JPATH 杂志的病原体 2090 - 3065 2090 - 3057 Hindawi出版公司 10.1155 / 2015/957259 957259年 研究文章 Oxacillinases和易感性模式和分布 bla 每在耐药基因 鲍曼不动杆菌在伊朗在教学医院 阿訇Josheghani Sareh 1 Moniri Rezvan 1、2 Firoozeh Farzaneh 1 Sehat Mojtaba 3 Dasteh哥利 Yasaman 4 落下帷幕 Abhijit M。 1 微生物学和免疫学 医学院 Kashan大学医学科学 Kashan 87159 85191 伊朗 kaums.ac.ir 2 解剖科学研究中心 Kashan大学医学科学 Kashan 87159 85191 伊朗 kaums.ac.ir 3 创伤研究中心 Kashan大学医学科学 Kashan 87159 85191 伊朗 kaums.ac.ir 4 马里兰大学 学院公园 MD 20742 美国 umd.edu 2015年 31日 12 2015年 2015年 09年 09年 2015年 25 11 2015年 10 12 2015年 2015年 版权©2015 Sareh阿訇Josheghani et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

鲍曼不动杆菌(a . baumannii)是一个重要的医疗机构院内病原体。 β-Lactamase-mediated电阻是最常见的耐碳青霉烯的机制 答:baumannii。本研究的目的是确定抗生素耐药性的模式,来检测 OXA编码基因,A类, b l 一个 P E R - - - - - - 1 ,检测ISA的存在 英航1。总共有124 答:baumannii分离收集Kashan教学医院,住院病人的伊朗。隔离不同抗生素的敏感性由disk-diffusion决定方法。PCR用于检测 b l 一个 P E R - - - - - - 1 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 58 ,ISA 英航1基因。所有隔离耐头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟。所有的隔离透露对多粘菌素B和粘菌素。百分之九十六的隔离是广泛的耐药性(XDR), 5.6%扩展频谱beta-lactamase (ESBL),和54.8%的金属-β-内酰胺酶(MBL)。分离都是阳性 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 和ISA 英航1。 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 58 被发现在79.8%、25%和3.2%,分别。的频率 b l 一个 P E R - - - - - - 1 基因是52.4%。耐药 答:baumannii隔离正在增加在我们的设置和广泛限制治疗的选择。类D的高速率存在carbapenemase-encoding基因,主要是 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 "令人担忧,担忧在我们的医院是一个新兴的威胁。

 1。介绍

耐药 答:baumannii是医院获得性感染和公认的主要原因导致大范围的威胁生命的疾病。这种生物抗生素抵抗几乎所有的频繁访问限制治疗方案( 1]。药物治疗期间出现的阻力 答:baumannii可能发生感染和产量增加的发病率,死亡率,和治疗成本( 2]。 答:baumannii能够积累多种抗生素抗性基因,导致耐药的发展或广泛耐药菌株。获得性耐药特征的后果发生突变或收购外生阻力因素,可以由不同的机制,包括beta-lactamases、细胞壁渠道,改变和射流泵。最令人担忧的临床耐药机制已收购丝氨酸和金属-β-内酰胺酶,而目前耐碳青霉烯( 3]。因此,本研究进行了识别的患病率beta-lactamases产生耐药 答:baumannii和普遍的基因的分子特征,提高治疗的目的选择和减少发病率和死亡率在Kashan Beheshti说医院,伊朗。

 2。材料和方法 2.1。样品收集

从2013年6月到2014年11月,一个描述性的研究与各种临床样本收集从Kashan三级保健医院的伊朗。总共有124 答:baumannii分离收集临床样本包括气管导管63(50.8%)、血液,28(22.6%),痰,10(8.1%)、胸膜液体,7例(5.6%),尿,7例(5.6%),脑脊髓液,4例(3.2%),尿导管,3例(2.4%),和伤口,2例(1.6%),从住院病人。Kashan大学医学科学的道德委员会批准了这项研究协议。

细菌的分离。 答:baumannii隔离被确定通过MICROGEN玲娜+ B (MICROGEN Bioproducts有限公司,英国。

 2.2。测定抗生素耐药性的<斜体>模式a baumannii < /斜体>

隔离的抗生素敏感性试验确定使用Kirby-Bauer disk-diffusion断点分析在Mueller-Hinton琼脂(德国默克公司);和文化孵化24 h在37°C。细菌被列为敏感、中间或依照当前对抗生素临床实验室标准协会建议( 4]。哌拉西林(100 μg), ampicillin-sulbactam (10/10 μg), piperacillin-tazobactam (100/10 μg)、头孢噻肟(30 μg)、头孢他啶(30 μg),头孢曲松(30 μg)、头孢吡肟(30 μimipenem (10 g) μmeropenem (10 g) μg)、阿米卡星(30 μg)、庆大霉素(10 μg)、环丙沙星(5 μg)、左氧氟沙星(5 μ四环素(30克) μ甲氧苄氨嘧啶g),(1.25/23.75毫克),粘菌素(10 μg)和多粘菌素B (300 IU)磁盘从桅杆,购买默西塞德郡,英国。 大肠杆菌写明ATCC 25922人作为质量控制应变敏感性测试。

MDR XDR, PDR的定义。耐多药耐药(MDR)是当隔离nonsusceptible适用于至少一个抗菌剂在≥3以下类别的抗生素包括喹诺酮类、广谱头孢菌素,beta-lactamaseinhibitor / beta-lactams,氨基糖甙类,四环素,功效,碳青霉烯。广泛的耐药性(XDR)被定义为细菌隔离剩余容易只有一个或两个类别。Pan-drug耐(PDR)被定义为细菌分离与nonsusceptibility所有代理(即所有的抗菌类别。,没有代理测试作为生物敏感)。因此,细菌分离,特点是XDR也将归类为耐多药。同样,一个细菌隔离必须XDR为了进一步定义为PDR ( 5]。

 2.3。为检测ESBLs表型测试

在体外检测ESBL double-disk-diffusion测试使用头孢噻肟(30 μg)和头孢噻肟/克拉维酸(CTX 30 μg + CA 10 μg /磁盘)(桅杆,默西塞德郡,英国)。依照临床和实验室标准协会(CLSI)建议的指导方针,增加区域直径≥5毫米的克拉维酸扩展频谱的存在——表示 β -lactamases (ESBLs)在测试生物 6]。

 2.4。表型测试MBL的检测

Imipenem-resistant隔离生产金属-β-内酰胺酶的筛选(MBL)。双盘协同测试(DDST)进行识别的MBL imipenem (10 μg),单独和结合EDTA (750 μg /磁盘)(ROSCO、丹麦)。增加周围的区域直径≥7毫米imipenem + EDTA比imipenem磁盘仅被视为积极的MBL生产( 6]。

 2.5。Beta-Lactamase-Encoding基因的PCR扩增

进行了一系列的PCR反应检测不同Ambler类 bla基因。引物设计放大以下使用多路复用carbapenemase-encoding基因PCR:类D: b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 58 ;甲级: b l 一个 P E R - - - - - - 1 ( 7, 9]。元素(ISA 英航1)被PCR扩增使用先前描述的方法( 8]。所有隔离受到多重PCR检测 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 58 基因。使用的引物分析表中列出 1。

PCR产品运行在1.0%琼脂糖凝胶,用溴化乙锭染色,通过紫外光照(Ingenius Syngene)拍摄。PCR产物的大小是与100年相比,bp DNA梯(Bioneer、韩国)。 答:baumannii写明ATCC 19606年作为参考应变。

测序方法。排序是由桑格的方法(应用生物系统公司3730/3730xl DNA分析测序;Bioneer)。分析了序列使用ChromasPro版本1.7.5 Technelysium ( http://www.technelysium.com.au/)。基因库加入数据 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 , b l 一个 P E R - - - - - - 1 KP462887、KP462888 KP462889, KP462892。

 2.6。统计分析

统计数据分析是使用SPSS软件进行版本19 (SPSS Inc .,芝加哥,IL)。采用卡方检验比较抗生素耐药性利率在这项研究。 P < 0.05 被认为是具有统计学意义。

 3所示。结果

研究病人的平均年龄 54.2 ± 18.1 年,这从23到95年不等。大部分患者(61.3%)是男性,76年和48个女性。的数量和利率隔离不同医院的病房如下:ICU, 69 (55.6%);内科,26 (21%);急诊室,23 (18.5%);和儿科,6例(4.8%)。

抗菌素耐药性模式。所有菌株对头孢他啶、头孢曲松钠和头孢噻肟,当他们受到粘菌素和多粘菌素b的阻力模式 答:baumannii隔离在图所示 1。所有的 答:baumannii隔离被认为是多药耐药性(MDR)和81年(96%)隔离广泛耐药(XDR)。幸运的是,没有一个隔离pan-drug耐(PDR)。7(5.6%)的隔离ESBL阳性,68(54.8%)隔离——金属生产 β -lactamases (MBLs)。在我们的研究中,所有的 答:baumannii分离株为阳性 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 和ISA 英航1。发病率OXA编码基因分离的分析表明,79.8%的人是积极的 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 25%, b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 ,3.2%的 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 58 。不同的共存 b l 一个 O X 一个 基因在隔离观察,他们的相对量如下: b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 + b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 75年(60.5%); b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 + b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 7例(5.6%); b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 + b l 一个 O X 一个 - - - - - - 58 3例(2.4%); b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 + b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 + b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 在23个(18.5%) b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 + b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 + b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 + b l 一个 O X 一个 - - - - - - 58 在1隔离(0.8%)。放大,如图oxacillinases基因的存在 2。 b l 一个 P E R - - - - - - 1 “漫步者”类的一个 β -lactamase-encoding基因被确定在65年(52.4%)的隔离。表 2提出了分离株的遗传和表型分析。图 3显示了方差的大小扩增子产品不同OXA复合PCR鉴定的基因。

 4所示。讨论

这项研究的结果表明,124年 答:baumannii隔离非常抵抗最常见的抗生素,令人惊讶的是,100%,头孢他啶,头孢曲松钠、头孢噻肟。此外,100%的隔离是MDR, 96% XDR, 54.8% MBL生产商。相比之下,产ESBL的频率 答:baumannii(5.6%)没有明显的在目前的研究。根据之前的报道,高电阻率碳青霉烯已报告在伊朗,从25%到96.1%不等( 10- - - - - - 15]。碳青霉烯已选择的药物治疗院内感染所致 答:baumannii;但是特拉的 答:baumannii已报告在全球范围内( 16]。碳青霉烯的广泛的处方在我们医院来治疗 答:baumannii感染导致出现的特拉隔离。极端使用第三代头孢菌素和aztreonam加剧了碳青霉烯电阻率的问题。在医院广谱头孢菌素高的电阻率,结合beta-lactam / beta-lactamase抑制剂,或碳青霉烯,选择适当的抗生素是至关重要的。生产carbapenem-hydrolyzing β -lactamases是全球分布的主要机制耐碳青霉烯( 17]。多粘菌素B和粘菌素是最常用的代理 不动杆菌对一线人员的隔离。这项研究的结果显示,100%的隔离是对多粘菌素敏感。这是发现,100%的 答:baumannii是在阿尔及利亚粘菌素敏感,70.9%在沙特阿拉伯,科威特92.5%,95%在埃及 18]。流行的隔离窝藏基因编码OXA-type " ( b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 , b l 一个 O X 一个 - - - - - - 58 全世界越来越多的组)描述( 19]。在目前的研究中,79.8%的 答:baumannii分离株为阳性 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 基因和超过80%的耐imipenem和meropenem。也有研究碳青霉烯敏试验,一个孤立的容易meropenem但耐imipenem,反之亦然;最近一些研究报道 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 是最常见的类型的"确认在特拉 答:baumannii( 20.]。的流行率 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 已经检测到从0到98.4%; b l 一个 O X 一个 - - - - - - 51 和ISA 英航1在所有隔离观察。的流行率 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 24 / 40 已经检测到从0到85.43%,利率 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 58 据报道在哥伦比亚从0%降至96.9%,希腊、韩国、波兰、台湾和土耳其( 13, 18]。比较频率率 b l 一个 O X 一个 基因在 答:baumannii隔离在伊朗在图所示 2( 7, 12, 13, 21- - - - - - 23]。 b l 一个 P E R - - - - - - 1 中检测出52.4%的吗 答:baumannii隔离。它也被发现 不动杆菌隔离来自阿根廷、比利时、埃及、法国、印度、伊朗、沙特阿拉伯和韩国( 18, 24]。此外,48个分离株(48.5%)同时为阳性 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 和 b l 一个 P E R - - - - - - 1 基因。经验性抗生素治疗 不动杆菌隔离应该选择基于局部磁化率模式,它包含一个广谱头孢菌素,beta-lactam / beta-lactamase抑制剂的组合,或碳青霉烯。在传染病病例的发生高度抗菌电阻率,建议结合使用上述代理antipseudomonal氟喹诺酮类,氨基糖苷类或粘菌素阻碍治疗失败的机会。电阻率的考虑一线抗菌药物,治疗选择强制限于多粘菌素,二甲胺四环素和tigecycline。

 5。结论

本研究的结果显示高患病率的MDR的发生 答:baumannii和象征的惊人的传播 b l 一个 O X 一个 - - - - - - 23 "在我们的设置。总的来说,这些研究结果建议筛查可以提供有用的信息,比较不同人群之间的MDR基因集合和国家和潜在支持更多的感染控制策略和化疗治疗项目。

 信息披露

本文基于论文的硕士学位和经济上支持Kashan大学医学科学研究基金(批准号92149)。资助者的没有参与研究设计、数据收集和分析,决定发表或论文的准备。

 利益冲突

作者宣称没有利益冲突。