为了确定一个准确的快速和可靠的技术诊断疟疾研究的效率测试等Parahit总(HRPII &醛缩酶Ag),优势mal卡(寄生虫特定的LDH),和修改QBC完成与传统相比血液涂片镜检。一百例感染
全国媒介传播疾病控制计划(NVBDCP)印度每年报道200万疟原虫阳性病例,其中约50%
疟疾的黄金标准检测微观检测是乏味和依赖技术专长。因此测试Parahit总喜欢利用mal卡,和QBC介绍了。针对疟疾感染的严重性和缺乏在当前可用性的诊断设施在印度,我们进行了一个比较研究上面的测试与显微镜在基线和8到15天的跟踪。
目前的研究是一个前瞻性评估员失明,比较研究评估各种技术用于疟疾的诊断患者从简单的疟疾症状
患者的18到70岁之间的历史与疟疾发热疑似一般户外或疟疾病人部门(门诊部当),Kasturba医院传染病,孟买,印度,筛选后得到书面知情同意从2010年5月到2011年11月。有症状的病人,简单的疟疾的存在证实了以下的标准包括:
血涂片阳性
发烧或前24小时内的热历史。
患者知情同意被从所有参与这项研究。重要参数如温度、脉搏、和血压记录在研究的开始(第一天)。
两个或三个滴血放在载玻片,五µL吸管mal卡的优势,Parahit总五µL器,55 - 65
厚,薄膜制备在同一幻灯片彩色染色方法和石油油浸物镜光学显微镜下检查。
无性,性阶段的寄生虫密度测定的厚膜通过计算寄生虫的数量分别对200个白细胞和被表达在每毫升(
QBC (Becton Dickinson)雇佣了microhematocrit离心是一种有效的检测手段疟原虫通过直接检查。它采用毛细管内部涂以EDTA和吖啶橙(
在修改QBC QBC管充满了55
疟疾快速诊断检测都是执行和解释根据制造商的指示。
所有患者在第一天和被要求来跟踪在8到15天。每个病人样本受到所有的测试在后续的日子。
快速测试阅读两个独立的研究助理,以减少偏见蒙蔽了。血液的电影被蒙蔽了经验丰富的显微镜工作者在实验室没有提及快速测试的结果和临床病人的历史。所有负面的幻灯片快速检测呈阳性的测试或测试呈阴性反应的所有积极的幻灯片快速测试被另一位专家再次检查显微镜学家蒙蔽显微镜的结果。
大部分的分析是由Instat version 3.2(加州GraphPad软件)和Epimax计算器(临床与经济软件解决方案,美国新泽西州)。灵敏度也计算手动TP / (TP + FN)×100%,特异性为TN / (TN + FP)×100%,阳性预测值(PPV) TP / (TP + FP)×100%,阴性预测值(NPV)作为TN / (FN + TN)×100%,假阳性率(玻璃钢)FP / (FP + TN)×100%,准确性(ACC) (TP + TN) /(正面+负面)×100%,和错误发现率(罗斯福)FP / (FP + TP)×100%。敏感性和特异性被用来计算测试结果为阳性的可能性比率(灵敏度/(1 -特异性)]和负面测试结果(灵敏度(1 -)/特异性)。优势比也被计算。所有的参数测试和微观检测的金标准进行评估。
共有1301名患者被怀疑与疟疾筛选疟原虫的厚薄PBS(外周血涂片)从2010年5月到2011年11月。筛选后,266名患者满足入选标准(知情同意,诊断是积极的、发烧、发热或历史)参与研究;216名患者为疟原虫阳性;50对疟原虫不利。216阳性患者,201跟踪完成,101患者感染
这项研究的流程图。
病人诊断为恶性疟疾的年龄从18岁到70岁,与间日疟原虫(31.94±11.37),32.01±12.21。平均基线,在第一天,无性寄生虫密度恶性组为4436.16±11996.87(0 - 112000),性密度为335.2±769.75(0 - 6000µL),意味着在间日疟原虫无性密度组2728±3157.15(40 - 13040µL),和性密度是3610±4407.55(80 - 19200年µL)(表
包括患者的基线特征。
| 参数 | 恶性疟原虫臂( |
间日疟原虫臂( |
消极的手臂 |
|---|---|---|---|
| 年龄(平均±标准差) |
|
|
|
| 性别:男:女 | 96:5 | 97:3 | 39:11 |
| 无性寄生虫密度(平均数±标准差) |
|
|
0 |
| 配子母细胞密度(平均数±标准差) |
|
|
0 |
| 发热持续时间(平均±SD)天 |
|
|
|
从50 -病人,发现了一个假阳性与PBS显微镜相比。PPV敏感性、特异性、NPV和似然比积极和似然比消极的恶性疟原虫和间日疟原虫的手臂已经计算用表2×2外周血涂片作为黄金标准(表
| 染色涂片 | 优势mal卡 | Parahit总 | ||
|---|---|---|---|---|
| 积极的 | 负 | 积极的 | 负 | |
| 间日疟原虫 | ||||
| 积极的- 100 | TP 97 | FN 3 | 73 TP | 27 FN |
| Negative-50 | 1《外交政策》 | TN 49 | 1《外交政策》 | 49万亿年 |
| 总- 150 |
|
|
|
|
| 恶性疟原虫 | ||||
| 积极的- 101 | 96 TP | FN 5 | 71 TP | 30 FN |
| Negative-50 | 1《外交政策》 | TN 49 | 1《外交政策》 | 49万亿年 |
| 总- 151 |
|
|
|
|
| 涂片 | 修改QBC | |
|---|---|---|
| 积极的 | 负 | |
| 间日疟原虫 | ||
| 积极的- 100 | 98 TP | 2 FN |
| Negative-50 | 1《外交政策》 | 49万亿年 |
| 总- 150 |
|
|
| 恶性疟原虫 | 积极的 | 负 |
| 积极的- 101 | 99 TP | 2 FN |
| Negative-50 | 2《外交政策》 | 48万亿年 |
| 总- 151 |
|
|
TP:真阳性,TN:真阴性,FN:假阴性,与《外交政策》:假阳性。
患者感染
| 修改QBC | PLDH | Parahit总 | |
|---|---|---|---|
| 灵敏度 | 98 (94.4 - -99.5)ab | 95.0 (91.3 - -96.0)*一个 | 70.3 (65.9 - 71.2)* b |
| 特异性 | 96 (88.7 - -99.0)cd | 98.0 (95.1 - -99.9)c# | 98 (89.2 - -99.9)# d |
| 阳性预测值 | 98 (94.4 - -99.5) | 99.0 (95.1 - -99.9) | 98.6 (92.5 - -99.9) |
| 消极的预测价值 | 96 (88.7 - -99.0) | 90.7 (83.7 - -92.5) | 62.0 (56.4 - -63.2) |
| 似然比+ | 24.5 | 47.52 | 35.14 |
| 似然比− | 0.02 | 0.050 | 0.30 |
| 优势比 | 1176 (131.09 - -18730.21) | 940.80 (99.17 - -22239.18) | 115.96 (15.96 - -2389.96) |
| 相对风险 | 24.50 (8.35 - -97.02) | 10.68 (5.84 - -13.31) | 2.59 (2.12 - -2.71) |
| 卡巴 | 0.94 (0.831 - -0.985) | 0.912 (0.801 - -0.940) | 0.59 (0.48 - -0.62) |
| 总体精度 | 0.9733 | 96.0 | 0.79 |
| 假阳性率 | 0.04 | 0.02 | 0.02 |
| 假阴性率 | 0.02 | 0.049 | 0.29 |
一个不具有统计学意义
患者感染
| 修改QBC | PLDH | Parahit总 | |
|---|---|---|---|
| 灵敏度 | 98 (94.5 - -98.9)ab | 97.0 (93.4 - -97.9)*一个 | 73% (68.6 - -73.9%)* b |
| 特异性 | 98 (91.1 - -99.9)cd | 98.0 (90.8 - -99.9)# cd | 98% (89.2 - -99.9%)# d |
| 阳性预测值 | 99 (95.5 - -99.9) | 99.0 (95.3 - -99.9) | 98.6 (92.7 - -99.9) |
| 消极的预测价值 | 96.1 (89.3 - -97.9) | 94.2 (87.3 - -96.1) | 64.5 (58.7 - -65.7) |
| 似然比+ | 49 | 48.5 | 36.5 |
| 似然比− | 0.02 | 0.030 | 0.27 |
| 优势比 | 2401 (177.42 - -87320.96) | 1584.33 (140.25 - -44349.3) | 132.48 (18.11 - -2739.27) |
| 相对风险 | 25.24 (8.93 - -48.37) | 17.15 (7.52 - -25.30) | 2.77 (2.24 - -2.91) |
| 卡巴 | 0.95 (0.85 - -0.98) | 0.941 (0.834 - -0.969) | 0.628 (0.51 - -0.65) |
| 总体精度 | 98年 | 97.33 | 81.33 |
| 假阳性率 | 0.02 | 0.02 | 0.02 |
| 假阴性率 | 0.02 | 0.03 | 0.27 |
#不具有统计学意义
c没有统计显著的
恶性疟原虫的手臂,优势mal卡未能发现五个恶性疟原虫阳性。8天,9患者
Parahit总未能发现30恶性疟原虫阳性。Parahit totaldetected 59 68 8天假阳性和假阳性15天。
修改QBC未能在第一天接两个阳性。八天,所有9名患者
Parahit总数和优势mal卡没有发现任何积极的间日疟原虫的寄生虫密度小于200的手臂,而QBC显示33%的敏感性。
Parahit总显示75.25%的敏感性间日疟原虫的寄生虫密度超过200人的手臂,而优势mal卡和QBC显示100%的敏感性。
Parahit总显示灵敏度很低的百分之五在恶性疟原虫的寄生虫密度小于200的手臂,而优势mal卡和QBC显示的敏感性为75%和90%,分别为(表
灵敏度的快速诊断检测和QBC寄生虫密度高于和低于200 /
| 测试 | 显微镜检查结果 | |||
|---|---|---|---|---|
| PF < 200 / |
PF≥200 / |
PV < 200 / |
PV≥200 / |
|
| Parahit总 | 1 (5%) | 70例(86.41%) | 0 | 73例(75.25%) |
| 优势mal卡 | 15 (75%) | 81例(100%) | 0 | 97例(100%) |
| QBC | 18 (90%) | 81例(100%) | 1 (33.33%) | 97例(100%) |
Parahit总显示86.41%的敏感性在寄生虫密度超过200,而优势mal卡和QBC显示100%的敏感性。
间日疟原虫的手臂,100完成随访患者,利用mal卡未能接3 PBS显微镜间日疟原虫阳性的样品。八天,四个患者在15天假阳性,而所有的病人都是消极的寄生虫。
Parahit总未能接27由显微镜间日疟原虫阳性样品。它检测到1混合感染阳性
八天,有67误报负的显微镜,15天,Parahit总发现52假阳性。
修改QBC手臂在第一天未能接两个样品检测呈阳性
的敏感性和特异性Parahit总在间日疟原虫的手臂73%和98%,70%和98%的恶性疟原虫的手臂。优势mal卡有97%和98%的敏感性和特异性间日疟原虫在恶性疟原虫的手臂,手臂和95%和98%分别与外周血涂片相比。间日疟原虫的手臂的敏感性和特异性98%,恶性疟原虫的手臂被发现98%和96%,分别,这使得它良好的诊断测试。
疟疾的准确诊断及时治疗很重要的发热患者抗疟药物降低死亡率和发病率,并有效地管理nonfebrile疾病。PBS显微镜很繁琐和费时。各种敏感方法曾简单,可靠,快速诊断疟疾。这些都是最有前途的快速诊断测试和QBC
修改QBC方法未能发现两个PBS间日疟原虫阳性。这可能是由于这一事实晚营养体的比重
的敏感性QBC据报道已经高达90%,由高隆et al。(
修改QBC检测到一个样本为假阳性
结果也可用在8 - 15分钟是一小部分所需的时间比厚膜的方法。培训的资源也减少了与3 - 5天的培训学员可能产生的结果与一位有经验的技术人员。修改QBC持有承诺视为一个很好的替代选择染色染色PBS由于其速度,灵敏度和特异性常规QBC特别是病人负载非常高的地方。
我们修改常规QBC方法降低了每个测试成本48%在一个小实验室设置(
两种抗原的测试评估,利用mal卡显示97%和98%的敏感性和特异性间日疟原虫在恶性疟原虫的手臂,手臂和95%和98%分别与外周血涂片相比。的敏感性优势mal卡测试几乎是类似的QBC相比。抗原测试的局限性是它不能区分积极治疗感染和最近感染的显微镜和QBC仍然是一个重要的优势。此外,RDT不能检测疾病的严重程度,只是有用的诊断疟疾。除了寄生虫数也不能使用RDT尤其需要
Parahit总的敏感性和特异性分别为73%和98%,间日疟原虫的胳膊,70%和98%的恶性疟原虫的手臂。优势mal卡的敏感性远比Parahit总检测疟疾感染。的低灵敏度
优势的主要好处mal卡(pLDH Ag) Parahit总(HRP-II Ag)是有更少的假阳性的后续研究。
恶性疟原虫的高假积极挽Parahit总可能解释之后,身体慢慢地消除HRP-II寄生虫间隙。HRP-II已被证明存在,可检测疟疾临床症状消失后,从宿主寄生虫显然已经被清理
所显示Gerstl et al。
阿什利et al。
在目前的研究中,利用mal卡片显示的灵敏度为97%
需要采用更加敏感测试,除了快速还能够检测到低水平的parasitaemia。的替代品染色染色显微镜PCR, QBC,和快速诊断检测。PCR不适合在现场或临床实验室常规使用这是一个研究工具。QBC方法被发现更迅速比周围血涂片检查离心使疟原虫小紧凑的区域集中在巴菲外套层。这增加的速度和易于解释parasitaemia特别的低。背景和形态表象不是通过修改QBC改进。背景和形态的表象常规QBC QBC几乎类似于修改。我们修改常规QBC技术使它更便宜的在不影响的敏感性和特异性的技术。这是一系列和常规QBC一样敏感。也比常规QBC成本效益要求诊断实验室在印度。 Therefore modified QBC could be the method of choice for laboratory setting in India as an alternative to conventional microscopy. However Giemsa stained microscopy is the gold standard.
有抗疟药物研发投资增加但它应该伴随着平行投资改善诊断工具。考虑诊断方法的优点和缺点,它可以从这个调查结论,修改QBC可以替代显微镜在设置适当的功能是可用的。然而在足够的实验室备份不可用的情况下,简单的和用户友好的技术优势mal卡可以使用具有较高的敏感性和特异性。本研究的结果也将有助于使国家和国际政策决定根除疟疾项目。
更多的投资需要改善疟疾诊断测试。这项工作表明,改性QBC是一个符合成本效益,精确的测试,可用于实验室用适当的设施。优势mal卡可以使用更好的跟踪测试,但即使没有一个实验室的设置。
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
作者的感激和感谢是由于两RDT制造商提供他们的测试评价和Girish Patwardhan博士提供的QBC测试评估。他们感谢在考试疟疾患者参与了这项研究。