IJMICRO 国际微生物学杂志 1687 - 9198 1687 - 918 x Hindawi 10.1155 / 2017/2692360 2692360 研究文章 流行病学的特征<我t一个l我c>艰难梭状芽胞杆菌殖民约旦婴儿的肠道 Abu-Khader 埃曼N。 1 兰 埃曼F。 2 http://orcid.org/0000 - 0002 - 2628 - 6284 Shehabi 亚欧会议。 1 Iglewski 芭芭拉·H。 1 Pathology-Microbiology和法医学 约旦大学 医学院的 安曼 约旦 ju.edu.jo 2 儿科 约旦大学医院 安曼 约旦 ju.edu.jo 2017年 20. 12 2017年 2017年 11 08年 2017年 11 11 2017年 28 11 2017年 20. 12 2017年 2017年 版权©2017埃曼n . Abu-Khader et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

艰难梭状芽胞杆菌在肠中常见的婴儿不会引起任何的疾病。本研究调查最重要的流行病学特征<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌菌株殖民约旦婴儿的肠道。287收集粪便样本从婴儿承认乔丹大学医院(JUH) 2015年的时期。样品被培养<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌和他们的增长被确认使用微生物培养和PCR。整体<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌殖民率和住院nonhospitalized婴儿是37/287 (12.9%)。比其他婴儿新生儿没有殖民(8.7% vs 19.5%)。殖民的婴儿<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌产毒素的菌株(TcdA和TcdB)在54%的隔离观察,而那些殖民与艾菌株分别为46%和只有一个隔离是积极为二进制毒素。母乳喂养的婴儿是一个重要因素与殖民下降有关<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌。所有<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌菌株对万古霉素和甲硝唑易感,而高电阻率对环丙沙星(78.4%)和较低的电阻率,红霉素(29.7%)被发现在隔离。结果表明,分离株进行变异的40.5%<我t一个l我c>gyrA和<我t一个l我c>gyrB基因对环丙沙星、莫西沙星抗力移转。这项研究代表了有用的流行病学特征<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌殖民肠的婴儿生活在一个发展中国家。

 约旦的学术研究中,大学的院长职位或任期 约旦研究基金会 约旦大学医院 1。介绍

艰难梭状芽胞杆菌院内antibiotic-associated腹泻的主要原因是由于毒素a和B的生产。<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌感染(CDI)会导致无症状的马车,轻度腹泻或pseudomembranous结肠炎(PMC)。CDI可以关联到重要的发病率,死亡率,和医疗保健费用在住院病人 1, 2]。CDI的发病率增加耦合与更严重的临床表现;尤其是患者的死亡率从24 - 50%不等( 3- - - - - - 5]。

的速度<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌殖民新生儿差别很大(2.5 - -90%) 1),主要是在前两年的生活,通常无症状地( 6, 7]。从美国最近的一项研究报告增加小儿CDI-related住院率在1997 - 2006年期间( 8]。报道过一些假设来解释无症状的状态<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌在新生儿。其中包括竞争由艾株肠道殖民,免疫系统的不成熟,可能没有肠道中的毒素受体,调制的毒素生产婴儿微生物群,和毒素中和由母亲的抗体 6, 9]。

的传播<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌主要发生在卫生保健设施,暴露在抗菌药物和环境污染的孢子主要引起院内感染( 10, 11]。

本研究调查了发生的速度<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌肠道殖民化和最重要的流行病学因素与它的存在在约旦婴儿肠。

 2。患者和方法 2.1。研究人群

这个未来的便利抽样研究儿科部门/约旦大学医院(JUH)的8个月从2015年3月到2015年10月。批准的这项研究是医学院研究生学院大学的乔丹。总共287份粪便排泄物样本来自151男性和136女性婴儿一年或更少。

传记和临床数据从每个婴儿获得包括年龄、性别、姓名、住院期间,出现腹泻,医院的住院时间,分娩方式,类型的喂食,和抗生素治疗时抽样(表 1)。

人口287婴儿积极和消极的特征<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌文化。

变量 积极的数目(%) 梭状芽孢杆菌 数量(%)的负面 梭状芽孢杆菌 P 价值
年龄群
1天-≤30天 15 (8.7) 157 (91.3) 0.050
> 1个月-≤1年 22日(19.5) 93 (80.5)
性别
男性 18 (11.9) 133 (88.1) 0.605
女 19日(14.0) 117 (86.0)
医院病房
N 我 C U ∗ 0 (0.0) 50 (100) 0.001
门诊部当 37 (15.6) 200 (84.4)
抗生素治疗
是的 10 (10.5) 85 (89.5) 0.400
没有 27日(14.1) 165 (85.9)
的存在 腹泻 ∗ ∗
是的 3 (23.1) 10 (76.9) 0.262
没有 34 (12.4) 240 (87.6)
医院住院时间
1 - 7天 14 (14.1) 85 (85.9) 0.062
8-30天 1 (2.0) 49 (98.0)
> 30天 2 (15.4) 11 (84.6)
孕龄
< 32 0 (0.0) 12 (100) 0.420
32-36 9 (14.3) 54 (85.7)
37-39 16 (11.6) 122 (88.4)
> 39 12 (16.2) 62 (83.8)
出生体重
≤2500 16 (16.2) 83 (83.8) 0.230
> 2500 21日(11.2) 167 (88.8)
交货方式
正常的阴道分娩 20 (13.8) 125 (86.2) 0.654
剖腹产 17 (12.0) 125 (88.0)
类型的喂养
乳房 4 (5.1) 74 (94.9) 0.012
公式和混合 33 (15.8) 176 (84.2)

我 n c l u d e d ∗ 50个新生儿被送入新生儿重症监护室(NICU)。<我nl我ne-formula> 米 o 年代 t l y ∗ ∗ 软大便没有任何临床明显的胃肠道症状或腹泻期间收集的标本。

 2.2。道德许可

伦理审查委员会的权限也获得(ERB)约旦大学医院(JUH),许可数量75/2015。口头同意后,从所有的母亲的婴儿获得解释研究的目的。

 2.3。文化和身份的<斜体> < /斜体>难辨梭状芽胞杆菌这种

从每个病人调查期间收集的粪便样品在门诊诊所或直接进入医院后,用无菌prewetted棉签0.85%生理盐水。2 - 3小时内所有粪便标本被研究微生物学实验室。标本是首先被绝对乙醇(v / v) 1 h在接种之前<我t一个l我c>艰难梭状芽胞杆菌moxalactam-norfloxacin琼脂板(CDMN, Oxoid,英国),补充了7% (v / v)去纤维蛋白的马血。文化板块孵化48小时37°C在厌氧条件下,和一个控制参考应变<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌据国家反恐怖主义中心(11204)是包括在内。像所有可疑的殖民地<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌在外表被用于革兰氏染色和芽孢染色,后来证实了Remel快速安娜II系统(美国KS Lenexa Remel Inc .)。所有<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离被冻结在脑心浸液肉汤−70°C (BHIB)与20%甘油进一步抗菌药物敏感性测试和表征潜在的毒素基因。

 2.4。抗菌药物敏感性试验

所有<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离测试使用<我nl我ne-formula> E 测试(英国Oxoid)对万古霉素、甲硝哒唑,环丙沙星,红霉素根据CLSI指南(2015)( 12]。一个质量控制<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌应变(国家反恐怖主义中心的11204)是包括在内。

 2.5。分子的方法

梭状芽孢杆菌DNA被沸腾的准备使用单一的殖民地在95°C水浴的10分钟。的身份<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌证实了隔离放大16 s rRNA基因的使用<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌特定的引物(PG48和B) ( 13]。PCR反应是用于检测<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌毒素基因A和B (<我t一个l我c>TcdA和<我t一个l我c>TcdB)和检测基因编码的酶<我t一个l我c>(cdtA)和绑定<我t一个l我c>(cdtB)组件的二进制毒素被Terhes et al。 14]。基因突变检测<我t一个l我c>gyrA和gyrB利用PCR基因进行了报道Dridi et al。 15]。

 2.6。统计数据

所有的数据分析进行了使用SPSS版本20。<我nl我ne-formula> χ 2 以及用于统计分析。<我nl我ne-formula> P ≤ 0.0 5 被认为是具有统计学意义。

 3所示。结果 3.1。婴儿的特点

表 1显示所有检查的重要角色与积极或消极的婴儿<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌粪便分离根据他们的年龄,进入重症监护室(INCU)或门诊部门(门诊部当),性别、腹泻、住院时间、类型的喂养,出生体重(BWT),分娩方式,和当前的抗生素治疗。

 3.2。检测<斜体> < /斜体>难辨梭状芽胞杆菌这种

37/287(12.9%)的<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离从婴儿≤1年,20/37(54.1%)的产毒素的菌株。所有隔离被证实使用16 s rRNA基因PCR。

 3.3。检测<斜体> < /斜体>难辨梭状芽胞杆菌这种产毒素的基因

表 2显示,13/37(35.1%)的两个基因毒素<我t一个l我c>(TcdA)和B<我t一个l我c>(TcdB),而17/37(45.9%)的隔离是不利于毒素A和B的基因。只有一个隔离(2.7%)呈阳性二进制毒素基因(<我t一个l我c>TcdA和<我t一个l我c>TcdB)(表 2)。成功的测序(99%)<我t一个l我c>cdtA和<我t一个l我c>cdtb基因是用来证实一个孤立的身份是积极为二进制毒素基因(Macrogen、韩国)。顺序读取使用在线软件NCBI BLAST手动对齐。

产毒素的37的<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离。

毒素概要 数量的隔离(%)
A + B + 13<我nl我ne-formula> 35.2 ∗
A + B− 1 (2.7)
−B + 6 (16.2)
- A和B 17<我nl我ne-formula> 45.9 ∗ ∗
总额(%) 37<我nl我ne-formula> One hundred. ∗ ∗ ∗

O n l y ∗ 隔离是阳性二进制毒素基因测序证实;<我nl我ne-formula> 5 ∗ ∗ 4.1%的<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离是产毒素的菌株;<我nl我ne-formula> 37 ∗ ∗ ∗ / 287(12.9%)肠殖民<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌。

 3.4。抗菌药物敏感性

所有<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离易感万古霉素和100%灭滴灵见麦克风断点,而中等收入国家对环丙沙星和红霉素显示,29/37(78.4%)和11/37(29.7%)的分离株耐药,分别。氟喹诺酮类resistance-determining突变基因(<我t一个l我c>gyrA和<我t一个l我c>gyrB)在隔离(表中15/37 (40.5%) 3)。

抗菌MIC 37的结果<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离。

抗菌药物 MIC50 (<我t一个l我c>µg / ml) MIC90 (<我t一个l我c>µg / ml) 抵抗断点(<我t一个l我c>µg / ml) 麦克风(<我t一个l我c>µg / ml)的范围内 数量(%)的抗性
C 我 p r o f l o x 一个 c 我 n ∗ 5.3 9.6 8 3.0 - -16.0 29 (78.4)
红霉素 0.42 0.75 8 0.25 - -2.0 11 (29.7)
万古霉素 0.89 1.60 32 1.0 - -4.0 零
灭滴灵 0.09 0.16 32 0.023 - -0.25 零

一个 ∗ 共有40.5%的隔离是积极的变异<我t一个l我c>GyrA和<我t一个l我c>GyrB基因。

 4所示。讨论

这项研究展示了殖民率相对较低<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌(12.9%)的凳子和nonhospitalized住院婴儿≤1年。产毒素的<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离的占54.1%(表 1和 2)。在法国一个前瞻性研究执行期间发现,18个月<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌殖民的法国婴儿年龄在0到2年是33.7%,和殖民率产毒素的菌株是略低于7.1%,在我们的研究中 9]。从美国最近的一项研究报道,儿科CDI-related住院率从1997年到2006年从12.8%上升到7.2;率最低的是观察新生儿(0.5%),而发病率< 1年,年龄在5 - 9岁儿童(32% 8]。在日本的一项研究报道,马车产毒素的速度<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌在新生儿很低(2.5%),但增加到84.4%在2岁以下的婴儿 16]。

的发病率的原因<我t一个l我c>C。<我t一个l我c>难相处的婴儿不同国家之间的广泛仍让人怀疑。然而,殖民的速度在婴儿可能是由于低能力的婴儿肠道菌群抑制增长<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌或由于缺乏小儿肠道粘膜中的毒素受体( 17]。此外,婴儿比成人更频繁的殖民地,但是他们很少开发<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌疾病在生活的第一年( 18- - - - - - 20.]。

目前的研究表明,有婴儿配方奶粉混合牛奶明显相关(<我nl我ne-formula> P < 0.012 ),<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌比母乳(表殖民 1)。这一发现是类似于其他最近的研究( 6, 7, 19]。否则,这个研究表明没有明显相关性(<我nl我ne-formula> P > 0.05 )之间的<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌殖民和某些新生儿情况与性别、胎龄、出生体重、分娩方式,医院的住院时间,柔软的凳子,和抗生素治疗。

在约旦,大多数以前的研究<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌感染和殖民大多都涉及成人患者。2007年在约旦大学医院进行的一项研究发现,13.7%的产毒素的流行率<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离在成人住院病人的存在证明了积极的文化/毒素基因或和与腹泻,但没有单一的情况下发现儿童( 21]。目前的研究表明,积极的产毒素的殖民之间没有相关性<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌在婴儿和软凳,先前的抗生素治疗,或炎症性肠病,总体我们的研究结果与其他调查人员( 18, 19]。最近的一项多中心研究在三个不同的私人约旦安曼的医院在8个月显示高患病率(92.4%)的积极<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌成年人毒素以及老年患者长期住院和并发症 22]。此外,最近的一项研究表明,婴儿被艾广泛殖民<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌菌株及其与产毒素的菌株起源于早期肠道殖民成人( 9]。

这项研究表明,37<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离是容易受到万古霉素和甲硝唑和高度耐环丙沙星(78.4%),中度耐红霉素(29.7%)(表 3)。这些结果类似于某种程度上发表的一项研究从我们医院 21显示所有<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌隔离非常容易万古霉素和甲硝唑,温和抵抗率被发现环丙沙星。这些发现也与其他欧洲研究( 15, 23, 24]。同样重要的是在这里提及,粪便<我t一个l我c>大肠杆菌隔离从约旦婴儿和成人是高度耐环丙沙星,众所周知,乔丹医生广泛使用在治疗尿氟喹诺酮类原料药和呼吸道感染 25- - - - - - 27]。

总之,本研究提出了重要的流行病学数据toxigenix的发生<我t一个l我c>梭状芽孢杆菌肠道住院和nonhospitalized婴儿住在一个中东国家。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

 确认

这项研究已经被院长财政支持研究,约旦大学,和约旦研究基金,安曼,约旦。作者感谢乔丹大学医院在安曼的支持。

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