JPR
寄生虫学研究期刊》的研究
2090 - 0031
2090 - 0023
Hindawi
10.1155 / 2020/4627158
4627158
研究文章
的时间表
摘要vasorum (1866)Baillet Kamensky, 1905:感染
Biomphalaria glabrata (例如,1818)
Barcante
t。
1
2
https://orcid.org/0000 - 0002 - 7963 - 5775
Barcante
j·m·P。
1
卡多佐
l
3
Remedio
r . N。
1
秘鲁首都利马
w·S。
2
林赛
d S。
1
健康科学部门
Lavras联邦大学的
Lavras
米纳斯吉拉斯37200 - 000
巴西
ufla.br
2
寄生虫学部门
米纳斯吉拉斯联邦大学
米纳斯吉拉斯
巴西
ufmg.br
3
兽医学系
农业和兽医科学学院
大学Tras-os-Montes e Alto杜罗河(UTAD)
5000 - 801年维拉真实
葡萄牙
utad.pt
2020年
5
3
2020年
2020年
30.
08年
2019年
10
12
2019年
24
01
2020年
5
3
2020年
2020年
版权©2020 t . a . Barcante et al。
这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。
法国犬恶丝虫的中间宿主
摘要vasorum 水生和陆地腹足类。目前的工作旨在澄清渗透的迁徙路线的网站
答:vasorum 在
Biomphalaria glabrata 蜗牛组织和评估他们的perilarval反应对细胞成分和组织学改变参与腹足类动物对感染的反应。
Biomphalaria glabrata 蜗牛是单独感染1000一期幼虫(L1)
答:vasorum 每个预定的时候感染后死亡。经皮感染与口腔感染同时发生。尽管幼虫取向纤维肌性的组织,一些幼虫位于不同的组织和器官。perilarval反应观察周围的幼虫在纤维肌性的层,后来出现在幼虫位于内脏。通过姬氏周围的幼虫的数量逐渐增加,形成一个pregranuloma。没有发现幼虫死亡和退化。没有发生迁徙模式定义,幼虫发展显然是与特定的组织或器官。此外,感染
答:vasorum 诱发系统性动员perilarval通过姬氏的反应。
大学联邦de Lavras
联邦德·米纳斯吉拉斯大学
Fundacao德帕罗尽管做Estado de米纳斯吉拉斯
1。介绍
摘要vasorum Kamensky (Baillet, 1866), 1905年是一个寄生虫野生和家养的metastrongyloid线虫犬科动物。成虫在宿主的右心室及肺动脉,引起咳嗽、呼吸困难、运动耐量下降,体重减轻、呕吐、神经症状,出血失调,心脏衰竭,最终死亡
1 ]。的生命周期
答:vasorum heteroxenous,涉及一些水生和陆地腹足类作为中间宿主,如蜗牛的物种
Achatina fulica 和
Biomphalaria glabrata (
2 - - - - - -
6 ]。第一阶段(L1)幼虫在犬科动物的粪便和进一步发展两个脱毛第三阶段(L3)中间宿主(
7 ]。的主机被感染到L3摄入,可以在环境中被释放或吸收和猎物(中间或paratenic主机)
8 ]。
有几个问题关于生命周期和传播
答:vasorum 应该阐明(
4 ]。知识的发展和幼虫动力学在中间宿主对更好的理解宿主—寄生虫关系至关重要,这一情况可能会导致对angiostrongylosis控制策略的发展。
目前的工作研究渗透网站和年代学的迁徙路线
答:vasorum 幼虫在
Biomphalaria glabrata 和评估这中间宿主的perilarval反应,有关细胞成分和组织学改变参与腹足类动物对感染的反应。
2。材料和方法
的
答:vasorum 应变是孤立的国内狗的粪便自然感染(
犬属后裔 ),生活在Caratinga,米纳斯吉拉斯,巴西。通过串行感染线虫是维持国内的狗和水生蜗牛(
b . glabrata 实验室的兽医寄生虫学、寄生虫学、联邦大学的米纳斯吉拉斯(UFMG),巴西。实验过程中执行该工作UFMG伦理委员会批准(协议编号060/03),并使用符合动物福利的接受原则在实验科学。
2.1。腹足类动物感染
第一阶段(L1)的幼虫
答:vasorum 从殖民地获得被保存在实验室。幼虫被修改后的恢复从狗的粪便Baermann的装置
8 ]。38实验培育
b . glabrata 壳从10到15毫米直径,在聚苯乙烯单独感染文化测试板6井,充满了3毫升的水和1000 L1
答:vasorum 每一个
。 24小时后,腹足类被转移到一个水族馆
8 ]。
2.2。时间研究
过程中感染(30分钟;1、2、3、4、5、6、12、24小时;和2、3、4、5、6、8、14、20、30和60天),两个蜗牛被随机从感染的水族馆来评估每个预定的时间。蜗牛壳穿孔,整个被固定在磷酸盐福尔马林(
9 ),在10% EDTA溶液脱钙为15天,外壳去矿化作用。腹足类的柔软的部分分开了壳牌和放置在一个自动组织处理器脱水,diaphanization,埋置,加入石蜡。样品被切成5
μ m系列部分切片机,和一个六张幻灯片与苏木精和伊红染色。部分进行了分析,得到图像亮场显微镜(德国卡尔蔡司)。
3所示。结果
口腔和皮肤被观察到的感染途径。尽管幼虫取向纤维肌性的组织,一些幼虫在研究期间位于不同的器官和组织,如表所示
1 。在口腔感染,一些观察幼虫消化道腔。他们中的一些人是位于不同的消化道壁层。皮肤感染包括上皮细胞的分裂的幼虫,它渗透皮,然后到达了脚或纤维肌性的组织。然而,它是不可能区分感染途径结缔组织的幼虫被发现时,消化腺,hemocele或循环系统。幼虫进入通过这些路线可能位于这些组织。
表1
幼虫的
摘要vasorum 坐落在感染后不同的组织或器官
Biomphalaria glabrata。
感染时间
幼虫的位置
体育
神奇动物
CS
嗯
DT
我
CE
厘米
CT
DG
MC
BB
厘米
PS
我
AG)
CT
KD
30分钟
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1 h
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2 h
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3 h
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4 h
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5 h
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6小时
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8 h
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12小时
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24小时
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2天
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3天
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4天
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5天
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6天
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8天
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14天
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20天
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30天
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60天
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+
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体育:穿透上皮细胞;弗拉维奥-布里亚托利:纤维肌性的组织或脚;CS:循环系统(船舶、窦);嗯:hemocele;DT:消化道腔;问:附近粘膜;CE:穿过上皮细胞;CM:穿越基底膜;CT:结缔组织;DG:消化腺; MC: mantle cavity; BB: buccal bulb; CM: columellar muscle; PS: pseudobranquia; ME: mantle epithelia; AG: albumen gland; CT: connective tissue between organs; KD: kidney.
大部分的幼虫被发现在后者,包围或不是由细胞聚集,这里叫做血细胞反应,与变量(表程度的反应
2 )。
表2
血细胞的形态分类的反应
Biomphalaria glabrata 感染了
摘要vasorum。
感染时间
血细胞反应的分类
缺席
离散
温和的
Pregranuloma
肉芽肿
总凹面的幼虫
松散总通过姬氏
30分钟
X
1 h
X
2 h
X
3 h
X
4 h
X
5 h
X
X
6小时
X
X
8 h
X
X
12小时
X
X
24小时
X
X
X
2天
X
3天
4天
5天
6天
X
8天
14天
X
20天
X
X
X
30天
X
60天
X
在30分钟的感染(数字
1(一) 和
1 (b) ),存在更多的L1食道和肠前部和后部。从第一个小时(图
1 (c) ),观察幼虫坚持胃粘膜上皮内的位置。在这两种情况下,没有观察到的细胞反应。2 h的曝光(图
1 (d) - - - - - -
1 (f) ),他们观察到在消化腺和憩室内,没有perilarvar细胞反应。此外,幼虫(L1)也被观察到在牙龈结膜层之间的中肠和消化腺,与当地轻微的细胞反应。(图3 h后的感染
1 (g) )、幼虫(L1)毗邻hemocele消化腺和自由,有轻度细胞反应,是可视化;在胃里,上皮内的幼虫观察位置或穿过基底膜,用离散细胞渗透。(图4 h的感染
1 (h) ),L1首次观察到的循环系统和外套腔的幼虫。幼虫在踏板地区,涉及pregranuloma观察(图5 h后感染
2(一个) )。后6 h(数字
2 (b) 和
2 (c) ),一些寄生虫可视化在纤维肌性的组织,仍然没有perilarvar反应;在邻近的组织颊灯泡,可以观察到局部电池反应,尽管存在幼虫在鼻小柱肌肉提升细胞反应。在(图8 h的感染
2 (d) ),一些幼虫被发现的脚组织和pseudogill;在12 h(图
2 (e) ),这些寄生虫是首次观测到的衬里上皮肺腔和肺憩室。
图1
组织学的部分
Biomphalaria glabrata 感染了1000 L1
摘要vasorum 。苏木精和伊红染色。(一)概述部分消化管的线虫(黑色箭头)附近粘膜感染30分钟后开始;(b)幼虫(L1)穿透上皮的足背腹足类动物的质量开始三十分钟后感染;(c)概述胃的地区几个幼虫腔(黑色箭头),在上皮(白色箭头),和旁边的基底膜(白色星号)的开始一小时后感染;(d)幼虫消化腺内部从开始的两个小时后感染;(e)幼虫(L1)深刻的中肠粘膜(见扩展细节)。在较大的箭头,幼虫位于结膜下上皮细胞层,两个小时后感染的开始;(f)的细节之前的照片显示一个离散的局部细胞反应;(g)幼虫位于消化腺的血腔显示离散局部细胞反应的开始三小时后感染; (h) larvae inside the circulatory system (arrow) between the albumen gland (white asterisk) and the kidney (black asterisk) after four hours of the beginning of the infection. Magnifications: (a, d) 150
μ m;50 (b, e)
μ m;(c) 120
μ m;(f): 35
μ m;(g) 60
μ m;(h) 160
μ m。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
图2
组织学的部分
Biomphalaria glabrata 感染了1000 L1
摘要vasorum 。苏木精和伊红染色。(a)幼虫的脚纤维肌性的组织(箭头)之间呈现明显的空间和组织细胞渗透大约五小时后感染的开始;(b)幼虫在脚的肌纤维组织无明显感染的细胞反应6小时后开始。白色星号显示了神经系统的结构;(c)幼虫位于鼻小柱肌肉细胞渗透接近它;(d)幼虫位于pseudobranquia的薄片(箭头),没有细胞反应,八小时后感染的开始;(e)幼虫在脚的肌纤维组织(箭头)的证据perilarvar反应更有组织性,保持清晰的空间开始12小时后感染;(f)强烈的纤维肌性的组织细胞反应足背质量的存在pregranuloma perilarvar(白色星号)24小时开始的感染;(g)的纤维肌性的组织细胞浸润的足背地区(黑星号)上的细胞开始形成一个按钮的一侧pregranulomatous反应(箭头); (h) larva located in the mantle without showing obvious cellular reaction maintaining the standard of formation of a clear space with forty-eight of the beginning of infection. Magnifications: (a, c, d, g, and h) 35
μ m;(b) 50
μ m;(e) 25
μ m;(f) 40
μ m。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
后1天(数字
2 (f) 和
2 (g) ),大多数的寄生虫是位于肌肉组织的踏板质量,包围与pregranuloma形成更强烈的细胞反应,在某些情况下显示细胞迁移的凹面幼虫。幼虫(L1)观察外套腔上皮和肺组织后48 h(图
2 (h) )。6天后(数字
3(一个) 和
3 (b) ),几种典型肉芽肿踏板地区分布,首次发现寄生虫住的间质蛋白腺。幼虫也发现肾循环系统和hemocele之间的结缔组织,憩室的消化腺和pseudogill感染蜗牛后14天(数字
3 (c) 和
3 (d) )。在感染(图20天
3 (e) ),观察到的模式是类似的,虽然有不同的组织反应。在30天(数字
3 (f) - - - - - -
3 (h) ),幼虫位于踏板质量,肾脏,pseudogill, right-rectal组织,和鼻小柱的肌肉,附近的连接组织,在60天的感染(数字
4(一) - - - - - -
4 (e) 免费),他们被发现在血淋巴和踏板质量hemocele,非常微弱的反应。
图3
组织学的部分
Biomphalaria glabrata 感染了1000 L1
答:vasorum 。苏木精和伊红染色。(一)肉芽肿的形成两个不同的层,内部类上皮细胞方面(黑色星号)和外,与纤维母细胞等细胞(箭头所指)。白色的十字架显示细胞的形成按钮的一侧开始感染的幼虫后六天;(b)的幼虫(箭头)蛋白腺内被细胞反应;白色的星号显示细胞反应开始后6天感染;(c)内肉芽肿形成肾动脉(白色星号)的感染后14天开始。肾空间是由黑色的星号,箭头所指示的幼虫是L2因为这颗粒在肠(14天);(d)肉芽肿足背地区确定变薄的上皮(箭头所指)感染后14天开始;(e)幼虫在脚的肌纤维组织强烈反应以按钮的形式(黑色星号)没有典型的肉芽肿,20天后开始的感染; (f) larva (white arrow) in a less typical granuloma located in the conjunctive tissue around the kidney (black asterisk) thirty days after the beginning of infection. (g) Weak cellular reaction around the larva with looser appearance. It can be observed larvae within mucus cells (black asterisk) thirty days from the beginning of infection; (h) larvae located in foot fibromuscular tissue without presenting typical granulomatous response, keeping the space even more clear after thirty days at the beginning of infection. Magnifications: (a–h) 35
μ m。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
图4
组织学的部分
Biomphalaria glabrata 感染了1000 L1
答:vasorum 。苏木精和伊红染色。(a)幼虫(垂直箭头)位于脚纤维肌性的组织与细胞结构和松散组织的外观加上黑色素的沉积色素(斜箭头)60天后开始的感染;(b)幼虫(L3)踏板组织肉芽肿性结构没有证据显示组织很松散的方面开始后的60天感染;(c)幼虫(L3)与宽松的外观和连接组织存在明显的净空间周围感染的幼虫后60天开始;(d)免费幼虫(L3)位于之间的空间(黑星号)消化腺的憩室(灰色星号)没有细胞结构的存在后60天左右开始的感染;(e)免费幼虫(箭头所指)在肾空间(黑色星号)没有细胞结构的存在后60天的开始感染。放大:(模拟):35
μ m;(e): 120
μ m。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
第一和谨慎的血细胞反应的迹象出现在中肠2 h,当一层通过姬氏包围的幼虫(L1)(数据
1 (e) 和
1 (f) )。通过姬氏周围的幼虫的数量逐渐增加,从5 h感染后,这些细胞更有组织,形成一个pregranuloma(数字
2(一个) - - - - - -
2 (f) )。血球的反应不同,不同的幼虫提出不同强度的反应,甚至没有反应。一个清晰的幼虫周围空间存在于所有标本(数据分析
2 (e) - - - - - -
2 (h) )。在感染后的24小时,反应更强烈,经常通过姬氏pregranulomas和聚合形成的凹度的幼虫,称为细胞按钮(图
2 (g) )。肉芽肿的形成6天的感染。肉芽肿了两层,内部厚层由几个通过姬氏同中心地组织和外部层,通过姬氏夷为平地,形成一个胶囊(数字
3(一个) 和
3 (b) )。细胞质液泡指示通过姬氏的高活动构成肉芽肿被认为在第14天(数据
3 (c) 和
3 (d) )。偶尔,上皮细胞伸展,由于产生的压力日益增长的肉芽肿。扩展的血细胞反应和通过姬氏的数量明显减少(图20天的感染
3 (e) )。幼虫(L2)和周围血细胞反应没有靠近直肠的牙龈组织。30天后,肉芽肿不存在的外部层扁平细胞和通过姬氏的聚合是宽松的,小,用海绵外观,有时呈现色素(数字
3 (f) - - - - - -
3 (h) )。整个器官的肉芽肿改变的外观在60天。他们变得宽松,像海绵组织。幼虫周围的净空间更广泛,血球渗透几乎缺席(数据
4(一) - - - - - -
4 (e) )。
4所示。讨论
自1960年以来,当属腹足类
Arion 被证明参与的生命周期
答:vasorum (
7 ),一些新的调查集中在宿主—寄生虫关系报告(
4 ,
8 ]。目前的研究集中在组织学方面的
b . glabrata 感染
答:vasorum 。可以观察口服和皮肤感染,其次是L1扩散到多个组织和器官,并围绕幼虫的血细胞反应的修改。
线虫Metastrongyloidea顺序,包括
答:vasorum ,感染中间宿主穿透消化道和/或皮(
10 - - - - - -
15 ]。在目前的工作中,幼虫通过墙壁消化道入侵发生在连续的步骤,没有偏好特定部分,如前所观察到的其他作者(
16 - - - - - -
18 ]:上皮表面的附着力,transepithelial迁移到基底膜,基底膜的换位,连接牙龈组织的入侵。皮肤感染的证据包括观察幼虫穿透上方的上皮细胞和L1的外皮在第一分钟和小时的感染。这两种感染途径也被证实在其他angiostrongylids [
10 ,
11 ,
13 ,
15 ]。事实上,感染
摘要costaricensis 发生与此同时也通过口服和经皮通道,观察组织学部分(
19 ]。然而,分子机制,参与L1幼虫之间的交互和消化道上皮不同段的腹足类仍然是未知的。
在目前的研究中,可能的减少数量的L3感染的标本30和60天内可能表明幼虫消除发生。在此期间,幼虫形态异常,没有证据表明,幼虫在宿主幸存下来。这些事实表明,幼虫在环境中被淘汰,所建议的其他作者(
20. ]。Conboy et al。
21 ]报道自发摆脱metastrongyloid L3的检测实验感染蛞蝓的粪便。在目前的研究中,L3幼虫接近直肠的存在也可能表明这个地区可能充当幼虫消除路线
答:vasorum。
感染和迁移过程中在主机内,幼虫可能保留在一些地方,主要集中在纤维肌性的组织,包围或不是由血细胞反应。然而,一些幼虫(L1)扩散到整个有机体,朝着组织蛋白酶等酶的帮助或进入循环系统,流在血管和鼻窦,直到他们达到组织或器官。在目前的工作中,渗透和入侵优先发生在第一个5 h。然而,移民通过内脏发生更长一段时间。幼虫最好达到消化腺、肾、胃肠道、肺、pseudobranchia和结缔组织。
几个还发现大量的工作
摘要 幼虫在纤维肌性的组织
14 ,
16 ,
17 ]。蒙特莎et al。
17 )表明,大量的幼虫
答:costaricensis 纤维肌性的组织结果充足hemolymphatic血管化组织。理查兹和梅里特
14 ]建议的大多数
答:cantonensis 幼虫消化道渗透着墙进入血腔,导致纤维肌性的组织和脚。
perilarval反应的发展开始从5 h(感染和显示发展模式独立于目的地的幼虫。然而,幼虫(L1)穿透皮肤可能附着在纤维肌性的组织,而那些摄入需要穿过肠道上皮细胞在任何水平,没有特异性的渗透,以达到其他内部器官通过血腔或直接接触。此外,幼虫可能达到的各种器官显然在任何时间,因为它们摄取的曝光时间。
腹足类的细胞反应是由通过姬氏(coelomocytes或变形细胞),白细胞细胞集群(封装)病原体和产生体液中间体。在目前的研究中,我们观察到幼虫血细胞反应未受损的组织和器官的蜗牛没有退化。血细胞反应集中在幼虫,除了这些点的血球聚合的组织和器官正常的外观。这种寄生虫能够发展好了,即使通过姬氏包围。例如,已知metastrongyloid幼虫存活细胞内反应(
16 ,
22 ]。还有些研究讨论由寄生虫宿主的免疫反应开发(
23 ,
24 的封装,angiostrongylids被认为是这样一个过程的一个例子(
16 ,
17 ,
22 ]。
最初,建立了细胞密度在幼虫与随后的纤维母细胞分化,形成了pseudocapsule从6天的感染。其他作者(
25 ,
26 )也提出这个变形细胞分化的成纤维细胞。同样的模式也被观察到
答:cantonensi 年代感染
b . glabrata 。周围形成一个明确的空间在其他angiostrongylids幼虫是一种常见的现象,它是由于潜在的蛋白水解酶产生的幼虫(
16 ]。然而,这种组织模式不应被混淆与幼虫进入粘液细胞的脚,有相似的外观,以及组织收缩的发生的可能性,组织学工件。在目前的研究中,是不可能证明幼虫蛋白水解活性负责明确空间分离幼虫部分和周围宿主组织。然而,明确空间在几个样本观察。这表明,有必要调查如果这种现象是由于蛋白水解酶已经被证明
答:costaricensis 感染
Sarasinula marginata (
16 ]。
这项工作表明,感染
b . glabrata 通过
答:vasorum 通过口服和经皮通道发生,没有一个定义的迁徙模式。同样,在感染的网站,通过姬氏的系统性动员诱导,导致perilarval反应,虽然没有幼虫的死亡。越来越多的动物线虫的重要性
答:vasorum 及其人畜共患潜在问题加强研究宿主—寄生虫关系的重要性。研究比较血细胞形态学方面的反应
答:vasorum 不同种类的腹足类感染可能导致更好的理解在无脊椎动物先天免疫系统。除此之外,他们也可能被用作工具的研究和开发这种寄生虫的控制方法。
数据可用性
使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
我们想提供特别感谢恩里克曼扎诺兰兹博士,虽然不再与我们,继续鼓励他的例子和奉献他的学生在他的职业生涯。我们也感谢Langia杆菌蒙特莎和Teofania Heloisa南美洲阿莫林Vidigal科学支持。这项研究受到了联邦德·米纳斯吉拉斯大学(UFMG),大学联邦de Lavras (UFLA)和Fundacao de帕罗尽管做Estado de米纳斯吉拉斯(FAPEMIG)。
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