IPID 跨学科视角传染病 1687 - 7098 1687 - 708 x Hindawi出版公司 409757年 10.1155 / 2012/409757 409757年 研究文章 改编自里奇的寄生虫诊断方法最小化的化工产品 Anecimo 瑞吉斯席尔瓦 1 Tonani 卡琳娜A。 2 Fregonesi 拨立柴玛丽亚 2 马里亚诺• 安娜宝拉 2 Ferrassino 海军陆战队d B。 1 Trevilato 塔尼亚·m·B。 3 罗德里格斯 罗伯塔布拉加 3 Segura-Munoz 苏珊娜。 2 羽衣甘蓝 Oladele O。 1 大学医院中心实验室的临床病理学 圣保罗大学小溪Preto医学院 14040 - 902年小溪Preto SP 巴西 2 生态毒理学和环境实验室的寄生虫学,圣保罗大学小溪Preto护理学院 加拉卡斯bandeirante 3900 大学校园 14040 - 902年小溪Preto, SP 巴西 3 显微技术/金属行业 圣保罗大学小溪Preto医学院医院das丹尼 14040 - 902年小溪Preto, SP 巴西 2012年 13 8 2012年 2012年 31日 05年 2012年 08年 07年 2012年 2012年 版权©2012瑞吉斯席尔瓦Anecimo et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

拉丁美洲、非洲和亚洲广泛传播和水性寄生虫病患病率高,这是一个强大的脆弱的公共卫生系统的说明。在这种背景下,寄生虫学的分析是非常相关的工具。几种疟原虫诊断方法存在,其中里奇的方法(1948)脱颖而出。这个方法使用甲醛和醚,两个试剂毒性的重要性,会造成对环境和职业健康损害。本研究旨在比较瑞吉斯Anecimo里奇的方法修改,没有溶剂的使用,与传统的里奇的方法,通常用于寄生虫和原生动物诊断在巴西。一些变化介绍了改性方法,如控制水温的增加粪便稀释后使用,替代甲醛和乙醚的中性洗涤剂前材料离心观察的寄生虫。检查样品的两种方法,多重感染是常见的观察;修改后的方法类似的敏感性来识别寄生虫。分析诊断方法的发展,减少使用化学产品,如醚和甲醛是一种重要的工具,防止职业病中暴露的专业人士,以及保护环境质量通过使用清洁技术。

 1。介绍

在许多地区,肠道寄生虫代表一个非常重要的medical-sanitary问题,由于大规模传播,患病率高。这种情况是典型的发展中国家,病因代理人和主机之间的相互关系是受欢迎的,考虑到基本的卫生状况不稳定,诱发环境因素和不利的社会经济状况的一个重要组成部分的人口( 1]。

在发展中国家,最常见的蠕虫病肠道感染引起的土壤传播寄生虫等 蛔虫和 鞭虫trichiura和钩虫( Necator也和钩虫属duodenale)[ 2]。据疾病控制和预防中心(CDC) ( 3),约15亿人感染 蛔虫,11亿年 鞭虫trichiura和13亿年钩虫,主要临床表现是肠梗阻,营养不良,贫血缺铁造成的。也估计有200到4亿人,分别举办原生动物等 贾第虫属duodenalis和 痢疾阿米巴,导致腹泻和可怜的吸收,其临床表现通常是成正比的寄生的负载由个人( 4- - - - - - 6]。

人类寄生虫的临床诊断通常是伴随着实验室诊断为了证实怀疑。寄生虫学的分析是一个非常相关的仪器在这个领域,因为它允许识别寄生虫生活在人类的消化管或使用正常的粪便作为传播形式的外部环境。在寄生虫学,包含不同的诊断方法取决于每一个寄生虫,考虑到生物和微生物的形态变化研究。有一些定性和定量的方法对寄生虫学的诊断,如自然沉降法Hofmman Lutz;Centrifugal-flotation浮士德的方法;染色的方法Ziehl Neelzen加藤Katz和沉降和离心方法里奇( 7, 8]。

在上述方法中,里奇的方法(1948)强调,这是基于一个公认的效率的方法诊断寄生虫和原生动物的粪便通过离心沉降甲醛醚体系。甲醛和醚两种试剂的毒性都重视环境卫生对于职业( 9]。

本研究旨在比较寄生虫和原生动物在凳子上使用里奇的传统诊断方法和里奇的修改方法,避免使用有毒溶剂。

 2。材料和方法 2.1。的研究

本研究进行有机液体部分的临床病理学的中心实验室,圣保罗大学小溪Preto医学院诊所医院,小溪Preto,巴西圣保罗。它被认为是最大的医院的圣保罗州的内部。每年,临床病理学实验室执行2676500例实验室考试(诊断和治疗支持),354700年专业考试,和大约8000个寄生虫学的考试( 10]。

 2.2。样本收集和分析过程

所有病人寄生虫学的考试收到收件人收集粪便样本,贴上自己的名字和注册号码。病人在家收集材料和交付它第二天在房间收集临床医院的转发到有机流体实验室。共有392个样本处理和检查由霍夫曼自发沉积法( 11)和浮士德硫酸锌离心浮选方法( 12用于识别的鸡蛋,囊肿,和幼虫。霍夫曼方法,大约2 g的粪便样本均质在蒸馏水中,通过纱布过滤,允许代表24小时。沉积物被用于观察。对于浮士德方法,大约2 g粪便样本均质在蒸馏水(10毫升)和离心机在2500 rpm在锥形管1分钟。离心过程重复进行,直到解决方案变得清晰。然后,解决方案是在ZnSO resuspended4(33%)和离心机。表面电影收集和观察。沉积物和薄膜样品表面,两者都是沾lugol和Eclipse E200尼康显微镜中观察到。积极的样品( n = 150年 与里奇)用于比较分析的方法 9修改瑞吉斯Anecimo]和里奇的方法,提出了研究。

里奇的方法修改里吉斯Anecimo,肥皂温水离心沉降的方法。这项技术是基于暂停大约2 g的凳子在10毫升的水在45°C。样本均质和折叠纱布过滤漏斗的帮助( 65年 × 50 毫米)。接下来,他们在2500 rpm离心机在1分钟;浮在表面的材料移除。沉积物与中性洗涤剂resuspended (100 μL)结合10毫升的水在45°C,均质,离心机在2500 rpm 1分钟。一滴叶片上的沉积物是1 - 2滴lugol和光学显微镜下观察到的尼康Eclipse E200,扩大为100 x 400 x。生成数字图像,显微镜Zeizz AxioVision A1使用范围。

 2.3。统计分析

统计分析的结果,统计程序图垫棱镜(图3.02版Windows,垫软件,圣地亚哥,美国)使用。的Mann-Whitney使用非参数检验。是水平的意义 P = 0.05 。

 3所示。结果与讨论

表 1显示比例根据里奇的方法发现的寄生虫和里奇的方法修改瑞吉斯Anecimo。多重感染普遍观察到的样本通过两种方法检查。寄生虫的百分比中观察到这两种技术并没有显示出统计学差异( P > 0.05 )。

寄生虫百分比由传统里奇的量化方法和里奇的方法修改瑞吉斯Anecimo。

里奇的方法(%) 里奇的方法修改里吉斯Anecimo (%)
痢疾杆菌 36 28
兰伯氏贾第虫 20. 24
类圆线虫属stercoralis 16 20.
绦虫仕达屋优先计划 。 12 12
蛔虫 10 11
Enterobius vermicularis 4 4
曼氏裂体吸虫 4 4

定性比较图像获得的囊肿,卵和幼虫被里奇的方法和里奇的方法修改瑞吉斯Anecimo呈现在图 1。证明通过观察图片,修改了传统方法允许寄生虫的令人满意的识别与传统方法相比。中性洗涤剂作为表面活性剂分散剂,增溶的脂肪存在于粪便物,使寄生虫结构识别,没有形态的扭曲。

定性的比较一些鸡蛋、囊肿和幼虫发现里奇的方法(RMs)和里奇的方法修改里吉斯Anecimo (RM-RA)。

自从1948年引入里奇的方法( 9),许多实验室选择formalin-ether浓度过程粪便标本的寄生虫学的考试。然而,考虑到承认危险造成的暴露在乙醚和甲醛、研究开发技术作为有效的里奇发起的方法( 13, 14]。

于1979年,是开发出一种方法,代替乙醚,乙酸乙酯没有形态的扭曲或改变,证明同等或更高浓度的生物比乙醚( 15]。一般来说,乙酸乙酯似乎增加程序的效率而言,生物的数量和范围的标本中恢复过来。乙酸乙酯是更有效的比乙醚集中囊肿 贾第虫属种虫害和 h .娜娜,经常不恢复原来的方法。

乙酸乙酯的效果类似于醚复苏的生物,同时也介绍了利用比醚不危险。根据这些研究,乙酸乙酯似乎是一个有效的和更少的有毒溶剂供日常使用。禁止在实验室使用乙醚或危险,乙酸乙酯被建议作为一种替代( 15]。然而,这是一个有害的,刺激性产品对皮肤和眼睛,会导致烧伤。长期反复接触会加重这些影响,会伤害皮肤,粘膜和呼吸系统 16]。

乙酸乙酯也提出了一些其他缺点:乙酸乙酯的厚界面层难以去除和小气泡,所以试剂仍然不溶性覆盖下,模糊的小生物。因此,验证了该方法提出了残留在叶片的识别困难的寄生虫和增加阅读时间。

一些作者调查了d-Limonene溶剂(Hemo-De / 4-isopropenil-1-metil-ciclohexano)显示一个特定的重力和水溶解度类似于乙酸乙酯( 17]。在这个研究中,寄生虫学的浓度方法比较,用乙醚,乙酸乙酯,或d-Limonene。的有效性的方法使用d-Limonene或乙酸乙酯浓度的肠道寄生虫。然而,作者强调了使用d-Limonene因为它不是有毒,也可生物降解。此外,它代表了一种经济的75%相比的方法结合了甲醛和乙酸乙酯( 17]。

最近,这种方法使用formalin-polysorbate 20(渐变20)发表。它提出了更好的结果比过程与福尔马林醚。用福尔马林聚山梨醇酯的方法明显优越的识别鸡蛋的 蛔虫;它还显示了识别相似的敏感性 兰伯氏贾第虫, 鞭虫trichiura, 痢疾杆菌, 痢疾阿米巴。然而,它是不那么有效识别的原生动物 内阿米巴科娜娜, 酵母菌属hominis( 18]。该方法的另一个缺点是需要使用福尔马林,只有取代醚聚山梨醇酯。

里奇的方法的修改是基于消除化工产品的策略。许多研究在文学改良传统的识别方法和展示了出色的效率以及减少化工产品。然而,根据文献回顾发达在本研究的计划和实现,目前还没有方法能够完全消除化工产品从传统方法(里奇的方法)。

里奇的方法修改里吉斯Anecimo提出了一个很大的优势相对于其他方法,因为除了消除里奇的中使用的所有化学物质的使用方法,还提出了与那些通过传统方法获得的结果,包括识别 类圆线虫属stercoralis礼物thermohydrotropism,典型的线虫幼虫( 19]。因此,里奇的方法修改里吉斯Anecimo可用于寄生虫学的诊断在临床分析实验室。

 4所示。结论

分析诊断方法的发展,减少使用化学产品,如醚和甲醛是一种重要的工具,防止职业病中暴露的专业人士,以及保护环境质量通过使用清洁技术。另一方面,技术的发展,减少经济成本是非常相关的,特别是对于发展中国家,在寄生虫病的患病率较高,金融资源运往预防、控制、诊断更有限。

 利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

 承认

这项工作被FAPESP(批准号必须占州政府支持部分2009/50145-0)。

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