given-names> </name> <name> <surname> Frolenkov</surname> <given-names> g . I。</given-names> </name> <name> <surname> Kachar</surname> <given-names> B。</given-names> </name> </person-group> <article-title> prestin和糖转运体的表达和本地化GLUT-5 electromotility发展中耳蜗外毛细胞</一个rticle-title> <source> <italic> 《神经科学杂志》上</我t一个l我c> <year> 2000年</year> <volume> 20.</volume> <issue> 24</我ssue> <pub-id pub-id-type="publisher-id"> RC116</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0034672784</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B15" content-type="article"> <label>15</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 李</surname> <given-names> C。</given-names> </name> <name> <surname> 陈</surname> <given-names> 年代。</given-names> </name> <name> <surname> 余</surname> <given-names> Y。</given-names> </name> <etal></etal> </person-group> <article-title> BIG1, brefeldin A-inhibited鸟嘌呤nucleotide-exchange因素,需要GABA-gated Cl<sup>- - - - - -</sup>通过调节GABA涌入<sub>一个</sub>受体贩卖</一个rticle-title> <source> <italic> 分子神经生物学</我t一个l我c> <year> 2014年</year> <volume> 49</volume> <issue> 2</我ssue> <fpage> 808年</fpage> <lpage> 819年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1007 / s12035 - 013 - 8558 - 8</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B16" content-type="article"> <label>16</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 唐ydF4y2Ba</surname> <given-names> X。</given-names> </name> <name> <surname> Pecka</surname> <given-names> j·L。</given-names> </name> <name> <surname> 唐</surname> <given-names> J。</given-names> </name> <name> <surname> Okoruwa</surname> <given-names> o . E。</given-names> </name> <name> <surname> 张</surname> <given-names> Q。</given-names> </name> <name> <surname> 贝赛</surname> <given-names> k W。</given-names> </name> <name> <surname> 他</surname> <given-names> d . Z Z。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 从斑马鱼到哺乳动物:prestin的功能演变,耳蜗外毛细胞的马达蛋白</一个rticle-title> <source> <italic> 神经生理学杂志</我t一个l我c> <year> 2011年</year> <volume> 105年</volume> <issue> 1</我ssue> <fpage> 36</fpage> <lpage> 44</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1152 / jn.00234.2010</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 78651460278</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B17" content-type="article"> <label>17</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 唐ydF4y2Ba</surname> <given-names> X。</given-names> </name> <name> <surname> Pecka</surname> <given-names> j·L。</given-names> </name> <name> <surname> 唐</surname> <given-names> J。</given-names> </name> <name> <surname> 风之子</surname> <given-names> 年代。</given-names> </name> <name> <surname> 贝赛</surname> <given-names> k W。</given-names> </name> <name> <surname> 他</surname> <given-names> d . Z Z。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 11个氨基酸的主题结构适应性,促进运动能力的真兽亚纲动物prestin</一个rticle-title> <source> <italic> 《细胞科学</我t一个l我c> <year> 2012年</year> <volume> 125年,第4部分</volume> <fpage> 1039年</fpage> <lpage> 1047年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1242 / jcs.097337</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 84861208645</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B18" content-type="article"> <label>18</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 唐</surname> <given-names> J。</given-names> </name> <name> <surname> Pecka</surname> <given-names> j·L。</given-names> </name> <name> <surname> 唐ydF4y2Ba</surname> <given-names> X。</given-names> </name> <name> <surname> 贝赛</surname> <given-names> k W。</given-names> </name> <name> <surname> 他</surname> <given-names> d . Z Z。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 工程pendrin蛋白质、离子转运体和分子马达</一个rticle-title> <source> <italic> 《生物化学》杂志上</我t一个l我c> <year> 2011年</year> <volume> 286年</volume> <issue> 35</我ssue> <fpage> 31014年</fpage> <lpage> 31021年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1074 / jbc.m111.259564</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 80052217354</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B19" content-type="article"> <label>19</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 唐</surname> <given-names> J。</given-names> </name> <name> <surname> Pecka</surname> <given-names> j·L。</given-names> </name> <name> <surname> Fritzsch</surname> <given-names> B。</given-names> </name> <name> <surname> 贝赛</surname> <given-names> k W。</given-names> </name> <name> <surname> 他</surname> <given-names> d . Z Z。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 蜥蜴和青蛙prestin:进化洞察功能变化</一个rticle-title> <source> <italic> 《公共科学图书馆•综合》</我t一个l我c> <year> 2013年</year> <volume> 8</volume> <issue> 1</我ssue> <pub-id pub-id-type="publisher-id"> e54388</pub-id> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1371 / journal.pone.0054388</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 84872464116</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B20" content-type="article"> <label>20.</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Santos-Sacchi</surname> <given-names> J。</given-names> </name> <name> <surname> 吴</surname> <given-names> M。</given-names> </name> <name> <surname> Kakehata</surname> <given-names> 年代。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 呋喃苯胺酸改变非线性电容在孤立的外毛细胞</一个rticle-title> <source> <italic> 听力的研究</我t一个l我c> <year> 2001年</year> <volume> 159年</volume> <issue> 1 - 2</我ssue> <fpage> 69年</fpage> <lpage> 73年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / s0378 - 5955 (01) 00321 - 5</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0034904775</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B21" content-type="article"> <label>21</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Santos-Sacchi</surname> <given-names> J。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 可逆抑制压敏电阻器外毛细胞能动性和电容</一个rticle-title> <source> <italic> 《神经科学杂志》上</我t一个l我c> <year> 1991年</year> <volume> 11</volume> <issue> 10</我ssue> <fpage> 3096年</fpage> <lpage> 3110年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0025998241</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B22" content-type="article"> <label>22</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 他</surname> <given-names> d . Z Z。</given-names> </name> <name> <surname> 郑</surname> <given-names> J。</given-names> </name> <name> <surname> 边缘</surname> <given-names> R。</given-names> </name> <name> <surname> Dallos</surname> <given-names> P。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 耳蜗内毛细胞的隔离</一个rticle-title> <source> <italic> 听力的研究</我t一个l我c> <year> 2000年</year> <volume> 145年</volume> <issue> 1 - 2</我ssue> <fpage> 156年</fpage> <lpage> 160年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="pmid"> 10867288</pub-id> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / s0378 - 5955 (00) 00084 - 8</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0034091599</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 10867288</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B23" content-type="book"> <label>23</l一个bel> <element-citation publication-type="book"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 安石</surname> <given-names> j·F。</given-names> </name> </person-group> <source> <italic> 耳蜗机制:结构、功能和模式</我t一个l我c> <year> 1989年</year> <publisher-name> 施普林格科学与商业媒体</publisher-name> </element-citation> </ref> <ref id="B24" content-type="article"> <label>24</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 本</surname> <given-names> K。</given-names> </name> <name> <surname> Dallos</surname> <given-names> P。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 证据表明prestin至少有两个压敏电阻器的步骤</一个rticle-title> <source> <italic> 《生物化学》杂志上</我t一个l我c> <year> 2011年</year> <volume> 286年</volume> <issue> 3</我ssue> <fpage> 2297年</fpage> <lpage> 2307年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1074 / jbc.m110.185694</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 78751509553</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B25" content-type="book"> <label>25</l一个bel> <element-citation publication-type="book"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Møller</surname> <given-names> 一个。</given-names> </name> </person-group> <source> <italic> 听力:解剖学、生理学、听觉系统的障碍</我t一个l我c> <year> 2006年</year> <publisher-loc> 牛津大学,英国</publisher-loc> <publisher-name> 爱思唯尔</publisher-name> </element-citation> </ref> <ref id="B26" content-type="article"> <label>26</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Scimemi</surname> <given-names> P。</given-names> </name> <name> <surname> Santarelli</surname> <given-names> R。</given-names> </name> <name> <surname> Selmo</surname> <given-names> 一个。</given-names> </name> <name> <surname> Mammano</surname> <given-names> F。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 听觉脑干反应点击和语调C57 BL / 6 j小鼠中爆发</一个rticle-title> <source> <italic> Acta Otorhinolaryngologica Italica</我t一个l我c> <year> 2014年</year> <volume> 34</volume> <issue> 4</我ssue> <fpage> 264年</fpage> <lpage> 271年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 84923348659</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B27" content-type="article"> <label>27</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Geal-Dor</surname> <given-names> M。</given-names> </name> <name> <surname> 弗里曼</surname> <given-names> 年代。</given-names> </name> <name> <surname> 李</surname> <given-names> G。</given-names> </name> <name> <surname> Sohmer</surname> <given-names> H。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 新生儿的听力发展老鼠:空气和骨骼进行了ABR阈值</一个rticle-title> <source> <italic> 听力的研究</我t一个l我c> <year> 1993年</year> <volume> 69年</volume> <issue> 1 - 2</我ssue> <fpage> 236年</fpage> <lpage> 242年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / 0378 - 5955 (93)90113 - f</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 0027170951</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B28" content-type="article"> <label>28</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 凯利</surname> <given-names> m . C。</given-names> </name> <name> <surname> 陈</surname> <given-names> P。</given-names> </name> </person-group> <article-title> 哺乳动物耳蜗的形式和功能的发展</一个rticle-title> <source> <italic> 目前在神经生物学的观点</我t一个l我c> <year> 2009年</year> <volume> 19</volume> <issue> 4</我ssue> <fpage> 395年</fpage> <lpage> 401年</lp一个ge> <pub-id pub-id-type="pmid"> 19683914</pub-id> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / j.conb.2009.07.010</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 69449084127</pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 19683914</pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B29" content-type="article"> <label>29日</l一个bel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 林</surname> <given-names> 答:K。</given-names> </name> <name> <surname> Fekete</surname> <given-names> d . 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C。</given-names> </name> <name> <surname> 苹果</surname> <given-names> j . M。</given-names> </name> <name> <surname> 实习医生</surname> <given-names> 大肠。</given-names> </name> <name> <surname> 古德里奇</surname> <given-names> l . 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