IJPS 国际高分子科学杂志 1687-9430. 1687-9422 印地语 10.1155 / 2021/6337906 6337906 研究文章 蛋白质组学分析显示生长抑制 革盖菌属多色的甲醇提取物 樟树木质部 https://orcid.org/0000-0001-7512-0734 锂 全 1. 2. https://orcid.org/0000-0003-1313-633X 锂 襄阳 1. https://orcid.org/0000-0001-9536-2909 林 回族 2. 3. 王 哲 1. 凯利大学 凯利 贵州556011 中国 kluniv.edu.cn 2. 福建省高校绿色能源与环境催化重点实验室 宁德师范大学 寧德 福建352100 中国 ndnu.edu.cn 3. 福建省生化工业特色材料重点实验室 宁德师范大学 寧德 福建352100 中国 ndnu.edu.cn 2021 23. 8. 2021 2021 13. 5. 2021 21. 6. 2021 11. 8. 2021 23. 8. 2021 2021 版权所有©2021李权等。 这是一篇在知识共享署名许可下发布的开放存取的文章，它允许在任何媒体上无限制地使用、传播和复制，只要原始作品被适当地引用。

抗腐树种提取物是未来木材防腐剂发展的重要研究对象。了解其抗真菌作用机制 革盖菌属多色的甲醇提取物的抑制作用 香樟木木质部，蛋白质谱 C. Versicolor.采用2-DE分析，MALDI-TOF/MS和生物信息学分析。结果表明，在366 ~ 385个蛋白点中，有41个蛋白点发生了明显的变化 C. Versicolor.用甲醇提取物处理 香樟木木质部。21个蛋白点上调，20个蛋白点下调。对这些差异蛋白进行细胞定位，生物学过程和功能分析发现其中9种蛋白质位于细胞质中，6种位于细胞内，5种位于线粒体中。共有18.8%被定位于小分子代谢过程，12.5%被定位于细胞氨基酸代谢过程，10.9%被定位于细胞氮化合物代谢过程。25%的差异蛋白与离子结合有关，15%与氧化还原酶活性有关，15%与ATP酶活性和跨膜转运活性有关。天冬氨酸转氨酶、ATP合酶α链、DEAD/DEAH盒解旋酶和磷酸甘油酸激酶的表达下调表明 香樟木木质部破坏了氮碳代谢、能量代谢、激素信号反应和葡萄糖代谢等功能，最终导致 C. Versicolor.抑制。

 绿色能源与环境催化重点实验室开放课题 FJ-GEEC202005 生化产业中福建省重点实验室的开放题目 FJKL_FBCM202005 中国国家自然科学基金 21966015 31760191 1.介绍

木材是一种经济且环保的材料，可用于多种最终用途，如家具、人造板和木结构。然而，一些木材容易受到外部因素的损坏或破坏，从而降低其商业价值。特别是，生物腐烂，包括木腐菌和腐霉这是对木材最严重、最有害的威胁[ 1.– 3.]因此，迫切需要发展木材防腐技术[ 4.]。木材保存可延长木材的使用寿命，并赋予木材相对良好的户外耐候性。许多类型的木材具有天然的耐腐性能。除了木材的不同生物结构外，学术界一致认为，木材的化学成分和含量存在差异这些化学成分的差异是导致天然耐腐性能变化的重要因素之一[ 5.]这些研究通常集中于抗菌、抗腐性和抗氧化化合物及其应用[ 6., 7.]。近年来，越来越多的学者关注可作为木材防腐剂的植物提取物[ 8.]。植物提取物在木材防腐浸渍中的应用是木材科学领域的一种新技术。

目前的研究表明，不同耐腐性的树种具有不同的抗真菌化学成分，不同的提取方法和溶剂可获得不同的抗真菌化学成分。一般来说，抗腐木材提取物可以抑制木腐真菌，而不抗腐的木材浸渍了抗腐心材提取物可以变得抗腐[ 9]。许多学者对当地的一些抗腐硬木树种进行了调查，发现相关的抗腐木材提取物通常含有多种酚类、萜类、生物碱等化学成分[ 10.]除木材提取物外，一些树木其他部位的提取物也有一定的抗菌活性。一些研究表明，植物的乙醇提取物 马缨丹根、茎和叶可以防止白腐和褐腐真菌[ 11., 12.]通过分析，发现提取物中含有大量的酚类、生物碱、萜类化合物等具有抗真菌活性的物质。为了验证植物提取物的抗真菌性能，许多学者研究了大量植物提取物对木腐真菌的作用[ 13.]。研究发现，抗腐树种心材提取物对木腐真菌有较强的抑制活性。通过对比树木提取物不同部位的化学结构与抗真菌活性之间的关系，心材通常具有最好的抗腐性能。从植物提取物中提取天然木材防腐剂已成为近年来的研究热点。 樟树( 香樟木)作为一种具有耐腐性的木材，其抗真菌和抗菌提取物已被广泛应用于该领域，但其抗腐机制尚不清楚[ 14.– 16.]。

蛋白质是由特殊的氨基酸组成的，这些氨基酸是生物体的基本组成部分，参与细胞内的每一个过程[ 17.]蛋白质作为基因功能的表现和执行者，具有催化、信号转导、免疫保护、代谢调节、生长和分化等多种生物学功能，与生命形式的生物学功能和生理活动密切相关[ 18., 19.]。蛋白质组学是研究一个有机体的全部蛋白质含量和概况，然后将其映射到生物学途径[ 20.]蛋白质在真菌和细菌功能中起着关键作用，有助于揭示与木腐菌生长相关的基因，特别是在研究蛋白质的动态变化时。有必要从整体、动态和网络水平研究木腐菌的蛋白质，因为这将有助于我们全面深入地了解木腐菌复杂的生物活性。

总之，研究人员探索了多种植物提取物的抗真菌和抗腐性能，并报告了在许多领域的大量应用，例如抗真菌（白腐真菌和褐腐真菌）和杀虫活性[ 21., 22.]然而，植物提取物的研究主要集中在现象报道上，抗真菌机制的研究较少，导致植物提取物的开发利用缺乏理论基础。 香樟木是一种耐腐性很强的树种，利用其提取物作为木材防腐剂，不仅为促进木材保护科学技术的发展，而且为实现低毒木材保护和木材资源的保护提供了一个新的研究方向[ 23.– 25.]实施木材防腐剂清洁生产具有重要意义[ 26.]。使用二维凝胶电泳（2-DE）和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF / MS）分析差异表达的蛋白质 C. Versicolor.，由甲醇提取物抑制 香樟木木质部的变化 C. Versicolor.结果表明，这些蛋白的表达水平可以为进一步探讨中药甲醇提取物的抗真菌作用机制提供理论依据 香樟木木门反对 C. Versicolor.．

 2.材料和方法 2.1.材料和试剂

C. Versicolor.甲醇从福建农林大学植物保护学院（中国福州）获得。甲醇从上海化学试剂厂（中国上海）购买。

pH标准（pH 3–10, L = 24. 厘米 ），TCA， β制备了-巯基乙醇(BME)、两性水凝胶(ph3 - 10)、丙烯酰胺、十二烷基硫酸钠(SDS)、过硫酸铵、亚甲基二丙烯酰胺、尿素、硫脲、DTT、CHAPS和碘乙酰胺。

使用pH梯度等电聚焦(IPG) Ettan™-IPGphor™III IEF系统垂直凝胶板电泳仪。该研究使用了Ettan™Dalt II垂直系统、ImageScanner III扫描密度计(GE Healthcare)图像分析系统、5800 MALDI-TOF/TOF-MS仪器、THY-111B持续振荡培养箱和制备型超离心机(BECKMANCOULTER OPTIMAL)。

 2.2.提取物制备

实验树( 香樟木)， 45岁，在福州上街地区长大。的木质部 香樟木被粉碎，筛目尺寸在40 - 60之间。的 香樟木粉末（100 g） 进行热回流提取。使用甲醇作为溶剂。将混合物加热至沸点温度64°C。提取两次原料，首先加热5分钟 h，比率为 香樟木粉末溶剂为1：10（g·ml-1)，然后按……的比例加热3小时 香樟木粉末溶剂为1：10（g·ml-1）．然后将提取液进行组合，过滤得到提取液。采用减压蒸馏法去除溶剂，并进行蒸馏 香樟木获得提取物。最后，制备浓度为80%的提取物 mg·mL-1与水。

 2.3.真菌菌株

含25 mL 4% ( W / v )麦芽琼脂（制作麦芽琼脂固体培养基的配方为25 g麦芽提取物，15 g琼脂和1000 mL蒸馏水）固体培养基接种 C. Versicolor.，真菌在培养基中培养 28. ± 2. ° C 在相对湿度为75%-85%的条件下培养7天，然后，培养基中的菌丝 C. Versicolor.应变（7 mm）被转移到250 mL无菌培养瓶，含100 mL麦芽琼脂培养基和1 毫升的 香樟木木瓜甲醇提取物（浓度为80g·l-1）．此后，在28℃下在振荡箱中培养上述两种灭菌瓶和受控样品，转速为80℃·min-114天。最后，通过真空过滤收集菌丝。

 2.4.抗真菌试验

抗真菌活性 香樟木提取物对 C. Versicolor.用毒液培养法测定生长速度[ 27.]。麦芽琼脂固体培养基然后混合 香樟木提取液的最终浓度为0.5 g·L-11. 克·升-1，2 g·l-1，4 g·l-1，及 克·升-1.将 C. Versicolor.，将每种真菌的培养物保持在皮氏培养皿的中心，培养数天，并在培养基中培养 28. ± 2. ° C 几天后菌丝到达培养皿边缘。欧共体50.（最大作用50%的浓度）计算。菌丝生长抑制率用 (1) 抑制作用 率 % = X — Y X × 100. % , 在哪里 X 是控制菌落生长直径，和 Y 是处理生长直径。

 2．5．tca -丙酮法提取菌丝蛋白

将菌丝用液氮研磨，用20ml TCA /丙酮混合，并均化。然后将混合物在-20℃下沉淀12小时。沉淀后，将样品以4℃和11000rpm离心15分钟。除去上清液，然后除去20mL丙酮，在-20℃下预冷，并含有0.07％ β-巯基乙醇，并添加到样品中。沉淀2小时后 h、 将样品离心15分钟 在4°C和11000下的最低温度 重复该步骤，直到沉淀变白。真空过滤后，按照20%的标准浓度进行放射免疫沉淀分析（RIPA）  μL·mg-1．25-30℃超声溶解2 h。最后，在4℃，11000rpm离心后，得到含有蛋白质的上清。蛋白质样品(浓度为5-10 μg· μL-1)保存在-20°C的冰箱中。

 2.6。二维电泳

等电点聚焦进行了使用Ettan™-IPGphor™能源论坛第三合作系统陶瓷盘上使用以下协议:13 h 30 V, 1.0 h在500 V, 6 h在1000 V, 8 h在8000 V(梯度),4 h 8000 V(步骤),并在1000 V 30 h。然后在平衡缓冲液I (10 mL平衡液与100 mg DTT)中平衡15分钟，随后在平衡缓冲液II (10 mL平衡液与250 mg碘乙酰胺)中平衡15分钟。然后用滤纸吸收带上多余的平衡缓冲液。将条带冲洗后置于10%聚丙烯酰胺凝胶板上，加入相对质量标准蛋白。最后进行第二次垂直电泳实验[ 28.]。

 2.7.双向电泳和染色

将平衡的IPG条固定在玻璃凝胶板上，1 加入mL琼脂糖密封胶。然后，将玻璃凝胶板放置在Ettan的缓冲罐中™ DALT II垂直系统。电泳在16°C水循环条件下进行，恒功率为4 W·胶-1. 当示踪剂溴酚蓝到达凝胶底部边缘时，停止电泳，并移除凝胶并染色。

 2.8。凝胶图像分析

采用图像扫描仪进行图像扫描。图像母版™ 2D Platinum 7.0用于实现2-DE指纹分析[ 29.]。采用Image Master 7.0软件进行二维SDS-PAGE电泳图谱比较 C. Versicolor.木质部甲醇提取物的处理 香樟木和控制。

 2.9.凝胶内蛋白水解消化和鉴定

人工从ccb染色凝胶中切除感兴趣的蛋白点，并进行凝胶内胰蛋白酶消化。经消化后，用0.1%三氟乙酸(TFA)在50% ACN中提取多肽两次。提取液被集中在一起，完全用SpeedVac设备干燥。肽混合物在0.1%的TFA和0.8 μL肽溶液与0.4混合  μ在靶板上斑点之前，在30%的ACN中加入1%的基质（CHCA，0.1%的TFA）。

在AB SCIEX MALDI-TOF / TOF-MS™5800分析仪（AB SCIEX，FOSTE CITY，CA）上进行蛋白质鉴定，配备钕：钇 - 铝石榴石激光器（激光波长：349nm）。TOF / TOF校准混合物（AB SCIEX）用于将质谱仪校准到100ppm以内的质量耐受性。对于MS模式，在正反射模式下获得肽质量映射，700-3600 m·z-1质量范围为每光谱1000次激光射击。以环境空气为碰撞气体，介质压力为10，每点最多选取50个前体，最小信噪比为25，进行MS/MS分析-6 托尔。MS/MS分析排除了源自人类角蛋白、胰蛋白酶自动消化或基质的污染m/z峰。2的能量 KV用于碰撞诱导离解（CID），每个MS/MS谱累积2500次采集。使用GPS Explorer TM软件按照以下标准处理原始MS和MS/MS光谱：真菌（1757520个序列；762750636个残基）、释放日期（2016.03.11）、胰蛋白酶作为消化酶、一次缺失切割、100 ppm前体耐受性，MS/MS离子耐受性为0.6 Da和蛋氨酸氧化作为可变修饰。蛋白质得分置信区间（C.Is.）大于95%的蛋白质( 蛋白质 分数 > 75 )被认为是可靠的鉴定。

 3。结果与讨论 3.1.抗真菌活性

甲醇提取物 香樟木Xylem表明某些抗真菌活动 C. Versicolor.该生长抑制率的计算范围为0.5 克·升-1至10.39%，1 g·L-1至13.15%，2 克·升-1至17.98%，4 克·升-1到23.01％，8 g·l-1分别为28.02%50.甲醇提取物的计算值为79.92 克·升-1．

 3.2.蛋白质组差异显示分析

2D-GE图显示的结果 C. Versicolor.用甲醇提取物处理 香樟木木质部可以在图中看到 1.，表明两种蛋白质的二维电泳图谱基本相同，蛋白质斑点主要集中在pH值为4-7的范围内。

蛋白质的双向电泳凝胶图 革盖菌属多色的用甲醇提取物处理 樟树木质部。

 3.3. 差异蛋白的动态变化

使用软件匹配每个蛋白质的二维电泳图,发现41蛋白质表现出丰富的变化具有良好的重现性和明显的2倍以上的变化表达式,其中21个蛋白质斑点是调节和20个蛋白质点表达下调(图 S1）．

 3.4. 差异表达蛋白质的质谱鉴定

蛋白质组学是指对基因组编码的所有蛋白质进行大规模分析，分为表达蛋白质组学和功能蛋白质组学 香樟木通过切割、脱色、胰蛋白酶消化和脱盐处理可抑制白腐真菌的木质部甲醇提取物。最后，测量与MALDI-TOF/TOF-MS数据相对应的肽质量指纹，并使用NCBI数据库中的MASCOT软件鉴定共14种蛋白质以线粒体前体（斑点24）为例，蛋白质的串联质谱图如图所示 S2在ATP合成酶α链和线粒体前体的肽质量指纹图中，b和c分别是离子分数为82和78的肽的MS/MS图谱。

通过对生理功能的推断，蛋白质可分为以下几类[ 30., 31.]。一些蛋白质 C. Versicolor.与细胞壁生物合成有关，是一类与小分子代谢过程、细胞氨基酸代谢过程和细胞含氮化合物代谢过程有关的蛋白质。一些蛋白质参与离子结合、氧化还原酶活性、ATP酶活性和跨膜转运体活性。参与repr的蛋白质产生翻译与能量有关（表1） 1.）．

差异表达斑点 革盖菌属多色的用质谱鉴定的甲醇提取物处理。

现场编号。 蛋白质描述 加入不。 肽 MW/pI 蛋白质评分 序列覆盖范围 有机体
13. 类似于含有UBA/TS-N结构域的蛋白质 Gi | 312216952 2. 152573/5.69 65 3％ Leptosphaeria maculans
15. 蛋白磷酸酶 胃肠道| 320591516 14. 48259/4.69 182 24% 罗汉果kw1407
24. ATP合酶链，线粒体前体 Gi | 114193514 23. 59832/9.14 406 34％ 曲霉属真菌terreusNIH2624
33. 假设蛋白质SNOG_12700 gi | 169619014 17. 28025/8.83 60 49% 结节褐飞虱SN15
36. Remname：Full =磷酸性激酶 Gi | 400757 9 44353 / 6.16 182 22％ 木霉
37. 死亡/死亡盒螺旋酶 gi | 310790877. 27. 44680/5.02 642 40% Glomerella graminicolaM1.001
49. ATP合酶-链，线粒体前体 gi | 46116940 23. 54852/5.40 393. 38％ 玉米赤霉PH-1
56 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 Gi | 228551660 13. 36053/6.46 263 23％ 蛹虫草
58 预测蛋白质 gi | 302918373. 5. 15925/5.84 209 24% Nectria Haematoccca.mpVI 77-13-4
59 假设蛋白SMAC_03111 胃肠道| 336269525 19. 44437/8.70 447 34％ 大孢菌地狱
114. 预测蛋白质 胃肠道| 302914537 17. 37541/9.48 320. 30％ Nectria Haematoccca.mpVI 77-13-4
168 假设蛋白FG00036.1 胃肠道| 46102664 32. 176621/5.75 75 19% 玉米赤霉PH-1
175 预测蛋白质 gi | 302918373. 6. 15925/5.84 188 24% Nectria Haematoccca.mpVI 77-13-4
186 假设蛋白SERLADRAFT_468747 GI | 336383691. 15. 35195/9.83 74 39％ 干腐菌var。 lacrymansS7.9
190 丙二酰辅酶a -酰基载体蛋白转酰基酶 Gi | 32268339 9 47145/9.33 68 28% 绿僵菌属acridumCQMa 102
A. 天冬氨酸转氨酶 Gi | 295669158 16. 47022/9.25 176 31％ 巴西副球虫Pb01
B 假设蛋白质NECHADRAFT_91822 Gi | 302920406 7. 21737/6.71 134. 19% Nectria Haematoccca.mpVI 77-13-4
C 液泡ATP合酶亚单位E Gi | 322705501 7. 25896/6.69 110. 23％ 绿僵菌属anisopliaeARSEF 23
D 五功能AROM多肽，推定 Gi | 218724284 19. 74261/6.72 61 27% 柄篮状菌ATCC 10500
3.5。差异表达蛋白的功能分析

可以发现质谱鉴定的14种差异蛋白质与细胞定位相关（图1） 2.）．9蛋白位于细胞质中,6离开细胞,5属于线粒体,5细胞器,5在蛋白质复合体,2是在核糖体,1是在细胞外的地区,1是在细胞核,1在液泡。

蛋白质差异的细胞定位 革盖菌属多色的对木质部甲醇提取物的响应 樟树。

从图中可以看出 3.蛋白质在 C. Versicolor.经甲醇提取物处理后差异表达的蛋白质参与了生物过程，即18.8%参与了小分子代谢过程；在细胞氨基酸代谢过程中占12.5%；在运输过程中占10.9%；细胞含氮化合物代谢过程中10.9%；9.4%在跨膜转运过程中；在翻译过程中占6.3%；在前体代谢产物的生成和能量生成、分解代谢过程和碳水化合物代谢等过程中占6.3%。

不同蛋白质的生物学过程 革盖菌属多色的对木质部甲醇提取物的响应 樟树。

每个类别中蛋白质功能的百分比如图所示 4.．25%的差异蛋白与离子结合有关，15%与氧化还原酶活性有关，15%与atp酶活性有关，15%与跨膜运输活性有关，6%与翻译因子活性有关，3%与DNA、解旋酶活性、肽酶活性有关。激酶活性，转移酶活性，磷酸酶活性，裂解酶活性和异构酶活性。

蛋白质的官能团 革盖菌属多色的对木质部甲醇提取物的响应 樟树。

 3.6。差异表达蛋白的功能分类

天冬氨酸转氨酶是一种催化活性高的酶，广泛存在于动物、植物和微生物中。这种酶在细胞的氮和碳代谢中起着非常重要的作用[ 32.]。天冬氨酸氨基转移酶对于线粒体和细胞溶溶胶之间的代谢物交换是重要的。该酶在氨基酸的生物合成中起重要作用，反应方法包括细胞氨基酸的代谢过程，细胞的生物合成等。该酶的具体功能是催化活性，氨基转移酶活性和转移酶活动。Aspartate氨基转移酶的下调在此表明甲醇提取物 香樟木木质部抑制植物体内氮、碳的代谢 C. Versicolor.．

ATP合成酶α链是一种与能量代谢相关的酶。这种酶在质子梯度穿过膜的情况下从ADP产生ATP[ 33.]。ATP合成酶广泛分布在线粒体内膜和异养细菌和光合细菌膜膜中。ATP合成酶α链的生理功能可能涉及细胞增殖和细胞毒性。ATP合酶α链的下调 C. Versicolor.用甲醇提取物处理后 香樟木木质部表明植物体内的能量代谢 C. Versicolor.被抑制。

甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）是一种高度保守的蛋白质，在中央碳代谢中起作用。GAPDH是为支持生活提供能源活动的最基本酶之一[ 34.]。GAPDH是所有原核生物和真核生物中糖分解的关键酶[ 35.]Tokunaga等人[ 36.]揭示了甘油醛-3-磷酸脱氢酶的分子基础，并揭示了能量产生反应在癌细胞生长中的重要作用[ 36.]。此外，该酶还参与调控转录后基因的表达，作用于tRNA的转运、DNA的复制和修复等过程。相关蛋白点(GAPDH)消失，可能影响了细胞碳代谢。这一结果表明，该酶被完全抑制，导致能量代谢的损失和随后的死亡 C. Versicolor.．

线粒体前体ATP合酶β链是一种与能量代谢相关的酶，目前尚无相关文献报道该酶的详细信息。

空泡ATP合酶亚基E的功能主要是ATP水解质子交换膜偶联，ATPase也参与质子的转运和旋转机制[ 37.]。

解旋酶广泛存在于几乎所有的原核生物和真核生物中，是一类分解氢键的酶。这些酶的功能主要包括核酸结合、解旋酶活性和ATP结合[ 38.]。大量研究表明，DEAD/DEAH盒解旋酶参与了从细菌到真核细胞的几乎所有生物学过程，包括激素反应、RNA代谢、核质运输、基因表达调控等重要的生物学活动。此外，DEAD/DEAH盒解旋酶还在RNA折叠和RNA-蛋白复合体加工中发挥重要作用。DEAD-box解旋酶表达下调提示激素信号反应、RNA代谢等受到抑制 C. Versicolor.．

磷酸甘油酸激酶（PGK）是糖酵解过程中的关键酶，几乎存在于所有生物体内，是生物体依赖的重要酶[ 39.].这种酶的缺乏可导致功能失调，如功能代谢。PGK在大多数活细胞中是需氧菌糖酵解途径产生ATP和厌氧菌发酵所必需的[ 40]。PGK分布在不同的生物体内，其生物学功能在不同的生物体内也不同。该酶表达下调表明糖代谢受到抑制，可能导致糖代谢功能障碍 C. Versicolor.．

 4.结论

该研究揭示了次生代谢物的抗真菌机制 香樟木通过2-DE和MALDI-TOF/TOF-MS，甲醇提取物中的木质部。观察到的差异蛋白质可分为细胞壁生物合成、小分子代谢、细胞氨基酸和氮化合物代谢以及转运。天冬氨酸转氨酶、ATP合酶α链和死亡蛋白的表达下调/DEAH盒解旋酶显示氨基酸代谢、能量代谢、核质转运和葡萄糖代谢受到抑制。我们得出结论，这些提取物的抑制机制 C. Versicolor.可能提供一个机会，开发新的木材防腐剂，破坏木材腐烂真菌的代谢途径。

 数据可用性

本研究未使用任何数据。

 的利益冲突

作者声明他们没有利益冲突。

 致谢

该项目得到了中国自然科学基金的补助金（第31760191号;第21966015号），在生化产业中的福建省主要材料的开放题目（FJKL_FBCM202005），以及绿色重点实验室的开放题目能量和环境催化（FJ-GEEC202005）。

 补充材料

以下内容可在网上找到。图S1:与对照组比较的差异蛋白表达水平(a)蛋白斑点数6-40;(b)蛋白斑点数44-114;(c)蛋白斑点数128-192。图S2: 24号蛋白点(ATP合酶α链，线粒体前体)的质谱图((a) ATP合酶α链，线粒体前体的肽质量指纹图;(b) 1332肽的MS/MS图谱，离子评分为82;(c) 1553肽段的MS/MS图谱，离子评分为78)。

 古玛 A. 里帕罗娃 P Kasal B 阿达莫普洛斯 年代。 哈耶克 P 竹材对白腐菌和褐腐菌的抗性 木材材料科学与工程 2020 15. 1. 57 63 10.1080/17480272.2018.1475420 2-s2.0-85047152466 Sierra-Alvarez R。 防腐剂处理木材中金属的真菌生物浸出 过程生化 2007 42. 5. 798 804 10.1016 / j.procbio.2007.01.019 2-s2.0-34047116507 田中 Y 科诺 N 铃木 T。 哈布 N 褐腐菌的淀粉降解酶 沼泽拟叶蜂 蛋白质表达与纯化 2020 170，第105609条 10.1016/j.pep.2020.105609 贾宁 A. 库尔特 L 富人 P 仁慈的 G 库珀 P 布莱斯 J.F。 CCA处理的木材废料净化工艺在处理后的其他铜基防腐处理木材上的应用 危险材料杂志 2011 186 2-3 1880 1887 10.1016 / j.jhazmat.2010.12.094 2 - s2.0 - 79751536501 21216528 Karpiń滑雪 TM值。 唇形科植物精油的抗真菌作用 生物重组 2020 10. 1. 103. 10.3390/10010103 31936168 Bhardwaj. S. K. 辛格拉 S. K. Bhardwaj. r·K。 植物提取物抗木材腐烂真菌作用的评价 革盖菌属多色的（左：法国）小煎饼 印度木材科学学院学报 2012 9 1. 62 65 10.1007/s13196-012-0065-4 2 - s2.0 - 84865352143 吉尔林格 N 雅克 D 施瓦宁格 M 懦夫 R。 Pâques. L.E。 落叶松不同树种心材抽提物和木质素含量及其与褐腐病抗性的关系 树 2004 18. 2. 230 236 10.1007/s00468-003-0300-0 2-s2.0-1642297573 安 S.H。 哦 s . C。 崔 国际集团。 汉 G.S。 郑 H.S。 基姆 k W。 尹 Y.H。 杨 我 环境友好的木材防腐剂与酶解的kara，铜和/或硼盐 危险材料杂志 2010 178 1-3 604 611 10.1016/j.jhazmat.2010.01.128 2 - s2.0 - 77951498962 20153107 Brocco V.F。 pa J.B。 达科斯塔 L.G。 柯克 G.T。 巴西林 年代。 柚木心材提取物作为木材防腐剂的木材颜色变化和杀菌性能 Holzforschung 2020 74 3. 233 245 10.1515 / hf - 2019 - 0138 锂 J 杨 医学博士。 苏 w . Q。 长白落叶松提取物对木材防腐效果的研究 林产品化学与工业 2007 27. 5. 49. 52 特里帕蒂 年代。 rawat. K 迪亚尼 年代。 裤子 H 潜力 马缨丹杂草对破坏木材的真菌 印度林务员 2009 135. 3. 403 王 S. Y. 陈 P. F. 常 科技部。 本土肉桂的精油及其成分的抗真菌活性（ 土肉桂）叶对木腐烂真菌 生物资源技术 2005 96 7. 813 818 10.1016 / J.Biortech2004.07.010 2-s2.0-10944258482 15607195 Voda K bo B 瓦塔尼克 M 波勒文 F 含氧芳香精油化合物对白腐病的抑菌活性研究 云芝还有褐腐病 葡萄锥虫 国际生物降解与生物降解 2003 51. 1. 51. 59 10.1016/S0964-8305（02）00075-6 2 - s2.0 - 0037210520 郭 年代。 耿 Z 张 W。 梁 J 王 C 邓 Z 杜 年代。 植物精油的化学组成 樟树对贮藏产品害虫的杀虫活性 国际分子科学杂志 2016 17. 11. 1836 10.3390/ijms17111836 2-s2.0-84994751993 27827929 锂 Q。 徐 L 吴 H 刘 J 林 J 关 X。 胰腺肿的Xylem提取物的差异蛋白质组分析 云芝 Holzforschung 2018 72 6. 459 466 10.1515/hf-2017-0148 2 - s2.0 - 85045839840 吴 J.F。 壮族 x F。 元 H.M。 锂 Q。 王 W。 锂 j . Q。 林 J.G。 福建柏心材提取物的抗真菌、抗腐性及其对小珠藻的抑制作用 生物资源 2020 15. 2. 2784 2799 杜利特尔 R. F. 峰 D.F。 曾荫权 年代。 赵 G 小的 E 用蛋白质钟测定生物体主要界的分化时间 科学 1996 271 5248 470 477 10.1126/science.271.5248.470 2 - s2.0 - 0030023247 8560259 Nanduri R。 Furusawa. T。 爆破 M HMGN染色体蛋白的生物学功能 国际分子科学杂志 2020 21. 2. 449 10.3390 / ijms21020449 31936777 辛格 年代。 古普塔 年代。 辛格 B 沙玛 S. K. 古普塔 V.K。 沙玛 g . L。 用抗真菌香豆素治疗的曲霉菌菌菌蛋白表征鉴定键途径新靶分子 蛋白质组学研究 2012 11. 6. 3259 3268 10.1021/pr300006j 2 - s2.0 - 84861801730 22533410 太阳 C 歌曲 C 文科硕士 Z 徐 K 张 Y 金 H 钳 年代。 叮 W。 夏 G 叮 Q。 通过前列腺活检的itraq -蛋白组学分析，Periostin被确定为前列腺癌的潜在生物标志物 蛋白质组学 2011 9 1. 22. 10.1186 / 1477-5956-9-22 2-s2.0-79955101776 皮带 T。 哈尼宁 T。 Rautkari L 苏格兰松心材和结提取物的抗氧化活性及其对褐腐病抗性的影响 Holzforschung 2017 71 6. 527 534 10.1515 / hf - 2016 - 0232 2 - s2.0 - 85020437129 张 Z 杨 T。 惯性矩 N 王 Y 锂 G 王 L 谢 Y 单波通对木头腐真菌的抗真菌活动 国际生物降解与生物降解 2016 106. 157. 160 10.1016 / j.ibiod.2015.10.018 2 - s2.0 - 84946833786 陈 J 唐 C 张 R。 耶 年代。 赵 Z 黄 Y 徐 X。 局域网 W。 杨 D 代谢组学分析法评价银杏叶挥发油的抗菌活性 樟树(林)。Presl 民族药物学杂志 2020 253年,第112652条 10.1016 / J.JEP.2020.112652 傅 J 曾 C 曾 Z 王 B 龚 D 樟树籽仁油可改善由饮食引起的肥胖大鼠的氧化应激和炎症 食品科学杂志 2016 81 5. 1295 1300 李 h·J。 Hyun 大肠。 尹 W.J。 基姆 B.H。 李 m . H。 炕 h·K。 赵 J.Y。 柳 大肠。 丹参的体外抗炎和抗氧化作用 樟树摘录 民族药物学杂志 2006 103. 2. 208 216 10.1016 / j.jep.2005.08.009 2-s2.0-29144508550 16182479 舒伯特 M 沃尔克默 T。 莱林格 C 施瓦泽 中华人民共和国 用木材防腐剂处理的生物切割木材对蓝染和木材腐烂真菌的抗性 国际生物降解与生物降解 2011 65 1. 108. 115. 10.1016/j.ibiod.2010.10.003 2 - s2.0 - 78650677039 林赛 K.L。 范Staden J 艾洛夫 j . N。 黄芪提取物对植物病原真菌生长的抑制作用 大蒜和 紫娇花 南非植物学杂志 2004 70 4. 671 673 10.1016/S0254-6299（15）30210-6 2-s2.0-11244328589 山田 E Sasai. K 希加 R。 Mizuguchi H 保险丝 Y 二维电泳湖泊湖泊溶解蛋白的表征及动态分析 分析科学 2020 36. 6. 753 759 10.2116 / analsci.19P450 31956160 杨 N 熊 A. 王 R。 杨 L 王 Z 消炎利胆片中中药成分的质量评价：指纹图谱和UPLC-MS定量分析 分子 2016 21. 2. 83 10.3390 / molecules21020083 2-s2.0-84964691203 26805803 kumari. 年代。 耆那教徒的 P 沙玛 B 卡迪亚 P 大波尔 R。 金丝桃水提物的体外抗真菌活性及其可能的杀菌机理 大花巴勒菌 应用生物化学与生物技术 2015 175 8. 3571 3584 10.1007/s12010-015-1527-0 2-s2.0-84940008255 25672323 Mø噢 i M。 Igamberdiev 美国。 贝科娃 N.V。 芬克梅尔 我 Rasmusson a·G。 Schwarzländer. M 基质氧化还原生理学通过后期蛋白质修改治理植物线粒体代谢的调节 植物细胞的 2020 32. 3. 573. 594. 10.1105/tpc.19.00535 31911454 樱桃酒 J.F。 多夫 G 河流浅水处 GC。 文森特 M.G。 詹索尼厄斯 j . N。 格林 H Christen P 基于其空间结构提出的天冬氨酸氨基转移酶的作用机制 分子生物学杂志 1984 174 3. 497 525 10.1016/0022-2836(84)90333-4 2-s2.0-0021634693 努斯科娃 H Mikesova. J 埃菲莫瓦 我 佩西诺娃 A. 佩内纳 P Drahota Z 霍斯特克 J MRACEK. T。 ATP合酶缺陷病理表现的生化阈值 生物化学和生物物理学研究通讯 2020 521 4. 1036 1041 10.1016/j.bbrc.2019.11.033 31732150 龚 Z 苏 Y 黄 L 林 J 唐 K 周 X。 大豆甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的克隆与分析 蛹虫草 非洲农业研究杂志 2009 4. 4. 402 408 丹希娜 P.V。 Schmalhausen e . V。 Avetisyan A.V。 Muronetz 静脉注射。 轻度氧化甘油醛-3-磷酸脱氢酶作为糖酵解的可能调节因子 IUBMB生活 2001 51. 5. 309 314 10.1080/152165401317190824 2-s2.0-0034775677 11699877 Tokunaga. K Nakamura. Y 坂田 K 藤森 K 大久保 M 左右田 K Sakiyama 年代。 甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因在人肺癌中的增强表达 癌症研究 1987 47. 21. 5616 5619 3664468 索布蒂 M Ishmukhametov R。 斯图尔特 a·G。 ATP合成酶：表达，纯化和功能 蛋白质纳米技术 2020 纽约,纽约 胡马纳 73 84 卡拉瑟斯 J.M。 麦凯 d·B。 螺旋酶的结构与机制 结构生物学的最新观点 2002 12. 1. 123. 133. 10.1016 / s0959-440x（02）00298-1 2 - s2.0 - 0036468702 曼德尔曼 D Ballut L 沃尔夫 d . A。 伐木工人 G 格迪 C 有 R。 Aghajari N 结构决定因素增加的灵活性赋予冷亲和性磷酸甘油酸激酶的冷适应 极端微生物 2019 23. 5. 495 506 10.1007/s00792-019-01102-x 2 - s2.0 - 85066781662 31147836 奥尔巴赫 G 休伯 R。 Grattinger M 扎伊斯 K 舒里格 H Jaenicke R。 雅各布 U。 磷酸甘油酸激酶的封闭结构 海洋热托加揭示热稳定性的催化机制和决定因素 结构 1997 5. 11. 1475 1483 10.1016/S0969-2126（97）00297-9 2-s2.0-0031573453 9384563