乔 肿瘤学杂志 1687 - 8469 1687 - 8450 Hindawi出版公司 373826年 10.1155 / 2012/373826 373826年 研究文章 最初报告的微分表达式Sprouty人类上皮蛋白1和2卵巢癌细胞系 穆贾达姆 萨玛Masoumi 1 Amini Afshin 1 魏 Ai-Qun 2 Pourgholami 穆罕默德·侯赛因 1 莫里斯 大卫·劳森 3 Copelan 爱德华。 1 癌症研究实验室 外科学系 圣乔治医院 新南威尔士大学 2217年悉尼新南威尔士 澳大利亚 unsw.edu.au 2 整形外科学系 圣乔治医院 新南威尔士大学 2217年悉尼新南威尔士 澳大利亚 unsw.edu.au 3 外科学系 圣乔治医院 新南威尔士大学 2217年悉尼新南威尔士 澳大利亚 unsw.edu.au 2012年 29日 11 2012年 2012年 30. 08年 2012年 17 10 2012年 17 10 2012年 2012年 版权©2012萨玛Masoumi穆贾达姆等。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

Sprouty(敏捷)蛋白质受体酪氨酸激酶信号通路的调节器,是管制在各种病理条件包括癌症。在目前的研究中我们调查的表达Spry1和Spry2亚型在人类卵巢癌细胞株体外的面板。免疫印迹分析显示非均匀的敏捷模式表达的癌细胞,其中没有一个符合模式中观察到正常卵巢上皮细胞使用的控制。在七个癌症细胞系研究,Spry1低表达在四个细胞系和更高的在一个与控制。至于Spry2,四个细胞系表现出较低和两个表现出更高的表达式。rt - pcr分析结果提出了一个可能性,那敏捷的蛋白质含量不一定符合它的表达在mRNA水平。我们的免疫染色研究表明Spry2主要分布在整个细胞质在多孔结构而Spry1被发现在细胞质和细胞核。这可能提供线索的行动敏捷模式的进一步调查和/或功能。总的来说,我们的研究揭开了微分表达式Spry1各卵巢癌细胞系和Spry2蛋白质。

 1。介绍

异常活动各种受体酪氨酸激酶(rtk)在恶性肿瘤的发病机制中扮演着重要的角色。Sprouty(敏捷)蛋白质代表的主要类ligand-inducible RTK-dependent信号通路的抑制剂。dSpry ( 黑腹果蝇敏捷)最初是由Hacohen等人1998年的抑制剂纤维母细胞生长因子(FGF)介导的气管分支中 d .腹开发( 1]。他们还发现了三个的人类dSpry同系物,指定Spry1-3,在搜索的表达序列标签(EST)数据库。第四个哺乳动物相同器官后来发现在老鼠 2)和人( 3]。活泼的蛋白质,特别是Spry1、Spry2 Spry4亚型,可能有一个重要的角色在控制生长信号,显然管制在某些病理条件包括癌症。几项研究已经报道敏捷,在多种肿瘤包括乳腺癌[差别或对这些 4)、前列腺癌( 5- - - - - - 7),肝细胞( 8, 9),结肠( 10),和肺癌 11, 12),以及黑色素瘤( 13, 14)和胃肠道间质瘤( 15),暗示敏捷作为可能的肿瘤抑制,可能会作为肿瘤标志物和一个有趣的目标使用药物干预。在此基础上,我们旨在调查敏捷的角色在卵巢癌,第七个主要癌症妇女和从全球妇科恶性肿瘤死亡的第二个原因 16]。

作为一个初步尝试,我们为了在这项研究评估Spry1的表达模式和Spry2亚型在人类卵巢癌上皮细胞系的面板。敏捷变更以来表达在这个病理条件是预期,主要人类卵巢上皮细胞也用作控制,对癌细胞的表达模式可以相比。

 2。材料和方法 2.1。细胞培养

人类卵巢癌细胞系OVCAR-3 SKOV-3, 1 a9从美国获得类型文化集合(写明ATCC)(美国弗吉尼亚州马纳萨斯)。其他人类卵巢癌细胞,CAOV-3 A2780, ov - 90和IGROV-1一种勇博士李的礼物(放射学、圣乔治医院,新南威尔士大学,澳大利亚)。主要的人类卵巢表面上皮细胞系HOSEpiC获得SienCell (SienCell、钙、美国)。细胞系都保持在一个湿润的5% 有限公司 2 孵化器在37°C在各自媒介如下:OVCAR-3, SKOV-3, 1 a9, A2780,和IGROV-1 rpmi - 1640细胞(表达载体、钙、美国),CAOV-3在DMEM(表达载体、钙、美国),ov - 90细胞1:1的混合物MCDB 105 /媒介199 (Sigma-Aldrich,密苏里州,美国),和HOSEpiC OEpiCM (SienCell、钙、美国)。所使用的培养基都补充了10%胎牛血清和1% penicillin-streptomycin混合物(表达载体、钙、美国)。

 2.2。免疫细胞化学

OVCAR-3、SKOV-3 HOSEpiC细胞被播种到无菌玻璃盖玻片6-well细胞培养板的初始密度2.5×105细胞/好和维护RPMI中补充10%胎牛血清在37°C的湿润,5% 有限公司 2 的气氛。50%的融合,这些细胞被固定在0.1%叠氮化钠+ 0.5%甲醛在磷酸盐(PBS) (Sigma-Aldrich,密苏里州,美国)在室温下一个小时。这是紧随其后的是一个小时孵化与70%乙醇在4°C / PBS透化作用,进一步固定。为了阻止非特异性结合的抗体,在盖玻片浸在1%牛血清白蛋白(BSA)在室温下PBS一小时。细胞培养在一夜之间在4°C和单克隆anti-Spry1 anti-Spry2抗体(1:20 1% BSA / 1 x PBS) (Abnova、台湾),除了没有初级抗体的负控制样品。孵化与二级抗体随后应用于所有样本使用Alexa面粉488鸡anti-mouse免疫球蛋白g(1: 500年1% BSA / 1 x PBS)(表达载体、钙、美国)1小时在黑暗4°C。接下来,细胞与propidium counter-stained碘(1:500)3分钟和盖玻片安装与明胶甘油和储存在4°C在黑暗。每一步之后,冲洗PBS。激光扫描共焦显微镜的细胞可视化(美国奥林巴斯)和X60油浸镜片。FluoView软件(版本4.3,中心山谷,PA)被用来覆盖的图像。

 2.3。西方墨点法

细胞均质蛋白裂解缓冲(里帕缓冲区)含10%蛋白酶抑制剂(Sigma-Aldrich,密苏里州,美国)和蛋白质浓度被BioRad量化分析(Bio-Rad、钙、美国)。然后,相同数量的蛋白质被钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳分离,转移到PVDF膜(美国马密理博公司),和孵化一夜之间在4°C 1: 1000稀释anti-Spry1 anti-Spry2鼠单克隆抗体(Abnova、台湾)。膜清洗和处理山羊anti-mouse二级抗体结合辣根过氧化物酶(1:5000稀释;圣克鲁斯生物技术、钙、美国)在室温下1小时。类似的过程进行了GAPDH蛋白质1:20000稀释anti-GAPDH鼠单克隆抗体(Sigma-Aldrich,密苏里州,美国)。使用ImageQuant拉斯维加斯4000年生物分子成像和ImageQuant软件(英国通用电气医疗集团)、抗原抗体反应是数字化,带微量化和数据归一化的值GAPDH蛋白表达。定量分析蛋白质的表达,否则通过规范执行数据从HOSEpiC癌症细胞系对细胞的正常控制,表达的价值观在任意单位的比例每个单元中的蛋白表达在HOSEpiC。

 2.4。rt - pcr

总RNA分离出七个卵巢癌细胞系以及主要的人类卵巢表面上皮细胞系HOSEpiC RNase-free环境中使用RNeasy +迷你包(试剂盒、德国)按照制造商的指示。可能污染已经没有DNA被消化细胞DNA与RNA准备DNase治疗和去除试剂(Ambion,生活技术,美国)。提取的RNA产量和纯度被决定通过测量吸光度在230年,260年和280年使用NanoDrop nm 2000分光光度计(热费希尔科学、马、美国)其次是RNA完整性的评价通过凝胶电泳测定28 s / 18 s核糖体RNA (rRNA)比例。逆转录使用上标三世一步法rt - pcr系统执行与铂Taq DNA聚合酶(表达载体、钙、美国)Veriti 96 -好热循环仪(美国应用生物系统公司,CA)根据制造商的协议与核糖核酸酶抑制剂(试剂盒、德国)补充道。PCR扩增进行如下:30分钟孵化56°C的互补脱氧核糖核酸的合成,一个3分钟的热从94°C其次是35周期在94°C的变性30秒,在56°C退火30秒,在72°C和扩展了30秒,最终在72°C扩展了5分钟。成绩单Spry1放大和Spry2采用以下基于公布的序列的寡核苷酸引物( 17]跨越外显子/内含子区域:

5′-CTGCAGGGGAAGTGCAAGTGTGGAGAA-3′(向前)

5′-AAGCTTAGTTCAGGAGGTACAACCCAC-3′Spry1(反向),和

5′-GGATCCCATTCGCTCATCTGCCAGGAA-3′(向前)

5′-AAGCTTTGCTGGGTGAGGGCGTCTCTG-3′Spry2(反向)。

寡核苷酸引物的 β肌动蛋白,5′-ATATCGCCGCGCTCGTCGTC-3′(向前)和5′-AGTGGTACGGCCAGAGGCGT-3′(反向),设计通过NCBI Primer-BLAST ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/),在同一放大条件下作为参考。- RT控制(−RT)和没有模板控制(NTC)也包括在实验来验证没有RNA基因组DNA的准备工作和可能的污染的工具组件,分别。10 μL整除的PCR产物分离在1.5%琼脂糖凝胶含有1:10000稀释10000×SYBR安全DNA凝胶染色(表达载体、钙、美国)在80 V,然后观察使用Bio-Rad凝胶电泳Doc紫外线透照器2000(美国CA Bio-Rad)。

 2.5。人类样本和免疫组织化学

批准后适当的机构伦理委员会(南东部悉尼当地的卫生区人类研究伦理委员会、新南威尔士、澳大利亚)按照有关规定,肿瘤石蜡包埋组织部分临床诊断原发性卵巢上皮癌患者,免疫组织化学染色。总之,deparaffinization之后,部分进行预处理和抗原检索。然后孵化与主要抗体是在4°C一夜之间使用anti-Spry1或anti-Spry2单克隆抗体(Abnova、台湾)根据制造商的协议。其次是孵化与二次抗体(圣克鲁斯生物技术、钙、美国),用苏木精复染色。积极的控制使用制造商推荐的。消极的控制,没有主要抗体应用,也准备为每个样本。彩色幻灯片被观察到徕卡DMLB显微镜(放大×40)和拍摄使用徕卡DC200数字成像系统(徕卡微系统公司,位于德国)。

 2.6。统计分析

所有资料都是代表三个独立的实验。统计分析使用GraphPad InStat (GraphPad棱镜5,圣地亚哥,加利福尼亚州,美国)。学生的 t 未配对样本,以及应用 P 值 < 0.05 被认为是重要的。

 3所示。结果 3.1。卵巢癌上皮细胞系表达不同程度的Spry1和Spry2蛋白质

进行了初步研究探讨Spry1和Spry2蛋白的表达在7个常用的人类卵巢癌上皮细胞系通过免疫印迹分析使用Spry1和Spry2特定抗体。卵巢癌上皮细胞表现出不同程度的活泼的表达式(图 1(一))。虽然OVCAR-3细胞高表达量的Spry1同种型,和1 a9 A2780细胞显示中度表达,IGROV-1细胞表达低水平的Spry1和细胞株SKOV-3 CAOV-3, ov - 90几乎没有表情。至于Spry2,而OVCAR-3和1 a9表现出高水平的表达和A2780和IGROV-1表示适度,CAOV-3的表达水平较低和ov - 90细胞和SKOV-3几乎为零。两种亚型,最高和最低水平的表达被认为与OVCAR-3 SKOV-3细胞,分别。总而言之,我们的观察揭示非均匀的表达模式Spry1和Spry2七癌症细胞系的表达水平几乎从零到高。

表达Spry1和Spry2蛋白在卵巢癌细胞系相比,人类卵巢表面上皮细胞系(HOSEpiC)。(一)免疫印迹分析Spry1 HOSEpiC Spry2表达式,OVCAR-3, SKOV-3, 1 a9, A2780, CAOV-3, ov - 90, IGROV-1细胞系使用GAPDH作为加载控制。(b) - (c)敏捷的量化表达的细胞株产生至少三个独立的免疫印迹(a)类似,使用ImageQuant软件。装载量对GAPDH和量化规范化值。此外,癌症细胞系中的表达水平标准化对HOSEpiC细胞作为正常的控制。图代表的表达Spry1 (b)和Spry2 (c)在任意单位规范化。改变两种亚型的表达在癌细胞比控制。数据显示为 意味着 ± SE 。重要值( P < 0.05 )用星号表示。

 3.2。Spry1和Spry2蛋白的表达改变的癌症细胞系与正常卵巢上皮细胞

为了调查任何可能改变人类的表达Spry1和Spry2蛋白在卵巢癌,免疫印迹也进行蛋白质溶解产物从主要人类卵巢癌细胞获得HOSEpiC(图 1(一))和蛋白质的表达进行了定量比较使用ImageQuant软件(数据 1 (b)- - - - - - 1 (c))。我们的研究结果表明,Spry1 Spry2适度正常细胞中表达。当Spry1的非均匀表达模式和Spry2癌症细胞系是单独针对这种模式相比,不墨守成规。而Spry1的表达和Spry2 OVCAR-3明显高于( P 值0.0012和0.0004,分别地),SKOV-3 CAOV-3, ov - 90表达水平显著降低Spry1 ( P 值为0.0002、0.0015和0.0002,分别地。)和Spry2 ( P 的值< 0.0001、0.0146和0.0003,分别地),与SKOV-3表达。虽然Spry1 A2780表达式模式类似于对照组,这细胞系表达水平明显高于Spry2 ( P 值:0.0032)。IGROV-1细胞表达Spry1显著降低( P 比对照组值:0.0002)。IGROV-1 Spry2的表达下降,然而,不显著( P 值:0.1074)。1 a9表现出类似水平的Spry1和无关紧要的更高级别的Spry2 ( P 值:0.1657)比控制。在癌症细胞系,OVCAR-3 SKOV-3表达了两种亚型的最高和最低水平,分别。

综上所述,虽然Spry1和Spry2适度表达在正常卵巢细胞工作的控制,改变Spry1的表达和/或Spry2被发现在所有肿瘤细胞进行了研究。Spry1低表达在四个细胞系和更高。至于Spry2,四个细胞系表现出较低和两个表现出更高的表达,尽管增加1 a9 Spry2不显著的表情。

 3.3。Spry1和Spry2 mrna在不同卵巢上皮癌细胞

评估敏捷在mRNA的表达水平及其与敏捷可能对应在蛋白质水平表达,我们进行逆转录聚合酶链反应(rt - pcr)分析总RNA样本来自正常和癌症细胞系的研究。预期的产品尺寸 Spry1和 Spry2分别是438年基地和471个碱基。如图 2,癌细胞显示变量的水平 Spry1。虽然CAOV-3细胞中几乎检测不到, Spry1被其他细胞表达,更值得一提的是1 a9,暗示 Spry1是差异表达在人类卵巢上皮癌细胞体外。 Spry2很容易发现在所有的细胞系,与癌症细胞表达一种更加有效的方式。

Spry1和2 mrna评估通过rt - pcr OVCAR-3 (1) SKOVE-3 (2), 1 a9 (3), A2780 (4), CAOV-3 (5), ov - 90 (6), IGROV-1 HOSEpiC相比(7)细胞。如上所述, Spry1和 Spry2不同表达的癌细胞。虽然Spry1 mRNA CAOV-3细胞中几乎检测不到,它被其他细胞表达,在1 a9更加突出。Spry2信使rna被确认在所有与更加突出表现在杀伤肿瘤细胞的细胞系。的产品尺寸 Spry1和 Spry2分别是438年基地和471个碱基。 β 肌动蛋白被用作参考。

 3.4。采用定位Spry1 Spry2 OVCAR-3, SKOV-3, HOSEpiC细胞

确定Spry1和Spry2蛋白质的亚细胞分布在人类卵巢上皮癌,我们共聚焦免疫荧光显微镜进行卵巢癌细胞系OVCAR-3 SKOV-3,以及人类卵巢表面上皮细胞系HOSEpiC,使用抗体特定Spry1和Spry2。这两种癌症细胞系选择基于他们代表的最高和最低的细胞表达Spry1和Spry2细胞系的研究,这都是最初来源于卵巢浆液性癌,最常见的卵巢上皮癌的亚型( 18, 19]。Spry1和Spry2蛋白质的染色强度更强在OVCAR-3细胞相比HOSEpiC和SKOV-3细胞。此外,而Spry1细胞质和细胞核中发现了泡状结构,Spry2主要显示细胞质本地化(图 3)。

Spry1和Spry2蛋白质的亚细胞定位主要人类卵巢表面上皮细胞系HOSEpiC和人类卵巢癌上皮细胞系OVCAR-3和SKOV-3使用共聚焦免疫荧光显微镜(60 x油浸镜片)。Affinity-purified抗体被用来专门检测Spry1和Spry2(绿色)。Propidium碘染色进行核(红色)。两大行代表HOSEpiC细胞,中间两行显示SKOV-3细胞,和底部行表明OVCAR-3细胞。看到,Spry1和Spry2蛋白质的染色强度强在OVCAR-3细胞相比HOSEpiC和SKOV-3细胞。此外,而Spry2是主要分布在整个细胞质泡状结构,Spry1被发现在细胞质和细胞核。酒吧规模:50 μm。

 3.5。免疫组织化学定位Spry1和Spry2上皮卵巢癌患者的肿瘤样本证实蛋白质的亚细胞分布格局免疫细胞化学观察到体外

使用Spry1和Spry2特定的抗体,免疫组织化学染色法进行随机石蜡包埋部分来自不同的病人。见图 4早些时候,我们观察到一个分布模式类似透露我们的免疫细胞化学研究,证实的细胞质和核本地化Spry1 Spry2以及胞质分布。

免疫组织化学染色Spry1和Spry2石蜡包埋幻灯片从三个不同的卵巢上皮癌患者观察到徕卡DMLB显微镜(放大×40)并使用徕卡DC200数字成像系统拍摄。蓝色代表无污点的零部件和黄褐色的颜色显示彩色敏捷与不同的强度。看到,Spry2细胞质表达(a), (c)和(e),虽然Spry1染色观察到细胞质和细胞核(b), (d)和(f)。

 4所示。讨论

基于之前报告的角色活泼的蛋白质家族在生理和病理条件下包括人类恶性肿瘤,我们预期的表达一个或多个这种蛋白质的家人将在上皮改变卵巢癌细胞株与正常卵巢上皮细胞。检查的表达敏捷1和Spry2在正常细胞中,我们的研究表明,正常的人类卵巢表面上皮细胞表达两个亚型,体外。Haimov-Kochman等人早些时候报道Spry2信使rna和蛋白质的表达在granulosa-lutein细胞(相关)的正常的人类卵巢( 20.]。这些发现在一起可能在卵巢生理暗示敏捷的作用。我们的结果也表明Spry1的微分表达式和/或Spry2卵巢癌细胞系的研究。这些都是,至少在某种程度上,与先前的研究结果在其他恶性肿瘤。使用免疫组织化学分析和组织微阵列,Kwabi-Addo Spry1的差别等人一直表现出对这些蛋白质在近40%的前列腺癌与匹配正常前列腺癌( 21]。方等人也观察到一个一致的减少Spry2蛋白的表达在人类肝细胞癌(HCC)的恶性肝细胞与正常或肝硬化肝细胞( 8]。Downregulation Spry2表达在HCC在另一项研究也证实歌曲等。 22]。Sutterluty等人报道持续减少表达式nonsmall Spry2蛋白质的细胞性肺癌(NSCLC)组织和细胞系相比,正常肺上皮细胞( 11]。减少Spry2蛋白的表达也在HT细胞系来源于人类b细胞淋巴瘤扩散( 23]。Barbachano等人表现出低水平的Spry2低级,但不是高档,结直肠肿瘤( 24]。在另一项研究中,冯et al .,减少表达Spry2观察了在阶段III或IV结肠癌患者比那些II期疾病、结肠癌的Spry2差别表明对这些可能与肿瘤侵袭转移相关( 10]。Velasco等人报道的减少spry2表达在子宫内膜癌的19.85%,观察到一个强大和逆相关性spry2和细胞增殖。考虑到减少的表达Spry2优质肿瘤与低级癌相比,他们建议Spry2可以充当“肿瘤恶化”抑制基因( 25]。在目前的研究中,也就不足为奇了活泼的表达式的转换是不相似的模式在整个范围的卵巢癌细胞系的研究。这些细胞系的常用体外的代表不同亚型的卵巢癌上皮最初来源于个体病人展示不同临床病理的特点。此外,所有上皮恶性肿瘤有多种遗传和表观遗传改变,一般来说,只有一小部分给定肿瘤类型都有一个特定的情况下变更( 21]。应该注意在当下研究的表达Spry1和Spry2亚型OVCAR-3细胞显著高于在其他癌症细胞系和对照组,这意味着尽管Spry1表达降低和/或更频繁地观察Spry2在卵巢癌细胞系研究,敏捷的表达下降可能不一定需要所有上皮卵巢癌。

大量的研究表明减少敏捷的一些基因的表达在乳房 4)、前列腺癌( 5- - - - - - 7),肝细胞癌( 8, 9),非小细胞肺癌( 11, 12),人类b细胞淋巴瘤( 26),和结肠癌 10]。然而,敏捷upregulation据报道在黑色素瘤细胞携带b - raf V599E突变( 13, 14),人类patient-derived纤维肉瘤细胞系( 27),胃肠道间质瘤(要点) 15]。在一项由Schaner et al .,浆液性卵巢癌组织的基因表达模式进行了聚类分析( 28]。敏捷的同系物1和2的基因表明coexpression和其他特定的基因。免疫印迹分析相比,我们的评估敏捷的存在在mRNA水平表明,敏捷的mRNA水平不一定对应蛋白质表达水平。这可能是由于敏捷蛋白质家族的规定在不同的水平。这不仅包括转录和转译的监管,但造成翻译修饰蛋白质微分定位和/或蛋白质水平修改通过互动与其他蛋白质和介质( 29日, 30.]。同时,敏捷在蛋白质或mRNA的表达水平似乎依赖于癌症程控,。换句话说,在敏捷的表达改变自差别并不局限于其对这些基因的表达增加敏捷也被报道在某些类型的癌症。这个场景中可以得出两个不同群体的研究。第一组表明,这种蛋白质家族的一些成员,特别是Spry2,可能有一个肿瘤抑制的潜力。这是基于观测结果显示在不同的差别敏捷对这些癌症(如之前所述),以及活泼的家庭的调查证明抑制作用ERK信号通路在敏捷overexpressing癌细胞( 8, 12, 21, 31日]。第二组,另一方面,表明虽然敏捷可能作为一个癌症临床预后的指标的差别显示对这些敏捷( 32, 33),这是令人惊讶的是贫穷的标志在其他癌症临床预后Spry upregulation [ 34]。这组让一种敏捷的后应用的可能性作为肿瘤标志物的蛋白质。活泼的功能出现的这两个方面值得进一步深入调查。

蛋白质的定位可以为其提供线索作用方式和/或函数( 35]。在目前的研究中,我们观察到细胞质和核本地化Spry1和细胞质Spry2体外的本地化。这进一步证实了我们的免疫组织化学分析卵巢癌患者的肿瘤样本。我们的发现有关Spry2定位符合研究的结果Hausott et al。 36)和Velasco et al。 25)展示一个细胞质,但不是核染色的Spry2 NIH3T3成纤维细胞和人类子宫内膜癌样本,分别。然而,Hausott等人发现细胞质和核本地化的Spry2 DRG神经元和C6胶质母细胞瘤细胞( 36]。到目前为止,这种蛋白质家族的各种细胞的网站驻留已报告( 35, 37),这些差异的原因在敏捷的本地化模式有待关注。

 5。结论

在这项研究中,我们已经解决了第一次敏捷的某些方面在人类卵巢癌上皮蛋白表达。我们的调查公布的微分表达式Spry1和Spry2蛋白质在一系列人类上皮卵巢癌细胞系。我们的研究结果显示之间缺乏对应Spry mRNA的表达和敏捷的蛋白质有利于敏捷的调控发生在不同的事实。此外,我们的研究结果显示Spry1之间的亚细胞定位的差异和Spry2亚型可能在卵巢癌的功能意义。目前的报告,以及其他类似的研究癌症,表明,敏捷的蛋白质的表达模式家庭是程控依赖。进一步的研究探索的影响改变在敏捷的表达在肿瘤细胞生物学是必要的。这可能导致新的治疗策略的发展和可靠的卵巢癌肿瘤标志物。

 缩写 敏捷:

Sprouty

 rt - pcr:

逆转录聚合酶链反应

 rtk:

受体酪氨酸激酶

 dSpry:

黑腹果蝇Sprouty

 美国东部时间:

表达序列标签数据库

 相关:

Granulosa-lutein细胞

 肝细胞癌:

肝细胞癌

 非小细胞肺癌:

Nonsmall细胞肺癌

 要点:

胃肠道间质瘤

 写明ATCC:

美式文化收藏

 PBS:

磷酸盐

 BSA:

牛血清白蛋白。

 利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

 承认

莱昂Vonthethoff博士(解剖病理学、圣乔治医院,新南威尔士大学,悉尼,澳大利亚)感激地承认是有用的讨论与免疫组织化学过程和技术援助。

 Hacohen N。 克莱默 年代。 萨瑟兰 D。 Hiromi Y。 Krasnow m·A。 Sprouty FGF信号的编码小说拮抗剂的顶端分支模式 果蝇航空公司 细胞 1998年 92年 2 253年 263年 2 - s2.0 - 0032559228 10.1016 / s0092 - 8674 (00) 80919 - 8 de Maximy 答:一个。 Nakatake Y。 Moncada集团 年代。 伊藤 N。 Thiery j . P。 Bellusci 年代。 克隆和表达模式鼠标同系物 果蝇sprouty在老鼠胚胎 机制的发展 1999年 81年 1 - 2 213年 216年 2 - s2.0 - 0032933938 10.1016 / s0925 - 4773 (98) 00241 - x Leeksma o . C。 范Achterberg t·a·E。 Tsumura Y。 丰岛 J。 老 E。 克罗斯 w·g·M。 Mellink C。 Spaargaren M。 美津浓 K。 Pannekoek H。 德弗里斯 c . j . M。 人类sprouty 4,一个新的ras拮抗剂5问,与双特异性激酶TESK1交互 欧洲生物化学杂志 2002年 269年 10 2546年 2556年 2 - s2.0 - 0036105451 10.1046 / j.1432-1033.2002.02921.x 罗 t . L。 Yusoff P。 方 c·W。 郭 K。 McCaw b . J。 菲利普斯 w·A。 杨 H。 黄 e·s·M。 梁 h·F。 曾 Q。 丘比特 t . C。 的家伙 g·R。 Ras /增殖蛋白激酶通路抑制剂和可能的肿瘤抑制蛋白,sprouty 1和sprouty 2管制在乳腺癌 癌症研究 2004年 64年 17 6127年 6136年 2 - s2.0 - 4344660712 0008 - 5472. - 10.1158 / - 04 - 1207 麦基 答:B。 道格拉斯 d . A。 Olijslagers 年代。 格雷厄姆 J。 奥马尔 M . M。 陆军 R。 Gnanapragasam 诉J。 罗布森 c . N。 梁 h . Y。 表观遗传失活的人类sprouty (hSPRY2)同系物在前列腺癌 致癌基因 2005年 24 13 2166年 2174年 2 - s2.0 - 16444370423 10.1038 / sj.onc.1208371 Fritzsche 年代。 Kenzelmann M。 霍夫曼 m·J。 穆勒 M。 乘客们 R。 Grone h·J。 舒尔茨 w·A。 同时下调SPRY1和SPRY2前列腺癌 Endocrine-Related癌症 2006年 13 3 839年 849年 2 - s2.0 - 33751115512 10.1677 / erc.1.01190 王 J。 汤普森 B。 任 C。 Ittmann M。 Kwabi-Addo B。 Sprouty4,抑制肿瘤细胞的能动性,是人类前列腺癌DNA甲基化的表达下调 前列腺癌 2006年 66年 6 613年 624年 2 - s2.0 - 33645917663 10.1002 / pros.20353 方 c·W。 蔡 m . S。 麦基 答:B。 凌 s . h . M。 梅森 V。 李 R。 Yusoff P。 罗 t . L。 梁 h . Y。 所以 S . k . S。 的家伙 g·R。 Sprouty 2,抑制增殖作用的蛋白激酶信号,抑制肝细胞癌 癌症研究 2006年 66年 4 2048年 2058年 2 - s2.0 - 33644521213 10.1158 / 0008 - 5472. - 05 - 1072 Sirivatanauksorn Y。 Sirivatanauksorn V。 Srisawat C。 Khongmanee 一个。 Tongkham C。 微分sprouty基因在肝细胞癌的表达 肿瘤外科杂志》 2012年 105年 3 273年 276年 冯 y . H。 吴 c . L。 曹 c·J。 常 j·G。 陆 p . J。 叶 k . T。 Uen y . H。 李 j . C。 Shiau a . L。 管制的表达sprouty2和microRNA-21人类结肠癌:与疾病的临床分期相关 癌症生物学和治疗 2011年 11 1 111年 121年 2 - s2.0 - 78751498848 10.4161 / cbt.11.1.13965 Sutterluty H。 迈耶 c, E。 Setinek U。 Attems J。 Ovtcharov 年代。 Mikula M。 Mikulits W。 Micksche M。 伯杰 W。 下调Sprouty2的非小细胞肺癌导致肿瘤恶性肿瘤通过细胞外signal-regulated激酶pathway-dependent和独立的机制 分子癌症研究 2007年 5 5 509年 520年 2 - s2.0 - 34250161556 1541 - 7786. - 10.1158 / mcr - 06 - 0273 网球 m·A。 范Scoyk M . M。 弗里曼 s V。 Vandervest k . M。 Nemenoff r。 韦恩 r。 Sprouty-4抑制转化细胞生长、迁移和入侵和epithelial-mesenchymal过渡,由通过PPAR Wnt7a γ在非小细胞肺癌 分子癌症研究 2010年 8 6 833年 843年 2 - s2.0 - 77953752993 1541 - 7786. - 10.1158 / mcr - 09 - 0400 Tsavachidou D。 科尔曼 m . L。 Athanasiadis G。 李 年代。 轻的 j . D。 奥尔森 m F。 韦伯 b . L。 SPRY2 Ras抑制剂/细胞外signal-regulated激酶途径在黑色素细胞和黑素瘤细胞与野生型BRAF但不是V599E突变 癌症研究 2004年 64年 16 5556年 5559年 2 - s2.0 - 4143139997 0008 - 5472. - 10.1158 / - 04 - 1669 Bloethner 年代。 陈 B。 Hemminki K。 Muller-Berghaus J。 Ugurel 年代。 Schadendorf D。 库马尔 R。 常见的b - raf和基因突变对全球的影响黑素瘤细胞系的基因表达 致癌作用 2005年 26 7 1224年 1232年 2 - s2.0 - 22844443766 10.1093 / carcin / bgi066 尼尔森 t . O。 西 r B。 林 s . C。 改变 O。 诺林 m·A。 奥康奈尔 j . X。 朱 年代。 Fero M。 《神探夏洛克》 G。 波拉克 j . R。 布朗 p . O。 Botstein D。 Van de Rijn M。 软组织肿瘤的分子描述:基因表达研究 《柳叶刀》 2002年 359年 9314年 1301年 1307年 2 - s2.0 - 0037070754 10.1016 / s0140 - 6736 (02) 08270 - 3 Ferlay J。 胫骨 h·R。 布雷 F。 福尔曼 D。 源泉> C。 帕金 d . M。 估计2008年全球癌症负担:GLOBOCAN 2008 国际癌症杂志》上 2010年 127年 12 2893年 2917年 2 - s2.0 - 78049485263 10.1002 / ijc.25516 Anteby e . Y。 Natanson-Yaron 年代。 格林菲尔德 C。 Goldman-Wohl D。 Haimov-Kochman R。 霍尔泽 H。 Yagel 年代。 人类胎盘Hofbauer细胞表达sprouty蛋白质:一个可能的调节机制的绒毛分支 胎盘 2005年 26 6 476年 483年 2 - s2.0 - 20444414134 10.1016 / j.placenta.2004.08.008 兰登 s P。 Lawrie 美国年代。 建立卵巢癌细胞系 方法在分子医学 2001年 39 155年 159年 Aletti g D。 Gallenberg M . M。 Cliby w·A。 Jatoi 一个。 哈特曼 l . C。 目前卵巢癌的管理策略 梅奥诊所的公报 2007年 82年 6 751年 770年 2 - s2.0 - 34249947772 10.4065 / 82.6.751 Haimov-Kochman R。 Ravhon 一个。 保诚 D。 格林菲尔德 C。 Finci-Yeheskel Z。 Goldman-Wohl d S。 Natanson-Yaron 年代。 帝国 R。 Yagel 年代。 赫维茨 一个。 表达和调控的Sprouty-2 granulosa-lutein黄体细胞 人类生殖的分子 2005年 11 8 537年 542年 2 - s2.0 - 27144478902 10.1093 / molehr / gah203 Kwabi-Addo B。 王 J。 Erdem那样预言正发党胜利 H。 Vaid 一个。 卡斯特罗 P。 Ayala G。 Ittmann M。 Sprouty1的表达,抑制纤维母细胞生长因子的信号转导,是人类前列腺癌减少 癌症研究 2004年 64年 14 4728年 4735年 2 - s2.0 - 3142780658 10.1158 / 0008 - 5472. - 03 - 3759 首歌 K。 高 Q。 周 J。 邱 美国J。 黄 x W。 王 x Y。 风扇 J。 预后的意义和临床相关性Sprouty 2蛋白表达在人类肝细胞癌 肝胆的国际和胰腺疾病 2012年 11 2 177年 184年 桑切斯 一个。 Setien F。 马丁内斯 N。 奥利瓦 j·L。 的 M。 弗拉格 m F。 Alaminos M。 Esteller M。 罗哈斯 j . M。 表观遗传失活的ERK抑制剂Spry2 b细胞淋巴瘤 致癌基因 2008年 27 36 4969年 4972年 2 - s2.0 - 50049125314 10.1038 / onc.2008.129 Barbachano 一个。 Ordoňez-Moran P。 加西亚 j . M。 桑切斯 一个。 佩雷拉 F。 Larriba m·J。 马丁内斯 N。 埃尔南德斯 J。 血小板 年代。 Bonilla F。 帕尔默 h·G。 罗哈斯 j . M。 Mũoz 一个。 SPROUTY-2和钙粘蛋白调节相互地决定tumourigenicity结肠癌细胞 致癌基因 2010年 29日 34 4800年 4813年 2 - s2.0 - 77956174563 10.1038 / onc.2010.225 Velasco 一个。 Pallares J。 Santacana M。 Gatius 年代。 费尔南德斯 M。 多明戈 M。 舒适的环境 J。 Yeramian 一个。 encina M。 Dolcet X。 Matias-Guiu X。 启动子甲基化和表达在子宫内膜癌sprouty 2 人类病理学 2011年 42 2 185年 193年 2 - s2.0 - 78751585102 10.1016 / j.humpath.2010.08.001 弗兰克 m·J。 道森 d . W。 Bensinger 美国J。 在香港 j·S。 Knosp w·M。 徐 l Balatoni c, E。 艾伦 e . L。 沈 R R。 Bar-Sagi D。 马丁 g·R。 Teitell m·A。 表达sprouty2抑制b细胞增殖和epigenetically沉默在老鼠和人类b细胞淋巴瘤 血 2009年 113年 11 2478年 2487年 2 - s2.0 - 63849272814 10.1182 / - 2008 - 05 - 156943血 Lito P。 大都会 b D。 Kleff 年代。 O ' reilly 年代。 马赫 诉M。 麦考密克 J·J。 肉瘤形成所需的证据表明sprouty 2 h - oncogene-transformed人类成纤维细胞 生物化学杂志 2008年 283年 4 2002年 2009年 2 - s2.0 - 38349104766 10.1074 / jbc.M709046200 Schaner m E。 戴维森 B。 Skrede M。 帝国 R。 Flørenes 诉。 里斯贝里 B。 伯纳 一个。 戈德堡 我。 Givant-Horwitz V。 比喻 c·G。 Kristensen g . B。 Nesland j . M。 Børresen-Dale a . L。 在积液中基因表达模式的变化和主要从浆液性卵巢癌肿瘤病人 分子癌症 2005年 4日,第二十六条 2 - s2.0 - 26844552461 10.1186 / 1476-4598-4-26 梅森 j . M。 莫里森 d . J。 森 m·A。 轻的 j . D。 Sprouty蛋白质:多方面的负反馈监管者受体酪氨酸激酶的信号 细胞生物学的趋势 2006年 16 1 45 54 2 - s2.0 - 30444441147 10.1016 / j.tcb.2005.11.004 的家伙 g·R。 杰克逊 r。 Yusoff P。 周润发 s Y。 Sprouty蛋白质:修改调节器,媒人或失踪链接? 内分泌学杂志》 2009年 203年 2 191年 202年 2 - s2.0 - 70449445990 10.1677 /乔- 09 - 0110 李 C . C。 普特南 a·J。 Miranti c K。 Gustafson M。 王 l . M。 Vande Woude g F。 高 c F。 超表达sprouty 2抑制HGF / SF-mediated细胞生长,侵犯,移民和胞质分裂 致癌基因 2004年 23 30. 5193年 5202年 2 - s2.0 - 3142736728 10.1038 / sj.onc.1207646 高桥 M。 罗兹 d·R。 Furge k。 Kanayama h . O。 Kagawa 年代。 Haab B . B。 格兰 b . T。 透明细胞肾细胞癌基因表达分析:基因识别和预测分类 美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国 2001年 98年 17 9754年 9759年 2 - s2.0 - 0035859883 10.1073 / pnas.171209998 Faratian D。 西姆斯 a . H。 马伦 P。 凯 C。 嗯 我。 兰登 s P。 哈里森 d . J。 Sprouty 2是一个独立的预后因子在乳腺癌和曲妥珠单抗治疗的患者可能会有用 《公共科学图书馆•综合》 2011年 6 8 e23772 Frolov 一个。 Chahwan 年代。 Ochs M。 Arnoletti j . P。 锅 Z Z。 Favorova O。 弗莱彻 J。 •冯•梅伦谈到 M。 艾森伯格 B。 古德温 答:K。 响应标记和分子机制的作用在胃肠道间质瘤格列卫 分子癌症治疗 2003年 2 8 699年 709年 2 - s2.0 - 0347256705 金 h·J。 Bar-Sagi D。 调制信号的sprouty:发展的故事 自然评论分子细胞生物学 2004年 5 6 441年 450年 2 - s2.0 - 2942568167 10.1038 / nrm1400 Hausott B。 Vallant N。 奥氏小体 M。 杨 l 戴 F。 Brand-Saberi B。 Klimaschewski l Sprouty2下调促进成人感觉神经元轴突的生长 分子和细胞神经科学 2009年 42 4 328年 340年 2 - s2.0 - 70350749418 10.1016 / j.mcn.2009.08.005 Impagnatiello m·A。 维特尔 年代。 甘农 G。 Compagni 一个。 Cotten M。 Christofori G。 哺乳动物sprouty-1和2 membrane-anchored磷蛋白质抑制剂内皮细胞的生长因子信号 细胞生物学杂志 2001年 152年 5 1087年 1098年 2 - s2.0 - 0035809919 10.1083 / jcb.152.5.1087