JPATH 杂志的病原体 2090 - 3065 2090 - 3057 Hindawi出版公司 10.1155 / 2016/8603964 8603964 研究文章 碳青霉烯耐药表型检测金属-β-内酰胺酶 鲍曼不动杆菌在巴基斯坦与儿科患者 安瓦尔 Muneeza 1 Ejaz 哈桑 1 征服者 Aizza 1 哈米德 哈姆丹 2 Rodriguez-Palacios 亚历山大 1 微生物学系 儿童医院和儿童健康研究所的拉合尔 巴基斯坦 2 美国免疫学 拉合尔大学健康科学 巴基斯坦 2016年 30. 3 2016年 2016年 15 11 2015年 14 01 2016年 02 03 2016年 30. 3 2016年 2016年 版权©2016 Muneeza瓦尔et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

耐药 答:baumannii已成为一个重要的和有问题的人类病原体是几种类型的感染的病原体尤其是新生儿免疫功能低下的患者,因为至少他们有能力对抗感染。碳青霉烯类抗生素作为最后的治疗这些感染但目前抵抗碳青霉烯由于MBL生产正在上升。本研究的目的是确定抗生素耐药性的频率 答:baumannii也比较的功效结合试验和双磁盘协同测试金属-β-内酰胺酶的检测。总共有112 答:baumannii确定了从各种临床样本和抗生素敏感性取决于Kirby-Bauer磁盘扩散法。112年,66名(58.9%)隔离耐imipenem和meropenem (OXOID)。这些耐药隔离测试"生产,55个(83.3%)被修改"生产商霍奇测试。这些隔离进一步检测MBL生产综合测试和双磁盘协同测试。66年,49隔离都是积极的方法,CDT DDST,发现了只有一个隔离- (kappa值= 0.038)。所有MBL生产菌株表现出非凡的耐头孢菌素、氟喹诺酮类原料药,氨基糖甙类和哌拉西林/ tazobactam (OXOID)。抗生素耐药性是非常高的 答:baumannii被隔绝在巴基斯坦的孩子特别出席一个肾脏学单元。

 1。介绍

答:baumannii是一种多晶的需氧菌革兰氏阴性细菌。这是一个不动的,封装,nonlactose发酵革兰阴性球杆菌( 1]。这是最重要的物种属 不动杆菌这已成为一个全球耐药医院病原体( 2]。院内感染病人安全的一个主要挑战,第六最重要的死亡原因在美国( 3]。

答:baumannii引起广泛的感染如通风相关肺炎、败血症、尿路感染、伤口感染、脑膜炎特别是免疫力低下和住院病人 3]。碳青霉烯类抗生素通常作为最后的治疗严重的院内感染引起的耐药菌株( 4]。尽管抗生素耐药性是由多个机制,由于碳青霉烯耐碳青霉烯抗生素水解酶(现在是一个全球问题 5]。

碳青霉烯类水解酶属于A、B和D根据分子Ambler分类和被称为"。然而,"在B类需要一个或两个锌离子的催化活性和这些酶因此被称为MBLs [ 6]。MBLs被认为是更重要的比其他的耐药机制,因为他们几乎可以水解所有beta-lactam抗生素( 7]。没有临床批准MBL抑制剂,使这些酶一个严重威胁人类健康 8]。MBL基因编码可以很容易地从一个细菌传播到另一个通过水平基因转移机制 7]。

MBL行列式似乎是普遍的在印度次大陆和印度70 - 90%的人口可能携带MBL生产商而在巴基斯坦27.1%的人口可能携带MBL生产者和洲际MBL产生物种的传播已经承认在欧洲,澳大利亚,非洲( 9, 10]。MBLs目前已知至少20所表达的物种包括大部分的肠杆菌科的家人尤其是 大肠杆菌, 肺炎克雷伯菌, 答:baumannii, 脆弱拟杆菌, 气单胞菌属hydrophila, Stenotrophomonas maltophilia, 粘质沙雷氏菌, 和绿脓假单胞菌( 11]。

本研究旨在量化的耐药模式 答:baumannii碳青霉烯和检测的频率" MBL生产 答:baumannii表型,修改治疗和发起有效的感染控制措施。

 2。材料和方法

这种描述性的横断面研究的微生物学、儿童医院和儿童健康研究所的拉合尔,从2014年7月到2014年12月。总共有112 答:baumannii从临床标本包括尿液、血液、痰、脓、体液、气管分泌物和文化进行。殖民地的嫌疑 答:baumannii被革兰氏染色鉴定,菌落形态-氧化酶反应和API 20 e。显示所有的菌株耐碳青霉烯进一步筛查" MHT和MBL生产,DDST,分别和CDT。

2.1。抗菌药物敏感性

抗生素敏感性测试来确定执行测试的灵敏度模式生物利用Kirby-Bauer磁盘扩散法(表 1)。不同的抗生素OXOID测试包括阿米卡星(AK)、庆大霉素(CN)、头孢呋辛(CXM),头孢克肟(CFM)、头孢噻肟(CTX)、头孢他啶(CAZ),头孢曲松钠(CRO) sulbactam /头孢哌酮(SCF)、环丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LEV)莫西沙星(氧化物),meropenem (MEM) imipenem (IPM)、硫酸粘菌素(CT)、哌拉西林/ tazobactam (TZP)。

抗菌素的敏感性MBL生产 答:baumannii。

抗生素 耐药(%) 中间敏感(%) 敏感(%)
头孢呋辛 66 (100.0) 0 (0.0) 0 (0.0)
头孢克肟 66 (100.0) 0 (0.0) 0 (0.0)
Meropenem 66 (100.0) 0 (0.0) 0 (0.0)
Imipenem 66 (100.0) 0 (0.0) 0 (0.0)
头孢曲松钠 65 (98.5) 1 (1.5) 0 (0.0)
头孢噻肟 65 (98.5) 1 (1.5) 0 (0.0)
头孢他啶 64 (97.0) 0 (0.0) 2 (3.0)
环丙沙星 61 (92.4) 0 (0.0) 5 (7.6)
左氧氟沙星 57 (86.4) 1 (1.5) 8 (12.1)
莫西沙星 57 (86.4) 1 (1.5) 8 (12.1)
哌拉西林/ tazobactam 55 (83.3) 5 (7.6) 6 (9.1)
阿米卡星 55 (83.3) 4 (6.1) 7 (10.6)
庆大霉素 47 (71.2) 0 (0.0) 19日(28.8)
Sulbactam /头孢哌酮 12 (18.2) 18 (27.3) 36 (54.5)
硫酸粘菌素 10 (15.2) 0 (0.0) 56 (84.8)
2.2。修改霍奇测试(MHT)

所有的碳青霉烯耐药菌株受到MHT "的检测。写明ATCC的悬架 大肠杆菌25922年准备0.5麦克法兰标准相比在5毫升无菌生理盐水悬架使用直接的殖民地。4.5毫升无菌生理盐水用移液器吸取了无菌管。然后0.5毫升的写明ATCC 大肠杆菌25922年暂停添加到4.5毫升的生理盐水1:10稀释。稀释写明ATCC 大肠杆菌25922年接种到穆勒辛顿(MH)包含70板 μ克/毫升的硫酸锌,然后有整个板的帮助下无菌棉拭子。一个10 μg meropenem易感性磁盘被放置在MH板的中心。然后测试生物体,积极控制( 肺炎克雷伯菌写明ATCC baa - 1706)和消极的控制( 肺炎克雷伯菌写明ATCC baa - 1705),是有一条直线从meropenem圆盘的边缘板的边缘,然后孵化在35°C±2°C的环境空气16 - 20个小时。"生产被增强的写明ATCC的外观检测 大肠杆菌25922年增长沿着测试生物透露clover-leaf-like缩进显示积极的测试。

 2.3。结合磁盘测试(CDT)

CDT被用于MBLs表型检测的碳青霉烯耐药革兰氏阴性细菌。0.5米的EDTA溶液浓度是由溶解EDTA二钠46.53克·2 h2O在250毫升蒸馏水和调整pH值8.0用氢氧化钠( 12]。混合物被高压灭菌消毒。两个十 μg imipenem磁盘放在MH琼脂和4 μL EDTA的解决方案是添加到其中一个获得所需的浓度。的抑制区imipenem和imipenem-EDTA磁盘比较16到18个小时的潜伏期后35°C。在CDT的增加抑制带≥7毫米的imipenem-EDTA磁盘独自imipenem磁盘相比,被认为是MBL积极( 13]。

 2.4。双盘协同测试(DDST)

的imipenem-EDTA DDST进行的一项研究表明由李等。 14]。0.1 EDTA溶液是由溶解EDTA二钠29.4克·2 h2O在250毫升蒸馏水和调整pH值8.0用氢氧化钠( 12]。混合物被高压灭菌消毒。直接殖民地暂停测试生物适应匹配0.5麦克法兰浊度准备和接种MH琼脂板上推荐的国家临床实验室标准委员会(CLSI, 2013) 15]。一个空白滤纸磁盘包含10 μL EDTA是放置在距离中心的20毫米imipenem磁盘。的抑制区imipenem与EDTA比较空白磁盘。增强的抑制区之间的区域imipenem和EDTA磁盘相比,欧元区的远侧抑制的药物是解释为一个积极的结果 14]。

 3所示。结果

碳青霉烯耐药观察66年(58.9%) 答:baumannii112年临床分离株的Kirby-Bauer磁盘扩散法。这些碳青霉烯耐药隔离测试"生产MHT和55(83.3%)"生产商(图 1)。

100毫米的MHT MH板:写明ATCC baa - 1705 (1) 肺炎克雷伯菌负面结果,写明ATCC baa - 1706 (2) 肺炎克雷伯菌积极的结果,和(3)测试应变阳性结果。

耐碳青霉烯的分离还测试了MBL生产和63个隔离了CDT阳性结果,而51隔离了积极的结果,DDST(图 2)。

表型检测金属-β-内酰胺酶的联合测试和双磁盘协同测试。

耐66隔离,49(74.2%)来自男性患者。生产MBLs在大多数的新生儿和婴儿被视为有17(25.8%)和16(24.2%)检出病例,分别。少数量的MBL菌株被孤立于其他年龄组(图 3)。

发生的MBL生产 答:baumannii在不同年龄组( n = 66年 )。

MBL产生压力的主要来源是尿液(14)(21.2%),其次是血(12)(18.2%)、气管分泌物(9)(13.6%)、脑脊液(6)(9.1%)、脓(5)(7.6%)、腹膜透析导管(5)(7.6%),伤口拭子(4)(6.1%),中央静脉技巧(4)(6.1%),胸膜液体(2)(3.0%),气管内管(2)(3.0%),和痰液(1)(1.5%)。

最大数量的 答:baumannii分离各病房如下:肾脏学(15)(22.2%),其次是心脏病(12)(18.2%),手术(9)(13.6%)、重症监护室(7)(10.6%)、肿瘤(7)(10.6%)、医疗单位(7)(10.6),新生儿单元(5)(7.6%),神经单元(4)(6.1%)。

总体的结果显示,有11例(16.7%)病例的死亡率中观察到病人感染MBL生产 答:baumannii。在其他患者53例(80.3%)被成功治疗后出院,2例(3.0%)病人左不听医生的劝告。

 4所示。讨论

耐碳青霉烯的频率在一项由侯赛因et al。(2013)(58.26%)隔离在抵抗meropenem和imipenem。meropenem耐药菌株筛选"生产MHT和83.3%被认定为"生产商,这是符合当前的研究( 16]。Kumar et al。(2011)报告说,71%的隔离被MHT["生产商 17]。这也是一致的结果报告的李et al。(2003)在韩国,发现73%的隔离是"积极的MHT [ 14]。

抗meropenem隔离MBL生产进一步筛选。95.4%被CDT积极,77.2%被DDST积极。类似的研究由Pandya et al。(2011)显示,96.30%的隔离被CDT MBL积极,81.4%被DDST积极 18]。本研究的结果也与研究的结果由艾尔et al .(2008)阿加汗大学卡拉奇,在96.6%的碳青霉烯耐药菌株被CDT (MBL生产商 19]。研究也获得了类似的结果由这et al .(2014),其中86.8%的隔离被确认为MBL生产商CDT ( 7]。

目前研究表明,大多数MBL生产 答:baumannii从新生儿被孤立。Begum et al。(2013)进行的一项研究在真纳大学伊斯兰堡,42.85%新生儿有MDR引起的感染 答:baumannii。有74.2%的男性和25.8%的女性患者( 20.]。Alm-El-Din et al .(2014)的一项研究报告了更多的男性(51.5%)高于女性(48.8%)( 21]。Islahi et al。(2014)还观察到高百分比的院内感染更多的男性(76.0%)高于女性(23.9%)( 22]。类似的结果在研究由Peymani et al .(2011)中,72%是男性,28%是女性患者( 23]。

最常见的感染是尿路感染(21.2%),其次是血流感染(18.2%)和呼吸道感染(13.6%)。结果不同于其他研究报道,呼吸道感染是常见的感染的网站。这et al。(2014)发现MBL生产的比例最高 答:baumannii在呼吸道标本(52.8%),其次是尿(26.9%)和血液(7.4%)( 7]。另一项研究是由德卡瓦略et al .(2013)描述了最常见的隔离是气管分泌物(56.3%),其次是导管尖端(16.9%)、血液(7%),尿(7%)( 24]。各病人感染的网站可能会有所不同,这可能与介入手术的类型有关。

Sunenshine et al。(2007)感染耐多药患者进行了回顾性分析 答:baumannii在受感染的病人的死亡率是26%非常接近16.7%死亡率的研究( 25]。类似的研究是由Kumar et al。(2012)由于MDR的死亡率 答:baumannii为16.6% ( 26]。

患者感染MBL产生的频率 答:baumannii在肾脏内科病房更高(22.2%),其次是心脏病(18.2%),手术(13.6%),和医疗重症监护病房(10.6%)是不同于其他研究的结果。Mahajan et al。(2011)进行了一项前瞻性研究的三级保健医院Jalandhar,发现属于重症监护室比例最高(42.8%),其次是手术、医学、和肾脏学 27]。根据Muthusamy Boope(2012), 35%属于ICU其次是神经外科(19%),神经学(12%),手术(8%),和肾脏学(5%)( 3]。

当前研究描述,所有MBL生产商拥有很高的抵抗抗菌素(beta-lactams、氨基糖甙类和氟喹诺酮类原料药)从71.2%降至100%,还显示83.3%耐哌拉西林/ tazobactam。所有MBL生产 答:baumannii显示,15.2%抗硫酸粘菌素和18.2% sulbactam /头孢哌酮。目前的研究表明,硫酸粘菌素和sulbactam /头孢哌酮治疗MDR的最有效药物 答:baumannii。Islahi et al。(2014)的耐药模式决定的 不动杆菌物种在住院病人。他们的研究显示84.7%的隔离对阿米卡星、庆大霉素86.9%,89.1%头孢曲松钠和头孢噻肟、环丙沙星86.4%,10.6%和32.7%硫酸粘菌素,sulbactam /头孢哌酮( 22]。也见过类似的结果在一个研究由Jaggi et al。(2012)根据90.3%是对阿米卡星、庆大霉素85.8%,92.1%,89.7%,哌拉西林,头孢他啶91.6%对环丙沙星、左氧氟沙星87.6%,1.2%粘菌素( 28]。这et al。(2014)报告说,95.4%的分离株耐头孢他啶,庆大霉素40.7%,80.6%,92.6%对环丙沙星、阿米卡星哌拉西林/ tazobactam, 95.4%和1.8%硫酸粘菌素( 7]。

 5。结论

目前的研究表明高水平的multiantibiotic阻力的存在之间的碳青霉烯耐药 鲍曼不动杆菌隔离从小儿肾脏学患者评估2014年在巴基斯坦。比较多个表型分析金属-β-内酰胺酶的细菌的检测表明,合并后的磁盘测试提供了最高的积极的测试。

 附加分

这项研究描述了存在高水平的MBL产生抗生素耐药性 鲍曼不动杆菌特别相关的肾脏学巴基斯坦的儿童患者。

 相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突。

 确认

作者感谢管理和儿童医院伦理委员会和儿童健康研究所,拉合尔,巴基斯坦,向他们提供各种设施和伦理批准。

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