JAMC 分析方法在化学杂志》上 2090 - 8873 2090 - 8865 Hindawi 10.1155 / 2019/8970624 8970624 研究文章 同时测定的有效成分和相关分析Multiconstituents和抗血小板聚集的生物活性 在体外在Chuanxiong根茎受到不同煎煮时间 张 Peihua 1 程ydF4y2Ba Linming 2 王 晓晓 3 程ydF4y2Ba Jinpei 1 徐 Shungui 1 https://orcid.org/0000 - 0003 - 0903 - 9377 叶 凌 1 https://orcid.org/0000 - 0001 - 6948 - 6975 姚 益鑫 2 Moldoveanu Serban C。 1 福建大学附属人民医院的中医 福州350122年 中国 fjtcm.edu.cn 2 Kangmei药业有限公司 有限公司 普宁515300 中国 kangmei.com.cn 3 德阳食品和药物安全检查和测试中心 德阳61800 中国 2019年 22 11 2019年 2019年 25 06 2019年 19 08年 2019年 26 10 2019年 22 11 2019年 2019年 版权©2019 Peihua Zhang et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

几种有效成分,如香草醛、阿魏酸、senkyunolide我senkyunolide H,松柏ferulate, Z-ligustilide, butylphthalide, senkyunolide,和levistilide、不稳定和具有相互转换关系Chuanxiong根茎(CR)。中药主要涉及煎煮,有效成分的含量和抗血小板聚合生物活性(CR)艺术展可能随不同煎煮时间(10分钟、20分钟、30分钟、40分钟,50分钟和60分钟)。在这里,我们表明,松柏ferulate levistilide CR材料中被检测到,但不是在煎煮。有效成分具有转换在CR煎煮不同的时期和退化。艺术展的有效成分和强度在10到20分钟是最强,其次是30 - 50分钟,60分钟是最弱的分析SIMCA-PLS CR煎煮不同的时间。皮尔森相关分析,有相关性( P < 0.05 )之间的有效成分,阿魏酸和senkyunolide我(系数为0.976),阿魏酸和senkyunolide H(系数为0.972),senkyunolide我和senkyunolide H(系数为0.982),senkyunolide A和butylphthalide(系数为0.974),senkyunolide A和Z-ligustilide(系数为0.947),和butylphthalide Z-ligustilide(系数为0.993)。有效成分(阿魏酸,senkyunolide我和senkyunolide H)和艺术展相关和皮尔逊相关系数分别为0.965,0.973和0.999。逐步回归分析,senkyunolide H和senkyunolide我与艺术展( P < 0.05 )。Senkyunolide H (H)呈正相关,艺术展,Senkyunolide我与艺术展(我)是负相关,和它的表达艺术展= 1.187 ∗ H−0.199 ∗ 我−0.422。这些发现表明,有一些有效成分之间的相关性和CR的艺术展。

 1。介绍

Chuanxiong根茎(CR)的干燥粉末 当归chuanxiong长的矮。(伞形科)是最常用的中药(TCM)活血和去除瘀(TCM)的影响 1]。最近的研究表明,铬和相关的中国专利药物处方治疗心血管和cephalagra疾病( 2, 3]。铬的主要成分包括苯酞和酚酸。四氯苯酞包括Z-ligustilide, senkyunolide senkyunolide我senkyunolide H, butylphthalide [ 4- - - - - - 6]。Z-ligustilide的影响血管舒张和神经保护 7, 8]。Senkyunolide, Senkyunolide I, Senkyunolide H可以抑制血栓的形成,增加脑血流量,降低脑血管阻力( 9- - - - - - 12]。Butylphthalide给予神经保护作用[ 13- - - - - - 15]。的主要成分阿魏酸和松柏ferulate酚酸( 5, 6]。阿魏酸的影响包括antithrombosis和抗血小板聚集。ferulate钠是一种常见的心血管药物( 16]。松柏ferulate给予抗氧化和血管舒张效应( 17]。香兰素的原材料或中间是许多心血管和脑血管药物(如甲基多巴) 18]。中医主要涉及煎煮。最有效的CR成分不稳定,容易分解或转换。例如,Z-ligustilide容易氧化成senkyunolide我和senkyunolide H或聚合成levistilide与加热空气或( 19]。松柏ferulate很容易水解成阿魏酸和松柏醇提取或当离开站作为液体( 20.]。松柏醇可以进一步氧化香草醛( 21]。Senkyunolide是不稳定的,很容易氧化和异构化的butylphthalide [ 22)(图 1)。因此,不同煎煮时间可能导致活性物质的内容的变化。血瘀的症状与thrombus-related疾病密切相关。血小板聚集是血栓形成的直接原因之一。抗血小板聚集生物活性(艺术展)是一个指数,反映了CR的消散瘀血活动( 23]。不同煎煮时间变化也可能在CR的艺术展,导致临床疗效的差异。

九个有效成分的转换关系。

迄今为止,没有研究的决心multiconstituents和艺术展在CR汤不同煎煮时间进行了试验。在这项研究中,ultraperformance液相色谱(UPLC)方法用于定量确定9的内容成分(香草醛、阿魏酸、senkyunolide我senkyunolide H,松柏ferulate, Z-ligustilide, butylphthalide, senkyunolide,和levistilide)在CR材料或在不同煎煮时间,煎煮,同时确定艺术展。在不同煎煮时间(10分钟、20分钟、30分钟、40分钟,50分钟和60分钟),分析了有效成分的差异SIMCA-PLS和聚类分析,并通过Student-Newman-Keuls艺术展的差异进行了分析。有效成分之间的相关性和评估使用SIMCA-PLS艺术展,皮尔逊相关分析和逐步回归分析。本研究使用CR中医进行了基本评估。

 2。材料和方法 2.1。材料和试剂

乙腈(高效液相色谱级)从费雪公司(美国沃尔瑟姆,MA)。Adenosine-5-two磷酸钠(C10H13N5Na2O10P2)从Sigma-Aldrich购买公司(圣路易斯,密苏里州,美国)。阿魏酸钠得到你们从上海元生物技术有限公司(上海,中国)。冰醋酸,二甲亚砜(DMSO)和柠檬酸三钠(2水)C6H5Na3O7H·2 (2O)均为分析纯,且从广州化学试剂厂(广州)。氯化钠注射液(0.9%,W / V)从四川购买科隆药业有限公司有限公司(中国成都)。CR汤块(产品生产批号。180802731)被Kangmei药业有限公司生产的有限公司(广东,中国),把中国传统医学实验室的普宁Kangmei制药生产基地。标准的香兰素、阿魏酸、senkyunolide我senkyunolide H,松柏ferulate, Z-ligustilide, butylphthalide, senkyunolide,和levistilide(高效液相色谱法纯度≥98%)购买从成都Pufei德生物技术有限公司有限公司(中国成都)。日本大耳白兔,男,重约2.5公斤,被成都Dashuo提供生物技术有限公司(成都,中国)。

 2.2。装置

BSA224S精密电子天平是购自北京缝匠肌科学仪器有限公司有限公司(中国,北京)。ZNHW-II智能数显电鼓励购买从巩义昙花仪器有限公司有限公司(天津)。前沿™5000多专业多功能离心机从排开购买公司(美国松溪);re - 2000 b旋转蒸发器是购自上海Yarong生化仪器工厂(上海,中国)。sc - 2000血小板聚集仪从北京购买成功科技发展有限公司有限公司(中国,北京)。kq - 500 vde双频数字超声波清洗仪器购买从昆山超声仪器有限公司有限公司(昆山、中国)。安捷伦1290执行UPLC无穷II系统(美国安捷伦,帕洛阿尔托,CA)配备二元溶剂泵管理系统,在线脱气装置,autosampler。

 2.3。决心UPLC的成分 2.3.1。UPLC条件

列是一个安捷伦Eclipse + C18列(1.8 μ米,50毫米×2.1毫米,安捷伦),列温度保持在30°C。流量被设定为0.3毫升·分钟−1。注射体积是2 μl .检测波长设置为280海里。1%选择乙腈作为流动相,冰醋酸(V / V)被选为流动相b的线性梯度洗脱进行如下:在0 - 4分钟18% -25%,25%,-46%在4 - 5分钟,在5 - 9分钟,46% -62% 62% -72%在9 - 12分钟,在12 - 15分钟72% -100%,100%在15 - 20分钟。

 2.3.2。CR的制备甲醇超声提取

每个干材料粉50网。大约0.5克的粉粉是准确称重,然后用50毫升甲醇提取,超声波提取(300 W的效率,45 kHz的频率)1 h,冷却到室温,最终解决成交量调整到50毫升甲醇。

 2.3.3。制备铬水提取

每个干材料粉50网。大约0.5克的粉粉是准确称重,然后用50毫升纯水煎煮提取(100°C) 10分钟,20分钟,30分钟,40分钟,50分钟,60分钟,冷却到室温,最终解决成交量调整与纯水50毫升。解决方案是离心机在6000 r / min 20分钟。上层清液的收集和通过一个过滤器(0.22 μ米筛孔尺寸)。

 2.4。测定艺术展 2.4.1。测试物质的解决方案

测试物质的解决方案是柠檬酸三钠抗凝剂(3.2%,W / V), adenosine-5-two磷酸钠溶液(C10H13N5Na2O10P2;最终浓度:10 μmol / L),和积极的药物溶液(钠ferulate,最终浓度:2毫克/毫升)。

 2.4.2。准备艺术展的CR样本分析的解决方案

每个干材料粉50网。大约0.5克的粉粉放入每个10锥形烧瓶,50毫升的纯的水是补充道。解决方案是称重和“煮10分钟,20分钟,30分钟,40分钟,50分钟,60分钟,补充失重。提取是用纱布过滤,离心,然后进行真空过滤滤纸。提取集中约5毫升,减压(85°C, 15分钟),然后转移到10毫升容量的玻璃瓶。纯净水加入体积然后动摇。大约1毫升的提取是放置在一个10毫升容量瓶,1.5毫升的DMSO溶液混合溶解,然后添加生理盐水体积和动摇。解决方案被转移到一个离心管,离心20分钟6000 rpm,然后是浮在表面的收集。

 2.4.3。制备富含血小板血浆(PRP)和Platelet-Poor等离子体(PPP)

心脏的血正常兔子收集和与柠檬酸三钠的混合溶液作为抗凝剂。柠檬酸三钠的溶液和血液的比例是1:9。抗凝和血液被轻轻混合彻底颠倒离心管。

混合物在800转离心10分钟两次。上等离子体,这是富含血小板血浆(PRP),收集。较低的层的血液从第一个离心收集,然后在3500转离心10分钟。等离子体的上层是platelet-poor等离子(PPP)。

 2.4.4。体外测定血小板最大聚集率和计算抑制率

大约有280 μL(购买力平价被添加到三浊度管,每个包含10 μL的生理盐水,10 μL的积极的药物,和10 μL的样品溶液,相应的空白的解决方案。大约有280 μL (PRP放入另一个三浊度管,每个混合10 μL(生理盐水,10 μL的积极的药物,和10 μL的样品溶液,相应的示例解决方案。

血小板聚集仪是预热至37°C,然后10 μL(生理盐水被添加到空白的解决方案并放入测试孔为零。血小板聚集率为60年代由预热的血小板解决方案和添加10 μL adenosine-5-sodium二磷酸(C10H13N5Na2O10P2)解决方案。抑制血小板聚集率的样品或积极的药物是使用以下公式计算:血小板抑制率°=°(生理盐水组最大aggregation-sample或阳性药物组最大聚合)/生理盐水组最大聚合°×°100%。每个样品进行平行测定3次( 24]。

 2.5。统计分析

结果SIMCA-PLS的有效成分进行了分析和聚类分析。结果表示为均值±SD艺术展(标准差)。单向方差分析比较的数据随后Student-Newman-Keuls SPSS 19.0软件(美国帕洛阿尔托,CA)。被认为是具有统计学意义的差异时,α= 0.05的不同子集的子集,相反,同一子集没有显著差异。成分之间的相关性,分析了艺术展皮尔逊相关分析和逐步回归分析。皮尔森相关分析,时被认为是具有统计学意义的差异 P < 0.05 和双变量相关系数表示。在逐步回归分析的价值 R2大,模型更加准确。线性回归时被认为是具有统计学意义的差异 P < 0.05 。自变量和因变量之间的关系可以表达的表达。

 3所示。结果与讨论 3.1。验证的方法

校准曲线的发展:从色谱峰面积校正曲线是相对权重的香兰素,阿魏酸,senkyunolide我senkyunolide H,松柏ferulate, Z-ligustilide, butylphthalide senkyunolide A, levistilide A和检测极限(LOD, S / N = 3)和量化的限制(定量限,S / N = 10)计算。结果如表所示 1。

校准曲线9成分。

复合 线性 R2 范围( μg / ml) LOD (ng / ml) LQD (ng / ml)
香兰素 Y= 10387 X−5.4863 0.9997 0.09656 - -1.4484 4.37 13.52
阿魏酸 Y= 3265.1 X−3.468 0.9999 0.06784 - -1.0176 3.29 9.98
Senkyunolide我 Y= 16138 X−1.3311 1.0000 0.0904 - -1.356 4.31 12.90
Senkyunolide H Y= 16330 X−1.3378 1.0000 0.0596 - -0.894 2.10 6.71
松柏ferulate Y= 4648 X+ 3.5724 1.0000 0.1507 - -2.2608 2.31 6.98
Senkyunolide一 Y= 2982 X+ 1.2708 0.9999 0.18224 - -2.7336 0.41 1.38
Butylphthalide Y= 7455.1 X+ 0.4517 0.9999 0.01119 - -1.791 1.22 4.01
Z-Ligustilide Y= 3902.7 X+ 4.7909 1.0000 0.2312 - -3.468 1.47 5.10
Levistilide一 Y= 8457 X−1.4961 1.0000 0.07944 - -1.1916 0.75 2.49

准确性、重复性和稳定性(12小时)进行评估的峰值区域九个成分,有六个平行样品,他们表示为相对标准偏差(%)在5%。结果如表所示 2。

九个组件UPLC法验证参数。

复合 精密(RSD) (%) 稳定(RSD) (%) 再现性(RSD) (%)
香兰素 0.32 0.33 0.34
阿魏酸 0.35 0.35 0.15
Senkyunolide我 0.23 0.39 0.18
Senkyunolide H 0.34 0.34 0.34
松柏ferulate 0.20 0.20 0.09
Senkyunolide一 0.13 0.10 0.09
Butylphthalide 0.15 0.16 0.16
Z-Ligustilide 0.22 0.25 0.12
Levistilide一 0.26 0.19 0.24
3.2。分析Multiconstituents CR汤不同煎煮时间

当CR被提取的水溶剂提取,松柏ferulate可以被水解成阿魏酸和松柏醇。同时,苯酞在CR是不稳定的,容易被降解和转化的加热过程。因此,为了保持9活性成分的CR在最大的程度上代表CR的成分中,100%甲醇作为提取溶剂,超声提取为60分钟用来表示九个活性成分在CR ( 20., 21]。CR甲醇提取代表9个成分的药材(0分钟)(数据 2和 3和表 3)。当组件的相对标准偏差值< 5%使用各种煎煮时间,内容并没有改变。香兰素的内容减少使用10 - 20分钟与20分钟汤煎煮时间,但并没有改变时间。内容的相对标准偏差值为3.16% ( n= 6)和< 5%使用60分钟煎煮时间和内容没有改变使用60分钟煎煮的时间。因此,香兰素的内容没有进一步使用60分钟煎煮时间改变。阿魏酸的内容增加了10 - 20分钟煎煮时间,达到20分钟,然后随后下降20分钟煎煮时间。内容的相对标准偏差值为4.26% ( n= 5)< 5%和10 - 50分钟煎煮时间和内容没有改变。因此,阿魏酸的含量开始稳定下来,然后0-60分煎煮时间减少。这表明,阿魏酸的含量的增加稳定在10 - 50分钟煎煮时间和部分退化在50 - 60分钟。senkyunolide我增加的内容随着时间10 - 20分钟汤,然后达到20分钟。它随后下降在20 - 30分钟,然后增加30 - 50分钟内,最后降低在50 - 60分钟。内容的相对标准偏差值为1.11% ( n= 5)和< 5%煎煮10 - 50分钟,然后保持稳定10 - 50分钟。因此,senkyunolide的内容我最初稳定10 - 50分钟,然后减少50 - 60分钟。对于senkyunolide H, RSD值的内容为3.39% ( n= 5)和< 5%在10 - 50分钟和10 - 50分钟内没有改变。因此,最初senkyunolide H稳定的内容,然后从10到60分钟下降。Senkyunolide下降从10到40分钟,从40到50分钟增加,然后下降从50到60分钟。内容的相对标准偏差值为0.49% ( n= 3)和< 5%从30到50分钟,然后从30到50分钟保持不变。因此,senkyunolide最初降低的内容,然后稳定下来,最后从10到60分钟下降。butylphthalide减少的内容从10到30分钟,然后稳定从30到60分钟。因此,butylphthalide内容最初下降然后60分钟内保持不变。Z-ligustilide在10 - 30分钟的内容在30分钟0。松柏的内容ferulate levistilide 0在10分钟。

样品和标准化合物的色谱CR。(a)的样品色谱图在不同煎煮时间CR。S:甲醇提取;S1: 10分钟;S2: 20分钟;S3: 30分钟;S4: 40分钟;S5: 50分钟;S6: 60分钟。(b) 9个标准化合物的色谱图。1。 Vanillin. 2. Ferulic acid. 3. Senkyunolide I. 4. Senkyunolide H. 5. Coniferyl ferulate. 6. Senkyunolide A. 7. Butylphthalide. 8. Z-Ligustilide. 9. Levistilide A.

香兰素(a)变化,阿魏酸,senkyunolide我senkyunolide H, butylphthalide内容。松柏ferulate (b)变化,senkyunolide A, Z-ligustilide内容。

9个成分含量在不同煎煮时间(毫克/克, n= 3)。

t(分钟) 香兰素(%) 阿魏酸(%) Senkyunolide我(%) Senkyunolide H (%) 松柏ferulate (%) Senkyunolide (%) Butylphthalide (%) Z-Ligustilide (%) Levistilide (%)
0 0.14±0.69 1.34±0.79 1.54±0.42 0.28±0.44 5.94±1.32 31.47±1.38 0.47±1.36 14.47±1.21 0.02±1.27
10 0.13±1.22 4.19±1.35 1.73±0.81 0.37±0.38 0.00 13.61±1.21 0.16±1.38 1.03±0.98 0.00
20. 0.12±1.31 4.25±0.77 1.74±0.38 0.37±0.29 0.00 10.64±0.98 0.12±1.69 0.44±1.35 0.00
30. 0.12±1.65 3.97±0.28 1.69±1.12 0.35±0.87 0.00 6.00±0.77 0.08±1.47 0.00 0.00
40 0.12±1.69 3.96±0.54 1.70±1.21 0.34±0.78 0.00 5.95±1.26 0.08±2.19 0.00 0.00
50 0.12±0.89 3.84±0.39 1.71±1.33 0.34±0.98 0.00 6.00±1.39 0.08±1.32 0.00 0.00
60 0.12±1.27 3.12±0.41 1.40±1.29 0.28±1.22 0.00 5.01±1.27 0.08±1.18 0.00 0.00

微量的松柏ferulate levistilide察觉在10分钟,表明这些可能是退化或不溶解。先前的报道表明,针叶树ferulate容易水解在煎煮,因此针叶树ferulate清廉min内降解。Levistilide Z-ligustilide的二聚体,其化学结构比Z-ligustilide更稳定,但Z-ligustilide内容更高(0分钟,清廉分钟内降解率更高。Levistilide是检测不到10分钟,这表明它可能没有溶解。基于上述结果,CR的主要成分与不同煎煮时间分为两个部分:相对稳定的成分和不稳定的成分。相对稳定的成分,即阿魏酸,senkyunolide我senkyunolide H,香兰素,如果我们把传统的煎煮时间30到40分钟为标准,那么这四个成分稳定在CR煎煮40分钟内,符合传统煎煮时间的要求。阿魏酸、senkyunolide我和senkyunolide H CR活性物质,而香兰素需要进一步的研究来证实它是否确实是一个有效的成分。不稳定成分包括松柏ferulate、Z-ligustilide senkyunolide, butylphthalide, levistilide A这五个成分减少的内容或溶解在煎煮。松柏ferulate是0的内容,但它可以在煎煮过程中水解为阿魏酸,表明松柏ferulate是一个间接的有效成分。解散Z-ligustilide率很低或者很容易退化在水里,但它能氧化senkyunolide我和senkyunolide h .然而,Z-ligustilide非常的口服生物利用度低,主要代谢物 在活的有机体内包括senkyunolide我senkyunolide H n-butenyldenphthalide [ 24- - - - - - 26]。这表明Z-ligustilide间接功效的成分。Senkyunolide也部分溶解在60分钟,很容易转化为butylphthalide [ 21];它可以进入血液,表明senkyunolide直接组成。Butylphthalide显示类似的生物活性与CR功效和可以进入大脑 13, 14]。这是一个直接组成在CR的汤。这些研究结果表明,选民的内容是不同的,影响CR也煎煮的时间不同。

有效成分的差异是全面分析了60分钟的煎煮时间SIMCA-PCA。因为原始ferulate的内容和levistilide 0和不同的是小香兰素的内容,其他的有效成分是由SIMCA-PCA分析和聚类分析。SIMCA-PCA的结果表明选择前两个主成分, R2 X(和)是0.993 问2(和)是0.959。进一步结合聚类分析,10分钟,20分钟是一个类;30分钟、40分钟和50分钟是一个类;和60分钟是一个类(数据 4(一)和 4 (b))。结果表明,20分钟和50分钟两个划分点的煎煮时间CR 60分钟。丰富的有效成分可以表示为10分钟,20分钟> 30分钟,40分钟,50分钟> 60分钟。

由SIMCA-PCA统计分析和聚类分析的结果:(a)分数散点图;(b)系统树图。

 3.3。艺术展的分析使用不同煎煮时间体外CR煎煮

基于抗血小板聚集的结果,计算出的血小板抑制率(PIR) 10分钟(47.94±1.90%)> 20分钟(47.63±0.68%)> 30分钟(42.38±1.99%)> 40分钟(39.20±1.93%)> 50分钟(38.93±2.60%)> 60分钟(24.76±3.56%)(图 5)。是表达艺术展的血小板抑制率,表明艺术展的CR汤在60分钟下降。

血小板抑制率CR使用不同煎煮时间( n= 3)。

单向方差分析(方差分析),和Student-Newman-Keuls (SNK)被选中。SNK的统计分析,没有显著区别相同的子集和之间有显著差异的不同子集的子集α= 0.05。在SPSS 19.0统计软件,SNK选择单向方差分析比较不同的艺术展在10分钟,20分钟,30分钟,40分钟,50分钟,60分钟。结果表明,有显著差异( P < 0.05 (表)组 4),没有明显区别10分钟和20分钟,或在30分钟,40分钟,50分钟。然而,观察与其他倍极显著差异(表 5)。这表明与CR艺术展显著不同煎煮时间和主要可以分为三个阶段(时间点),也就是说,使用10 - 20分钟艺术展是最强的煎煮时间,然后使用30 - 50分钟煎煮,最后60分钟。我们的结论是,在CR随煎煮时间艺术展。

方差分析。

源 平方和 df 均方 F 团体。
集团 0.108 5 0.022 41.711 0.000
总 0.114 17

Student-Newman-Keuls一个。

集团 N α= 0.05的子集
1 2 3
60分钟 3 0.248
50分钟 3 0.389
40分钟 3 0.392
30分钟 3 0.424
20分钟 3 0.476
10分钟 3 0.479
团体。 1.000 0.194 0.873
3.4。有效成分相关分析和体外艺术展在CR使用不同煎煮时间 3.4.1。有效成分分析和SIMCA-PLS艺术展

基于SIMCA-PCA结果,阿魏酸,senkyunolide我senkyunolide H, Z-ligustilide, butylphthalide, senkyunolide作为独立的变量( X),作为因变量(艺术展 Y)是由SIMCA-PLS。SIMCA-PLS的结果表明选择前两个主成分, R2 X(和)是0.993 问2(和)是0.941。条件下的有效成分和艺术展,煎煮时间分为三个部分:10 - 20分钟,30 - 50分钟,60分钟(图 6(一))。在SIMCA-PLS装运散点图,6个有效成分和艺术展被分成两部分:Z-ligustilide, butylphthalide, senkyunolide集中,而我senkyunolide艺术展、senkyunolide H,和阿魏酸集中。结果表明,Z-ligustilide之间有很强的相关性,butylphthalide,和senkyunolide senkyunolide我之间有很强的相关性,senkyunolide H和阿魏酸。与此同时,艺术展的变化规律类似于senkyunolide我senkyunolide H,和阿魏酸(图 6 (b))。

统计分析的结果通过SIMCA-PLS:(一)点阴谋;(b)加载散点图。

 3.4.2。皮尔森相关分析的变量

两个变量的相关性可能由皮尔森相关分析研究。CR 60分钟,煎煮的香兰素,阿魏酸,senkyunolide我senkyunolide H, senkyunolide, butylphthalide, Z-ligustilide,艺术展选择进行皮尔逊相关分析(表 6)。结果表明,有显著差异( P < 0.05 )之间的有效成分,阿魏酸和senkyunolide我(相关性为0.976),阿魏酸和senkyunolide H(相关性为0.972),senkyunolide我和senkyunolide H(相关性为0.982),senkyunolide A和butylphthalide(相关性为0.974),senkyunolide A和Z-ligustilide(相关性为0.947),butylphthalide和Z-ligustilide(相关性为0.993),分别。有显著差异( P < 0.05 )有效成分与艺术展,阿魏酸(相关性为0.965),senkyunolide我0.973(相关),senkyunolide H(相关性是0.999)。与SIMCA-PLS结果是一致的。

皮尔逊相关系数的相关性分析。

变量 香兰素 阿魏酸 Senkyunolide我 Senkyunolide H Senkyunolide一 Butylphthalide Z-Ligustilide 艺术展
香兰素 - - - - - - −0.540 −0.395 −0.466 0.669 0.795 0.859 −0.482
阿魏酸 - - - - - - - - - - - - 0.976 ∗ ∗ 0.972 ∗ ∗ −0.385 −0.548 −0.564 0.965 ∗ ∗
Senkyunolide我 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.982 ∗ ∗ −0.364 −0.503 −0.499 0.973 ∗ ∗
Senkyunolide H - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - −0.319 −0.483 −0.495 0.999 ∗ ∗
Senkyunolide一 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.974 ∗ ∗ 0.947 ∗ −0.313
Butylphthalide - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.993 ∗ ∗ −0.481
Z-Ligustilide - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - −0.497
艺术展 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

∗ P < 0.05 ; ∗ ∗ P < 0.01 。

 3.4.3。多重回归分析

有效成分之间的关系可能是多元线性回归和艺术展;即。,multicomponent was correlated with AAB at the same time. According to the results of stepwise regression analysis, the R2模型1和调整 R21,这表明该模型适合(表吗 7)。在方差分析,线性回归senkyunolide H和senkyunolide我有统计学意义( P < 0.05 ),和其他有效成分的统计学意义( P > 0.05 )(表 8)。有senkyunolide H之间的相关性,senkyunolide我和艺术展。Senkyunolide H (H)呈正相关,艺术展。Senkyunolide我与艺术展(我)是负相关,和它的表达艺术展= 1.187 ∗ H−0.199 ∗ 我−0.422(表 9和 10)。

模型总结。

模型 R R2 调整 R2 Std.误差的估计
1 1.000一个 1 1 0.0010433

一个预测:(常数),senkyunolide H, senkyunolide我。

方差分析。

模型 平方和 Df 均方 F 团体。
1 回归 0.036 2 0.018 16575.747 0.000一个
剩余 0 3 0
总 0.036 5

一个预测:(常数),senkyunolide H, senkyunolide我。

系数一个。

变量 Unstandardized系数 标准化系数 t 团体。
B Std.错误 β
(常量) −0.422 0.007 −63.728 0
Senkyunolide H 3.044 0.045 1.187 67.199 0
Senkyunolide我 −0.13 0.012 −0.199 −11.244 0.002

一个因变量:艺术展。

排除变量一个。

模型 β t 团体。 偏相关 共线性统计公差
香兰素 0.006一个 0.799 0.508 0.492 0.622
阿魏酸 0.011一个 0.183 0.872 0.128 0.012
Senkyunolide一 −0.001一个 −0.091 0.936 −0.064 0.195
Butylphthalide 0.001一个 0.1 0.929 0.071 0.264
Z-Ligustilide 0.003一个 0.229 0.84 0.16 0.302

一个预测:(常数),senkyunolide H, senkyunolide我。

 4所示。结论

有效成分的内容在CR在不同时间不同。煎煮时间的延长,有效成分具有转化和降解,减少艺术展。有效成分的变化是一致的艺术展在CR汤:10分钟,20分钟> 30分钟,40分钟,50分钟> 60分钟。有协同作用的有效成分之间的关系;与此同时,有效成分和艺术展是相关的。在分析多组分之间的相关性和艺术展,senkyunolide我senkyunolide H,艺术展显示线性关系,senkyunolide H呈正相关,senkyunolide负相关,和其他有效成分和艺术展没有联系。

 数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

 信息披露

陈Linming co-first作者。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

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