IPID 跨学科视角传染病 1687 - 7098 1687 - 708 x Hindawi出版公司 10.1155 / 2014/470825 470825年 临床研究 甲型H1N1流感重症肺炎:小说Morphocytological发现支气管肺泡灌洗 Faverio Paola 1、2 http://orcid.org/0000 - 0002 - 0090 - 4531 Aliberti 斯特凡诺 1 http://orcid.org/0000 - 0003 - 4619 - 4253 以西结 克林顿 2 Messinesi 葛拉齐亚 1 Brenna Ambrogio 3 Pesci 阿尔贝托。 1 Cinti 桑德罗 1 米兰Bicocca大学健康科学部门,我们共同Pneumologica, AO圣杰勒德通过Pergolesi 33岁20900蒙扎 意大利 unimib.it 2 在圣安东尼奥,德克萨斯大学健康科学中心8300年弗洛伊德卷发,圣安东尼奥,TX 78229 美国 uthscsa.edu 3 解剖学Patologica, AO圣杰勒德通过Pergolesi 33岁20900蒙扎 意大利 2014年 14 10 2014年 2014年 01 05年 2014年 02 10 2014年 14 10 2014年 2014年 版权©2014 Paola Faverio et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

我们目前的结果支气管肺泡灌洗(BAL)中执行三个严重流感A / H1N1患者肺炎并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。光学显微镜分析BAL cytocentrifugates显示大的存在特点,单核,plasmoblastic / plasmocytoid-like细胞从未描述。通过透射电子显微镜,这些细胞被归类为非典型II型pneumocytes其中显示胞质囊泡和夹杂物。我们得出结论,plasmoblastic / plasmocytoid-like II型pneumocytes可能代表一个形态标记的a / H1N1流感病毒感染以及弥漫性肺泡损伤后修复细胞活化。

 1。介绍

一些研究报道histophatological观察2009年甲型H1N1流感肺炎:主要发现是弥漫性肺泡损伤(爸爸) 1- - - - - - 4]。II型pneumocytes被认为是流感A / H1N1感染的主要目标 5]。有限数量的观察描述体内样本,如支气管肺泡灌洗(BAL) [ 6- - - - - - 8]。BAL细胞学分析可能是有用的在流感病毒肺炎。因此,它可能扮演一个角色在进一步理解新病毒株的发病机理。

系列在这种情况下我们目前的结果BAL中执行三个严重2009年甲型H1N1流感肺炎患者并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。

 2。材料和方法

8月至2009年12月我们执行bronchoscopy-guided BAL三圣Gerardo住院的病人,蒙扎,意大利,流感a / H1N1病毒肺炎ARDS的后续发展。所有三个病人需要重症监护病房(ICU)承认和接受机械通气(MV)和体外呼吸支持(ECMO)。甲型H1N1流感诊断证实了A / H1N1病毒RNA检测鼻拭子样本使用2009年甲型H1N1流感rrt - pcr(实时Reverse-Transcriptase-Polymerase-Chain-Reaction)试验(Genexpert)。

BAL微分细胞计数在执行cytocentrifugate光学显微镜(LM)通过计算约300个细胞随机领域在400 x放大。形态特征的细胞可能格染色和Papanicolau染色后注册。另外采用分析使用CD20和CD138在两个样本。Semithin部分准备透射电子显微镜观察(EM)。

 3所示。结果

人口、并存病、严重程度上承认,微生物分解动作,结果为每个病人描述在表 1。

人口、并存病、严重程度上承认,临床过程,微生物分解动作,结果。

患者1 病人2 患者3
年龄 51 43 24
性别 男性 女 男性
身体质量指数 27 32 24
免疫抑制 没有 没有 没有
并发症 痛风 甲状腺功能减退、抑郁、慢性头痛 没有一个
沙发分数录取 6 4 6
抑制- 65分数录取 0 1 2
MV医院一天就开始了 3日 2日 2日
ECMO医院一天就开始了 7日 2日 4日
医学界的长度(天) 20. 26 15
医院一天流感病毒化验和奥司他韦开始执行 3日 2日 1日
长度的奥司他韦治疗(天) 13 9 30.
医院病原体分离 c . parapsilosis喉标本和 美国epidermidis对BAS 铜绿假单胞菌MDR, 白念珠菌, c . glabrata和 c . parapsilosis对BAS 铜绿假单胞菌MDR, 黄杆菌属,和 c . indologenes对BAS
LP和SP尿抗原 负 负 负
CP、议员和LP IgM和免疫球蛋白 负 负 负
结果 活着 活着 活着

MV:机械通气;ECMO:体外膜肺氧合;LP: 退伍军人;SP: 肺炎链球菌;CP: c .肺炎;议员: m .肺炎;BAS:支气管送气音;耐多药耐药(用于病原体耐至少三种不同抗生素类药物)。

与奥司他韦抗病毒疗法(150毫克每日两次)与rrt - pcr分析,同时从住院开始一直持续到rrt - pcr测定鼻拭子转为负面。

BAL cytocentrifugates分析总结在表 2。大,非典型细胞与plasmocytoid外观相似的三个标本的观察百分比(8、9和6%,分别地。)。在LM,他们看上去那么大,plasmoblastic / plasmocytoid-like细胞与偏心核和paranuclear液泡,比例高核/细胞质和强烈嗜碱性胞浆。没有明确的观察病毒细胞病变效应(图 1)。采用免疫分析cytocentrifugate表明这些细胞为阴性CD20 (B淋巴细胞标记)和CD138(浆细胞标记)。

细胞学检查支气管肺泡灌洗。

病人# 1 病人# 2 病人# 3 参考区间#
天住院后落下帷幕 15日 6日 5日
肺泡巨噬细胞% 36 31日 33 80 - 90%
淋巴细胞百分比 46 15 21 5 - 15%
中性粒细胞,% 3 44 38 1 - 3%
肥大细胞% 6 0 2 < 1%
嗜酸性粒细胞百分比 2 1 1 ≤1%
% p / p-like细胞 8 9 6 缺席
红细胞 现在 现在 现在 缺席
II型pneumocytes聚合成群 缺席 现在 现在 缺席

p / p-like细胞:plasmoblastic / plasmocytoid-like细胞。

#拜尔港合作指导委员会。支气管肺泡灌洗的选民在健康个体,特发性肺纤维化,选择比较组( 9]。

标本从支气管肺泡灌洗显示巨噬细胞、中性粒细胞和大型plasmoblastic / plasmocytoid-like元素(箭头)和胞浆嗜碱性的paranuclear液泡(可能格染色,放大×400)。

超微结构检查在传播他们允许我们观察multilamellar osmiophilic身体plasmoblastic / plasmocytoid-like细胞的细胞质中。Osmiophilic身体产生表面活性剂和II型pneumocytes特定。因此,这些细胞被归类为非典型II型pneumocytes。他们显示在这些小圆细胞细胞质内含物与不规则表面和一个直径约60 nm(图 2)。他们还显示胞质囊泡直径100纳米左右和不规则的电子致密核心(图 3)。这些方面被怀疑是病毒包涵体。

超微结构检查的非典型II型pneumocytes支气管肺泡灌洗标本。箭头表示怀疑细胞质病毒包涵体。酒吧规模:200海里。

超微结构检查的非典型II型pneumocytes支气管肺泡灌洗标本。箭头表示一个包含一个疑似病毒粒子的囊泡。酒吧规模:200海里。

 4所示。讨论

球的主要特征的甲型H1N1流感患者肺炎与ARDS是大细胞的存在plasmoblastic / plasmocytoid-like外观,标识在EM典型II型pneumocytes。

我们假设两个可能的解释这些非典型细胞的存在。

第一个假说认为修复行动,II型pneumocytes可能在爸爸。在我们的情况下,II型pneumocytes激活将合理的病毒损伤肺泡上皮细胞。反应性增生的II型pneumocytes是典型的ARDS的组织阶段。斯坦利形态描述的异型性,如增加nuclear-cytoplasmic比率,在II型pneumocytes发现在ARDS巴尔斯( 10]。这些非典型pneumocytes通常聚集在集群和应该有一个修复的作用。

我们所有的发达ARDS患者,我们观察到pneumocytes聚合在集群巴尔斯(病例数字2和3)早些时候执行。根据第一个假说,我们观察到的非典型细胞可以被描述为无功不成熟的II型pneumocytes。

第二个假说认为流感A / H1N1病毒细胞病变效应。II型pneumocytes已经被描述为2009年流感A / H1N1感染的主要目标( 5]。只是等人在2012年描述四个解剖与组织病理学模式A / H1N1流感病例出现流感病毒抗原阳性的急性爸爸II型pneumocytes,或许表明病毒感染细胞的直接作用在急性肺泡损伤( 11]。没有特定cytophatic效应或病毒包含描述到目前为止在LM在流感肺炎肺组织标本 1]。

进行了观察通过EM尸检标本。在最近的流感大流行,Mauad等人发现II型pneumocytes囊泡,直径大约100海里,电子密度中心( 2]。pneumocytes Bal和他的同事描述了细胞质内含物,直径范围从74到82纳米和显示表面峰值流感病毒的特征 12]。

他们观察的标本透露了一些典型pneumocytes显示两个小圆细胞质内含物的不规则表面和小泡(类似被Bal和Mauad)。根据第二个假说,非典型II型pneumocytes流感病毒感染可能是一个特定的形态标记。

从数据收集到目前为止,我们无法支持一种解释;事实上,他们可以共存的情况下严重流感A / H1N1肺炎与ARDS。

本研究的局限性包括以下几点:首先,缺乏案例分析;第二,我们没有进行免疫组织化学染色对H1N1病毒抗原BAL样本。

落下帷幕的对照组的描述ARDS患者与甲型H1N1流感肺炎是超出了本系列案件的范围。然而,其他作者描述BAL细胞学non-H1N1 ARDS,尽管他们在II型pneumocytes报道形态异型性,他们不描述这些特殊plasmoblastic / plasmocytoid-like细胞[ 10, 12, 13]。

收集病人的呼吸道标本2号和3号,院内的病原体是孤立的,发生后落下帷幕。因此,这些病原体最有可能并不影响落下帷幕的细胞结构。

总之,plasmoblastic / plasmocytoid-like II型pneumocytes描述球2009年甲型H1N1流感患者的肺炎与ARDS。他们可以代表一个特殊的标记的流感病毒肺炎以及修复细胞激活后爸爸。更多的观察BAL患者细胞学流感肺炎需要了解他们的特点和作用。

 利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

 承认

作者感谢Consorzio M.I.A.(米兰比可卡大学的显微镜和图像分析)与电子显微镜图像寻求帮助。

 Mukhopadhyay 年代。 菲利普 a . T。 Stoppacher R。 病理发现新型甲型流感(H1N1)病毒感染(“猪流感”):对比在两个死亡病例临床表现和肺部病理学 美国临床病理学杂志》上 2010年 133年 3 380年 387年 10.1309 / AJCPXY17SULQKSWK 2 - s2.0 - 77949417531 Mauad T。 的座谈会 l。 Callegari g D。 达席尔瓦 l F F。 Schout D。 活动 f·r·b·G。 阿尔维斯 诉a F。 Malheiros d·m·a·C。 也是如此 j . o . C。 Jr。 费雷拉 答:F。 Borsato m . r . L。 Bezerra s M。 古铁雷斯 p S。 Caldini e . t . e . G。 Pasqualucci c。 Dolhnikoff M。 Saldiva p h . N。 在致命的肺部病理小说人类甲型流感(H1N1)感染 美国呼吸和重症监护医学杂志》上 2010年 181年 1 72年 79年 10.1164 / rccm.200909 - 1420摄氏度 2 - s2.0 - 73849101100 只是 N。 哈塔 年代。 佐藤 Y。 Tobiume M。 Katano H。 金子 K。 经营着 N。 Kataoka M。 Ainai 一个。 长谷川 H。 田代 M。 黑田 M。 乌代 T。 Urasawa N。 荻野 T。 Hanaoka H。 渡边 M。 萨塔 T。 第一次尸检的大流行性流感(A / H1N1pdm)在日本病毒感染:病毒检测高拷贝数的II型肺泡上皮细胞的病理和病毒学检查 日本传染病》杂志上 2010年 63年 1 67年 71年 2 - s2.0 - 76649133449 吉尔 j . R。 盛 Z.-M。 伊利 美国F。 Guinee d·G。 Jr。 比斯利 m B。 Suh J。 Deshpande C。 Mollura d . J。 Morens d . M。 布雷 M。 特拉维斯 w·D。 陶本伯杰 j·K。 肺的病理发现致命的2009 A / H1N1大流行性流感病毒感染 病理学和实验室医学档案 2010年 134年 2 235年 243年 2 - s2.0 - 76149106017 Shieh W.-J。 蓝色 d . M。 丹尼森 a . M。 DeLeon-Carnes M。 亚当 P。 博 J。 萨姆纳 J。 刘 l 帕特尔 M。 板条 B。 格里尔 P。 琼斯 T。 史密斯 C。 巴特利特 J。 蒙塔古 J。 白色的 E。 转入 D。 高 R。 密封 C。 Jost H。 梅特卡夫 M。 戈德史密斯 c·S。 汉弗莱 C。 施密茨 一个。 画了 C。 围场 C。 Uyeki t M。 扎基 s R。 2009年甲型流感(H1N1):病理病机100死亡病例在美国 美国病理学杂志》上 2010年 177年 1 166年 175年 10.2353 / ajpath.2010.100115 2 - s2.0 - 77954578058 Yokoyama T。 对马岛 K。 Ushiki 一个。 小林 N。 Urushihata K。 小泉 T。 久保 K。 急性肺损伤与肺泡出血由于小说swine-origin甲型流感(H1N1)病毒 内科医学 2010年 49 5 427年 430年 10.2169 / internalmedicine.49.3022 2 - s2.0 - 77749333226 全 e . J。 金 k . H。 最小值 k . H。 急性嗜酸性肺炎与2009年甲型流感(H1N1) 胸腔 2010年 65年 3 268年 270年 10.1136 / thx.2009.133025 2 - s2.0 - 77949820085 Igusa R。 神 T。 Shibahara T。 坂本 K。 西村 H。 在线旅行社 K。 复杂的二次肺炎后swine-origin infuenza病毒感染的免疫活性的病人 东北实验医学杂志》上 2012年 226年 2 117年 120年 10.1620 / tjem.226.117 2 - s2.0 - 84856281314 支气管肺泡灌洗的选民在健康个体,特发性肺纤维化,选择比较组。球合作指导委员会 美国的呼吸道疾病 1990年 141年 5,第2部分 S169 S202 斯坦利 m·W。 Henry-Stanley m·J。 Gajl-Peczalska k·J。 Bitterman p . B。 II型增生pneumocytes在急性肺损伤:细胞学的研究结果的顺序支气管肺泡灌洗 美国临床病理学杂志》上 1992年 97年 5 669年 677年 2 - s2.0 - 0026771077 只是 N。 佐藤 Y。 Katano H。 长谷川 H。 Kumasaka T。 哈塔 年代。 田中 年代。 天野之弥 T。 开赛 T。 庄 人类。 Iiduka T。 (靠 我。 日野 Y。 滨松 一个。 Horiguchi H。 田中 T。 Hasagawa 一个。 Kanaya Y。 总裁 R。 欧雅 T。 萨塔 T。 组织病理学和免疫组织化学结果20尸检病例与2009年H1N1流感病毒感染 现代病理学 2012年 25 1 1 13 10.1038 / modpathol.2011.125 2 - s2.0 - 84855348269 落下帷幕 一个。 苏瑞 V。 Mishra B。 Bhalla) 一个。 阿加瓦尔 R。 Abrol 一个。 Ratho r·K。 Joshi K。 病理学和病毒学发现致命的甲型流感H1N1病毒感染病例中2009 - 2010 组织病理学 2012年 60 2 326年 335年 10.1111 / j.1365-2559.2011.04081.x 2 - s2.0 - 84255178271 Ravaglia C。 Gurioli C。 Casoni G。 诊断作用的快速现场细胞学检查(玫瑰)broncho-alveolar灌洗在ALI / ARDS 没有抓住 2012年 104年 2 65年 69年 2 - s2.0 - 84867164909