IPID 跨学科视角传染病 1687 - 7098 1687 - 708 x Hindawi出版公司 719049年 10.1155 / 2013/719049 719049年 临床研究 接触的血清学证据 钩端螺旋体种虫害在兽医学生和其他大学生在特立尼达和多巴哥 詹姆斯 安布罗斯 Siele 金斯利 哈利 Neeka Suepaul Sharianne Stewart-Johnson 阿尔瓦 Adesiyun Abiodun Marquart 玛丽E。 兽医学院 医学科学学院 西印度群岛大学 圣奥古斯汀 特立尼达和多巴哥 uwi.edu 2013年 9 1 2013年 2013年 26 07年 2012年 17 12 2012年 19 12 2012年 2013年 版权©2013安布罗斯詹姆斯et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

研究比较了钩端螺旋体病的血清学证据在四所学校212名学生(兽医、牙科、高级护理教育和药学)大学的西印度群岛(桑),通过测试对免疫球蛋白免疫球蛋白 钩端螺旋体种虫害使用酶联免疫吸附试验(ELISA)和显微镜凝集试验(垫)。总体而言,212名学生的ELISA检测,12(5.7%)和31例(14.6%)是正面和边缘,分别。在113名兽医学生11(9.7%)和19(16.8%)分别血清反应阳性的和边缘与nonveterinary学生相应的值1(1.0%)和12 (12.1%)。钩端螺旋体病的血清学证据的频率由ELISA在统计学上显著( P < 0.05 ; χ 2 )在兽医学生更高,比nonveterinary(30 113) 26.5%的学生,13.1% (99)13。垫,钩端螺旋体病的血清阳性是类似的兽医学生,7.1%(113 8)和nonveterinary学生,7.1% (99 7)。对兽医的学生,普遍感染型Icterohaemorrhagiae Copenhageni nonveterinary学生之间,普遍型的南极光Rachmati。作为一个兽医的学生是唯一显著相关的危险因素 钩端螺旋体感染表明兽医学生需要认识到和练习为钩端螺旋体病的预防措施。

1。介绍

钩端螺旋体病是一种细菌人畜共患病与全球分布,虽然它已经被记载在发展中国家和发达以及温带和热带国家 1, 2]。这种疾病的发生主要为亚临床感染虽然与众多nonpathognomonic体征和症状的临床病例报告( 1- - - - - - 4]。因此负责全球发病率和死亡率( 2, 5, 6]。

它已经建立了啮齿动物是人类和动物感染的主要水库 钩端螺旋体种虫害的钩端螺旋体病的患病率较高的原因在热带环境中降雨和高湿度和普遍恶劣的卫生条件,支持啮齿动物的扩散 7- - - - - - 9]。主要储层的分布和病原体感染动物的能力(家畜、野生动物、宠物动物,和其他人)已经钩端螺旋体病一个职业病 9- - - - - - 11]。

高危个体包括牲畜的农民、动物处理程序、兽医、屠宰场工人,污水排放或环境环卫工人、甘蔗、和稻田的工人,而普通人群的成员( 9, 11, 12]。已知人类感染造成直接和间接接触啮齿动物或其他动物的尿液含有大量可行的leptospires或食用被污染的食物或水后( 13, 14]。一系列的因素,除了职业暴露,已报告影响暴露潜在的人类钩端螺旋体病。这些因素包括年龄、性别、季节、地理位置和人类已经知道影响感染率( 15, 16]。

人类钩端螺旋体病的诊断可通过微生物本身的演示或检测对病原体感染后产生的抗体( 13, 17]。有机体可以增长证明了文化媒体、特殊染色受感染的组织,和暗视野显微镜的使用 13, 18]。

有各种各样的血清学测试可以检测免疫球蛋白,IgM, IgA [ 19]。这些测试包括酶联免疫吸附试验(ELISA) [ 20.)和显微凝集试验(垫) 21]在别人。垫子是血清学诊断的“金标准”的钩端螺旋体病血清学分型的 钩端螺旋体隔离( 21, 22]。垫的优缺点作为诊断测试记录在文献[ 21- - - - - - 23]。ELISA是容易执行,快速,灵敏度高,和服从被标准化,但特异性较低,这是genus-specific,因此,不同于垫,不能用于血清型感染leptospires [ 24, 25]。

在特立尼达和多巴哥,一些存在于钩端螺旋体病的流行与检测报告或隔离在学校的孩子们 26],看似健康的人[ 27),在猪舍农场工人 28]。Mohan et al。 29日)进行了一项回顾性研究确定了钩端螺旋体病的平均年发病率和表明率受季节影响,性别和年龄。在甘蔗实地工作者进行的一项研究中,Adesiyun et al。 30.]报道seroprevalence钩端螺旋体病的0.7%。到目前为止没有报告钩端螺旋体病的发生在全国大专院校的学生。

当前的研究的具体目标是比较的频率钩端螺旋体病的血清学证据兽医学生nonveterinary医学科学学院的学生,来确定感染型的 钩端螺旋体种虫害和调查这些学生的钩端螺旋体病的重要危险因素。

2。材料和方法 2.1。学生人口研究

研究小组由四所学校的学生,牙科学院(SOD),兽医学院(SVM),高级护理教育学院(理智),和学校的药房(SOP),医学科学学院(FMS)。研究从2010年8月到2011年7月在每个学校的学生人数如下:SOD(160),支持向量机(170),SOP(279),和理智(89),一个三年计划。

2.2。研究设计

涉及的研究设计抽样的学生自愿参与每个学校的,然后比较兽医的血清学证据与nonveterinary学生。

2.3。样本容量的确定

学生数量的样本大小将决定使用公式 n o = t 2 × p ( 1 - - - - - - p ) / d 2 ( 31日), t = 1.96 , d = 精度在1型误差为0.04, p = 流行率= 11% ( 28),而 n o = 估计样本容量。由于这个方程是基于无限的人口, n o 调整,以适应一个明确的四所学校698名学生人口人口(SOD、支持向量机、理智和SOP)在FMS,使用这个公式 n 邻接的 = ( N × n o ) / ( N + n o ) ,在那里 n 邻接的 是人类需要的数量在同一绝对精确估计患病率作为第一个方程。在当前的研究中使用的样本量估计因此: n o = 1.96 2 × 0.11 ( 1 - - - - - - 0.11 ) / 0.04 2 = 3 84年 × 0 0979年 / 0.0016 = 235年 和最低调整样本量 n 邻接的 = ( 235年 × 698年 ) / ( 235年 + 698年 ) = 176年

2.4。调查问卷管理

管理问卷,每个参与者为了获得信息,包括研究的计划,年计划,年龄、性别、居住地、所有权的宠物动物(狗、猫、和啮齿动物),与畜牧业协会,农业活动在FMS和其他风险因素。每个参与者被允许选择一个随机数字是用来识别参与者的样品和测试结果。保持机密性的研究中,得到了电子邮件地址来传达每一个参与者的研究结果。

2.5。收集的样本

合格的抽血者和护士从理智的协助采血的参与者。大约5毫升的血液从手臂的肘的中值或头静脉使用21-gauge一个半英寸针连接到5毫升注射器。然后放入管无抗凝血。收集血液冷藏一夜后在4°C离心机和血清收获和储存在−20°C到测试。这是一个研究血清学检测接触的经验 钩端螺旋体种虫害在学生学习使用ELISA和垫,因此没有尝试文化的血液样本 钩端螺旋体spp。

2.6。试验对免疫球蛋白<斜体>钩端螺旋体< /斜体> spp。使用ELISA和垫子

现有captureELISA检测免疫球蛋白(感染)是用于检测之前接触的参与者在microtitre板制造商规定的钩端螺旋体病(SERION ELISA 经典的钩端螺旋体免疫球蛋白/ IgM Hersteller制造商制造者,Friedrich-Berguis-Ring 19 d, 97076维尔茨堡,德国)。试验以适当的控制进行了规定的设备制造商。免疫球蛋白的浓度(单位/毫升)样本中确定使用测试套件中提供的标准。这些样本分类如下:-:0到4.9单位/毫升。,borderline: 5.0 to 9.9 units/mL, and positive: 10 units and higher as recommended for the test kit.

显微镜凝集试验(垫),26型冻干抗原从Koninklijk获得 Instituut voor de Tropen/皇家热带研究所(装备),生物医学研究实验室,阿姆斯特丹,荷兰。于以下的国际小组利用由/型:南极光布拉迪斯拉发杰兹布拉迪斯拉发,Ballum Ballum 127亩,Canicola Canicola本田乌特勒支四世Grippotyphosa Grippotyphosa Duyster, Grippotyphosa Grippotyphosa Mandemakers, Hebdomadis Hebdomadis Hebdomadis, Icterohaemorrhagiae Icterohaemorrhagiae Kantorowic, Icterohaemorrhagiae Copenhageni Wijnberg,波莫纳波莫纳波莫纳,波莫纳proechimys 1161 U, Sejroe Hardjo Hardjoprajitno, Sejroe Saxkoebing亩24日Sejroe Sejroe M 84, Semaranga Patoc Patoc我,安达曼安达曼Ch 11日南极光南极光Ballico, Autumnalis Rachmati上,Bataviae Bataviae黑黝黝的,Cynopteri Cynopteri 3522 C,巴拿马的巴拿马CZ 214 K,致热源热原质Salinem, Semaranga Semaranga Veldrat Sem 173年Shermani Shermani 1342 K, Autumnalis荡妇,Icterohaemorrhagiae Mankarso,和Tarassovi Tarassovi Perepelicin。垫使用由两部分组成,定性检测的血清型抗血清和定量方面确定抗体滴定度。定性方面,遵循世界卫生组织描述的协议(13),该委员会26型。每周抗原亚文化在宝石瓶,孵化30°C和检查实现1 - 2×10的密度8后5 - 7天。测定的滴定度(定量的部分),连续2倍血清稀释了抗原的血清凝集展示给任何使用。有2型相同的滴定度,这些被认为是混合感染。这个过程完成后所描述的标准协议作为皇家热带研究所的国际课程实验室手工钩端螺旋体病的诊断方法(21)。滴定度1:20和更高的被认为是作为证据 钩端螺旋体种虫害感染推荐看似健康的人( 32]。

2.7。研究伦理委员会的批准

医学科学教师的道德委员会批准了研究开始之前。研究的目标和协议解释所有的参与者和书面同意。

2.8。数据分析

社会科学统计软件包(SPSS) 15.0版本是用于生产 2 × 2 应急表。进行卡方分析确定钩端螺旋体感染的危险因素在人类和意义会固定在水平α= 0.05。

3所示。结果 3.1。人口数据的学生进行了研究

1显示了人口数据从FMS的四所学校的学生,大学的西印度群岛,特立尼达和多巴哥,自愿参加这项研究。总的来说,共有212名学生参与了这项研究包括113名兽医学生和99 nonveterinary(46牙,39护理、14药店)的学生。基于数据生成学生的特点和钩端螺旋体病的危险因素,大多数(54.7%)的学生抽样是在年各自项目的2和3,25岁以上(37.3%)和女性(73.1%)和驻留在家庭(53.3%)。参与者在四所学校中,没有一个(0.0%)有钩端螺旋体病的诊断之前,69.8%保持宠物动物(狗/猫)最高的频率在兽医的学生(80.5%)。大多数(41.0%)保持动物当成家严格还是宠物动物;大多数(36.8%)保持低水平的接触他们的动物除了兽医的学生,大多数(46.9%)提到,他们密切接触宠物。高频率(98.6%)的宠物动物没有最近的钩端螺旋体病的诊断。兽医之间接触牲畜最高(31.0%)的学生。农业的最高频率(10.6%)外的教师实行了兽医学生大多数是畜牧业(9.7%)。总共有83(39.2%)的212名学生表示,他们遇到了啮齿动物问题的前提,但只有3.3%保持啮齿动物作为宠物饲养。

人口数据抽样研究的学生。

因素 从FMS采样(%)的学生人数 兽医学院* 其他学校* * 总 一年计划 128日(24.8)19日(19.2)47 232 (28.3)34 (34.3)66年 328日(24.8)22日(22.2)50 414 (12.4)16 (16.2)30. 511 (9.7)6 (6.1)17
年龄(年) 182 (1.8)0 (0.0)2 198 (7.1)2 (2.0)10 2018 (15.9)5 (5.1)23 2117 (15.0)7 (7.1)24 2213 (11.5)10 (10.1)23 235 (4.4)9 (9.1)14 245 (4.4)7 (7.1)12 25岁及以上21日(18.6)58 (58.6)79年
性别 男性29 (25.7)28日(28.3)57 女84 (74.3)71 (71.7)155年
住宅 旅馆10 (8.8)12 (12.1)22 公寓42 (37.2)30 (30.3)72年 回家58 (51.3)55 (55.6)113年 家+公寓2 (1.8)1 (1.0)3 其他人1 (0.9)1 (1.0)2
钩端螺旋体病的诊断 是的0 (0.0)0 (0.0)0 没有113 (100)99 (100.0)212年
宠物的存在 是的91 (80.5)57 (57.6)148年 没有22日(19.5)42 (42.4)64年
类型的宠物 家庭/宠物57 (50.4)30 (30.3)87年 卫队只7 (6.2)8 (8.1)15 宠物和保卫17 (15.0)15 (15.2)32
与宠物接触23日(20.4)55 (55.6)78年 媒介31 (27.4)25 (25.3)56 高53 (46.9)11 (11.1)64年 不适用6 (5.3)7 (7.1)13
接触牲畜6 (5.3)1 (1.0)7 媒介16 (14.2)1 (1.0)17 高13 (11.5)0 (0.0)13 不适用78 (69.0)0 (0.0)78年
最近宠物诊断 是的2 (1.8)1 (1.0)3 没有111 (98.2)98 (99.0)209年
啮齿动物的问题 是的54 (47.8)29 (29.3)83年 没有59 (52.2)70 (70.7)129年
农业 是的12 (10.6)2 (2.0)14 没有101 (89.4)97 (98.0)198年
类型的农业 牲畜11 (9.7)2 (2.0)13 大米糖1 (0.9)0 (0.0)1
宠物啮齿动物 是的5 (4.4)2 (2.0)7 没有98 (86.7)97 (98.0)195年

*基于113名学生。

* *共有99名参与者包括46牙,39护理、14药房的学生。

3.2。频率检测免疫球蛋白的<斜体>钩端螺旋体ELISA < /斜体>

113年的兽医学生测试,使用ELISA、免疫球蛋白免疫球蛋白 钩端螺旋体spp。11(9.7%)和19(16.8%)分为正面和边缘的结果,分别在nonveterinary学生是1(1.0%)和12(12.1%),分别如表所示 2。差异具有统计学意义( P < 0.05 ; χ 2 )。总的来说,比较试验的免疫球蛋白免疫球蛋白(正面和边缘) 钩端螺旋体113种虫害在兽医的学生,26.5%(30),在统计学上显著( P < 0.05 ; χ 2 )高于nonveterinary来自其他学校的学生,13.1% (99)13。

的频率由ELISA检测免疫球蛋白免疫球蛋白的钩端螺旋体病。

学校 测试的学生人数 数量与ELISA结果(%) 积极的* 边缘* * 兽医113年11 (9.7)19日(16.8) 其他学校* * *99年1 (1.0)12 (12.1)
212年12 (5.7)31 (14.6)

* ELISA 10单元的浓度。

* * ELISA 5 - 9单元的浓度。

* * *共有99名参与者包括46牙,39护理、14药房的学生。

3.3。频率检测免疫球蛋白的<斜体>钩端螺旋体< /斜体>的垫子上

免疫球蛋白的血清阳性率 钩端螺旋体种虫害化验时垫为兽医学生相似,7.1%(113 8),和nonveterinary学生,7.1%(99 7),如表所示 3。只有7个(26.9%)的26型测试凝集在20和更高的滴定度。的16个重大凝集检测7(43.8%)、7(43.8%),1例(6.3%),1例(6.3%)在滴定度1:20日1:40岁,1:80年,和1:分别为320。5(83.3%)的6个重要的凝集型Icterohaemorrhagiae被发现在兽医学生虽然所有5(100.0%)显著凝集型南极光Rachmati nonveterinary学生之间。

滴定度型的 钩端螺旋体定量探测到垫子上。

型 兽医的学生一个 其他学生b 人数(%)积极的滴定度 人数(%)积极的滴定度 20. 40 80年 160年 320年 20. 40 80年 160年 320年 Icterohaemorrhagiae Copenhageni3 (2.7)1 (0.9)1 (0.9)- - - - - -- - - - - -- - - - - -1 (1.0)- - - - - -- - - - - -- - - - - - Sejroe saxkoebing- - - - - -1 (0.9)- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - - Sejroe Sejroe1 (0.9)- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - - Ballum Ballum *- - - - - -1 (0.9)- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - - Bataviae Bataviae *- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -1 (0.9)- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - - 南极光Rachmati- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -3 (3.0)2 (2.0)- - - - - -- - - - - -- - - - - - Icterohaemorrhagiae Icterohaemorrhagiae- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -1 (1.0)- - - - - -- - - - - -- - - - - -
4 (3.5)3 (2.7)1 (0.9)0 (0.0)1 (0.9)3 (3.0)4 (4.0)

*样品有许多凝集。

一个基于共有113名学生。

b基于共有99个样本46牙,39护理、药学学生14。

-:没有。

3.4。比较的ELISA和垫子的结果

比较两种血清学测试用于血清学证据的研究表明,频率在所有学生显著( P < 0.05 ; χ 2 212(43)更高,20.3%),由ELISA相比之下,7.1%的212年(15)检测到的垫子上。

3.5。血清阳性的危险因素为免疫球蛋白<斜体>钩端螺旋体< /斜体>

关于血清阳性的危险因素,报名一个兽医的学生是唯一的因素,在统计学上显著( P < 0.05 ; χ 2 )与钩端螺旋体病的血清学证据这是只使用ELISA检测到。值得注意的是,其他危险因素研究(年计划,年龄、性别、居住地、最近的钩端螺旋体病的诊断宠物动物或它们的主人,拥有宠物(狗、猫、和啮齿动物),啮齿动物问题/房屋周围,类的狗拥有(严格意义上的宠物,严格保护,或者两者兼而有之),和与宠物接触动物或牲畜(低、中、高)农业(畜牧、大米、或甘蔗)没有显著( P > 0.05 ; χ 2 )与血清阳性相关 钩端螺旋体种虫害感染。

4所示。讨论

seroprevalence 9.7%检测到在看似健康的兽医学生使用免疫球蛋白ELISA在当前的研究中与兽医学生在西班牙时的8.14% ( 33)的免疫球蛋白g ELISA同样使用。然而,在研究它的感染率的成立 钩端螺旋体种虫害的数量增加年参加兽医项目相反被发现在我们的研究中血清阳性率没有明显不同的学生类的项目。在某种程度上,这可能是由于一个事实:整个项目从第一年和兽医学生暴露于技能培训和校外实习计划,让他们近距离接触动物。动物处理和曝光已报告在收缩是重要的 钩端螺旋体种虫害感染( 9, 11, 12, 33, 34]。

发现,通过使用ELISA的血清学证据曝光 钩端螺旋体种虫害在兽医学生在统计学上显著高于中发现nonveterinary学生因此并不感到惊讶。在最近的研究中,作为一个兽医的学生实际上是唯一的风险因素,决心与风险显著相关 钩端螺旋体spp。

滴定度相对较低(主要是1:20 - 1:40)检测到已知垫高特异性和灵敏度低( 21- - - - - - 23)可能导致了低血清阳性率检测到垫子上。在看似健康的个体,滴定度从低1:20到40 1:被用来确定为钩端螺旋体病血清阳性( 32, 33]。

诊断意义的发现,ELISA检测到更高频率(20.3%)的血清学证据曝光的经验 钩端螺旋体种虫害在所有的学生学习与垫(7.1%)。这一发现同意发表报告,ELISA已记录有较高的敏感性和特异性低于垫( 20., 24, 25]。可能负责的另一个原因,在某种程度上,低灵敏度的垫子是型的数量和类型 钩端螺旋体种虫害的面板用于测试( 22, 35]。据报道,型普遍的使用在一个特定的地理区域的筛选面板型的敏感性增加垫( 21- - - - - - 23]。垫在ELISA的主要优点是然而事实能够确定型的感染 钩端螺旋体种虫害在ELISA属具体。也更相关的交叉反应可能发生在型但也知道,个人可能会暴露于多种型的 钩端螺旋体种虫害,因此可能不是一定型之间由于交叉反应。

是发现主要的流行病学意义 钩端螺旋体型的兽医学生受到Icterohaemorrhagiae Copenhageni, nonveterinary学生,型南极光Rachmati最频繁被探测到。这是相关的,因为使用隔离和血清学技术最新研究表明型Icterohaemorrhagiae Copenhageni在狗最盛行(临床钩端螺旋体病的情况下,看似健康的流浪宠物狗),野生老鼠,和牲畜( 35- - - - - - 37]。因此明显,引起临床型这是重要的钩端螺旋体病和亚临床感染在看似健康的动物也是最有可能的负责血清阳性 钩端螺旋体种虫害在兽医学生,强调钩端螺旋体病的人畜共患的意义。是兴趣型南极光Rachmati,不是在兽医的学生,发现最常见的nonveterinary来自其他学校的学生。这一发现的含义并不是显而易见的,因为没有在人类临床型钩端螺旋体病或亚临床感染在特立尼达和多巴哥但它已经记录在其他国家( 7, 36]。但是相关提到几个板型用于垫之前当前研究没有包含型Rachmati。

关于七型在当前的研究中,发现五(Icterohaemorrhagiae Copenhageni, Icterohaemorrhagiae Icterohaemorrhagiae, Sejroe Sejroe, Ballum Ballum,和Bataviae Bataviae)早些时候有报道在人类和动物感染或临床钩端螺旋体病( 26- - - - - - 28, 35, 38, 39]。

5。结论

这是得出的结论是,虽然接触的频率检测的血清学证据的经验 钩端螺旋体种虫害的学生测试相对较低,20.3%的ELISA和7.1%的垫子,除了低滴定度(主要是20 - 80)中发现MAT-positive样本,兽医学生显著高于能接触到的风险 钩端螺旋体种虫害比nonveterinary学生。所有的风险因素(年龄、年计划和性别在其他人)对感染有显著的影响 钩端螺旋体spp。型Icterohaemorrhagiae Copenhageni兽医的主要型学生被暴露而型南极光Rachmati nonveterinary之间最频繁的学生,与可能的流行病学意义。

确认

作者感谢四所学校的董事(SVM, SOD、理智和SOP)支持研究和学生协会的主席的四个学校通知他们的同事关于这项研究的目标和方法。他们尤其感激丹尼斯太太Israel-Richardson理智的协调抽血者的活动和护士协助采血四所学校。实验室援助被Virmal呈现Arjoonsingh。

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