JPR
寄生虫学研究期刊》的研究
2090 - 0031
2090 - 0023
Hindawi出版公司
617028年
10.1155 / 2012/617028
617028年
研究文章
简短的交流:一个简单的方法来执行Worm-Egg依赖Formaldehyde-Preserved乙酸钠样品
梅尔罗斯
韦恩
孟席斯
冬青
布尔
梅丽莎
约瑟夫
海莉
里夫
大卫
Speare
理查德。
玛珊德
伯纳德
安东Breinl公共卫生与热带医学中心
詹姆斯库克大学
汤斯维尔
昆士兰4811
澳大利亚
jcu.edu.au
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版权©2012韦恩·梅尔罗斯等。
这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。
加藤Katz方法是最常见的人类粪便样本上执行worm-egg计数的方式,但它必须在现场使用新鲜收集样本。这很难用在偏远,缺乏可访问的情况。介绍一个蛋的简单方法依赖保存样本收集,发送到中央位置进行进一步处理。
1。介绍
粪便worm-egg计数为基线调查和正在进行的监测和评价是一个重要部分驱虫药项目(
1]。加藤Katz方法(
2,
3)是最常见的表现方式虫子蛋数量对人类粪便样本,但它需要检查新鲜的粪便。这使得它很难使用等领域的中央太平洋可能意味着部署一个显微镜专家团队,他们的设备,一个小岛和物资,只能通过一个不可靠的运输服务,或巴布亚新几内亚的偏远地区,访问是昂贵的航空服务,可以推迟几天,甚至几周,恶劣天气。加藤Katz方法包括其他问题需要检查准备在30分钟内,防止overclearing和低估钩虫鸡蛋
1),无法保持样品或幻灯片复审质量控制,感染的风险从粪便样本,和最后但并非最不重要,安全处理的废弃材料,尤其是玻璃幻灯片,在小隔离环礁和岛屿的处理任何类型的垃圾是很困难的。
所有上述问题可以克服使用醋酸钠,醋酸,福尔马林(SAF)保存样品
2),长时间保持稳定,即使存储在环境温度。收集容器和防腐剂可以发送调查网站提前,当地卫生工作者和收集的样品发送到中心实验室运输可用时进行处理。蛋的问题是设计一个方法依靠粪便样品已经被稀释,防腐剂。一种方法是添加一个重的粪便量到一个已知体积的防腐剂,但需要合适的余额可以在现场收集网站。新引入“FLOTAC”方法(
4)也可以用于保存样品,但需要专门的设备。其他优点的SAF-preserved样品是他们可以用来进行更全面的寄生虫学的调查因为浓度方法可用来检测“罕见”鸡蛋和永久性污渍可用来检测原生动物。
2。材料和方法
SAF添加到粪便样品后尽快收集在一个近似的一部分样本比两个固定剂,彻底和均质使用木制纵向的“压舌器”的分裂。没有肿块的排泄物必须将防止彻底固定的样本。任何明显的异物如石头,树叶也删除。
到达实验室后转移到一个塑料10毫升样品管和离心足够的时间和速度紧密包粪便材料管的底部。一些实验需要根据类型的离心机和排泄物的密度和组成。在我们实验室最优结果通过离心法在500克10分钟。仔细去除上层清液让尽可能少的背后。
小心注意下一步是绝对关键的成功的方法。拥挤的粪便必须彻底,大力均匀混合,以确保任何虫卵整个粪便物质的重新分配。这是最好通过使用一半的一个木制的压舌器加上一个旋涡混合器。
加藤Katz模板的供应是必需的。我们实验室使用那些由Vestergaard Frandsen因为他们是塑料制成的,可以清洗和重用,但任何品牌都可以。把模板放在显微镜幻灯片,填补的洞中心排泄物,水平,并谨慎地升空模板离开测量数量的排泄物(通常是41.7毫克)在幻灯片上。添加一滴水,拌匀,放置一个
22
×
22
毫米上盖玻片。(使用
22
×
40
盖玻片将薄但会需要更长的时间来检查做准备。)数鸡蛋在显微镜下,特别重视盖玻片的边缘。鸡蛋的数量数乘以24计算每克鸡蛋(EPG)。
3所示。结果与讨论
正式并排比较加藤Katz和这种方法尚未完成,但laboratory-generated比较是由混合新鲜,unpreserved粪便样本包含钩虫鸡蛋和另一个包含
蛔虫和
鞭虫trichiura鸡蛋与未感染的粪便样本的蛋。Kato-Katz数量在每一个样本之后,SAF添加和计数重复使用的新方法。比较结果表
1。
比较在EPG计数。
| 样本数量 |
加藤卡茨 |
新方法 |
| 1 |
864年 |
1120年 |
| 2 |
528年 |
938年 |
| 3 |
408年 |
216年 |
| 4 |
1800年 |
2232年 |
| 5 |
400年 |
284年 |
| 6 |
6384年 |
4938年 |
| 7 |
3072年 |
2088年 |
| 8 |
280年 |
456年 |
| 9 |
4032年 |
2850年 |
| 10 |
0 |
72年 |
| 11 |
2064年 |
1700年 |
| 12 |
120年 |
0 |
| 13 |
2829年 |
1856年 |
| 14 |
0 |
128年 |
| 15 |
0 |
0 |
| 16 |
1920年 |
1200年 |
| 17 |
408年 |
827年 |
| 18 |
120年 |
0 |
| 19 |
48 |
0 |
| 20. |
360年 |
432年 |
由于小数量的样品是不可能来比较三种分别获得的结果,但是这三个很容易准备的幻灯片中识别新方法和视觉清晰度非常好。钩虫鸡蛋完全消失了的幻灯片准备的加藤Katz方法重新检验时第二天,但仍完全可见的幻灯片准备的新方法。如果幻灯片准备的新方法与硬干燥密封边缘安装介质或指甲油会持续数月,从而提供一个有价值的培训材料的来源。这是直接与Kato-Katz准备不能保存超过一天或两天前干燥成为无用的。
因为这是一个人工实验室实验使用少量的“飙升”而不是一个精心设置的实地试验样品使用真实的参与者很难得出一个明确的结论比较结果,但一些重要的观察。加藤Katz,这种方法似乎不可靠的检测低密度低于100 EPG感染,但这两种方法检测到类似数量的阳性样本。非常重要的是,尽管有一个蛋数量的变化之间的方法,他们两人的30个样本正确分类29代表“光强度感染”使用世界卫生组织分类(
1]。
的批评之一可以在该方法被夷为平地,离心人为改变流体的内容,因此样品的一致性。加藤Katz方法没有考虑流体内容或粪便样本的一致性,这是强调作为一个潜在的误差来源(
5,
6]。因此可以认为,包装离心将减少这种错误的排泄物。最好也必须记住,这两种方法都可以描述为“半定量的”,极端的准确性不是必需的或预期。
4所示。结论
这个新方法显示了巨大的希望来描述进行寄生虫调查和监控驱虫药程序在偏远,很难达到,并且在后勤方面最具挑战性的地方加藤Katz的使用方法是不可能的,但一些实地比较需要。
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