IPID 跨学科视角传染病 1687 - 7098 1687 - 708 x Hindawi出版公司 894940年 10.1155 / 2012/894940 894940年 研究文章 实验评估的不同菌株的致病性 曼氏裂体吸虫 Euzebio 安东尼奥·奥利留 Jr。 1 Zuim Nadia Regina Borim 2 Linhares Aricio泽维尔 2 Magalhaes 路易斯奥古斯托。 2 Zanotti-Magalhaes 玛丽亚艾丽亚娜一直 2 Diament Decio 1 儿科 医学科学学院 坎皮纳斯州立大学(由) Rua Tessalia Vieira de Camargo 126”大学联盟Zeferino Vaz, 13083 - 887年坎皮纳斯 SP 巴西 unicamp.br 2 动物生物学系 生物学研究所 坎皮纳斯州立大学(由) Rua蒙泰罗Lobato 255”大学联盟Zeferino Vaz, 13083 - 862年坎皮纳斯 SP 巴西 unicamp.br 2012年 7 11 2012年 2012年 30. 05年 2012年 04 10 2012年 2012年 版权©2012安东尼奥Aurelio Euzebio et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

三种不同的发病机制 曼氏裂体吸虫从巴西米纳斯吉拉斯州的菌株(BH应变)和圣保罗(SJ和SD菌株)在实验感染小鼠评估。最严重的临床病例观察当地患者(SD菌株)的坎皮纳斯(巴西圣保罗)形成本研究的基础。老鼠被用作确定主机和感染了cercariae Biomphalaria tenagophila(SJ和SD菌株) Biomphalaria glabrata(BH菌株)。参数分析如下:数量 美国曼鸡蛋在老鼠的粪便;每个组织的肉芽肿数在肝、脾、肺、胰腺和升结肠;测量肝和肠肉芽肿;成虫的数量;和测量吸虫的鸡蛋。三个菌株之间的比较表明,SD菌株,孤立在坎皮纳斯提出了一个更高的蠕虫复苏相对于穿透cercariae的数量。此外,SJ和BH菌株相比,黑洞的SD菌株表现出类似的致病性菌株,肉芽肿的更大数量的内脏,以及更大的肉芽肿和鸡蛋。此外,更大数量的吸虫鸡蛋还在粪便。

 1。介绍

在疟疾、血吸虫病是最重要的全球寄生虫病和是一个严重的公共卫生问题主要在热带和亚热带地区。在巴西,血吸虫病的传播是由单一物种发生在这个国家, 曼氏裂体吸虫。它已被证明的传播 美国曼直接关系到国家的经济历史通过地区的人类迁徙事件从省级行政区呈高度流行)和三种蜗牛的存在,自然寄生虫的中间宿主。血吸虫病,最初被描述为一个典型的农村疾病,现在有一个城市的性格和流行主要在大城市的郊区在圣保罗(巴西),在巴西人口最多的国家。在圣保罗州疾病的另一个特点是没有严重的病例 1),从某种意义上来说这是有利的;然而,由于缺乏临床表现,使病人对公众健康诊所,血吸虫病经常仍然是诊断,感染者可能继续污染淡水资源中间宿主的品种。

1963年( 2),的黑洞和SJ菌株 曼氏裂体吸虫最初描述的基础上,观察了吗 Biomphalaria glabrata贝洛奥里藏特(巴西米纳斯吉拉斯州的)可能是感染了当地的应变(BH) 美国曼但抵抗感染 美国曼孤立于淡水河谷南帕拉伊巴(南帕拉伊巴河谷)(SJ应变)从圣保罗,巴西。此外, Biomphalaria tenagophila从淡水河谷南帕拉伊巴容易受到当地 美国曼(SJ应变)但难治性感染 美国曼贝洛奥里藏特(BH应变)。

对小鼠的研究( 3, 4]显示虫形态差异这两个菌株的致病性差异( 5- - - - - - 7]。作者( 7)得出的结论是,数量小得多的BH-strain寄生虫导致等效水平造成的损害更大数量的SJ-strain蠕虫。

在BH-strain流行地区,个人与失代偿性的肝脾肿大通常观察到。地区的患者感染了SJ应变,描述的一般临床表现包括肠道稍微脾脏肿大(形式 8]。

坎皮纳斯,一个城市位于圣保罗州(巴西)人口大约一百万,第一个本地的血吸虫病 美国曼在1959年观察,根据圣保罗的健康秘书处的记录和起源于一个焦点Picarrao流( 9]。从那时起,新情况和新感染疫源地记录在坎皮纳斯及其周边地区。然而,大多数的病例无症状。

原地血吸虫病病例 美国曼已报告在Jardim圣多明戈(圣多明戈花园)附近的坎皮纳斯自1998年以来。最近,一个应变的吸虫被隔离在一个实验室 b . tenagophila捕获在小湖蟒蛇Uniao (Boa Uniao湖),位于Jardim圣多明戈社区。Freitas和奥利维拉 10和Freitas et al。 11)发现门静脉高压的迹象,在某些情况下,患者的脊髓病原地血吸虫病Jardim圣多明戈医学中心治疗。这些事实让我们进行比较研究不同的致病性 美国曼菌株分离Jardim圣多明戈(坎皮纳斯,圣保罗,巴西),黑洞菌株从贝洛奥里藏特(米纳斯吉拉斯、巴西)和淡水河谷的SJ菌株南帕拉伊巴(巴西圣保罗)。

 2。材料和方法

实验动物实验伦理委员会批准的来自我们的机构和认证协议号码642 - 1。

瑞士特定病原体免费(SPF)雌性老鼠被暴露于感染 美国曼cercariae BH菌株(来自贝洛奥里藏特、米纳斯吉拉斯、巴西),SJ菌株(最初从淡水河谷帕拉伊巴,圣保罗,巴西),和SD菌株(来自Jardim圣多明戈,坎皮纳斯,圣保罗,巴西)。老鼠分成三组:组1、老鼠感染 美国曼cercariae BH应变;组2、老鼠感染 美国曼cercariae SJ应变;和组3,老鼠感染 美国曼cercariae SD菌株。

从感染的第三周开始,老鼠粪便物收集每周来验证的 美国曼鸡蛋。在感染的第八周,所有幸存的老鼠牺牲蠕虫复苏。

评价参数包括以下:穿透cercariae的数量;鸡蛋在粪便的数量;虫子的数量mesenteric-portal系统当天老鼠牺牲;肉芽肿的数量在肝脏、脾、小肠(升结肠)、胰腺、肺;组织区域发现的肉芽肿在肝脏和小肠;和 美国曼蛋的大小。

2.1。感染的老鼠

老鼠感染 美国曼cercariae从分布区重叠的蜗牛在实验室繁殖 b . tenagophila捕获在小湖蟒蛇Uniao Jardim圣多明戈(23°02′21.31′′年代47°06 17.01′′′W)坎皮纳斯。这些蜗牛受到miracidia SD菌株。的 b . glabrata从贝洛奥里藏特被暴露在miracidia BH应变,和 b . tenagophila从淡水河谷南帕拉伊巴被暴露在miracidia SJ的压力。

老鼠分别暴露了两个小时从蜗牛cercariae感染不同的菌株。接触感染进行经皮的尾巴70 cercariae,根据Magalhaes[描述的方法 12]。

 2.2。检查的数量<斜体>。曼< /斜体>鸡蛋粪便脱落

鸡蛋淘汰的数量受感染小鼠的粪便被Kato-Katz决定用描述的方法从第三周开始感染( 13]。玻璃幻灯片准备每组五个动物,和最终报告结果代表读数的算术方法从所有玻璃幻灯片。

 2.3。收集和计数的蠕虫

动物被牺牲的颈椎错位在第八周感染。蠕虫收集通过灌注肝门脉系统根据Yolles描述的方法等。 14]。雄性和雌性的数量记录,是否被隔离或双。

 2.4。收集、统计和测量Schistosomal内脏的肉芽肿

灌注后,碎片的肝脏,脾脏,结肠、肺、胰腺肉芽肿牺牲动物提取的计算和测量。片段固定在水Bouin的解决方案,和5 μ米厚的组织学部分沾着马森的三色的污渍。与光学显微镜的部分进行了分析,计算出每个组织的肉芽肿数(1.2469毫米2基于Magalhaes描述的方法等。 6]。肉芽肿反应的大小决定基于他们的区域。只包含一个肉芽肿 美国曼鸡蛋在他们中心测定,鸡蛋切片的间接验证大肉芽肿反应。测量进行了使用图像Pro Lite软件,版本4.0为Windows 95 / NT / 98。

 2.5。收集和测量<斜体>。曼< /斜体>鸡蛋

鸡蛋的黑洞,SJ和SD菌株 美国曼收集的粪便被感染的老鼠。长度、宽度和长度的蛋针状体测量使用图像箴Lite, 4.0版本的Windows 95 / NT / 98。统计分析的数据包括考试的长度、宽度、针状体大小,长度,宽度比,骨针比长度,宽度骨针比率。PROC全球语言监测机构(一般线性过程)函数在SAS软件包(2006)被用于分析( 15]。

 3所示。结果

所有的动物感染的所有三个菌株 美国曼幸存下来的八周的实验。

表 1和 2穿透cercariae的平均数字列表,雄性蠕虫,雌性蠕虫,交配蠕虫对,蠕虫,总数和比例的虫子的数量相对于恢复穿透cercariae小鼠感染了黑洞,SJ和SD菌株 美国曼。

平均穿透cercariae数量和平均数量的雄性和雌性小鼠感染了黑洞,SJ和SD菌株 美国曼感染和牺牲在第八周。

年代。 曼氏应变 受感染的老鼠数量 穿透cercariae 雄性蠕虫 雌性蠕虫 邓肯的测试*
SJ 10 66.90 一个
SD 10 64.50 一个 B
黑洞 15 62.67 B
黑洞 15 1.73 一个
SD 10 1.30 一个
SJ 10 0.90 一个
SJ 10 0.30 一个
黑洞 15 0.13 一个
SD 10 0.10 一个

*意味着随后相同字母不互相显著差异( α= 0.05)。

意味着数量的交配蠕虫对,蠕虫,总数和平均百分比蠕虫复苏的数量相对于穿透cercariae小鼠感染了黑洞,SJ和SD菌株 美国曼感染和牺牲在第八周。

美国曼应变 受感染的老鼠数量 交配蠕虫对 蠕虫的总数 蠕虫复苏(%) 邓肯的测试*
SD 10 14.80 一个
SJ 10 11.60 一个 B
黑洞 15 7.87 B
SD 10 31.00 一个
SJ 10 24.40 一个 B
黑洞 15 17.60 B
SD 10 48.62 一个
SJ 10 36.67 一个 B
黑洞 15 28.47 B

*意味着随后相同字母不互相显著差异( α= 0.05)。

统计分析表明,渗透能力的cercariae老鼠明显不同的菌株中( P = 0.0241 )。给出的SJ cercariae比BH cercariae(表更大的渗透 1)。

蠕虫对交配的数量和蠕虫的总数显著不同的菌株中( P = 0.0020 和 P = 0.0036 、职责)。小鼠感染蠕虫的SD菌株有明显高于数量(交配对和总)感染的小鼠比黑洞(表压力 2)。

恢复蠕虫的比例相对于穿透cercariae的数量被应变明显不同( P = 0.0065 )。列在表 2蠕虫恢复比例从SD菌株感染的小鼠高。统计分析(表 1)也显示,雄性蠕虫和雌性的数量从老鼠在所有三个菌株(没有显著差异 P = 0.7389 和 P = 0.4560 、职责)。

表 3列出了许多周围的肉芽肿反应 美国曼鸡蛋每组织面积(1.2469毫米2发现感染的小鼠脏器的黑洞,SJ和SD菌株 美国曼。

意思是数字的肉芽肿组织区(组织面积1.2469毫米2)对小鼠感染了黑洞,SJ和SD菌株 美国曼感染和牺牲在第八周。

美国曼应变 数量的老鼠 肉芽肿(意味着)/ 1.2469毫米2
肝 脾 胰腺 肠 肺 邓肯的测试*
黑洞 15 15.27 一个
SD 10 13.80 一个
SJ 10 10.60 B
SD 10 1.00 一个
黑洞 15 0.13 B
SJ 10 0.10 B
SD 10 3.40 一个
黑洞 15 2.00 一个 B
SJ 10 0.10 B
SD 10 4.50 一个
黑洞 15 3.87
SJ 10 2.50 一个
黑洞 15 1.07 一个
SD 10 0.40 一个
SJ 10 0.00 一个

*意味着随后相同字母不互相显著差异( α= 0.05)。

肉芽肿反应肝细胞的平均数量是明显不同( P = 0.0032 由应变)。BH和SD菌株感染的小鼠表现出更多的肉芽肿反应相比,感染了SJ(表压力 3)。

有显著差异的不同菌株感染小鼠的脾肉芽肿( P = 0.0390 ),SD菌株产生更多的黑洞和SJ菌株相比肉芽肿。黑洞和SJ的值之间的差异不显著(表压力 3)。

组织学分析胰腺部分显示的平均数schistosomal SD菌株(表肉芽肿 3)其他菌株相比( P = 0.0189 )。

统计分析的数量在肠(升结肠)和肺肉芽肿并没有透露任何显著差异在所有三个菌株( P = 0.2134 和 P = 0.2473 、职责)。然而,SD菌株产生更大的意思是肠道的肉芽肿。此外,SD菌株没有产生更多的比黑洞肺部肉芽肿(表压力 3)。

一般来说,部分小鼠感染的组织学分析这三个菌株表明肝脏周围的最大数量的肉芽肿反应 美国曼鸡蛋,其次是肠道。肉芽肿的third-greatest数量为SD菌株被发现在胰腺,其次是脾和肺。黑洞的应变,胰腺也third-greatest数量的内脏肉芽肿;然而,胰腺与SD菌株不同,其次是肺和脾。SJ应变,类似数量的肉芽肿是胰腺和脾脏中发现的。没有观察到动物的肺肉芽肿感染了SJ的压力。

获得的值的平均大小肉芽肿反应和鸡蛋的数量每克粪便为每个表中的应变了 4和 5。

意味着肝和肠肉芽肿在第八周感染小鼠感染了黑洞,SJ和SD菌株 美国曼。

S.mansoni应变 数量的肉芽肿 肉芽肿面积(平均) μ 米2 邓肯的测试*
肝 肠
SD 206年 132194年 一个
黑洞 403年 111586年 B
SJ 137年 109472年 B
SD 32 78313年 一个
黑洞 41 72340年 一个
SJ 16 38667年 B

*意味着随后相同字母不互相显著差异( α= 0.05)。

意味着数据(日志) 美国曼鸡蛋从小鼠感染了BH, SJ,每克粪便和SD菌株。

美国曼应变 受感染的老鼠数量 数量的鸡蛋(对数平均) 邓肯的测试* 感染时间(周)
SJ 10 1.417 一个 3日
黑洞 15 0.944 一个
SD 10 0.000 一个
SJ 10 3.186 一个 4日
黑洞 15 0.944 一个
SD 10 0.000 一个
SJ 10 4.342 一个 5日
SD 10 3.967 一个
黑洞 15 2.409 B
SD 10 4.309 一个 6日
SJ 10 3.804 一个
黑洞 15 3.275 一个
SD 10 6.787 一个 7日
黑洞 15 6.579 一个
SJ 10 4.524 B
SD 10 7.248 一个 8日
黑洞 15 6.746 一个
SJ 10 5.563 B

*意味着随后相同字母不互相显著差异( α= 0.05)。

表中的数据 4表明肝肉芽肿区域最大的SD菌株被发现。肝肉芽肿BH和SJ菌株感染的老鼠越来越互相之间没有显著性差异。

肠道肉芽肿是大动物感染SD和BH株,其次是SJ病毒感染者(表 4)。

第七和第八周的感染,感染的小鼠显然SD菌株倾向于消除类似数量的鸡蛋BH应变(表 5),尽管 b . tenagophila作为中间宿主。然而,重要的是要注意,总虫数量和交配对恢复感染的小鼠肠系膜门户系统的SD菌株感染的小鼠平均比在黑洞(表压力 2)。

表 6鸡蛋测量数据列表。的长度和宽度SD-strain鸡蛋(表 6)明显比另一个长鸡蛋从其他菌株( P < 0.0001 和 P < 0.0001 、职责),和黑洞的鸡蛋和SJ菌株没有差别。鸡蛋从黑洞应变有最短的宽度。

美国曼蛋测量从黑洞、SJ和SD菌株。

年代。 曼氏应变 数量的鸡蛋 鸡蛋(平均) μ 米 邓肯的测试*
长度 宽度 针状物
SD 23 155.60 一个
SJ 31日 141.11 B
黑洞 31日 139.34 B
SD 23 64.63 一个
SJ 31日 59.37 B
黑洞 31日 56.89 C
黑洞 31日 21.22 一个
SJ 31日 21.09 一个
SD 23 20.85 一个

*意味着随后相同字母不互相显著差异( α= 0.05)。

针状物的大小(表 6)没有明显不同的菌株( P = 0.9383 );然而,一些鸡蛋从SD菌株有针状体弯曲的提示,如图 1。测量比表中的数据 7表明,菌株的不同仅在于宽度小穗状花序长度比( P = 0.0855 ),这是最高的SD菌株。

美国曼鸡蛋比测量的黑洞,SJ和SD菌株。

S.mansoni 应变 数量的鸡蛋 鸡蛋(平均) 邓肯的测试*
长度/宽度 长度/针状物 宽/针状物
SD 23 2.45 一个
黑洞 31日 2.41 一个
SJ 31日 2.38 一个
SD 23 7.63 一个
黑洞 31日 6.93 一个
SJ 31日 6.87 一个
SD 23 3.16 一个
SJ 31日 2.89 一个 B
黑洞 31日 2.80 B

*意味着随后相同字母不互相显著差异( α= 0.05)。

蛋的SD菌株 美国曼(bar = 50 μ米)中观察到小鼠的粪便。注意弯曲骨针小费。

 4所示。讨论

地理上孤立的 美国曼致病力存在显著差异,这是由于器官的损害更大,因为更大范围和更广泛的分布 美国曼鸡蛋( 16),寄生虫产生的卵子的数量( 7, 17),和蜗牛的程度的易感性向量( 1, 16, 18, 19]。根据Chieffi Waldman [ 1),hepatosplenic形式在原地的罕见病例圣保罗州(巴西)可能是由于感染蜗牛的低利率 美国曼,它反映了降低感染的易感性 b . tenagophila相比 b . glabrata和 b . straminea。

在先前的研究中,吉冈et al。 20.]证明了圣罗莎(SR)的 美国曼孤立在坎皮纳斯,圣保罗(巴西),并不比BH和SJ菌株的致病性。老老鼠感染菌株表现出最少的蠕虫,鸡蛋在粪便和肉芽肿。寄生虫鸡蛋也有肉芽肿反应的最小直径。

比娜和草丛 17]显示之间的关联hepatosplenic疾病发展的形式和数量 美国曼鸡蛋消除病人的粪便。造成的损伤 美国曼很少局限于一个器官,肝脏还是肠。 美国曼鸡蛋通常是发现在几乎所有器官和组织,在那里他们产生一些类似的反应。某些差异源于特定的受影响的组织特征。

研究菌株,schistosomal肉芽肿被发现在所有研究器官,除了老鼠的肺感染了SJ(表压力 3)。

这里给出的结果表明高致病性的圣多明戈应变(SD),它最初是孤立的圣多明戈附近的坎皮纳斯(圣保罗)。这一毒株有类似水平的致病性BH应变,当考虑肉芽肿反应的数量和规模在内脏。更大的组织和器官的参与可以归因于更多的鸡蛋在蠕虫和大的鸡蛋大小的SD菌株。除了多,鸡蛋SD菌株的大(表 6),并有不同的形态特征,弯曲的骨针提示(图 1)。

从流行病学的角度来看,这些结果是相关的,由于更大的蠕虫复苏的数量相对于穿透cercariae和更多的鸡蛋在动物的粪便感染SD菌株。

SD菌株的获得的数据 美国曼也表明,该菌株的致病性菌株,描述目前 b . tenagophila作为中间宿主。大SD菌株的致病性观察到在实验室动物实验证实了观测获得临床检查的患者感染和沐浴在污染的区域 b . tenagophila( 10, 11]。Freitas和奥利维拉 10在这些病人中已经观察脊髓病。脊髓病被认为是造成的最严重的问题之一 曼氏裂体吸虫感染,所有证据表明,寄生虫鸡蛋负责其临床表现( 21]。

本研究的结果似乎表明,临床形式的更严重 美国曼有关的血吸虫病免疫能力的人可能是由于更高的寄生负载,高繁殖力的蠕虫,和更多的鸡蛋。所有这些导致更严重的妥协的组织由于更多的schistosomal肉芽肿。疾病的严重程度也可能归因于吸虫的大鸡蛋,在宿主机体产生更多的抗原,从而提高宿主的敏感性,促进炎症,反过来,这会产生更大的组织损伤的程度。

在这项研究中,提出了基于数据的准确评价 美国曼致病性必须根据一些寄生虫的生物学特性:参与肉芽肿反应的免疫调节作用,吸虫蛋抗原负责诱导肉芽肿,宿主的遗传特性( 22],血吸虫病的临床表现的寄生虫负荷小鼠和人类。

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