心肌梗死 炎症介质 1466 - 1861 0962 - 9351 Hindawi 10.1155 / 2020/6364258 6364258 研究文章 高CD163表情古典单核细胞与免疫控制Noncirrhotic乙型肝炎病毒感染的患者 https://orcid.org/0000 - 0002 - 3815 - 3745 Parfieniuk-Kowerda 安娜 1 Grubczak 卡米尔 2 https://orcid.org/0000 - 0002 - 8980 - 1474 Eljaszewicz Andrzej 2 https://orcid.org/0000 - 0002 - 7567 - 1023 Świderska 马格达莱纳 1 Maciaszek 马格达莱纳 1 Panasiuk Anatol 1 Jaroszewicz 杰西 1 https://orcid.org/0000 - 0003 - 3394 - 1635 Flisiak 罗伯特。 1 https://orcid.org/0000 - 0001 - 7183 - 3120 Moniuszko 戈 2 3 Kleinjan 亚历克斯 1 传染病和肝脏病学 比亚韦斯托克医科大学的 14 Zurawia圣。 15 - 540比亚韦斯托克 波兰 umb.edu.pl 2 再生医学和免疫调节 比亚韦斯托克医科大学的 13 Waszyngton圣。 15 - 269比亚韦斯托克 波兰 umb.edu.pl 3 变态反应学和内科 比亚韦斯托克医科大学的 24 m . Sklodowskiej-Curie圣。 15 - 276比亚韦斯托克 波兰 umb.edu.pl 2020年 29日 3 2020年 2020年 13 11 2019年 25 01 2020年 05年 03 2020年 29日 3 2020年 2020年 版权©2020年安娜Parfieniuk-Kowerda et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

背景和目的。单核细胞的功能障碍可能导致乙型肝炎病毒感染的持久性。本研究旨在评估单核细胞亚群,单核细胞表达CD163,等离子sCD163, sTWEAK慢性HBeAg-negative HBV感染患者在疾病的不同阶段。 方法。史的慢性乙肝患者59,9 HBsAg / anti-HBs血清转化,被录取。对照组由15名健康志愿者。亚种群的外周血单核细胞CD14和CD16区分。膜的表达CD163评估通过流式细胞术,等离子体由ELISA sCD163浓度,sTWEAK bead-based多路复用免疫测定系统。 结果。CD163表达式在古典和中间增加单核细胞在慢乙肝患者和那些HBsAg / anti-HBs血清转化。CD163表情古典单核细胞与免疫状态控制,从而显著肝炎乙型肝炎病毒感染与活跃。等离子体sCD163浓度增加的慢乙肝患者和那些HBsAg / anti-HBs血清转化与对照组。积极的血浆sCD163和ALT之间的相关性,以及APRI被观察到。慢性乙肝患者的血浆sTWEAK浓度较低相比HBsAg / anti-HBs患者血清转化。 结论。接触乙肝病毒抗原改变单核细胞子集的频率和激活。CD163古典单核细胞上的表达增加与提高乙型肝炎病毒感染的免疫控制。患者有表面抗原的表达最高CD163单核细胞,这表明单核细胞参与免疫控制乙型肝炎病毒感染。持续的炎症是伴随着更高的CD163表达式和sCD163 sTWEAK水平和低水平。

 Ministerstwo Nauki我Szkolnictwa Wyzszego IP2014 035173 1。介绍

慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是伴随着免疫系统功能的损伤导致增强病毒复制和肝脏疾病的进展。重要的是,它还没有完全理解为什么一些慢性感染患者能够控制乙肝病毒复制,而在大多数感染,病毒逃逸免疫监视。疾病的动力学在e抗原(-)肝炎尤为明显,波动的病毒dna和炎性活动是一个众所周知的现象。在一些病人,持久免疫控制病毒复制的自然获得的,定义为e抗原(-)感染。这些患者表现出较低的有利预后疾病进展的风险。已经证实,对象实现持久免疫控制的可能性最高HBsAg损失和血清转化( 1, 2]。激活内源性干扰素系统,多功能HBV-specific CD4 t细胞,t细胞克服疲惫,和先天immunity-associated因素提出了扮演一个角色在HBV病毒载量(重要的)控制 3, 4]。了解免疫乙肝病毒的感染控制机制可能允许优化目前新颖的免疫疗法的治疗方法和设计。

的免疫细胞,单核细胞代表一个异种的人口,据CD14和CD16表达的差异,可分为三个功能不同的子集,即古典(CD14 + + CD16 -)、中级(CD14 + + CD16 +),模(CD14 + CD16 + +)单核细胞。在生理条件下,连续三个子集,分别代表的单核细胞成熟阶段( 5, 6]。古典CD14 + + CD16 -单核细胞构成的主要部分血液单核细胞(80 - 90%)。这些细胞被认为是未激活的细胞具有吞噬活动。刺激,古典单核细胞获得CD16标记表达和分泌多种细胞因子和趋化因子。在生理条件下,中间CD14 + + CD16 +单核细胞占大约5%的总循环单核细胞和代表古典和模之间的过渡状态的成熟细胞。高的中间单核细胞可以作为M2巨噬细胞前体消炎LPS刺激后,产生大量的il - 10 ( 7- - - - - - 9]。M2-type巨噬细胞在组织修复中能性质;然而,它还没有完全阐明他们是否能开车或导致肝脏炎症和纤维化的决议 10]。有证据表明高架数字中间的单核细胞在终末期肝病,在那里,他们显示调节肝纤维发生( 11, 12]。模CD14 + CD16 + +细胞代表最成熟的子集,构成循环单核细胞总数的10%左右。他们显示重要的促炎属性,分泌大量的TNF和il - 1 β针对仿真( 7]。高数量的模单核细胞观察各种炎症条件( 13- - - - - - 15]。曾有报道称单核细胞的功能障碍可能导致乙型肝炎病毒感染的持久性。重要的是,单核细胞是被认为是唯一的抗原递呈细胞,可以吸收和储存高免疫原性病毒抗原( 16]。大量研究表明,模式识别受体的表达单核细胞减少HBV-infected个体,从而影响抗病毒免疫反应和细胞因子分泌的起始 17, 18]。

CD163被认为是一个单核细胞的表型标记抗炎潜力和单核细胞/巨噬细胞的分化标记,该功能主要是作为haemoglobin-haptoglobin复合物的清道夫受体和肿瘤坏死因子(TNF)——弱凋亡的诱导物(调整)。此外,CD163参与绑定/识别细菌和病毒抗原。一般来说,细胞表达CD163由抗炎因子调节,而促炎的信号表达下调其表达式。可溶性CD163 (sCD163)存在于血清中由于脱落的CD163膜形式激活monocyte-macrophage-lineage细胞在炎症过程中( 19]。肝脏枯氏细胞约占80%的巨噬细胞在体内,血清水平sCD163提出了作为一种新的生物标志物肝脏坏死性炎症和纤维化 19, 20.]。

调整作为肿瘤坏死因子超家族的成员,调节炎症反应、细胞增殖状态、分化和细胞生存。调整是一个膜锚定受体广泛表达,但也有一个裂解可溶性形式(sTWEAK)。最新的证据表明,调整可能参与再生和纤维发生肝脏通过扩散激活肝脏祖细胞和肝星状细胞( 21, 22]。有趣的是,CD163分子可能函数作为sTWEAK清道夫受体,从而调节炎症反应( 23]。

目前,有单核细胞表达CD163稀缺数据,sCD163血清,sTWEAK在慢性乙型肝炎病毒感染。因此,在当前的研究中,我们首次着手分析单核亚种群之间的相互关系,单核细胞CD163表达式,等离子sCD163, sTWEAK在乙型肝炎病毒感染的各个阶段,包括免疫控制阶段。

 2。材料和方法 2.1。研究了人口

59慢性HBeAg-negative患者乙型肝炎病毒感染(慢性乙肝),6与自发解决乙肝病毒感染血清转化HBsAg / anti-HBs≥20年前(RES)和3治疗引起血清转化HBsAg / anti-HBs≥2年(S-CONV)早些时候,参加这项研究。长期随访(> 36个月)在慢性感染的慢性乙肝患者允许三种模式区分根据当前EASL建议,以同样的方式,因为它是在我们之前的研究 24, 25]。

HBeAg-negative慢性感染(埃尼集团, n = 17 )- - - 乙型肝炎病毒 − DNA < 2000年 U / l ,正常的转氨酶

HBeAg-negative慢性乙型肝炎naive-to-treatment(掺 n = 6 )- - - 乙型肝炎病毒 − DNA > 2000年 U / l 和转氨酶升高

掺在干扰素有(t) ide模拟治疗(替诺福韦 n = 7 ,恩替卡韦 n = 6 ,阿德福韦 n = 2 或拉米夫定 n = 2 时,样本收集)和完整的病毒dna 抑制 > 24 个月(SUPR, n = 17 )。

另外两组杰出的基于病毒dna的负载和转氨酶水平:

low-replicative肝炎(ENH-LR) ( n = 3 )- - - 乙型肝炎病毒 − DNA < 2000年 U / l ,转氨酶升高

high-replicative患者 乙型肝炎病毒 − DNA > 2000年 U / l ,正常的转氨酶(ENI-HR) ( n = 16 )

研究群体的特点如表所示 1。对照组(HC)由15名健康志愿者。收集血液样本从禁食个人没有临床明显的急性炎症感染。知情同意是获得所有的人包括在这项研究。

人口统计学、临床和实验室特征研究慢性乙肝组。N / A: nonapplicable。

乙肝病毒的患者 HBsAg / anti-HBs有 健康受试者
流行病学
病人 60 9 15
性别、m / f (%) 35/25 (58.3/41.7) 6/3 (66.7/33.3) 7/8 (46.7/53.3)
年龄、中值、范围 37岁,20 - 84 57岁的23 - 79 38岁的29 - 61
实验室结果
ALT (U / L)、中值、范围 26日,11 - 100 22日,10-42 26日,11-43
AST (U / L)、中值、范围 21日8-53 N /一个 N /一个
CRP(毫克/升)、中值、范围( ULN = 5 毫克/升) 0.8,0.1 - -4.0 1.3,0.6 - -1.8 0.6,0.1 - -1.8
白细胞(/问),中值,范围 5.62,3.36 - -9.0 6.36,4.48 - -8.67 6.05,4.05 - -7.21
单核细胞(%)、中值、范围 10.0,6.4 - -18.5 10.7,8.5 - -17.9 9.4,7.1 - -11.7
中性粒细胞(%)、中值、范围 54.1,40.7 - -70.0 53.3,10.1 - -65.4 51.8,43.7 - -66.6
淋巴细胞(%)、中值、范围 32.0,18.6 - -44.3 34.8,23.2 - -37.6 34.1,24.5 - -42.2
Thrombocytes (/ nL)、中值、范围 209年,40 - 401 192年,101 - 272 233年,178 - 306
AST血小板比率指数(APRI) 0.25,0.09 - -1.0 N /一个 N /一个
病毒dna (log10国际单位/毫升)、中值、范围 2.57,1.28 - -7.64 N /一个 N /一个
qHBsAg (log10国际单位/毫升)、中值、范围 4.06,0.95 - -4.69 N /一个 N /一个
乙型肝炎病毒基因型
一个 13 (72.2) N /一个 N /一个
+ D 1 (0.6) N /一个 N /一个
D 2 (1.2) N /一个 N /一个
F 1 (0.6) N /一个 N /一个
H 1 (0.6) N /一个 N /一个
朔伊尔Histology-necroinflammatory活动年级(), n = 28
1, n (%) 8 (28.6) N /一个 N /一个
2, n (%) 13 (46.4) N /一个 N /一个
3, n (%) 7 (25.0) N /一个 N /一个
4, n (%) 0 N /一个 N /一个
朔伊尔Histology-fibrosis阶段()
1, n (%) 21日(75.0) N /一个 N /一个
2, n (%) 7 (25.0) N /一个 N /一个
3, n (%) 0 N /一个 N /一个
4, n (%) 0 N /一个 N /一个

研究的排除标准包括丙肝病毒、艾滋病毒、甲型肝炎感染,酒精性肝病,非酒精性脂肪肝炎,自身免疫性肝病,药物引起的肝损伤,肝外慢性炎性疾病,急性炎症的病因学,和恶性肿瘤。

这项研究是批准的机构(没有生命伦理委员会。R-I-002/497/2014)。研究中的所有程序执行按照道德标准的制度和国家研究委员会和1964年赫尔辛基宣言》及其修正案晚些时候或类似的道德标准。

 2.2。血液采集和流式细胞术

100年 μL新鲜EDTA-anticoagulated全血立即使用的荧光标记抗体染色:CD14 PerCP, CD16 FITC, HLA-DR APC, CD163 PE (BD生物科学、信息包含在表使用的抗体 2),根据stain-and-then-lyse-and-wash协议,如前所述 26]。Fluorescence-minus-one (FMO)控制被用于设置补偿,以确保正确的选通。标本采集进行使用FACSCalibur流式细胞分析仪(生物科学)正欲。收购了单核细胞总数事件构成 250年 × 10 5 为每个样本事件。使用FlowJo版本获得的数据进行分析。7.6.5软件(树明星)。单核细胞的控制策略来描述如图子集 1。单核细胞亚群提出了频率CD14-positive总池内单核细胞。三个单核细胞亚群是杰出的基础上CD14和CD16微分表达式。表达CD163既分析了平均荧光强度(MFI)封闭的单核细胞亚种群和CD163-postive细胞频率选择的数量。

单克隆抗体研究中使用的描述。

细胞表面标记 荧光染料 抗体克隆 公司
CD14 PerCP 米 φ票数 BD生物科学
CD16 FITC 3八国集团 BD生物科学
CD163 体育 全球健康行动计划/ 61 BD生物科学
HLA-DR APC TU36 BD生物科学

外周单核细胞频率在研究群体。(一)控制策略。(b) FMO控制所有研究群体(上层行)代表点块单核细胞在慢性乙肝,子集S-CONV + RES组和健康对照组。象限中的值表示的单核细胞比例子集。(c)总结的比较分析单核细胞在慢性乙肝,子集S-CONV + RES患者和健康对照组。 p 如果重要值显示。单杠表示中位数的单核细胞比例的子集。

 2.3。免疫测定

sCD163水平EDTA-plasma样本量化通过商用sCD163 DuoSet酶联免疫试剂盒(研发系统),根据制造商的说明(范围:156 pg / mL-10 ng / mL)。

等离子体浓度sTWEAK量化使用Luminex xMap技术(美国Bio-Rad Bio-Plex 200系统)——bead-based多路复用免疫测定系统在微型板块格式(检测极限(LOD): 0.5 pg / mL;分析工作范围:3.1 - -6772.8 pg / mL);猫。美国没有171 - al001m Bio-Rad)。

 2.4。统计分析

结果表示为中位数和范围,除非表示。以下非参数测试应用:Mann-Whitney U 测试和克鲁斯卡尔-沃利斯为单变量方差分析测试比较和斯皮尔曼等级相关分析测试。统计上显著 p 值< 0.05。Statistica 12为Windows用于执行分析(美国塔尔萨StatSoft Inc .)和图形演示使用GraphPad棱镜软件执行的结果(GraphPad棱镜软件公司,圣地亚哥,美国)。

 3所示。结果 3.1。频率的CD14 + + CD16 - CD14 + + CD16 +, CD14 + CD16 + +单核细胞在慢性乙型肝炎病毒感染

检查乙型肝炎病毒感染是否会影响单核细胞成分,我们评估的频率三个单核细胞的亚种。我们观察到传统的单核细胞在慢乙肝相比HC和少史的患者自发或药物引起HBsAg / anti-HBs血清转化(S-CONV + RES组)。中间单核细胞的百分比慢性乙肝没有差异,HC,和S-CONV + RES团体,而模单核细胞在慢性乙肝患者显著增加而HC(图 1 (c))。

 3.2。表达式的CD163外周血单核细胞在慢性乙型肝炎病毒感染的不同阶段

我们发现显著增加CD163表达古典单核细胞在慢性乙肝患者的人口和S-CONV + RES组与HC组(图 2(一个))。在慢性乙肝患者中,CD163古典单核细胞的表达明显高于比掺集团埃尼集团(数字 2 (b)和 2 (c))。有趣的是,在比较分析CD163表情古典单核细胞所有的组之间区分在这项研究中,我们观察到的最低HC CD163表达式。组间的乙型肝炎病毒感染(慢性乙肝和S-CONV + RES),最高CD163表达解决乙肝病毒感染患者血清转化HBsAg / anti-HBs (S-CONV + RES)和在埃尼low-replicative阶段,患者最低掺(方差分析 p = 0.02 的频率, p = 0.03 小额信贷机构)。总结,CD163古典单核细胞上的表达增加与改进的免疫控制HBV感染(掺< ENI-HR < ENH-LR < SUPR <埃尼≤S-CONV + RES)。

频率和CD163古典单核细胞内的表达。(一)代表直方图显示CD163表达在慢性乙肝,S-CONV + RES, HC组(实线)和足够的FMO控制(虚线)。(b)比较分析CD163表情古典单核细胞在慢性乙肝,S-CONV + RES, HC组。(c, d)的比较分析CD163表情古典单核细胞与慢性乙肝感染的阶段。数据表现为中间值25th和75年th百分位数和最小最大价值。

CD163表情中间单核细胞在慢性乙肝患者显著增加,在S-CONV + RES组相比,HC(图 3(一个));然而,我们没有观察到的差异CD163表达在慢性乙肝组(数字 3 (b)和 3 (c))。没有显著差异模CD163表情单核细胞在慢性乙肝,S-CONV + RES, HC组以及在慢性乙肝组(数字 4(一)- - - - - - 4 (c))。最低的表达CD163被发现在所有组模单核细胞相比,古典和中间单核细胞( t 以及, p < 0.0001 ),而CD163古典和中间单核细胞上的表达相当(数据没有显示)。

频率和CD163中间单核细胞内的表达。(一)代表直方图显示CD163表达在慢性乙肝,S-CONV + RES, HC组(实线)和足够的FMO控制(虚线)。(b) CD163表情中间单核细胞在慢性乙肝,S-CONV + RES, HC组。(c, d)的比较分析CD163表情中间单核细胞与慢性乙肝感染的阶段。数据表现为中间值25th和75年th百分位数和最小最大价值。

频率和模内CD163单核细胞的表达。(一)代表直方图显示CD163表达在慢性乙肝,S-CONV + RES, HC组(实线)和足够的FMO控制(虚线)。(b) CD163表情模单核细胞在慢性乙肝,S-CONV + RES, HC组。(c, d)的比较分析CD163表情模单核细胞与慢性乙肝感染的阶段。数据表现为中间值25th和75年th百分位数和最小最大价值。

 3.3。等离子体sCD163和sTWEAK浓度在不同阶段的慢性乙型肝炎病毒感染的活性

等离子体sCD163浓度被发现显著增加在慢性乙肝患者和S-CONV + RES组相比,HC ( p = 0.0006 和 p = 0.01 分别(图) 5(一个))。在慢性乙肝患者中,我们没有观察到协会sCD163浓度和阶段的乙型肝炎病毒感染(数据未显示)。之间存在着负相关血浆sCD163浓度和平均荧光强度(MFI) CD163古典单核细胞。等离子体之间无显著关联被发现sCD163浓度和CD163表达式(MFI)中间值和模单核细胞(表 2)。

在等离子体sCD163和sTWEAK水平。(一)血浆浓度sCD163在慢性乙肝,S-CONV + RES, HC组。(b)血浆浓度慢性乙肝的sTWEAK S-CONV + RES, HC组。数据表现为中间值25th和75年th百分位数和最小最大价值。

等离子体sTWEAK浓度显著低于慢性乙肝患者相比S-CONV + RES组(图 5 (b))。我们并没有发现任何特定的等离子sTWEAK之间的联系和活动中的乙型肝炎病毒感染慢性乙肝组(数据未显示)。我们发现,等离子体sTWEAK负相关的MFI CD163在每个分析单核细胞(表的子集 3)。

sCD163 / sTWEAK和CD163表达之间的相关性(MFI)单核细胞的亚种。

相关性 sCD163 (ng / mL) sTWEAK (pg / mL)
r r
p p
MFI CD163 + CD14 + + CD16 -细胞 -0.281 - - - - - - 0.353
0.030 0.007
MFI CD163 + CD14 + + CD16 +细胞 -0.204 -0.406
0.118 0.002
MFI CD163 + CD14 + CD16 +细胞 -0.166 -0.291
0.210 0.028
3.4。相关的病毒(六世,qHBsAg)和生化参数(ALT, APRI)与CD163单核细胞上表达,sCD163 sTWEAK

测试是否CD163表达单核细胞和血浆sCD163 sTWEAK反映乙型肝炎病毒感染的活性,病毒因素(HBV-VL qHBsAg)和单核细胞相比CD163生化参数表达式,sCD163, sTWEAK水平。我们发现CD163之间显著负相关表情古典单核细胞和血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平以及APRI分数(表 4)。同样,降低中间CD163表达单核细胞与ALT水平增加有关。等离子体sCD163水平明显与血清ALT水平和APRI得分呈正相关。符合这一点,有趋势降低CD163表情古典和中间单核细胞以及更高的sCD163和sTWEAK坏死炎性组织活性浓度门户/门静脉周的患者在肝组织( G ≥ 2 )相比,离散门户炎症( G = 1 )( p = 0.074 , p = 0.0592 , p = 0.057 , p = 0.063 分别)。之间没有明显的相关性被发现病毒因素(HBV-VL qHBsAg)和单核细胞CD163表达式,等离子sCD163或等离子sTWEAK。

相关的六世,qHBsAg、ALT和APRI CD163表情单核细胞,sCD163, sTWEAK。

相关性 病毒dna六世(国际单位/毫升) qHBsAg(国际单位/毫升) ALT (U / L) APRI
r r r r
p p p p
MFI CD163 + CD14 + + CD16 -细胞 -0.097 -0.052 -0.310 -0.594
0.504 0.724 0.015 0.015
MFI CD163 + CD14 + + CD16 +细胞 -0.103 0.077 -0.288 -0.203
0.477 0.603 0.024 0.451
MFI CD163 + CD14 + CD16 +细胞 0.027 -0.107 0.083 0.311
0.854 0.471 0.526 0.260
MFI CD163 + CD14 +细胞 -0.079 -0.055 -0.277 -0.481
0.586 0.710 0.031 0.059
sCD163 (ng / mL) -0.0535 -0.181 0.231 0.609
0.703 0.173 0.046 0.006
sTWEAK (pg / mL) 0.133 0.099 -0.037 -0.254
0.319 0.458 0.761 0.293
4所示。讨论

目前,乙肝病毒感染的管理的主要目标是实现最高的免疫控制病毒的表达为一个HBsAg / anti-HBs血清转化。最近,已经有一些研究强调先天免疫反应的重要作用的pathomechanism乙肝病毒感染。在搜索允许控制乙肝病毒的免疫目标恢复,这些报告是非常重要的先天免疫机制可能是一个依据新治疗方法的发展( 27]。

数据在我们的研究是第一个评估之间的联系频率的单核细胞子集,单核细胞表达CD163,等离子sCD163等离子sTWEAK,慢性炎症过程中乙肝病毒感染。我们发现不像古典单核细胞显著减少,模HBsAg-positive患者单核细胞是控制人口,相比于对照组。此外,CD163表达式在古典和中间的人口显著增加单核细胞在慢乙肝患者和那些HBsAg / anti-HBs血清转化。有趣的是,CD163表情古典单核细胞与免疫控制,因此重要的地位在乙型肝炎病毒感染(ENI)相比,活动性肝炎(掺)。CD163模单核细胞上的表达是最低的,可能暗示他们在乙型肝炎病毒感染不那么重要的角色。等离子体sCD163浓度显著增加患者的慢性乙肝和S-CONV + RES组与HC。此外,它与CD163相关负面表情古典单核细胞。等离子sCD163之间有正相关,血清ALT,以及APRI得分。此外,我们观察到等离子体sTWEAK浓度显著降低慢性乙肝患者相比S-CONV + RES组。

乙型肝炎病毒感染的影响上有冲突的数据循环单核细胞的表型和活动。Boltjes等人发现单核细胞从健康受试者和HBV-infected个人在接触表面产生的细胞因子。此外,他们没有观察到显著差异 在体外对HBsAg刺激响应性和比率的单核细胞亚种群从病人在感染的不同阶段。然而,当时他们的分析是基于旧的单核描述方法,区别只有CD14 + + CD16 -和CD14 + CD16 +数量( 28]。相比之下,张等人报道HBeAg-positive病人CD16 +单核细胞比率的增加,中间和模,随之而来的古典单核细胞的减少。这种差异尤为明显,当活跃HBeAg-positive肝炎组与健康对照组( 29日]。这些发现是在协议与我们的观测HBeAg-negative人口。我们观察到一个较低的比率古典单核细胞和更高比例的模单核细胞在慢性乙肝组相比,HC和患者乙型肝炎病毒感染的历史和HBsAg / anti-HBs血清转化。接下来,我们评估膜结合CD163分子的表达。可用的研究提供的证据增加CD163在外周血单核细胞表达与乙型肝炎病毒有关的肝功能衰竭( 30., 31日]。然而,我们没有发现任何研究解决这个问题在随后阶段的慢性乙型肝炎病毒感染。一般来说,单核细胞表达CD163受体被认为有抗炎的潜力。你们等人报道,CD163表达显著调节与乙型肝炎病毒有关的acute-on-chronic肝功能衰竭和慢性乙型肝炎相比健康人群( 31日]。这个观察慢性乙型肝炎是符合我们的结果,我们发现增加CD163表达古典和中间慢乙肝患者相比,HC的单核细胞。其他研究,张等人在与乙型肝炎病毒有关的肝功能衰竭,证明表达CD163增加在暴露于肝脏激活myofibroblasts PGE2-dependent的方式。作者提出的增加CD163表达肝衰竭可能是一个保护机制抵消炎症和单核细胞转向抗炎状态( 30.]。有趣的是,在慢性乙肝组CD163单核细胞上的表达增加与改善免疫控制HBsAg-positive乙型肝炎病毒感染的患者和个人的历史HBsAg / anti-HBs血清转化。我们可以通过我们的观察从先前的研究支持,膜结合CD163反向与sCD163 [ 32]。在炎症环境CD163从细胞表面和sCD163相应增长。最近,血清sCD163提出了作为整体生存肝硬化的预后因子,以及肝脏炎症和坏死的标志( 20., 33, 34]。Dultz等人观察到显著增加患者的血清浓度sCD163掺相比HBsAg运营商(ENI)。此外,血清sCD163将积极与血清病毒dna, ALT水平,坏死炎性组织活动指数和肝纤维化评分( 33]。相应研究的结果指出劳尔森等人在一群HBeAg-positive和HBeAg-negative慢乙肝患者 20.]。在我们的研究中,我们发现高血清浓度sCD163 HBV-infected患者与对照组。然而,免疫控制感染的状态并不影响血清浓度的sCD163 HBsAg-positive组。我们省略了肝活检组织病理学评估由于肝脏样本数量不足,我们地址作为我们研究的一个限制。尽管这一事实,我们观察到的趋势高血浆sCD163坏死炎性组织活动集中在门户/门静脉周的患者肝组织( G ≥ 2 )相比,离散门户炎症( G = 1 )。然而,我们试图评估之间的联系sCD163坏死炎性组织活动和间接肝的生物标志物。我们观察到显著的血清sCD163水平之间的相关性和ALT或APRI得分,肝脏炎症的普遍血清学非侵入性标记,和纤维化。考虑的表达之间缺乏相关性CD163单核细胞或血清sCD163水平和viral-associated六世和qHBsAg等参数,我们认为,改变在CD163表达和sCD163水平可能导致系统性炎症反应而不是直接交互的单核细胞的病毒的人群。这个假设可能支持的劳尔森等人在慢性乙肝患者的观察,显示减少sCD163水平以及降低ALT活动抗病毒疗法在治疗后反应者和nonresponders [ 20.]。

我们注意到一个较低的等离子体sTWEAK浓度在慢性乙型肝炎病毒感染与健康对照组相比。尽管在慢性乙肝组血浆sTWEAK水平较低,这些患者表现出较高的等离子体的趋势sTWEAK坏死炎性组织活动在个人门户/门静脉周的肝组织( G ≥ 2 )与离散门户炎症( G = 1 )。我们的发现对应的结果Asil Dertli,这也显示出减少sTWEAK集中在慢性乙肝和逐渐增加的炎症和纤维化程度HBV-infected肝活检的患者。作者提供一致的假设的upregulation Fn14受体在炎症条件下会导致循环sTWEAK的吸收,从而减少其在慢性乙型肝炎血清浓度( 35]。根据我们的研究结果,我们推测的upregulation CD163单核细胞分子也可能导致血清sTWEAK下降。除了绑定Fn14分子,调整可能与细胞膜受体CD163作为拮抗剂配体,从而导致抑制单核细胞活化。另一方面,有证据表明CD163分子出现在单核细胞可以作为调整的清道夫受体,从而阻止TWEAK-Fn14轴的生物功能,例如,凋亡细胞死亡( 23]。这里,我们之间观察到的负相关性CD163受体的表达在所有研究单核细胞的数量和sTWEAK血浆浓度。观察可以证明公认的共同监管的实验室证据相互作用的分子,增加膜CD163表达可能有助于sTWEAK血清浓度的下降。这个假设的观察或许能减少sTWEAK水平平行增加单核细胞CD163表达在慢性乙肝,但并不能解释的矛盾逐渐增加sTWEAK随肝脏炎症的进展。正如我们前面所提到的,在炎症条件下,CD163从细胞膜脱落,从而增加sCD163水平和sTWEAK水平,作为膜CD163绑定sTWEAK分子的表达减弱。关于肝纤维化,我们没有找到任何单核细胞CD163表达之间的相关性,sCD163, sTWEAK。然而,后者的观察是有偏见的肝脏活检样本数量不足,并不代表所有的肝纤维化的进展阶段。因此,与其他作者,我们可能认为CD163单核细胞上的表达和sCD163水平反映当前的纤维发生炎症状态和活动而不是疾病的一般发展( 36]。

总之,我们的结果表明,单核细胞免疫反应的一个重要组成部分在慢性肝炎b CD163被认为是一个标记的单核细胞,抗炎作用抑制慢性炎症的频率明显高于慢性乙肝,古典和中间CD163表达观察单核细胞”。CD163古典单核细胞上的表达增加与提高乙型肝炎病毒感染的免疫控制。患者有表面抗原表达CD163最高,这表明单核细胞参与免疫控制乙型肝炎病毒感染。另一方面,我们的数据表明,持续的炎症是伴随着低CD163表达,这可能是与激活单核细胞损伤有关。此外,“保护单核细胞表达CD163分子的衰落导致受损的中立状态的调整,从而使促炎和profibrogenic TWEAK-Fn14交互。这极大的兴趣对改善肝脏炎症的管理。还需要进一步的研究来揭示CD163-TWEAK轴的定位是否可能是一个潜在的策略治疗肝脏炎性疾病。

 5。结论

在慢性乙肝,更高频率的古典和中间CD163表达观察单核细胞”。CD163古典单核细胞上的表达增加与提高乙型肝炎病毒感染的免疫控制。患者有表面抗原的表达最高CD163单核细胞,这表明单核细胞参与免疫控制乙型肝炎病毒感染。持续的炎症是伴随着更高的CD163表达式和sCD163 sTWEAK水平和低水平,这可能是与活化的单核细胞和不当可能导致肝脏疾病的进展。

 缩写 乙肝病毒:

乙型肝炎病毒

 调整:

肿瘤坏死因子以弱凋亡的诱导物

 sCD163:

可溶性CD163

 sTWEAK:

可溶性肿瘤坏死因子以弱凋亡的诱导物

 慢性乙肝:

慢性乙型肝炎病毒感染

 RES:

自发地解决乙肝病毒感染HBsAg / anti-HBs血清转化

 S-CONV:

治疗引起血清转化HBsAg / anti-HBs

 埃尼集团:

HBeAg-negative慢性感染

 掺:

HBeAg-negative慢性乙型肝炎

 SUPR:

掺在干扰素有(t) ide模拟治疗完成病毒dna抑制

 ENH-LR:

Low-replicative肝炎

 ENI-HR:

High-replicative患者转氨酶正常

 HC:

健康对照组

 HBV-VL:

HBV病毒载量

 qHBsAg:

定量HBsAg

 ALT:

丙氨酸转氨酶

 APRI:

AST血小板比率指数

 ELISA:

酶联免疫吸附试验。

 数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

 信息披露

Jerzy Jaroszewicz现在地址是传染性疾病和肝脏病学比托姆,医科大学的西里西亚,49。Legionow, 41 - 902比托姆,波兰。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

 确认

本研究支持的科学预算从波兰科学和高等教育之间的2015年和2017年,项目没有。IP2014 035173 (Iuventus-Plus科研补助金),安娜Parfieniuk-Kowerda。本研究使用设备购买的医疗比亚韦斯托克大学的一部分RPOWP 2007 - 2013资金,Priority-I轴- 1.1,合同编号。UDA-RPPD.01.01.00-20-001/15-00 26.06.2015约会。

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