1。介绍
非洲锥虫病是一种疾病引起的几个锥锥虫科的家庭,影响人类或动物。
锥虫属evansi (
t . evansi )是最广泛分布的致病性非洲锥虫,影响家畜和野生动物(
1 ),导致非洲锥虫病,疾病影响人类和动物(
2 - - - - - -
4 ]。这也是众所周知的
t . evansi 是一种疾病的病因代理叫做伊氏锥虫病是牲畜发病率和死亡率的主要原因
5 ,
6 ),据报道发生在各种主机经济最重要的是马、水牛和牛
3 ,
6 ,
7 ]。
锥虫属brucei brucei (Tbb)也会引起非洲锥虫病以及其他种类的锥虫虽然Tbb形态相似
t . evansi ,后者不同于相关物种缺乏kinetoblast DNA minicircle [
8 ]。
目前,3500万人和2500万头牛在非洲感染这种疾病的危险,若不及时治疗会引发(
9 ]。具有讽刺意味的是,一些注册trypanocides经常是有毒的,需要长时间的管理,缺乏有效性和对大多数患者(有时是不可承受的
10 ]。
在许多非洲国家,植物历来用于世纪和仍在广泛用于治疗这种疾病和其他寄生虫病也可能是由于有限的可用性和医药产品的支付能力。精油(EOs)是植物产生的气味成分,传统上用于呼吸道感染,是具有抗菌性(
11 ,
12 ]。这也是众所周知,一些EOs一些化学成分具有杀虫特性(
13 )和一些EOs特征阵列的化合物在不同的变化最丰富的萜类化学成分的类型和苯基化合物(
14 ]。
目前的研究中,调查了EOs的体外antitrypanosomal活动的证据
Cymbopogon citratus、桉树citriodora桉树camaldulensis 和
素类 对Tbb和
t . evansi 为了探索自然的产品可能会更容易trypanocides来源与物种差异和当前可用的治疗这一事实远非理想。
2。材料和方法
2.1。收集的植物材料
新鲜的
素类 (CS)从新鲜橘子皮得到购买Zaria-Nigeria 2009年4月。的叶子
Cymbopogon citratus (CC)是收获的研究花园国家研究所化学技术(NARICT) 2009年3月Zaria-Nigeria
,桉树Camaldulensis (ED)和
桉树citriodora (EC)收获当即从国有林业,卡杜纳state-Nigeria 2009年4月。植物(CC、EC和ED)被确定在生物科学部门,Ahmadu贝洛大学Zaria-Nigeria。
2.2。测试生物
寄生虫
锥虫属brucei brucei 和
锥虫属evansi 使用和获得stabilates寄生虫学实验室,兽医学院,Ahmadu贝洛大学Zaria-Nigeria。
2.3。提取精油
短暂,250克新鲜植物原料的植物放在一个圆底烧瓶,1000毫升蒸馏水添加之前让水电蒸馏(
15 为6小时)。EOs是恢复和无水硫酸钠干燥。每个EOs产生稀释使用纯植物油从大粮油米尔斯获得有限,美国非洲公司,尼日利亚拉格斯。EOs准备的不同浓度为0.4 g / mL, 0.2 g / mL和0.1 g / mL的稀释剂组成为50%,25%,和1%,分别。
2.4。测定Parasiteamia
寄生虫被连续通道保持在实验室老鼠,直到它是必需的。通过完成当parasiteamia范围至少需要补充16至32每字段与受感染血液含有寄生虫
1
×
10
3
寄生虫是腹腔内引入健康的老鼠在0.1 - -0.2毫升血液/生理盐水。寄生虫的数量确定在放大显微镜下
×
400年,Parasitaemia每天监测。
2.5。在体外测试
药物孵化传染性试验(
16 用湿和厚血电影方法[]
17 检测任何能动的锥虫在96 microtitre板,一式三份
μ
20 L受感染的血液被孵化
μ
L的EOs从50%、25%和1%(之前准备的)最终浓度为114毫克/毫升,57毫克/毫升和28.6毫克/毫升,分别。Parasitaemia之间监测1 - 20分钟的孵化
30.
°
C
。约0.5
μ
l - 1
μ
L测试混合物在显微镜下观察每1分钟
×
400年。一组积极控制(PC)、消极控制(NC)和稀释剂控制(DC)建立站4小时与受感染的血液含有寄生虫。电脑包含25毫克/毫升
DIMINAVETO
R
(1.05 g的Diminazene diaceturate和1.31 g安替比林),数控只包含受感染的血液悬浮在肝素钠和磷酸缓冲盐葡萄糖(pH值7.2)和直流只包含纯植物油(100%)。
2.6。气相色谱-光谱法(气相)
这是被马舍尔et al。
13 使用EOs]从CS, CC, EC,和ED - ms QP2010岛津制作所,日本。柱温箱的温度
5
0
°
C
、注射温度是
20.
0
°
C
、压力为53.2 kPa。,Linear velocity was 36.2 cm/sec and Total flow was 53.8 mL/min. The Compounds were identified by GC retention time (RT) and by comparism with those present in the National Institute for Standard Technology computer data bank (NIST; 05 s. LIB).
3所示。结果与讨论
结果在图
1 和
2 显示的体外活性EC, CS,埃德和CC
t . evansi 和Tbb。在结果中给出数据
1(一) ,
1 (b) ,
1 (c) 和
1 (d) ,这是观察到剂量的0.4克/毫升浓度每个EOs的使用造成死亡的寄生虫3分钟(CC在2分钟除外)
t . evansi 。EOs的浓度在0.2 g / mL和0.1 g / mL, CS的寄生虫的死亡时间是7分钟,17分钟,ED是4分钟和15分钟,EC是3分钟,19分钟,分别和CC 2分钟和10分钟。数据
2(一个) ,
2 (b) ,
2 (c) ,
2 (d) 州的体外Antitrypanosomal活动的四种EOs和Tbb 0.4克/毫升浓度诱导死亡的Tbb 5分钟,4分钟,3分钟,CS, ED / EC和CC。EOs的浓度在0.2 g / mL和0.1 g / mL, CS的寄生虫的死亡时间为6分钟,15分钟,ED 8分钟,17分钟,EC 8分钟,22分钟,分别和CC是4分钟,11分钟。这表明疟原虫死亡的剂量和时间模式
t . evansi 和Tbb。结果表明,CC有较高的影响在减少细胞数量多,EC和CS对
t . evansi 和Tbb。所有EOs显示活动在两个寄生虫甚至在0.1克/毫升浓度但是有变化在细胞数量减少的EO的候选人。
CS (a)、(b),电子商务,(c)和CC (d)精油(EO)
t . evansi 血形式。EOs是稀释在0.4克/毫升(深蓝色),0.2克/毫升(红色)和0.1克/毫升(绿色)在纯植物油作为稀释剂,然后添加到文化,如前所述。治疗的寄生虫Diminaveto(积极的控制,紫色)诱导总溶解后2分钟。寄生虫的数量保持不变-控制和稀释剂控制(浅蓝色)。
(一)
(b)
(c)
(d)
CS (a)、(b),电子商务(c)和CC (d)精油(EO) Tbb血液形式。EOs是稀释在0.4克/毫升(深蓝色),0.2克/毫升(红色)或0.1克/毫升(绿色)在纯植物油作为稀释剂,然后添加到文化,如前所述。治疗的寄生虫Diminaveto(积极的控制,紫色)诱导总溶解后2分钟。寄生虫的数量保持不变-控制和稀释剂控制(浅蓝色)。
(一)
(b)
(c)
(d)
表
1 展示了各种化合物中EOs和化学成分被发现为每个EO是不同的。例如,柠檬醛(38.32%)出现在CC, Beta-myrcene(1.81%)和环丁烷(98.08%)出现在CS, Eucalptol(75.04%)出现在ED和6-Octenal(77.11%)存在于电子商务。大多数这些化合物Beta-myrcene,桉树脑和柠檬醛是已知生物活性(
13 ,
18 ,
19 原材料)也对植物和人类病原体(
20. ]。一些报道也表明CC在过氧化反应中发挥作用通过抑制自由基攻击生物膜(
21 ,
22 特别是红细胞,不可能带来任何健康风险
15 ]。EOs的活动也可能是由于环碳氢化合物的疏水性(表
1 ),它允许EOs与锥虫引起构象变化的寄生虫膜稳定膜结构产生的损失(
21 ]。
表1
gc - ms分析精油从CS,艾德,EC和CC。
复合
RT
CS (%)
ED (%)
电子商务(%)
CC (%)
Beta-Myrcene
10.045
1.81
- - - - - -
- - - - - -
- - - - - -
环丁烷
11.322
96.08
- - - - - -
- - - - - -
- - - - - -
1,6-octadien-3-ol
13.186
1.70
- - - - - -
- - - - - -
- - - - - -
院长的
15.355
0.41
- - - - - -
- - - - - -
- - - - - -
6-octenal
14.405
- - - - - -
- - - - - -
77.11
- - - - - -
环己醇
14.573
- - - - - -
- - - - - -
3.42
- - - - - -
6-octen-1-ol
15.878
- - - - - -
- - - - - -
14.09
- - - - - -
2,6-Octadiene
17.790
- - - - - -
- - - - - -
2.58
- - - - - -
环己醇
17.899
- - - - - -
- - - - - -
1.11
- - - - - -
Bicyclo 7.2.0 undec-4-ene
18.968
- - - - - -
- - - - - -
1.29
- - - - - -
1,7-Nonadiene
25.464
- - - - - -
- - - - - -
0.40
- - - - - -
Bicyclo(3.1.1)庚- 2 -烯
8.490
- - - - - -
10.27
- - - - - -
- - - - - -
苯
11.129
- - - - - -
6.23
- - - - - -
- - - - - -
环己烯
11.217
- - - - - -
4.92
- - - - - -
- - - - - -
桉油精
11.452
- - - - - -
75.04
- - - - - -
- - - - - -
p-meth-1-en-8-ol
15.261
1.65
2-Oxabicyclo octan-6-ol (2.2.2)
17.610
- - - - - -
1.09
- - - - - -
- - - - - -
(2 s, 4 r) -P-metha - (
1
(
7
)
,
8
]-diene-2-hydroperoxide
21.253
- - - - - -
0.80
- - - - - -
- - - - - -
2,6-octadien-1-ol
18.717
- - - - - -
- - - - - -
- - - - - -
26.63
2,6-octadienal
19.242
- - - - - -
- - - - - -
- - - - - -
35.05
柠檬醛
18.408
- - - - - -
- - - - - -
- - - - - -
38.32
在寄生虫数量快速减少Tbb和体外测试
t . evansi 表明EOs实际上是杀死寄生虫,一个未知的机制尽管EOs可以有多个模式的行动和多个点的破坏(
23 )抑制一些寄生虫糖酵解途径中的关键酶。也知道一些EOs组件抑制乙酰胆碱酯酶活性和作用于其他脆弱的网站,如细胞色素p450 (
13 ]。这种多组分的性质的植物EOs锥上几个目标网站的优势,这是一次特别相关的增加多药耐药病原体的出现。
我们没有观察到任何有鞭毛的运动恢复或增加细胞数量的Tbb和
t . evansi 4小时后孵化与PC和观察,CC,艾德,EC和CS。数控和直流没有影响寄生虫或单元号(数字
1 和
2 ),这给人动力的EOs物种使用。的观测数据
1 和
2 表明锥虫物种差异可能负责的功效Trypanocides符合事实,所有的EOs寄生虫数量随时间的方法不同。
在这项研究中,评价的四个EOs物种能够降低细胞数量的Tbb和
t . evansi 剂量依赖的模式。CC有更大影响的EOs减少寄生虫数量超过EC, CS和ED但理解真正的作用机理还有待进一步调查。EO续集这些品质,是权宜之计主题进一步锥体虫病理生理学。