心肌梗死 炎症介质 1466 - 1861 0962 - 9351 Hindawi 10.1155 / 2017/2401027 2401027 研究文章 的刺激Alpha7烟碱乙酰胆碱受体变弱Nicotine-Induced Upregulation MMP MCP-1,咆哮通过调制ERK1/2 / AP-1 RAW264.7和MOVAS细胞信号通路 http://orcid.org/0000 - 0003 - 3206 - 5186 刘 力平 1 2 吴 Hongxian 1 http://orcid.org/0000 - 0003 - 3329 - 4167 曹 Qunan 1 http://orcid.org/0000 - 0002 - 1721 - 908 x 郭 真真心心 1 任 Anmin 1 http://orcid.org/0000 - 0002 - 9707 - 5281 戴 Qiuyan 1 Agrawal 安苏 1 心内科 上海南京医科大学总医院 上海交通大学 上海 中国 sjtu.edu.cn 2 心内科 盐城第一人民医院 南通医科大学第四附属医院 江苏 中国 ntu.edu.cn 2017年 16 11 2017年 2017年 03 03 2017年 04 09年 2017年 27 09年 2017年 16 11 2017年 2017年 版权©2017力平刘et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

迷走神经刺激通过alpha7尼古丁乙酰胆碱受体( α7-nAChR)信号被衰减的炎症。本研究旨在确定pnu - 282987,选择性 α7-nAChR兴奋剂,影响活动的基质金属蛋白酶(MMP)和炎性细胞因子在nicotine-treatment RAW264.7 MOVAS细胞和评估潜在的分子机制。RAW264.7 MOVAS细胞治疗尼古丁在不同浓度(0、1、10和100 ng / ml)为0 - 120分钟。尼古丁刺激明显的磷酸化细胞外signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2)和c-Jun RAW264.7细胞。预处理U0126显著抑制磷酸化ERK1/2和进一步减毒nicotine-induced激活c-Jun upregulation MMP-2, MMP-9,单核细胞趋化蛋白- 1 (MCP),和监管在激活正常T细胞表达和分泌(咆哮)。同样,尼古丁的治疗也增加了磷酸化MMP-2 c-Jun和表达,MMP-9, MCP-1,咆哮MOVAS细胞。细胞用pnu预处理- 282987时,身上观察到尼古丁诱导下RAW264.7细胞的激活ERK1/2和c-Jun c-Jun MOVAS细胞被有效抑制。此外,nicotine-induced分泌物MMP-2、MMP-9 MCP-1,咆哮显著下调。治疗 α7-nAChR受体激动剂抑制nicotine-induced upregulation MMP和炎性细胞因子通过调节ERK1/2 / AP-1 RAW264.7细胞信号和AP-1 MOVAS细胞,提供一个新的治疗腹主动脉瘤。

 中国自然科学基金 81670399 81370415 1。介绍

腹主动脉瘤(AAA)的定义是一个扩张的腹主动脉(几乎只肾下的主动脉)达到直径30毫米或更多 1]。AAA通常保持无症状,直到它破裂的死亡率为80% 2]。而不是先进的动脉粥样硬化的结果,AAA是系统性血管疾病的地方表示,与微分分子和细胞概要文件( 3, 4]。AAA的特点是所有层的膨胀导致动脉壁炎症浸润,失去弹性,SMC细胞凋亡( 3, 5]。实验数据和研究人类的AAA已经确定了,在媒体上广泛的炎性浸润和动脉外膜由巨噬细胞和淋巴细胞,这秘密多个细胞因子,包括在AAA的病理过程 6- - - - - - 8]。基质金属蛋白酶(MMPs),来自血管平滑肌细胞(VSMCs)和巨噬细胞,分泌到细胞外基质,导致弹性蛋白的破坏和削弱主动脉壁的 5]。

吸烟是一个非常强大的可改变的危险因素为AAA级( 9- - - - - - 13]。在最近的一份报告中招收的18782名参与者年龄≥65年南部社区队列研究(癌),在一个平均4.94年的随访中,AAA是吸烟者的40%,另外40%是吸烟者(前 9]。吸烟,尤其是目前的吸烟,显著增加的风险AAA(目前:人力资源5.55,95%可信区间(CI) 3.67 - 8.40;前:人力资源1.91,95%可信区间1.27到2.87)。吸烟增加持续时间和日常的香烟数量导致事件的风险更高AAA,和影响是剂量依赖 11, 12]。此外,AAA扩张和破裂的风险在那些继续吸烟的明显升高。荟萃分析的情人et al。 13),AAA增长率增加了六分之一,破裂率翻了一番吸烟者相比,或从不吸烟者。尽管患病率、发病率和死亡率有所下降,因为减少吸烟率( 14, 15],AAA 16大死因仍在美国人中超过65岁( 9),从而强调需要更多的努力来改善治疗和预后。我们之前的研究表明,c-Jun n端激酶抑制剂(物)减毒尼古丁+ AngII-induced AAA形成抑制MMP-9, MMP2、单核细胞趋化蛋白- 1 (MCP),和监管在激活正常T细胞表达和分泌(咆哮)巨噬细胞分泌物和VSMCs,表明物是一个信号分子发病机制的尼古丁+ AngII-induced AAA ( 16]。然而,远端信号分子或核转录因子参与信号转导仍然难以捉摸。

迷走神经刺激通过alpha7尼古丁乙酰胆碱受体( α7-nAChR)信号,称为胆碱能抗炎通路,已经展示了衰减的炎症,改善炎症性疾病,如败血症、胰腺炎、出血休克和缺血/再灌注和术后肠梗阻的实验模型( 17]。最近的研究表明,迷走神经刺激可以通过调制在心血管疾病也有有益作用的细胞因子的水平,这是依赖从心率变异性 18]。激活 α7-nAChR被发现防止CaCl AAA的开发和发展2应用小鼠模型与减少炎症和矩阵退化( 19]。在目前的研究中,我们确定pnu - 282987,选择性 α7-nAChR兴奋剂,影响活动的MMP-2 MMP-9和炎性细胞因子的表达MCP-1咆哮在治疗尼古丁RAW264.7和MOVAS细胞。

 2。材料和方法 2.1。试剂和抗体

从Sigma-Aldrich尼古丁和pnu - 282987了。U0126(高度的选择性抑制剂MEK1 MEK2,激酶的ERK1/2)是细胞信号技术(CST)。兔单克隆antiextracellular signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2) antiphosphorylated ERK1/2, anti-c-Jun, antiphosphorylated c-Jun,抗核抗体- κB (NF - κB) p65, antiphosphorylated NF - κB p65来自春秋国旅。老鼠多克隆抗体MMP2、MCP-1咆哮,GAPDH来自Abcam。鼠单克隆anti-MMP9 MMP2和圣克鲁斯生物技术。

 2.2。细胞培养和治疗

小鼠巨噬细胞细胞株RAW264.7细胞和小鼠主动脉平滑肌细胞(SMC)线(MOVAS细胞)从美国购买类型文化集合(弗吉尼亚州马纳萨斯)。细胞培养在high-glucose杜尔贝科的修改鹰介质(美国UT DMEM HyClone,洛根)补充10%胎牛血清(的边后卫,Gibco,澳大利亚)37°C湿润,5%的公司2的气氛。一夜之间采用无血清饥饿后,细胞治疗尼古丁或pnu - 282987。额外的实验进行RAW264.7细胞使用U0126或pnu - 282987和MOVAS细胞preincubated pnu - 282987之前对尼古丁暴露。

 2.3。免疫印迹分析

细胞被洗两次与冰冷的磷酸盐(PBS),细胞溶解与里帕裂解缓冲(Beyotime生物技术研究所、江苏、中国),补充了磷酸酶抑制剂(Sangon生物技术,中国上海)和PMSF(罗氏、分子生化药剂,曼海姆,德国),离心机,量化BCA蛋白质化验设备(Beyotime生物技术研究所、江苏、中国)根据制造商的指示。整除总蛋白质的分离10%十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds - page),然后转移到聚偏二氟乙烯(PVDF)膜(美国大力神Bio-Rad实验室)。膜被封锁在5%脱脂乳/ TBST(25毫米Tris-HCl、150毫米氯化钠和0.1% Tween-20;pH值7.4)在室温下1 h和随后孵化主要抗体在一夜之间在4°C。三个洗后,膜被孵化与辣根过氧化物酶(合)共轭山羊anti-rabbit或老鼠免疫球蛋白1 h,与TBST再次清洗,随后可视化使用West-Pico ECL工具包(美国罗克福德皮尔斯)。

 2.4。实时逆转录聚合酶链反应(rt - pcr)

总RNA提取RAW264.7 MOVAS细胞使用试剂盒试剂(美国卡尔斯巴德英杰公司)和反向转录成cDNA PrimeScript RT大师混合(豆类、Kusatsu、日本)根据制造商的协议。定量rt - PCR进行使用SYBR预混料Taq交货(豆类、Kusatsu、日本)应用生物系统公司ViiA™7实时PCR系统。本研究中使用的特定的引物如下:MMP-9: 5′-GCCCTGGAACTCACACGACA-3′(向前)和5′-TTGGAAACTCACACGCCAGAAG-3′(反向);MMP-2: 5′-GATAACCTGGATGCCGTCGTG-3′(向前)和5′-GGTGTGCAGCGATGAAGATGATA-3′(反向);MCP-1: 5′-GCATCCACGTGTTGGCTCA-3′(向前)和5′-CTCCAGCCTACTCATTGGGATCA-3′(反向);咆哮5′-GAAAGAACCGCCAAGTGTGT-3′(向前)和5′-GCAAGCAGAAACAGGCAAAT-3′(反向);和GAPDH: 5′-GTATGACTCTACCC ACGGCAAGT-3′(向前)和5′-TTCCCGTTGATGACCAGCTT-3′(反向)。循环阈值(Ct)获得目标基因表达GAPDH规范化,并使用2相对表达式计算−ΔΔCt方法。

 2.5。统计分析

数据提出了均值±标准差(SD)。光密度分析的蛋白质免疫印迹的乐队表演使用ImageJ软件来自美国国立卫生研究院。数据分析了单向方差分析随后Dunnett的测试。使用SPSS统计分析进行了版本22。 P < 0.05 被认为是具有统计学意义。

 3所示。结果 3.1。尼古丁刺激磷酸化ERK1/2和c-Jun RAW264.7细胞

尼古丁是香烟烟雾的主要成分和血浆浓度的尼古丁迅速增加一个香烟后,从10 - 50毫微克/毫升( 20.]。调查的潜在机制nicotine-induced AAA, RAW264.7细胞暴露于10 ng / ml尼古丁为0,10、20、30、60、120分钟。免疫印迹分析(图 1(一))透露,10 ng / ml尼古丁导致显著增加的磷酸化ERK1/2 c-Jun从10分钟至60分钟;然而,尼古丁对p65磷酸化没有影响。然后,RAW264.7细胞浓度的尼古丁处理30分钟0,1,10,100 ng / ml。见图 1 (e)的磷酸化ERK1/2和c-Jun被尼古丁调节,而蛋白质含量的p-p65保持不变。这些数据表明,尼古丁可能发挥生物效应通过调制ERK1/2和c-Jun RAW264.7细胞信号通路。

尼古丁刺激的磷酸化细胞外signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2)和c-Jun RAW264.7细胞。(一)RAW264.7细胞治疗10毫克/毫升尼古丁为0,10、20、30、60、120分钟。(e) RAW264.7细胞暴露在尼古丁浓度为30分钟0,1,10和100毫克/毫升。细胞溶解产物收集和蛋白质水平的p-ERK1/2, ERK1/2, p-c-Jun, c-Jun, p-p65, p65通过免疫印迹。乐队光密度值(意味着±SD) p-ERK1/2 (b, f), p-c-Jun (c、g)和p-p65 (d, h)评估使用ImageJ软件,与所有实验被分析为三个不同的独立实验和GAPDH作为内部控制。 ∗ p < 0.05 和 ∗ ∗ p < 0.01 与控制。

 3.2。U0126废除Nicotine-Induced激活MMP-9 ERK1/2 c-Jun和表达式,MMP-2, MCP-1,咆哮RAW264.7细胞

为了进一步确定ERK1/2和c-Jun信号通路参与nicotine-induced MMP-9, MMP-2, MCP-1,咆哮,RAW264.7细胞使用10 μm和20 μm U0126 30分钟前30分钟或3 h尼古丁暴露在10 ng / ml的浓度。Nicotine-induced激活ERK1/2和c-Jun明显被U0126(图 2(一个))。的同时,nicotine-induced upregulation MMP-9、MMP-2 MCP-1,咆哮显著降低,如图 2 (d)。此外,定量rt - pcr表明U0126抑制nicotine-induced MMP-9, MMP-2 MCP-1,咆哮mRNA表达(数字 2(我), 2 (j), 2 (k), 2(左))。结果表明,尼古丁诱发upregulation MMP-9, MMP-2 MCP-1,咆哮,通过激活ERK1/2 / c-Jun RAW264.7细胞通路。

U0126减毒nicotine-induced激活的细胞外signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2)和c-Jun upregulation基质金属蛋白酶- 9 (MMP), MMP-2,单核细胞趋化蛋白- 1 (MCP),和监管在激活正常T细胞表达和分泌(咆哮)RAW264.7细胞。(一)RAW264.7细胞使用10 μm和20 μm U0126 30分钟前10 ng / ml尼古丁暴露了30分钟。(d) RAW264.7细胞使用10 μm和20 μm U0126 30分钟前10 ng / ml尼古丁暴露3 h。(b, c,超高频)蛋白带的强度(意味着±SD)免疫印迹被使用量化ImageJ GAPDH软件和规范化。代表三个独立实验的结果显示。(我)MMP-9 (j) MMP-2 MCP-1 (k), (l)咆哮mRNA水平由实时逆转录聚合酶链反应。所有实验都是一式三份独立的实验分析。 ∗ p < 0.05 和 ∗ ∗ p < 0.01 与控制;# p < 0.05 和# # p < 0.01 对尼古丁的治疗组。

 3.3。尼古丁增加磷酸化的c-Jun MOVAS细胞

我们也探讨尼古丁是否影响ERK1/2, c-Jun, p65 MOVAS细胞。同样,MOVAS细胞治疗10 ng / ml尼古丁为0,10、20、30、60、120分钟。如图 3(一个),nicotine-induced磷酸化c-Jun明显增加10分钟和20分钟,然后从30分钟下降到120分钟。相比之下,尼古丁抑制ERK1/2磷酸化和没有影响p65的激活。然后,MOVAS细胞暴露在尼古丁在不同浓度(0、1、10和100 ng / ml) 30分钟。的磷酸化c-Jun在所有三个浓度显著升高,而ERK1/2磷酸化是抑制(图 3 (e))。的激活p65没有受到尼古丁在不同浓度的影响。这些数据表明c-Jun可能是一个重要的转录因子参与身上观察到尼古丁诱导下MOVAS细胞的生物学效应。不符合RAW264.7细胞,MOVAS细胞治疗尼古丁ERK1/2和c-Jun之间表现出相反的趋势。值得一提的是,赵等人没有表明,U0126对肿瘤坏死因子的影响 α全身的激活c-Jun VSMCs [ 21]。因此,我们假设尼古丁诱发不同的信号转导通路在不同的细胞发挥生物学作用。

尼古丁增加c-Jun的磷酸化MOVAS细胞。(一)MOVAS细胞暴露于10 ng / ml尼古丁为0,10、20、30、60、120分钟。(e) MOVAS细胞为30分钟服用尼古丁浓度为0,1,10,100 ng / ml。磷酸化细胞外的表达signal-regulated kinase1/2 (p-ERK1/2) ERK1/2, p-c-Jun, c-Jun, p-p65, p65与免疫印迹分析。(罪犯f-h)光密度分析的蛋白质通过ImageJ乐队进行软件。GAPDH是利用作为内部控制,实验分析了作为三个独立的实验。 ∗ p < 0.05 和 ∗ ∗ p < 0.01 与控制。

 3.4。pnu - 282987抑制Nicotine-Stimulated激活ERK1/2和c-Jun Upregulation MMP-9, MMP-2, MCP-1,咆哮RAW264.7细胞

胆碱能抗炎通路由传出迷走神经,神经递质乙酰胆碱 α7-nAChR [ 17]。最近,潜在作用迷走神经刺激在心血管疾病出现了 18]。以确定的影响 α7-nAChR nicotine-stimulated基质金属蛋白酶的表达和炎症细胞因子,细胞被刺激的存在 α7-nAChR选择性受体激动剂。在第一个实验中,原始264.7细胞暴露在10 μm pnu - 282987 0, 15、30、60、90和120分钟。免疫印迹分析表明,pnu - 282987显著抑制ERK1/2和c-Jun(图的磷酸化 4(一))。然而,p65磷酸化有下行趋势没有统计学意义。然后,RAW264.7细胞使用pnu - 282987在不同浓度(0,1,10,100 μm) 10 ng / ml尼古丁暴露前30分钟30分钟或3 h。如图 4 (e)ERK1/2 nicotine-induced激活、c-Jun废除了10 and100 pnu - 282987的浓度 μm。在同一浓度,pnu - 282987抑制nicotine-stimulated upregulation MMP-9, MMP-2 MCP-1,咆哮(图 5(一个))。此外,定量rt - pcr显示pnu - 282987也减毒nicotine-induced MMP-9, MMP-2 MCP-1,咆哮mRNA表达(数字 5 (f), 5 (g), 5 (h), 5(我))。这些结果表明, α7-nAChR受体激动剂抑制nicotine-induced upregulation MMP-9, MMP-2, MCP-1,咆哮在RAW264.7细胞通过调节ERK1/2 / c-Jun信号。

pnu - 282987抑制nicotine-stimulated激活细胞外signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2)和c-Jun RAW264.7细胞。(一)RAW264.7细胞处理10 μm pnu - 282987 0, 15、30、60、90和120分钟。(e) RAW264.7细胞使用10 μm pnu 60 - 282987分钟前10 ng / ml尼古丁暴露了30分钟。p-ERK1/2蛋白质含量,ERK1/2、p-c-Jun c-Jun, p-p65,和p65用免疫印迹,而蛋白质带强度(意味着±SD)(罪犯,f, g)评估使用ImageJ软件,与所有实验被分析为三个不同的独立实验和GAPDH作为内部控制。 ∗ p < 0.05 和 ∗ ∗ p < 0.01 与控制;# p < 0.05 和# # p < 0.01 对尼古丁的治疗组。

pnu - 282987年废除nicotine-induced upregulation基质金属蛋白酶- 9 (MMP), MMP-2,单核细胞趋化蛋白- 1 (MCP),和监管在激活正常T细胞表达和分泌(咆哮)RAW264.7细胞。(一)RAW264.7细胞使用10 μm pnu 60 - 282987分钟前10 ng / ml尼古丁暴露3 h。乐队光密度值(意味着±SD) (b) MMP-9, (c) MMP-2, (d) MCP-1, (e)咆哮的免疫印迹被使用量化ImageJ GAPDH软件和规范化。代表三个独立实验的结果显示。(f) MMP-9, (g) MMP-2 MCP-1 (h),(我)咆哮mRNA水平被实时逆转录聚合酶链反应检测。所有实验都是一式三份独立的实验分析。 ∗ p < 0.05 和 ∗ ∗ p < 0.01 与控制;# p < 0.05 和# # p < 0.01 对尼古丁的治疗组。

 3.5。pnu - 282987减毒Nicotine-Induced激活MMP-9 c-Jun和表达,MMP-2, MCP-1,咆哮MOVAS细胞

在第二个实验中,MOVAS细胞治疗10 μm pnu - 282987 0, 15、30、60、90和120分钟。免疫印迹分析表明ERK1/2 c-Jun磷酸化是在不同的时间点明显减少,而磷酸化p65没有改变(图 6(一))。然后,MOVAS细胞使用pnu - 282987在不同浓度(0,1,10,100 μ米)前60分钟10 ng / ml尼古丁治疗30分钟或3 h。如图 6 (e)nicotine-induced激活减弱了c-Jun pnu 10和100 - 282987的浓度 μm。ERK的磷酸化的抑制尼古丁MOVAS进一步增强细胞使用pnu - 282987。此外,pnu - 282987抑制nicotine-stimulated MMP-9排泄,MMP-2 MCP-1,咆哮,从MOVAS细胞(图 7(一))。同时,定量rt - pcr显示pnu - 282987也减少nicotine-induced mRNA的表达MMP-9, MMP-2 MCP-1,咆哮,如图 7 (f), 7 (g), 7 (h), 7(我)。这些结果表明, α7-nAChR受体激动剂抑制nicotine-induced表达MMP-9、MMP-2 MCP-1,咆哮通过c-Jun MOVAS细胞。

pnu - 282987抑制nicotine-stimulated激活的c-Jun MOVAS细胞。(一)MOVAS细胞暴露在10 μm pnu - 282987 0, 15、30、60、90和120分钟。(e) MOVAS细胞使用10 μm pnu 60 - 282987分钟前10 ng / ml尼古丁暴露了30分钟。细胞溶解产物收集,和蛋白质水平的磷酸化细胞外signal-regulated kinase1/2 (p-ERK1/2) ERK1/2, p-c-Jun, c-Jun, p-p65, p65通过免疫印迹。(罪犯,f, g)光密度分析的蛋白质乐队通过ImageJ执行软件,与所有实验被分析为三个不同的独立实验和GAPDH作为内部控制。 ∗ p < 0.05 和 ∗ ∗ p < 0.01 与控制;# p < 0.05 和# # p < 0.01 对尼古丁的治疗组。

pnu - 282987表达下调nicotine-induced表达基质金属蛋白酶- 9 (MMP), MMP-2,单核细胞趋化蛋白- 1 (MCP),和监管在激活正常T细胞表达和分泌(咆哮)MOVAS细胞。(一)MOVAS细胞使用10 μm pnu 60 - 282987分钟前10 ng / ml尼古丁暴露3 h。乐队光密度值(意味着±SD) (b) MMP-9, (c) MMP-2, (d) MCP-1, (e)咆哮的免疫印迹被使用量化ImageJ GAPDH软件和规范化。代表三个独立实验的结果显示。(f) MMP-9, (g) MMP-2 MCP-1 (h),(我)咆哮mRNA水平由实时逆转录聚合酶链反应。所有实验都是一式三份独立的实验分析。 ∗ p < 0.05 和 ∗ ∗ p < 0.01 与控制;# p < 0.05 和# # p < 0.01 对尼古丁的治疗组。

 4所示。讨论

在目前的研究中,我们首次证明刺激 α7-nAChR抑制nicotine-induced upregulation炎性细胞因子和MMP。MCP-1咆哮,作为CC趋化因子家族的代表,也被证明参与AAA发展( 7, 22),被认为比其他趋化因子(扮演更大的角色 23]。MCP-1促进巨噬细胞浸润,增加在smc MMP-9表达式,并诱导细胞凋亡的smc AAA,通过直接的机制或通过激活巨噬细胞( 22, 24, 25]。咆哮,类似于MCP-1,作用于多种免疫细胞和慢性和急性炎症中发挥着重要作用( 26]。MMP-9 MMP-2,降解细胞外基质,协同工作,形成AAA, MMP-9和MMP-2基因敲除小鼠对动脉瘤发展( 27]。炎症和细胞外基质降解AAA形成起着至关重要的作用。因此,很可能抑制MCP-1,咆哮,MMP-9, MMP-2通过激活的 α7-nAChR导致nicotine-induced AAA发展的衰减。

相关的分子机制 α7-nAChR nicotine-induced AAA形成和抑制受体激动剂可能ERK1/2和AP-1——(c-Jun)介导的信号通路在巨噬细胞和smc。ERK1/2属于哺乳动物增殖蛋白激酶(MAPK)的家庭,在各种细胞反应起到至关重要的作用,包括细胞增殖、分化、和生存 28, 29日]。转录因子AP-1家庭由多个小君(c-Jun、JunB JunD)和安全系数(c-Fos, FosB、Fral Fra2)成员( 30.]。AP-1被发现参与多种生理和病理细胞过程包括扩散、炎症、分化、生长、细胞凋亡、细胞迁移和转换( 30., 31日]。这项研究表明,尼古丁MCP-1表达的增加,咆哮,MMP-9, MMP-2通过激活ERK1/2 / AP-1 c-Jun RAW264.7细胞信号通路和AP-1 (c-Jun) MOVAS细胞。这些结果表明AP-1 (c-Jun)可能发挥重要作用在nicotine-induced AAA的形成,进一步证实的报告,AP-1人类AAA (c-Jun)显著升高( 32]。的刺激 α7-nAChR pnu - 282987显著地抑制nicotine-induced激活ERK1/2和AP-1 (c-Jun) RAW264.7 MOVAS细胞然后抑制nicotine-stimulated upregulation MCP-1,咆哮,MMP-9, MMP-2。有趣的是,尼古丁可能通过不同的信号通路激活c-Jun RAW264.7和MOVAS细胞。我们之前的研究表明,尼古丁激活和pnu - 282987抑制物信号MOVAS细胞,这可能是另一个上游通路c-Jun [ 33]。这些信号通路的说明将揭示小说分子靶点可能提供一种新的治疗AAA策略。它需要提到尼古丁不能唤起NF -的激活 κB p65在这项研究中。尽管众所周知,NF - κ调节多种炎性细胞因子的表达,它可能扮演小角色的过程中nicotine-induced分泌MCP-1和咆哮。

ligand-gated乙酰胆是一个家庭的17个亚基组成的离子通道受体 α1 - α10日, β1 - β4, γ, δ, ε( 34]。除了中央和周围神经系统,已确定乙酰胆维管组织和免疫细胞( 34, 35]。不同的亚基组合导致功能多样的乙酰亚型具有不同配体的亲和力,阳离子渗透,信号( 36, 37]。的参与乙酰胆nicotine-induced炎性细胞因子的表达和MMP和发展AAA仍然未知。然而,越来越多的证据指向一种保护作用 α7-nAChR inflammation-based心血管疾病。程等人表明 α7-nAChR激活TNF的表达减少 αil - 6和缓解病毒性心肌炎( 38]。治疗pnu - 282987抑制ADP-induced人类血小板、血小板聚集和造血 α缺7-nAChR腹膜白细胞数量的增加和炎症介质的表达由腹膜白细胞(TNF α和c反应蛋白)和脾脏(TNF α)[ 39),被认为是重要的风险因素在动脉粥样硬化病变的发展 40]。的刺激 α由AR-R1779 7-nAChR变弱载脂蛋白E-deficient老鼠的血管硬化处理AngII可能通过抗炎效果和降低血压和血脂水平 41]。

与尼古丁激活多个乙酰亚型,pnu - 282987是一个选择的兴奋剂 α7-nAChR。因此,我们推断,独特的尼古丁的影响和pnu - 282987可能是由微分乙酰亚型。按照假设,德·莫拉和麦克马洪的最近的一项研究显示,pnu - 282987没有尼古丁的替代品辨别刺激雄性C57BL / 6 j小鼠( 42]。另一项研究表明,nicotine-induced儿茶酚胺释放肾上腺被调制 α3 β4乙酰胆,但不是通过 α7乙酰胆( 43]。

 5。结论

综上所述, α7-nAChR受体激动剂抑制nicotine-induced upregulation的炎性细胞因子,通过调节MMP ERK1/2 / AP-1 RAW264.7细胞信号和AP-1 MOVAS细胞。 α7-nAChR受体激动剂将AAA的新的治疗策略。然而,更多的研究,实验和临床的,是必要的,以获得进一步的洞察乙酰胆的功能和信号,并提供合理的治疗策略。

 的利益冲突

作者没有具体融资关系研究,没有利益冲突的披露。

 确认

这项工作是支持由中国自然科学基金会(国家自然科学基金委;不。81370415也没有。81670399)。

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