中性粒细胞胞浆autoantibody-(ANCA-)相关性血管炎(AAV)是一种自身免疫性疾病的特征在于通过小血管的少免疫坏死性炎症,具有13-20 /百万居民[年发病率
可溶性尿激酶纤溶酶原激活因子受体(suPAR)是一种来源于细胞膜结合的尿激酶纤溶酶原激活因子受体(uPAR)的裂解和释放,是纤溶酶原激活系统的一部分,参与炎症、蛋白水解、组织重塑和癌症转移等病理过程[
Wei等[
在本研究中,我们测量了中国AAV患者血浆suPAR的浓度。我们的主要目的是探讨血浆suPAR与临床参数的独立相关性以及与预后的关系。
共有90例确诊连续与同济医院肾内科AAV,2014年9至9月2016年,在参加了学习。积极为任何PR3-ANCAs或MPO-ANCAs患者被考虑列入(
每个受试者空腹(超过12小时)采血,取血后30分钟内1000g离心15min;然后将血浆分成等份,在-80℃保存直到使用。在整个研究过程中,避免了重复的冻融循环。
本研究经同济医院,华中科技大学的伦理委员会。所有受试者按照赫尔辛基之前入学的申告知情书面同意文件。
For all the enrolled patients, laboratory analyses information, including serum creatinine, high-sensitive C-reactive protein (CRP), erythrocyte sedimentation rate (ESR), procalcitonin (PCT), serum complement 3 (C3), and 24 h urine protein excretion levels, was derived from medical records. Serum CRP was measured using commercially enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits (Cat. no. LS-F26721, Lifespan Bio) according to the manufacturer’s instructions. The estimated glomerular filtration rate (eGFR) was calculated by means of the CKD-EPI equation [
血浆suPAR的水平通过使用根据制造商的说明可商购的人uPAR的Quantikine ELISA试剂盒(目录号DUP00,R&d系统,明尼阿波利斯,MN)测试。来自每个样品的suPAR的浓度使用曲线专家1.3(海姆斯DG,斯塔克维尔,密西西比州,USA)计算出的。suPAR的每隔半年加以分析,最后是所有样品的采集后再次分析。两次测量的平均值作为最终结果。所有试验一式两份;当标准误差在10%以上,所有样品都经常重新分析。
复合终点定义为肾功能进展为终末期肾病(终末期肾病)或全因死亡(以最先发生者为准)。ESRD被定义为需要肾脏替代治疗(如血液透析或腹膜透析)。采集样本时,采用伯明翰血管炎活动评分(BVAS)测量AAV的疾病活度[
为观察uPAR在肾组织中的表达,按照前文的方法对AAV患者和正常肾组织的肾活检进行uPAR的免疫组化染色[
为了研究在肾小球的表达uPAR的基因的不同,我们采用了Nephroseq数据库(
连续变量的数据表示为
共纳入90例AAV患者;其中41.1%为男性。研究人群的平均年龄为53.8岁。血浆suPAR平均浓度为
AAV患者的临床参数。
| 特征Ťh> | 值Ťh> | |||
|---|---|---|---|---|
| 患者数Ťd><Ťd一个lign="center">90Ťd>Ť[R><Ť[R> | 年龄( |
|||
| 性别(男/女)Ťd><Ťd一个lign="center">37/53Ťd>Ť[R><Ť[R> | MPO-ANCA / PR3-ANCAŤd><Ťd一个lign="center">80/10Ťd>Ť[R><Ť[R> | 初始血清肌酐( | 表皮生长因子受体(mL / min / 1.73米<小号up>2小号up>)<小号up>一个小号up>(中位数,IQR)Ťd><Ťd一个lign="center">22.9 (9.57,64.23)Ťd>Ť[R><Ť[R> | Urinary protein (g/24 h) ( |
| 透析相关的演示Ťd><Ťd一个lign="center">17 (18.9%)Ťd>Ť[R><Ť[R> | CRP(毫克/升)( |
|||
| ESR (mm/1 h) ( |
||||
| PCT (ng/mL)(中位数,IQR) ( | C3(克/升)( |
|||
| MPO (RU/mL)(中位数,IQR)Ťd><Ťd一个lign="center">159.7 (98.8,235.7)Ťd>Ť[R><Ť[R> | BVAS( |
一个小号up>
收集AAV、IgAN、LN患者和健康对照组的血浆样本。如图所示
血浆suPAR的在不同的组。(a)以抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎(AAV)患者suPAR的的血浆水平,IgA肾病患者和LN,和正常对照。(b)中的血浆水平的suPAR的在AAV患者有效(
此外,谁被初步诊断为肾功能损害AAV的57例患者中,有30返回到我们医院两个月门诊出院后,其中18根据临床症状和BVAS达到部分缓解。我们比较谁在疾病(活动期和部分缓解)的不同相位重复采样这些18名AAV患者血浆suPAR的浓度。在血浆suPAR的水平的显著减少被局部疾病缓解后发现(
我们分析了suPAR表达水平与AAV患者疾病活动的临床参数之间的关系(图)
血浆suPAR水平与(a)血清肌酐、(b) eGFR和(c)伯明翰血管炎活动评分(BVAS)的相关性。
血浆水平suPAR的与(A)的血浆C3水平的相关性(
随访的患者的平均长度与AAV为22(1-51范围)个月。在随访期间,18例死亡,11例患者进展至终末期肾病,29例患者发生复合终点。我们观察到开发谁比那些复合终点没有它AAV患者显著较高的血浆suPAR的水平(
AAV患者血浆suPAR水平与预后的关系。(a)根据suPAR状态,Kaplan-Meier生存曲线显示与复合结局(死亡或ESRD)相关。(b)根据suPAR状态,Kaplan-Meier生存曲线显示与ESRD相关。(c) suPAR在AAV患者的受试者工作特征(ROC)分析。
表
患者AAV复合终点的多因素分析。
| 单变量Ťh> | 多元 |
多元<小号up>†小号up> | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| HR(95%CI)Ťh> |
| HR(95%CI)Ťh> |
| HR(95%CI)Ťh> |
| |
| 血浆suPAR水平(每500 pg/mL升高)Ťd><Ťd一个lign="center">1.07 (1.03 - -1.12)Ťd><Ťd一个lign="center">0.002Ťd><Ťd一个lign="center">1.05(1.01-1.11)Ťd><Ťd一个lign="center">0.043Ťd><Ťd一个lign="center">1.02 (0.96 - -1.08)Ťd><Ťd一个lign="center">0.563Ťd>Ť[R><Ť[R> | 年龄(年)<小号up>§小号up> | 1.04(1.01-1.08)Ťd><Ťd一个lign="center">0.017Ťd><Ťd一个lign="center">1.03 (0.99 - -1.07)Ťd><Ťd一个lign="center">0.128Ťd><Ťd一个lign="center">1.05(1.01-1.10)Ťd><Ťd一个lign="center">0.025Ťd>Ť[R><Ť[R> | 性别(男性与女性)Ťd><Ťd一个lign="center">1.02(0.48-2.19)Ťd><Ťd一个lign="center">0.957Ťd><Ťd一个lign="center">0.98 (0.46 - -2.11)Ťd><Ťd一个lign="center">0.961Ťd><Ťd一个lign="center">0.74(0.30-1.83)Ťd><Ťd一个lign="center">0.515Ťd>Ť[R><Ť[R> | 初始血清肌酐(每mg/dL)Ťd><Ťd一个lign="center">1.17 (1.06 - -1.30)Ťd><Ťd一个lign="center">0.003Ťd><Ťd一个lign="center">-Ťd><Ťd一个lign="center">-Ťd><Ťd一个lign="center">1.22 (1.06 - -1.41)Ťd><Ťd一个lign="center">0.006Ťd>Ť[R><Ť[R> | Urinary protein (per g/24 h)Ťd><Ťd一个lign="center">0.93(0.66-1.30)Ťd><Ťd一个lign="center">0.699Ťd><Ťd一个lign="center">-Ťd><Ťd一个lign="center">-Ťd><Ťd一个lign="center">1.03(0.71-1.49)Ťd><Ťd一个lign="center">0.879Ťd>Ť[R>Ťbody> | |
为了验证等离子体suPAR的的复合结果的预测效率,对于曲线下患者不同的结果(面积产生的ROC曲线分析
suPAR是一种从细胞膜结合的uPAR裂解和释放而来的蛋白质,据报道与多种疾病有关[
在目前的研究中,我们发现90例AAV患者血浆suPAR水平与健康对照组相比升高。与此一致的是,这与AAV患者肾活检中uPAR表达的增加是平行的。先前的报道显示,13例mpo - anca相关性肾小球肾炎患者的suPAR水平明显高于健康对照组[
与藤本等人的研究结果相似[
越来越多的动物和临床研究表明,补体通路的替代激活可能参与了AAV的发生[
此外,我们观察到,第一次,血浆suPAR的水平和AAV患者的综合结果之间有很强的正相关性年龄和性别的调整之后。但该协会考虑到初始血清肌酐浓度,这可能是由suPAR的水平和肾功能之间的密切相关性,说明后消失。因此,我们建议,血浆suPAR的可能参与AAV的发病机制,但不会加速病情恶化。然而,ROC曲线分析表明,suPAR的有前途的预测值(
我们的研究也有一些局限性值得考虑。首先,虽然大多数的结果在统计学上显著,本研究的样本量较小。第二,我们没有分析血浆suPAR的水平和AAV患者肾组织肾脏病理参数之间的关系。第三,有可能造成治疗医师的有关ANCA状况的信息之间的差异某些疾病的评估偏差。因此,需要更多的前瞻性研究来证实在预测AAV患者的治疗效果血浆suPAR的水平的作用。
总之,我们目前的研究发现血浆suPAR水平与疾病活动性显著相关,可能是不良预后的一个因素。尚需进一步研究suPAR是否在AAV疾病进展中起作用。
支持本研究结果的数据可从通讯作者刘清泉获得。这些数据尚未公开,因为其中包含的信息可能会危及研究参与者的隐私或同意。
作者声明,本论文的发表不存在任何利益冲突。
吕永满和刘清泉对该作品的贡献是平等的,应该被认为是共同通讯作者。
感谢郭水明博士对实验构思和数据分析的指导。我们也非常感谢所有的血浆标本捐献者。本研究得到国家自然科学基金(No. 81800609)的资助。
附图1:正常对照和AAV患者肾脏标本肾小球和小管的uPAR免疫组化染色。补充图2:血管炎患者肾小球uPAR基因表达分析。肾小球uPAR基因的表达分析使用了可公开获取的肾小球数据集。直方图显示血管炎患者的uPAR基因表达明显高于健康对照组(