机会属于属酵母 假丝酵母已经关联到一个广泛的人类感染和严重的死亡率和发病率。肤浅的临床表现包括感染皮肤及其附属物深层或播散性念珠菌病。据估计, 假丝酵母种虫害已经第三个最常见的院内病原体相关血液感染(bsi) [ 1]。在非侵入性感染,酵母菌病)阴道假丝(致病菌种及影响大约75%的女性一生中至少有一个事件( 2]。虽然 白念珠菌有关与人类感染,主要是有感染的患病率的增加由于非吗 白假丝酵母在最近的过去( 3, 4]。许多致病非 白色的物种, c . tropicalis c . parapsilosis c .酸乳酒krusei, c . guilliermondii主要是与人类感染有关。 假丝酵母种虫害已经成功的同桌的病原体在不同网站的帮助下很多致病因素。尽管非 白假丝酵母已被证明是大多数侵袭性感染的常见病原体,很少关注其毒性属性。坚持宿主组织,对环境变化的反应,分泌的水解酶,和生物膜生产一些最重要的这些真菌的毒力机制 5]。的确切机制candidal发病机制是全球许多研究者的主要兴趣。由于非感染的增加率 白假丝酵母和常用的经验性抗真菌药物不同的易感性如氟康唑、早期和准确的物种识别有助于临床医生的治疗管理( 6]。然而,从微生物学的角度来看,传统的方法如糖同化,发酵反应,并根据形态特征识别是乏味而耗时的。这强调了需要测试各种工作流程算法使用商用诊断模式生成一个快速、准确的识别 假丝酵母物种。

本研究的目的是评估商业显色培养基的诊断工具和Vitek 2紧凑系统聚合酶链反应(PCR)临床分离株的物种鉴定 假丝酵母。这也是旨在检测和比较 在体外生产毒力因素的侵入性和非侵入性(粘膜)临床分离株 假丝酵母在研究其抗真菌易感模式。

本研究于110年进行的临床分离株 假丝酵母种虫害获得患者诊断血流感染或酵母菌病一年期间(2012年3月- 2013年2月)在实验室在高等护理教学医院在印度南部。

两个商用物种鉴定的方法 假丝酵母,即HiCrome 假丝酵母微分琼脂(HiMedia,孟买,印度)和Vitek 2紧凑系统(bioMerieux,马西l '演员名、法国),相比之下,种特异的PCR作为黄金标准。

总数的110例孤立研究,54(49%)获得患者的血培养candidaemia组成 c . tropicalis(25岁的46%), c . parapsilosis(16 30%), 白念珠菌(7 13%), c . glabrata(2 4%), c . krusei(1 2%),以及其他 假丝酵母spp。(3 6%)。另外56 (51%) 假丝酵母隔离来自包括阴道假丝被诊断为致病菌种及育龄妇女组 白念珠菌(34岁的61%), c . glabrata(11 20%), c . tropicalis(5 9%), c . parapsilosis(2 4%), c . krusei(2 4%),以及其他 假丝酵母spp。(2 4%)。所有的分离主要是确定使用种特异的PCR(图 1)。在 假丝酵母种虫害隔离, 白念珠菌(61%)和 c . glabrata(20%)、阴道假丝中最常见的致病菌种及而 c . tropicalis(46%)和 c . parapsilosisbsi(30%)是最常见的。作为PCR没有识别物种的5 假丝酵母隔离,只有105 假丝酵母包含在HiCrome的诊断效用的分析吗 假丝酵母微分琼脂和Vitek - 2紧凑的系统。HiCrome的敏感性和特异性 假丝酵母微分琼脂和Vitek - 2紧凑的物种鉴定 假丝酵母如表所示 1描述了三种方法之间的比较表 2。

抗真菌敏感性测试是用Vitek - 2紧凑的系统的所有105 假丝酵母隔离。隔离被列为敏感,在中间敏感和耐抗真菌剂根据他们的最低抑制浓度(麦克风)。所有的隔离均匀容易两性霉素b和结合氟胞嘧啶使用,在我们的研究中。 c . parapsilosis展示了最易受伏立康唑(64%)紧随其后 c . tropicalis(79%)。抗真菌敏感性研究隔离表中描述的模式 3。bsi的隔离显示中间或抵抗各种抗真菌药物敏感性,而氟康唑中间敏感性被认为在两个 白念珠菌(2/34,6%)。阴道假丝分离出致病菌种及

105年的隔离,11失去了生存能力,因此没有用于进一步的毒性研究。我们可以研究毒性94隔离包括48个字符 假丝酵母从血液和46 high-vaginal标本。不同毒力因素的生产中两个感染组和各种种类的 假丝酵母被观察到。蛋白酶生产更普遍入侵隔离(17,35%, P = 0.017 )相比,high-vaginal隔离测试使用时(6 13%) χ 2 测试。磷脂酶生产中更普遍high-vaginal隔离(13,28%, P = 0.001 )比血液分离株(4%)。酯酶生产和生物膜生产的隔离观察感染无显著差异( P > 0.05 )(表 4)。

不同物种之间的测试, 白念珠菌(24/39,62%) c . tropicalis(18/30,60%)是生物膜的主要生产商。比较生产毒力因素之一 白念珠菌和非 白假丝酵母没有显示出统计上的显著差异对生物膜的生产( P = 0.295 )、酯酶( P = 0.478 )和蛋白酶( P = 0.09 )。磷脂酶的产量明显高于 白念珠菌(93%, P < 0.001 比非) 白假丝酵母(7%)。毒力因素的分布在研究基于站点的孤立和分离各种物种中描述表 4。

协同生产的蛋白酶和酯酶在12/48(25%)的血液分离,与2/46(4%)相比high-vaginal隔离( P < 0.001 )。然而,生产超过毒力因子之一 白念珠菌和非 白假丝酵母没有显示任何统计学意义(14/39(36%)和15/55 (27%), P = 0.55 ) χ 2 分析。

越来越多的治疗失败,相关的死亡率,转向更耐隔离提倡物种鉴定的必要性 假丝酵母。尽管表型物种形成的方法是有效的,他们缺乏速度和再现性。PCR等分子技术的效用、RFLP和妊娠非常有前途,但昂贵的限制他们的效用研究和参考实验室( 14]。在我们的研究中,我们使用PCR对于物种鉴定的标准方法和比较了实用程序Vitek - 2紧凑,HiCrome 假丝酵母微分琼脂的识别 假丝酵母。我们发现这两种方法的敏感性和特异性相互比较和PCR。衡量协议 ( κ ) 2 Vitek紧凑,HiCrome 假丝酵母微分与PCR琼脂是0.895和0.826,分别说明两种方法的适用性在常规诊断实验室。HiCrome的性能 假丝酵母微分琼脂在我们的研究是与先前的报道 15]。然而,我们观察到的低灵敏度(79%)的HiCrome琼脂的识别 c . parapsilosis,这可能是由于相同颜色的殖民地(奶油白色) c . parapsilosis glabrata, c酸乳酒按照制造商的指示。然而,在我们的研究中三个隔离 c . parapsilosis与亮绿色中心模仿白人殖民地的殖民地 白念珠菌。Vitek - 2系统紧凑快速报告的身份和抗真菌敏感性结果平均周转时间17小时,而HiCrome 假丝酵母微分琼脂成绩更好的总体效用作为主要从临床标本中分离和鉴定。我们也注意到高interobserver措施的协议 ( κ = 0.892 ) 解释HiCrome的结果 假丝酵母微分琼脂指示高重现性。

目前的研究表明更高的非隔离率 白假丝酵母bsi可能由于参与的情况下从高危病人护理领域。 c . tropicalis是最常见的病原体分离患者血液感染。这一发现是在协议与先前报道的研究 13]。我们报告一个更高的比例 白念珠菌,阴道假丝在致病菌种及与观测的一些研究表明变化趋势与转向非病因 白假丝酵母。地理差异和增加使用自我药疗高涨的抗真菌药物可能导致感染的耐药 假丝酵母spp。 16, 17]。然而全球各种研究显示的优势 白念珠菌在粘膜感染和殖民 18, 19]。

敏感的 白念珠菌对氟康唑、结合氟胞嘧啶使用伏立康唑、两性霉素b和caspofungin分别为95%,100%,97.5%,100%,和97.5%,分别,这些利率是类似报道Pahwa et al。 20.),高于利率敏感性报道Chander et al。 4]。后者公布敏感率低得多 白念珠菌氟康唑(38%)为研究隔离从医院获得candidemia因此获得更高的抵抗常见的抗真菌药物。然而,在我们的研究中,没有观察到抗两性霉素b。有报道不同的电阻率的唑类之间的隔离,主要非 白假丝酵母(阴道假丝从致病菌种及 21]。然而,我们没有发现抗真菌之间的电阻 假丝酵母除了阴道假丝种虫害分离出致病菌种及中间易感性的两个隔离的 白念珠菌氟康唑。

大量的毒性的属性 假丝酵母已经假定可以促进粘膜殖民者的过渡到致命的病原体的传播。粘连帮助酵母在坚持宿主细胞表面,水解酶如蛋白酶、磷脂酶、脂酶和菌丝的形式促进渗透通过细胞。除了这些毒性的属性 假丝酵母、宿主免疫中起着重要作用在限制这些感染局部形式的免疫活性的主机或深部感染和传播形式的普遍免疫功能不全的主机( 22]。

强调产生的水解酶 假丝酵母种虫害可以帮助了解疾病过程中更好地为这些酶活动广泛的宿主基质。分泌天门冬氨酰蛋白酶(SAP) 假丝酵母众所周知,提高菌丝形成,上皮细胞损伤,入侵和炎症反应。 在活的有机体内实验模型还演示了一个的侵袭性增加酵母蛋白酶的生产( 22, 23]。之间的关联生产SAP和增加菌丝的形成 在活的有机体内据报道之前( 22]。考虑到coregulation SAP和菌丝的生产 假丝酵母spp。,我们假设bsi的隔离是主要蛋白酶生产商。在我们的研究中,我们观察到显著提高蛋白酶的生产。阴道假丝相比血液分离的致病菌种及这一发现是一致科斯塔et al。(以前的研究 24]。中蛋白酶的生产是相当高的 c . tropicalis,可能导致其增加了bsi的发生。虽然 白念珠菌是蛋白酶的主要产地在所有的物种 假丝酵母最近的研究表明4类型的SAP的生产 c . tropicalis( 25]。

磷脂酶是一组酶产生的 假丝酵母物种主要是帮助消化的磷脂导致细胞裂解宿主细胞。 白念珠菌磷脂酶的主要生产商,而非比例少吗 白假丝酵母产生这种酶。假设,需要更敏感的方法来检测较小数量的磷脂酶由非 白假丝酵母( 26]。在我们的研究中,绝大多数(93%)的磷脂酶生产商 白念珠菌,而只有7%的非 白假丝酵母磷脂酶阳性。磷脂酶生产主要出现在阴道隔离可能是由于更高的数量 白念珠菌在这一组。

虽然生产酯酶已被记录为毒性临床分离株之间的字符 假丝酵母,对发病机制所知甚少。最近的调查表明毒性的机理是由于脂酶和酯酶的细胞毒性效应在宿主组织( 27]。然而,我们并没有发现显著差异在酯酶生产的侵入性和非侵入性的分离。酯酶阳性分离株的比例在这项研究中较低相比,一些报道( 28, 29日]。

生物膜生产被认为是其中一个最强大的致病特点归因于治疗失败和复发性感染。我们报告类似的生物膜生产中血液和粘膜隔离(52%和54%),但较高的生物膜生产的 白念珠菌相比非 白假丝酵母( 13]。虽然确切的生物膜生产利率上升的原因 白念珠菌不是完全理解,研究使用扫描电子显微镜来理解复杂的生物膜结构认为这些生物膜的完整性和强度产生的更多的菌丝的元素 白念珠菌比 c . tropicalis和 c . parapsilosis。后两个物种形成生物膜强度和较低的这两个物种的生物膜主要是构成微菌落骨料的酵母细胞( 27]。考虑到需要的非高葡萄糖浓度 白假丝酵母产生生物膜 在体外我们用深发展6%的葡萄糖( 30.]。我们预期高葡萄糖浓度来模拟 在活的有机体内条件非 白假丝酵母促进检测生物膜的生产 在体外。值得注意的是,生物膜的生产 c . tropicalis(62%)相当 白念珠菌(60%)在我们的研究中。的增长趋势由于血液感染 c . tropicalis进一步的研究,了解其生物膜的结构和抗真菌敏感性是必要的。

我们的研究有一些局限性。我们不能比较毒性特点的生产在同一物种隔离由于少数几个不同的网站 假丝酵母物种。然而,当前的信息可能有助于更好的理解宿主环境因素的作用和个人站点特定的疾病开发毒性因素。类似地,种间比较毒性机制的所有病原物种之一 假丝酵母不能实现在当前的研究中由于少量的几个物种的 假丝酵母。

然而,我们的研究涉及常见 假丝酵母隔离形式侵入性和粘膜感染网站和分析生产重要的致病因素,尤其是探索非少 白假丝酵母。需要更敏感的方法来检测某些酶和酯酶在这些隔离。探索在非遗传毒性的机制 白假丝酵母将有助于了解疾病的频谱,在疾病流行病学变化趋势。

从这项研究中,我们发现 白念珠菌紧随其后的是 c . glabrata是主要的病原体,阴道假丝造成致病菌种及 c . tropicalis和 c . parapsilosis主要在血液感染。Vitek - 2紧凑,HiCrome微分琼脂证明他们在物种形成的功效 假丝酵母;然而合并或这两种技术在日常实践取决于吞吐量和资源设置的实验室。我们还观察到一个整体的生产增加毒性非之间的角色 白假丝酵母,特别是 c . tropicalis。大部分的 白念珠菌在我们的研究中对氟康唑敏感,倾向于使用抗菌素治疗阴道感染。抗非中各种常用的抗真菌药物 白假丝酵母表明物种鉴定的必要性在常规实验室的启动适当的抗真菌治疗。