JPATH 杂志的病原体 2090 - 3065 2090 - 3057 Hindawi出版公司 842469年 10.1155 / 2014/842469 842469年 研究文章 盛行的 幽门螺杆菌hopQ伊朗II基因型与胃十二指肠疾病的患者 Talebi Bezmin Abadi 阿明 1 Mohabbati Mobarez 阿什拉夫 2 Hin-Chung 1 美国医学微生物学 乌得勒支大学 Heidelberglaan 100 3584 CX乌得勒支 荷兰 uu.nl 2 美国细菌学 医学科学学院 Tarbiat Modares大学里 德黑兰 伊朗 modares.ac.ir 2014年 10 2 2014年 2014年 25 10 2013年 25 12 2013年 30. 12 2013年 10 2 2014年 2014年 版权©2014阿明Talebi Bezmin Abadi和阿什拉夫Mohabbati Mobarez。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

幽门螺杆菌慢性胃炎的发病机制中起着重要的作用,消化性溃疡,noncardia胃癌。几个公认的毒力因子 幽门螺旋杆菌已确定包括 vacA, 巴巴, 工商东亚。HopQ的外膜蛋白参与细菌坚持胃粘膜,已建议的毒性也扮演了一定的角色 幽门螺旋杆菌。由于大量的地理差异的发病率 幽门螺旋杆菌毒力因素的报道,本研究的主要目的是调查之间的关系不同 幽门螺旋杆菌毒性 hopQ等位基因(类型I和II)和胃十二指肠疾病的患者。的存在 幽门螺旋杆菌 hopQ等位基因在胃活检标本被特定的PCR检测。 幽门螺旋杆菌II型 hopQ被发现与胃癌患者显著相关(优势比:3.47,95% CI: 1.56—-5.89)。的流行信息 幽门螺杆菌hopQII型可用于确定高危疾病类型实际上是殖民地 幽门螺杆菌hopQII型阳性菌株。的存在 幽门螺杆菌hopQII型应当在不同的地理区域,确认调查结果可能会提供一个明确的生物标志物归因于某些严重的消化系统疾病的发病机制。

1。介绍

幽门螺杆菌是一种革兰氏阴性和成功的胃病原体在超过50%的世界人口( 1]。感染 幽门螺旋杆菌通常发生在生命的头几年,终身坚持如果未经处理的 2]。 幽门螺旋杆菌感染是胃和十二指肠溃疡的主要原因,以及胃癌的一个潜在的危险因素和mucosa-associated组织淋巴瘤( 3]。提出了只有一定数量的人 幽门螺旋杆菌感染将发展到严重的胃肠疾病( 4]。由于经常发生点突变, 幽门螺旋杆菌感染是异构( 5]。 幽门螺旋杆菌压力被认为拥有各种毒性因素导致消化疾病后遗症( 6- - - - - - 8),但到目前为止,他们仍不明确的( 9, 10]。迄今为止,可用报告显示轻微胃肠疾病之间的联系 幽门螺旋杆菌毒力因素( 11]。在过去的十年中,虽然不同的决定因素已报告毒性影响因素不同的疾病的进展 12- - - - - - 14),研究常常矛盾的( 6, 15- - - - - - 18]。

快速测序技术的进步和全基因组分析,研究人员可以搜索小说毒性因素。2005年,曹等人报道 幽门螺杆菌hopQ基因型与消化性溃疡疾病的风险增加( 19]。HopQ是细菌的外膜蛋白参与坚持胃粘膜( 20.]。Loh等人表明,在特定的 幽门螺旋杆菌,坚持胃上皮细胞略有促进菌株表达HopQ [ 21],但他们没有提供进一步的数据关于疾病的特殊毒性因子 hopQ。高速率的 幽门螺旋杆菌感染在伊朗北部和消化投诉的增多导致当前的研究是否存在 hopQ(I或II型)会影响疾病的结果。本研究的主要目的是调查可能的两个主要的之间的联系 幽门螺杆菌hopQ等位基因通过研究临床样品分离出各种胃肠疾病患者使用PCR。

2。材料和方法 2.1。病人

纳入本研究的患者接受上层胃内窥镜由于不同消化订单, 幽门螺旋杆菌临床分离株。这项研究是伦理委员会批准Tarbiat Modares大学里,德黑兰,伊朗。书面知情同意了之前所有的患者进入研究。参与者被分为四个病人组:十二指肠溃疡、胃溃疡、胃炎、胃癌。记录患者的入选标准 幽门螺旋杆菌感染是(我)积极性 幽门螺旋杆菌文化,(ii)没有报道抗生素或奥美拉唑消费前5个月,和(3)至少18岁。内窥镜观察和组织学结果被用来确定每个病人的诊断 幽门螺旋杆菌菌株分离( 22]。去年活检标本一直冻结在−70°C到进一步分析。

2.2。<斜体> H。螺杆菌< /斜体>菌株

两个窦的活检在无菌接种thioglycolate肉汤(默克公司、德国)和装运在寒冷的温度(5°C)诊断实验室的常规细菌培养根据标准的方法。培养基是哥伦比亚与7%琼脂补充羊血、两性霉素B(5毫克/毫升),乳酸甲氧苄氨嘧啶(5 mg / L),万古霉素(10毫克/毫升),和polymixin-B(2500单位/毫升)和10%的微量需氧的条件下孵化有限公司2,85% n2,5%的人啊2在37°C 10天湿度为95% ( 23]。生物被确定为 幽门螺旋杆菌通过革兰氏染色法,菌落形态和积极的氧化酶、过氧化氢酶、脲酶反应。所有 幽门螺旋杆菌单菌落菌株被存储在−80°C在布鲁氏菌汤(默克公司、德国)补充25% (FCS)(美国CA Gibco)和20%的甘油。 幽门螺旋杆菌写明ATCC 43504菌株在这项研究中被用作参考。

2.3。PCR分析

提取的基因组DNA只是如果一个殖民地是可用的,或由于积极的文化和脲酶测试。使用基因组DNA提取了DNA QIAamp DNA迷你包(试剂盒GmbH是一家现代化、希尔登,德国)根据制造商的指示。的存在 幽门螺旋杆菌DNA PCR证实了针对phosphoglucosamine变位酶基因, glmM( 24]。在这个实验中,单独的pcr进行 hopQ我和类型 hopQII型使用187和160个基点底漆集,分别为(表 1)[ 25]。6 μL(每个PCR产品装上2%琼脂糖凝胶(Sina-Gene,德黑兰,伊朗),与溴化乙锭染色。 幽门螺旋杆菌菌株26695和J99包括积极控制压力。

引物序列,PCR条件。

放大等位基因 引物序列 热条件 周期 参考
I型 hopQ 5-CAACGATAATGGCACAAACT-35-GTCGTATCAATAACAGAAGTTG-3 在60秒的94°C, 45秒54°C, 65秒72°C 35 ( 25]

II型 hopQ 5-TCCAATCCAGAAGCGATTAA-35-GTTTTAATGGTTACTTCCACC-3 在60秒的94°C, 45秒54°C, 65秒72°C 35 ( 25]
2.4。统计分析

IBM SPSS统计21.0版本是用于统计分析。一个 P 的价值 < 0.05 被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

基因组DNA从300年窦活检标本在2007 - 2009年已成功纯化。临床诊断的分布如下:75(25%)与胃炎与胃癌48例(16%),87(29%)与胃溃疡,90与十二指肠溃疡(30%)。的平均年龄是39岁(范围21 - 73年),女性的比例是41%。

年龄和性别之间无显著关联观察或临床表现的所有四个调查病人组( P > 0.05 )。通过聚合链反应, hopQI型出现在100 300株(33%) hopQ类型二世在156年被发现300株(52%)。此外,44 (15%) 幽门螺旋杆菌隔离被认为是消极的 hopQI hopQII,所以他们被排除在分析之外。 幽门螺旋杆菌类型 二世hopQ明显发现主要在胃癌患者(优势比:3.47,95% CI: 1.56—-5.89)(表吗 2)。相比之下,没有明显的类型和协会之间观察到疾病 hopQI型。

分布的 hopQ我和 hopQ二世在不同疾病。

疾病组 hopQ hopQ二世
阳性 奇怪的比例 95%可信区间 阳性 奇怪的比例 95%可信区间
胃炎( n = 75年 )(对照组) 22 (29%) 参考 30 (40%) 参考
胃溃疡( n = 87年 ) 40 (45%) 0.61 0.50 - -1.03 42 (48%) 0.81 0.91 - -1.21
十二指肠溃疡( n = 90年 ) 32 (35%) 0.79 0.17 - -2.43 39 (43%) 0.5 0.21 - -1.79
胃癌( n = 48 ) 6 (12%) 0.54 0.09 - -2.23 45 (93%) 3.47 1.56 - -5.89
4所示。讨论

临床的发展 幽门螺旋杆菌感染是交互影响的几个毒力因素以及主机。 幽门螺旋杆菌感染的主要病原体是浅表胃炎,显示了一个不可避免的角色在消化性溃疡疾病的病因 26]。关于生物的概念,实现成功和长期殖民需要复杂的细菌粘附机制。因此,所有可能的细菌产品正在调查可能的贡献集中在细菌殖民化。 幽门螺杆菌hopQ的一个主要外膜蛋白在细菌表面,是最大的外膜蛋白的家人在吗 幽门螺旋杆菌基因组。确定之间的联系 幽门螺杆菌hopQ和某些消化疾病可能会提供一个开始点回答问题 幽门螺旋杆菌坚持胃细胞。本研究旨在确定的频率 幽门螺杆菌hopQ基因型与活检标本。我们的发现证明患病率高 幽门螺杆菌hopQII型基因型在伊朗的胃癌患者。据我们所知,这是第一次报告的患病率 幽门螺杆菌hopQ伊朗人的等位基因,在感染症状。有人建议,具体genotyping-based分析 幽门螺旋杆菌隔离可以用于预测postinfection障碍( 3, 27]。最近的研究表明, hopQI型等位基因是与消化性溃疡疾病的风险增加密切相关(手)在西方国家 28), 幽门螺杆菌hopQ二世经常被发现在调查人口( 28]。此外,外膜蛋白 幽门螺旋杆菌显示一个强大的潜力增加胃十二指肠疾病的严重程度相关。Ohno et al。 28没有确定任何关系 hopQI和II型等位基因和其他毒性等因素 cagA vacA临床结果。然而,确切的毒力因素之间的联系 幽门螺旋杆菌 hopQ等位基因尤其是基因不同人群需要进一步调查。在一个调查Ohno et al ., ( 28)的患病率 hopQ我在胃炎和胃癌症患者报告了58%和68%,分别。然而,我们的研究结果表明的频率 hopQ我是类似在胃炎和十二指肠溃疡患者(36%和29%,resp)。我们的研究结果表明 hopQ我是流行基因型中越少 幽门螺旋杆菌隔离从伊朗人口(表中恢复过来 1)。与美国的一项研究[ 20.)据报道重大运输之间的联系 幽门螺杆菌hopQI型的消化性溃疡患者,Ohno et al。 28)不确定两者之间的关系 hopQ等位基因和感染的临床结果( P > 0.05 )。据报道, hopQII型菌株频率较低(小于1%)在远东国家。来自西方国家的数据表明的患病率 hopQII型菌株(36%)比从东亚国家更常见(1%)。总之,这项研究表明 hopQII基因型是经常出现在 幽门螺旋杆菌菌株在伊朗与胃癌患者隔离。它是第一个报告的临床意义 幽门螺杆菌hopQ二世,在此基础上应该进行进一步的研究。如果进一步的研究证实我们的发现,这将会导致提高临床医生的诊断策略打击这些国家目前胃癌的教条。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

承认

这个项目财务支持Tarbiat Modares大学里。

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