梨形鞭毛虫病产生重大的公共卫生影响,因为高患病率和疾病负担的感染及其倾向导致重大疫情和紧急反应(
人类贾第虫病的临床表现相对变量,从没有症状的急性或慢性腹泻,脱水,腹痛,恶心,呕吐,和减肥
关于这个问题,组合之间的相关性和临床症状的研究报道有争议的结果。一些研究指出,更与集合相关症状(
贾第虫病是一种流行在古巴肠道寄生虫感染患病率从10 - 55%在最近的研究中,主要是在首都和该国的西部省份(
自识别遗传的组合被认为是一个主要元素在人类贾第虫病的研究,开发和应用是很重要的,与基本分子实验室设备,单步PCR方法,允许一个探测和区分a和B组合和混合感染从人类粪便标本通过放大产品的凝胶电泳(
一个描述性的横断面研究的639名儿童进行了4所小学坐落在城市环境中属于广场de la冗员时,河岸,Boyeros直辖市,在哈瓦那。他们受到常规检查作为肠道寄生监测计划的一部分,从2013年1月至2013年12月。在这项工作中,我们研究的频率
粪便收集容器都交给父母被要求把孩子当天的新鲜样本检查。三粪便样本每个孩子参与这项研究检查肠道寄生虫。标准问卷用于收集信息,对每一个孩子根据人口(如年龄,性别,和家庭成员的数量),环境(例如,可用性和厕所的家庭类型,类型的供水、垃圾处理,和国内的动物),个人卫生(例如,饭前洗手,排便后,玩动物之后,洗蔬菜和水果在消费之前,沸水在消费之前,和洗澡的地方),和一般健康状况的参与者(即。症状相关的腹泻等肠道寄生虫感染(根据世卫组织(1998)定义),恶心,呕吐,腹痛和接受打虫药治疗的历史)。症状儿童被定义为那些孩子至少有上述症状之一,包括在问卷中,而无症状的儿童被称为完全没有症状。
新鲜的粪便样本被收集在一个标签和容器无菌粪便。凳子的一部分被湿涂片染色检查现场Lugol的碘和紧随其后的是福尔马林乙酸乙酯浓度技术在10 x 40 x光显微镜下的放大。所有的腹泻粪便样本被改良抗酸的染色
DNA溶解产物然后用酚/氯仿/异戊醇(24:24:1),紧随其后的是氯仿/异戊醇(24:1)根据Sambrook和罗素协议(2001)(
DNA分子进行了分析使用PCR-relevant出版协议(
进行了PCR反应混合物使用AmpliTaq DNA聚合酶GeneAmp 10 x PCR缓冲设备(美国应用生物系统公司)的总量25
DNA是放大使用thermocycler(美国应用生物系统公司Amp基因PCR系统9700)。PCR分析了产品2%琼脂糖凝胶电泳,沾染了0.5
从无菌文化的DNA
所有的数据进行了分析使用EPINFO 6.04和3.1 EPIDAT统计项目。卡方检验和比例测试是用来评估的意义关联。确切概率法被使用在需要时由于数据不足。
单变量分析使用所有可用的输入变量。使用引入多元逻辑回归测试是用来确定每个独立变量显著相关的结果变量。比值比(或)和95%可信区间(CI)被用来近似相关的相对风险敞口。的
研究协议经伦理委员会批准的“佩德罗Kouri”研究所。书面知情同意得到父母/监护人对儿童参与这项研究。每个症状的孩子被发现,而且被一位儿科专家。
总共有639儿童检查,76人感染
之间存在无显著相关
儿童感染的特征
| 特征 | 检查数量( |
阳性 |
|
有症状的儿童( |
无症状的儿童( |
|
|---|---|---|---|---|---|---|
| 性 | ||||||
| 男性 | 357年 | 42 (11.8) | 0.92 | 23日(54.8) | 19日(45.2) | 0.87 |
| 女 | 282年 | 34 (12.1) | 18 (52.9) | 16 (47.1) | ||
| 居住面积 | ||||||
| 城市 | 558年 | 69 (12.4) | 0.38 | 38 (55.1) | 31 (44.9) | 0.54 |
| 农村 | 81年 | 7 (8.6) | 3 (42.9) | 4 (57.1) | ||
| 皮肤的颜色 | ||||||
| 白色的 | 432年 | 48 (11.1) | 25 (52.1) | 23日(47.9) | ||
| 黑色的 | 58 | 3 (5.2) | 1 (33.3) | 2 (66.7) | ||
| 混血儿 | 149年 | 23日(15.4) | 0.32 | 15 (65.2) | 8 (34.8) | 0.43 |
| 年龄 | ||||||
| < 5 | 162年 | 27日(14.1) | 13 (48.1) | 14 (51.9) | ||
| > 5 | 477年 | 49 (10.3) | 0.06 | 28日(57.1) | 21日(42.9) | 0.45 |
| 腹泻 | ||||||
| 是的 | 123年 | 18 (14.6) | 12 (66.7) | 6 (33.3) | ||
| 没有 | 516年 | 58 (11.2) | 0.36 | 29 (50.0) | 29 (50.0) | 0.22 |
显微镜下呈阳性76份粪便样本
组合和混合感染的分布在76个DNA样本。
| 类型的聚合酶链反应 | 组合 | 结果 | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 一个从总积极(%) | B从总积极(%) | A + B从总积极(%) | 总积极 | 不放大 | |
| PCR - |
7 (11.1) | 30 (47.6) | 26日(41.3) | 63年 | 13 |
| PCR - |
5 (8.6) | 39 (67.3) | 14 (24.1) | 58 | 18 |
Ethidium bromide-stained高分辨率显示DNA琼脂糖凝胶放大2% triosephosphate异构酶(
2%琼脂糖凝胶显示PCR产品特定组合A和B根据万尼et al ., 2012。巷1、分子标记100个基点的阶梯;2,积极控制组合B(272个基点);巷3,积极控制组合(165个基点);车道4 - 6,代表样本阳性B组合;车道7 - 8代表阳性样本组合;道9 -控制组合,B-specific pcr。
我们也关注分析的临床意义
组合的分布
| 临床数据 | 组合PCR - |
|
||
|---|---|---|---|---|
| B ( |
一个( |
A + B ( |
||
| 无症状的 | 13 (46.4) | 2 (50.0) | 5 (45.4) | 0.99 |
| 有症状的 | 15 (53.6) | 2 (50.0) | 6 (55.6) | |
|
|
||||
| 腹泻 | 11 (39.3) | 0 (0) | 1 (9.1) | 0.02 |
| 腹部疼痛 | 12 (42.9) | 1 (25.0) | 2 (18.2) | 0.12 |
| 肠胃气胀 | 5 (17.9) | 0 (0) | 2 (18.2) | 0.63 |
| 恶心 | 6 (21.4) | 1 (25.0) | 4 (36.4) | 0.53 |
| 呕吐 | 5 (17.9) | 1 (25.0) | 2 (18.2) | 0.90 |
| 厌食症 | 6 (21.4) | 1 (25.0) | 3 (27.3) | 0.90 |
| 发烧 | 5 (17.9) | 1 (25.0) | 1 (9.1) | 0.63 |
| 失去的重量 | 11 (39.3) | 1 (25.0) | 2 (18.2) | 0.22 |
| 疲劳 | 4 (7.1) | 0 (0) | 1 (9.1) | 0.94 |
表
分析潜在的相关危险因素
| 特征 |
|
|
|
|||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 负 | 积极的 |
比值比(95%置信区间) |
|
比值比(95%置信区间) |
|
|
| 其他家庭成员感染了贾第虫病 | ||||||
| 是的 | 58 | 11 (18.9) | 1.7 (0.85 - -3.39) | 0.13 | 1.4 (0.63 - -2.27) | 0.09 |
| 没有 | 581年 | 65 (11.2) | 1 | 1 | ||
| 饮用水的来源 | ||||||
| 安全的水(经过氯处理) | 601年 | 75 (12.5) | 1 | 1 | ||
| 不安全的水(未处理) | 38 | 1 (2.6) | 0.2 (0.03 - -1.56) | 0.09 | 0.4 (0.12 - -1.89) | 0.17 |
| 水先煮后消费 | ||||||
| 是的 | 457年 | 34 (7.4) | 1 | 1 | ||
| 没有 | 182年 | 42 (13.5) | 1.4 (0.75 - -2.7) | 0.27 | 1.1 (0.56 - -2.01) | 0.34 |
| 吃饭前洗手 | ||||||
| 是的 | 338年 | 31 (9.7) | 1 | 1 | ||
| 没有 | 301年 | 45 (23.1) | 1.6 (1.00 - -2.64) | 0.04 |
1.3 (0.89 - -2.23) | 0.06 |
| 排便后洗手 | ||||||
| 是的 | 621年 | 74 (11.9) | 1 | 1 | ||
| 没有 | 18 | 2 (11.1) | 1.1 (0.24 - -4.71) | 0.92 | 0.9 (0.38 - -3.91) | 0.79 |
| 之前洗蔬菜/水果消费 | ||||||
| 是的 | 498年 | 47 (9.4) | 1 | 1 | ||
| 没有 | 141年 | 19日(13.5) | 1.2 (0.68 - -2.04) | 0.56 | 1.3 (0.80 - -1.97) | 0.61 |
| 让狗在家里(s) | ||||||
| 是的 | 71年 | 33 (46.5) | 2.6 (1.23 - -5.36) | 0.004 |
2.1 (1.11 - -4.76) | 0.01 |
| 没有 | 76年 | 12 (15.8) | 1 | 1 | ||
先前的研究表明
的分子特征
在目前的研究中,我们发现了一个高的部分混合感染(PCR - 41.3%
混合感染的发生还指出最近在一些使用assemblage-specific调查
混合感染的情况下的可靠检测受到几个因素的影响,包括标本中的每个组合的比例和有偏见的扩增效率的一个组合。在目前的研究中,使用
在目前的研究中,基因分型结果不一致的结果在pcr应用观察在22个分离株(28.9%),代表更高比先前报道的病例数(10 30%)(
的分子特征
基因分型不一致结果观察到在人类和动物(特别是狗还牛)隔离
贾第虫病的症状差异与不同的组合对荷兰病人最初描述。这里,组合与轻度间歇疾病有关,但组合B与严重持久的疾病(
在以前的研究在我国皮雷约et al。(2008)和普埃布拉et al。(2014),密切联系组合B和学校的孩子们被发现症状。然而,混合感染的比例在调查报道进一步复杂症状的归因感染特定的组合。相比我们的先前的研究
的患病率
的动物传染病的传播
考虑到兴趣解开有关的流行病学的复杂问题
总之,贾第虫病是一种最常见的肠道寄生虫感染在古巴的孩子。的决心
作者宣称没有利益冲突。
论文中列出所有作者实验设计作出了巨大贡献,它的实现,或数据的分析和解释。菲德尔·a . Nunez博士(风扇),卢西亚博士Ayllon巴尔德斯(LA),地方政府投资公司。路易斯恩里克·赫雷斯普埃布拉(LEJ),博士Lazara罗哈斯Rivero (LR)和诺伯特•穆勒(NM)博士设计的研究中,路易斯恩里克赫雷斯普埃布拉,博士Yuliet门德斯苏蒂尔(YM),伊莎贝尔博士马丁内斯席尔瓦(IM),地方政府投资公司。玛尔塔马丁内斯冈萨雷斯(毫米),博士Irais Atencio文澜(IA)进行寄生虫学的粪便样本。菲德尔·a·涅斯、诺伯特·穆勒和路易斯恩里克赫雷斯普埃布拉数据结果的分析和解释;菲德尔·a·涅斯和诺伯特•穆勒批判性知识内容的修订了论文。所有作者阅读和批准了期末论文。
本研究在一定程度上由瑞士国家科学基金会的资助(批准号31003 a_138353)。