1。介绍
布鲁里溃疡(BU)疾病、慢性皮肤坏死mycobacteriosis,特点是病变包括结节、丘疹、斑块、水肿,和大型坏死溃疡(
1,
2]。它会导致发病率在受影响的人伴随不祥的社会经济后果对病人和他们的家属(
3]。的疾病所致
溃疡分枝杆菌已报道,在全球超过30热带和亚热带国家,包括加纳(
4,
5]。以前,治疗布鲁里溃疡疾病取决于手术切除加上整形手术和皮肤移植(
6]。目前,管理使用利福平、链霉素的八周期间成功(
7- - - - - -
9]。这是基于推荐由世界卫生组织(世卫组织),临床试验成功后由Etuaful et al .,在加纳Agroyesum [
10,
11]。尽管如此成功,新、复发性和反应迟钝的布鲁里溃疡病例报道从流行地区
12- - - - - -
14]。这些挑战,再加上滥用,滥用推荐剂量的抗生素,和不驯服的患者有可能产生突变株耐药特性,作为其他病例报道mycobacteriosis尤其是肺结核(TB) (
14,
15]。
溃疡分枝杆菌突变,尽管据报道低(0.9%)甚至对利福平,存在,有可能破坏制定干预措施对疾病的控制
14]。
目前,几乎没有抵抗的状态信息
溃疡分枝杆菌菌株流行的社区内传播。据报道低突变率也大概自满惯性的原因与一些研究报道抗链霉素和利福平自建议世卫组织(
11,
13]。然而有效的控制措施需要疾病监测与有效的公共卫生工具。
微生物的易感性隔离包括定期调查
溃疡分枝杆菌通过实验室方法建立药物疗法就是这样一个重要的公共卫生监测工具。监控
溃疡分枝杆菌隔离在BU流行地区因此至关重要的有效传播疾病控制(
12]。这将有助于评估当地耐循环率
溃疡分枝杆菌隔离,因为这是有效的疾病控制的关键。获得的信息将是至关重要的政策制定疾病和病人和审查和实施以及优化药物治疗特别是在布鲁里溃疡病流行地区。因此,本研究的易感性概要报告
溃疡分枝杆菌隔离来自Paakro Akuapem南部地区和Asuboi Suhum-Kraboa-Coaltar区东部地区的两个主要可以理解在加纳BU流行地区。
2。方法
这是一个前瞻性实验研究设计,数据收集后获得道德伦理审查委员会的间隙加纳卫生服务(gh)和野口纪念医学研究所(NMIMR)(研究040/09-10)。
2.1。研究网站,样本收集和准备
在两年期间,2010年6月到2012年4月,共有540个拭子标本获得从135年临床确诊布鲁里溃疡病人报告的两个卫生中心Paakro和Asuboi治疗失败和慢性伤口持久的比预期更长的时间。这些拭子标本从布鲁里溃疡病变的病例和渗出液用于实验室确认的存在
溃疡分枝杆菌。分泌物培养在Lowenstein-Jensen (L-J) 8 - 12周。典型的增长
溃疡分枝杆菌殖民地在七十年发现了70种不同的文化的病人,潜伏期长达8到12周后在L-J 32°C (
16]。
溃疡分枝杆菌殖民地经常规实验室方法(
17)通过对文化增长Ziehl-Neelsen染色和确认IS2404 PCR (
17]。短暂,Ziehl-Neelsen染色过程,涂片准备从文化发展和被允许干,之后他们heat-fixed充斥carbol洋红染色。热量然后应用滑下直到蒸汽出现了。幻灯片就离开5分钟间歇地同时加热。多余的carbol洋红和自来水冲洗掉,多余的水被排干。幻灯片被覆盖20%的H然后使脱色2所以4,2 - 5分钟。它随后复染色亚甲蓝为3%,2分钟后用大量的水,排水,晾干。彩色的滑油浸下然后用光学显微镜观察。隔离的
溃疡分枝杆菌得到描述传统实验室的确认方法进行药敏测试链霉素(4
μ和利福平(40 g / mL)
μCanetti g / mL)的比例的磁化率的测定方法
分枝杆菌抗生素(
18]。这种方法简单,稀释准备标准化的接种物被播种到drug-incorporated(测试)和无毒(控制)Lowenstein-Jensen媒体。耐药隔离的比例很容易推导出通过比较重要的控制和测试。
溃疡分枝杆菌隔离表现出增长偏合并与描述的各种测试药物双重耐药隔离,同时一个隔离,只在一种drug-incorporated偏monoresistance展出。增长要么drug-incorporated媒体构成monoresistance,虽然可能受到隔离显示所有drug-incorporated媒体上没有增长。
2.2。溃疡分枝杆菌制备<斜体> < /斜体>培养液
溃疡分枝杆菌剂悬浮液准备挑选两到三个年轻的和纯粹的殖民地的亚文化
溃疡分枝杆菌200年,一次性
μL容量接种环。获得均匀样本悬挂,殖民地被转移到无菌7毫升宝石含10 - 15瓶无菌玻璃珠(3毫克)和500年
μL无菌蒸馏水。混合是通过间歇涡流六十秒。3毫升(3毫升)的无菌蒸馏水被添加到获得最后一卷4毫升。容器被放置在平面上,使悬架粗颗粒的沉降。上层清液是小心翼翼地转移到无菌管无菌一次性吸管(
19,
20.]。
的浊度
溃疡分枝杆菌然后调整悬架是相当于麦克法兰的标准1的解决方案。这涉及到添加蒸馏水和匹配的浓度标准溶液相当于1毫克/毫升的杆菌。两倍稀释的标准悬挂都是通过添加0.2毫升的悬架(10)到1.8毫升无菌蒸馏水获得双稀释(10−1)。这个过程被重复获得总共四个细菌悬液的稀释(10−2,10−3,10−4)。
2.3。敏感性测试和解释结果
为每个测试,100年
μL (
溃疡分枝杆菌剂稀释被播种到Lowenstein-Jensen (L-J)媒体整合与链霉素最后药物稀释4
μ40 g / mL和利福平
μ克/毫升。控制被设置为细菌接种物无毒L-J媒体。一个加纳
溃疡分枝杆菌应变(写明ATCC 970321 -加纳D19F9)也被设置为一个控制无毒和drug-incorporated媒体。L-J斜坡孵化在32°C。阅读测试比例做了28天42天。增长被记录为融合性的增长和+ + + + +为1 - 99 100多个殖民地和殖民地殖民地的实际数量计算。所有测试的解释是基于关押42天读数。对于每个隔离测试,生物的数量对每种药物浓度被表示为一个百分比无毒的生物的数量增长斜率。L-J斜坡上的选择是为评估科汉解释说吸毒、含药媒体上的增长
。溃疡分枝杆菌科汉解释说隔离表达≥1%的增长在含药无毒媒体的媒体相比,被认为是抗抗生素在测试浓度的利福平、链霉素40
μg / mL和4
μ分别g / mL。
4所示。讨论
本研究确定临床的易感性概要文件
溃疡分枝杆菌隔离的利福平、链霉素体外Canetti琼脂比例法(
18]。总共14个
溃疡分枝杆菌隔离展出体外抗链霉素或利福平;其中,十二个隔离展出40耐利福平的临界浓度
μ克/毫升,而抗链霉素被两个展出
溃疡分枝杆菌隔离测试。体内体外敏感性,对链霉素和利福平已经被其他部的研究报告(
21,
22]。在大多数的研究中,主要目标是药物发现或改进现有的方案。研究评估敏感性的临床分离株是罕见的,但它是一个重要的公共卫生工具用于有效的疾病监测,因为它提供了信息传播耐药
溃疡分枝杆菌在布鲁里溃疡地方性社区(
14]。
结核分枝杆菌耐药菌株可能同时表现出抵制两个或三个anti-mycobacterial抗生素通常归因于多重曝光,很少遇到一定的阻力
溃疡分枝杆菌。最初的挑战努力寻找有效的抗生素更警惕的方法。在这项研究中,没有
溃疡分枝杆菌隔离表现出双重抗利福平、链霉素;这不是令人惊讶的低利率
溃疡分枝杆菌突变一直在进行的一项研究报道简颂et al。
14在加纳。尽管,还需要持续的警惕/监测可能出现耐药
溃疡分枝杆菌菌株的布鲁里溃疡地方性社区,尤其是在有病例合并感染
溃疡分枝杆菌结核分枝杆菌和,这可能加剧当前的条件。本研究也报道的现状
溃疡分枝杆菌隔离在两个主要替代部地方性社区公共卫生疾病控制的观点。在这个方向上的研究相当缺乏,尤其是在监测循环耐药菌株
溃疡分枝杆菌。体外测定的敏感性资料从临床样本中分离获得的有效病例管理和公共卫生的重要组成部分[
23,
24]。
目前有效使用利福平、链霉素特别大的病变(> 15厘米)大小和报道短愈合时间范围在2 - 4周内提出预期的持续使用抗生素治疗疾病的有效管理(
8,
22]。在这项研究中,两个(2)
溃疡分枝杆菌隔离显示抗链霉素的临界浓度4
μ克/毫升。结果与其他诸如由Thangaraj et al ., 2000年,他们也证明了加纳的易感性隔离利福平体外和还在老鼠体内,戴格et al ., 2000年(
21,
22]。
抗微生物的活动主要是消除或抑制病原体的生长,这一现象可能有助于选择抗生素对治疗耐药水平的建议(
21,
25]。耐药的现象是一个全球卫生挑战的感染状况,包括mycobacteriosis。结果从几个研究证实这种说法
10,
22,
26,
27]。调查前一个孤立的传染病的敏感性抗生素的管理是非常重要的,强烈推荐。这将有助于防止不当接触传染性病原体的药物水平不足,构成滥用可能导致突变的选择分离,表现出抗推荐的药物(
28]。分枝杆菌疗法都有其公平份额的多药耐药性(MDR),很多情况下是特别报道
结核分枝杆菌(MTB) [
23,
29日- - - - - -
31日]。到目前为止,然而,有一些紧急的报告
溃疡分枝杆菌隔离(
8,
32]。这需要更多的研究耐药
溃疡分枝杆菌隔离。有效的药物配方政策将取决于对耐药信息的流通
溃疡分枝杆菌隔离。这将通知决定使用抗生素,还帮助检查毒品政策,推出更有效的药物组合。
目前的研究是在两个社区进行认可布鲁里溃疡加纳卫生服务流行地区(
12]。尽管这项研究的可能不是一个表示总体状况的布鲁里溃疡耐药性挑战在整个国家,重要的是要知道在这种流行地区的局势,并监测可能出现耐药隔离。这种监测活动是非常必要的,尤其是在布鲁里溃疡当前使用抗生素治疗。一般来说,在临床耐药性的流行
溃疡分枝杆菌隔离在加纳已经报很低(0.9%)
32]。与此同时,也不能保证将继续率仍然很低。这是因为耐药性由于各种因素发生,因此需要监控(
22]。电阻的类型表现出在当前使用的隔离是超出了本研究的范围,将是值得追求的。
没有发现分离抗链霉素和利福平。这是一个全球以及区域的现象报道对于大多数研究涉及链霉素和利福平的药敏和支持的高功效streptomycin-rifampicin联合治疗(
33]。也有报道称,利福平耐药性当作为单一疗法(
23),类似于目前的观察,利福平、链霉素以来实施了接近十年,清楚地表明(i)的突变速度相对较慢的循环
溃疡分枝杆菌隔离和(2)抗生素被充分管理,最重要的是,有效的合规的病人是限制潜在循环分离变异。如前所述,即使隔离用于研究来自患者治疗失败和慢性伤口持续时间超过预期,大部分的隔离没有表现出体外。因此,他们没有反应与药物灌注治疗可以归因于挑战这些慢性溃疡的病变影响也明显坏死。此外,从研究不能预测临床结果
溃疡分枝杆菌分离获得正常的伤口愈合。