脂肪肝是一个主要的健康问题在高产奶牛泌乳早期( 1, 2]。营养因素如肥胖脂肪肝病因是至关重要的。肥胖奶牛采食量下降更大peripartal期间,因此,更严重的负面能量平衡在泌乳早期( 3]。导致增加脂肪组织的脂解作用。Nonesterifed脂肪酸(NEFA)释放存储三酰甘油(标签)的脂肪组织很容易被肝脏为肝功能提供能源。如果更多NEFA到达肝脏,所需能量的目的,过多的氧化不完全,产生酮体( 4)以及沉积转换为标记。在正常情况下,标签从肝脏分泌极低密度脂蛋白(VLDL)。VLDL分泌不足,然而,导致脂肪肝的发展( 5]。

然而,干牛并不总是与肥胖脂肪肝表明还有其他风险因素比肥胖使奶牛脂肪肝的发展( 5]。内分泌不足调整起始哺乳期间可能在脂肪肝发病机制中发挥作用。特别是,甲状腺可能扮演一个角色因为代谢活动的强度,碳水化合物和脂质代谢以及生乳是由荷尔蒙释放组织决定的。有证据在文学强大的甲状腺激素之间的关系状态peripartal期间(3星期前3周后裂冰),当体内平衡机制面临的最大挑战,和postpartal代谢紊乱在Holstein-Friesian奶牛 6, 7]。虽然在文献数据不一致是由于实验过程,通常观察到甲状腺激素浓度减少peripartal期间由于适应organisam负能量平衡和开始泌乳 8- - - - - - 12]。如果明显减少或不同步与其他代谢和内分泌的调整,减少可能导致代谢紊乱导致增加脂肪组织的脂类分解和甘油三酯积累在实质组织,尤其是肝脏。卡普et al。 13)观察到血液中甲状腺激素水平降低与减少线粒体脂肪酸氧化的能力导致肝弥漫性肝细胞脂质浸润和发音功能障碍。

牛的激素状态在遥远的和中期干旱时期及其关系postpartal代谢紊乱,据我们所知,还没有文献报道。对脂肪肝发病机制,识别风险因素与homeorhetic相关机制导致代谢紊乱将提供一个工具,可以用来更好地管理牛防止脂肪肝或提供早期征兆,可以用来隔离奶牛产犊后将它们标记为密集的介入和协议。这个策略需要一个理解的时间点,当调整监管机制突破生理极限从而促使奶牛代谢问题。

本研究的目的是监测甲状腺活动预期产犊前30天至12天产后以调查其与肝脏脂质含量在产后12天的关系。工作的目标是开发一个预测脂肪肝可用于诊断和介入的目的。

20一个健康干奶牛(预期产犊前30天),每年产生7000公升的牛奶或在前面的泌乳从商业奶牛和选择的研究。牛从4到6岁不等。牛被安置在一个tie-stall谷仓。成分和化学成分的干燥和泌乳早期奶牛饮食表中列出 1和 2。

三个血液样本被从每个动物:颈静脉穿刺前30天前预期产犊(中期干旱时期),第二个预期产犊前2天(后期干旱时期),第三个产犊后12天(泌乳早期)。样本获得无菌针成管状和允许自发凝结冰(约15分钟)。样本随后在1000 g离心20分钟,和血清和存储带到−18°C到分析。比较激素浓度没有影响的日常节奏,采集标本早上4到6小时后进食。

Triiodthyronine (T₃)和甲状腺素(T₄)在血清浓度测定,未及包(INEP-Zemun,塞尔维亚)验证使用牛血清。平均intraassay变异系数(CV)重复样本T分别为4.1%和3.5%₄和T₃,分别。国米化验CVs是低于10%。

产犊后12天,肝经皮活检获得使用活检仪器Hojovcova和Kacafirek[方法后 14]。活检进行正确的第11肋间隙,约2厘米通过块茎髋骨水平线以下。一个中型插管( ~ 介绍过o。d。邓肯6毫米, ~ 4毫米的身份证;20.5厘米长)周围的一个坚实的,可伸缩的needle-pointed套管针插入通过肌肉和腹膜进入肝脏的方向朝左肩。无聊插管进入肝脏后,样品(3到5厘米,3 - 4毫米直径)是通过创建一个真空通过套管针,然后向上弯曲的尖端插管,轻轻推动。肝脏样本被驱逐到清洁擦,玷污自由的血液,放入存储瓶含有10% phormaldehyde固定的解决方案。

肝组织脂质含量测定Pathomorphology部门教员的兽药、贝尔格莱德大学。pathohistological测定脂质,部分是由使用冷冻切片机和彩色与苏丹III。肝细胞脂质含量是决定通过计算机图像分析(软件问赢了)。

牛被分成三个组同等大小的基础上在肝脏脂质积累的程度:轻度脂肪肝( < 20%的脂肪, n = 7 ),中度脂肪肝(20 - 30%的脂肪, n = 7 )和严重的脂肪肝( > 30%的脂肪, n = 7 )。

分析数据为所有牛(对角图案的酒吧,图 1),T₄和T₃浓度显示下降趋势从天−产犊后30天12(数字 1(一)和 1 (b)),而T₃/ T₄比从天−增加30天−2和减少−2天12(图 1 (c))。

我们的结果与先前的报道是一致的文学的影响相对于时间periparturient期间甲状腺激素浓度在牛 8- - - - - - 12]。然而,根据双向方差分析获得的结果,随着时间的推移和肝脏中脂质积累的程度的固定因素,时间是一个T signifant因素₄( F = 6.34 , P < 。 01 , F = 2.84 , P = 。 067年 , F = 0.41 , P = 。 667年 对于T₃和T₃/ T₄比,职责)。T₄浓度在预期产犊前30天明显不同于崩解值在2天前和哺乳期12天( P < 。 05年 和 P < 。 01 、职责)。T₃/ T₄比率是一个简单的计算单位重量比率,反映甲状腺功能和潜在的这些激素的作用在外围组织。甲状腺产生主要是T₄,还有少量的T₃。周组织的主要活动T₄经历extrathyroidal酶激活 5 ′ deiodinase ( 5 ′ D)产生更强大的T₃( 15]。根据Pezzi et al。 12)、I型 5 ′ D在肝脏和最活跃在干旱时期,而高效的II型 5 ′ D主要见于乳腺,其活动是最高的在早期泌乳。

根据肝脏的脂质含量在产犊后第12天,牛被分为三组:轻度脂肪肝奶牛( n = 7 ; 10.34 ± 4.81 中度脂肪肝%脂肪)、牛( n = 7 ; 25.77 ± 3.92 %的脂肪),与严重的脂肪肝奶牛( n = 7 ; 43.58 ± 6.10 %的脂肪)。T的浓度₃T₄以及T₃/ T₄比例都是依赖于脂质在肝脏的内容( F = 26.82 , F = 63.42 , F = 24.12 分别地, P < 。 001年 )。因此,T₄浓度大大减少了牛严重脂肪肝(图 1(一)牛有轻微)比( P < 。 001年 和温和的 P < 。 001年 )脂肪肝,轻微但显著差异也发现在轻度和中度脂肪肝( P < 。 05年 )。此外,与严重的脂肪肝奶牛T的浓度明显降低₃比牛有轻微 P < 。 001年 )和中度脂肪肝( P < 。 001年 )(图 1 (b))。T₃/ T₄比率(数据 1 (c))与严重的脂肪肝奶牛牛有轻微明显高于( P < 。 001年 )和中度脂肪肝( P < 。 001年 )。互动的时间和程度的肝脏脂质是微不足道的所有参数( F = 2.54 , P = 。 055年 , F = 1.29 , P = 。 287年 , F = 1.64 , P = 。 179年 对T₃T₄,T₃/ T₄比,职责)。

确定参数之间的相关系数(T₄T₃,T₃/ T₄比)和牛的肝脏中脂质含量如表所示 3。

这项工作表明,奶牛患有严重脂肪肝经验低血清T₄浓度在peripartal时期。另外,这项研究的结果提供的证据T之间显著负相关₄浓度和脂肪积累在肝脏的程度在分娩后12天不仅在late-dry ( r = - - - - - - 0.898 ; P < 。 001年 )和泌乳早期( r = - - - - - - 0.769 ; P < 。 001年 ),当发生脂质动员,但也干中期期间( r = - - - - - - 0.633 ; P < 0.01 )(表 3)。低甲状腺激素(T₃和T₄)浓度在泌乳早期奶牛患有严重脂肪肝已经建立( 8- - - - - - 11]。脂肪酸堆积在肝脏脂肪变性,肝实质,它已经表明,一些脂肪酸抑制肝脏i型 5 ′ D活动( 16]。这可能是低T的原因₃浓度在干燥后期(−2天)和泌乳早期(12天)时间与严重的脂肪肝奶牛。此外,T之间存在显著的负相关₃浓度和肝脏脂肪堆积的程度在干燥后期( r = - - - - - - 0.680 ; P < 。 01 )和泌乳早期( r = - - - - - - 0.606 ; P < 。 01 ),但不是在干旱时期中期(表 3)。高温₃/ T₄比率与严重的脂肪肝奶牛干中期期间和显著正相关程度的脂肪堆积在肝( r = 0.606 ; P < 。 01 )可能表明T的明显下降₄水平或参与的机制,增加T₃浓度。根据Pezzi et al。 12),T₃浓度增加可能是由于增加了 5 ′ D组织活动。T之间存在显著正相关性₃/ T₄比和肝脏的脂肪堆积程度存在直到崩解( r = 0.772 ; P < 。 001年 )。由于肝脏的主要网站deiodinase活动在干旱时期( 12),它可以推测,将严重影响奶牛脂肪肝在肝脏代谢活动增强中期干燥期间,可能会损害肝细胞适应性peripartal期间。此外,牛患病率和T₄浓度低于最低的生理价值(4.2 μ g / dL,据Kaneco et al。 17]),明显高于与严重的脂肪肝奶牛干中期期间比牛与中度和轻度脂肪肝( P < 。 01 两个),而后期干燥期间只是统计上显著差异牛有严重和轻微脂肪肝( P < 。 01 )。也就是说,患有严重的脂肪肝奶牛T₄切断值以下,这表明他们经历过hypothyroidsm崩解。只有一个牛组和中度脂肪肝没有牛在轻度脂肪肝组T₄浓度低于4.2 μ g / dL。

总之,我们可以肯定,牛,严重影响脂肪肝早期哺乳期间,在甲状腺状态在整个研究期间,这意味着之前的发展条件,。干中期期间甲状腺状态可能是一个风险因素和脂肪肝的早期指标,同时,在早期哺乳,脂肪肝的etiopathogenetic因素是很重要的。根据我们的结果,这可能表明外围低血清甲状腺激素状态可能引发T₃/ T₄比例增加。从这个实验中,基于家庭数据没有结论相关机制,引发T₃/ T₄比率可以增加。为了阐明机制需要进一步调查。