IJI 国际期刊的炎症 2042 - 0099 2090 - 8040 Hindawi出版公司 896864年 10.1155 / 2014/896864 896864年 研究文章 肝内淋巴细胞在慢性乙型肝炎的临床特征 http://orcid.org/0000 - 0003 - 0744 - 0634 Mohamadkhani 阿什拉夫 Naderi Elnaz Sotoudeh Masoud Katoonizadeh Aezam 蒙塔泽里 Ghodratollah http://orcid.org/0000 - 0003 - 4566 - 3628 Poustchi 侯赛因 卡维雍 jean - marc 1 肝脏和Pancreatobiliary疾病研究中心 消化系统疾病研究中心 德黑兰大学医学科学 Shariati医院、北Kargar大道,德黑兰14117 13135 伊朗 tums.ac.ir 2014年 21 1 2014年 2014年 07年 09年 2013年 28 10 2013年 21 1 2014年 2014年 版权©2014年阿什拉夫Mohamadkhani et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

体液免疫构成主要的防御机制对病毒感染。然而,肝脏损伤和B细胞的人口协会在慢性乙型肝炎病毒(HBV)运营商并没有被研究过。在这项研究中,五十7乙型肝炎表面抗原(HBsAg)积极和e抗原阴性的患者进行了研究,以确定CD20的表达,细胞表面标记表示在B细胞,肝活检部分使用免疫组织化学。病人的临床资料当时肝活检获得从他们的医疗记录。有显著联系日志HBV DNA和ALT ( r = 0.36 , P = 0.006 )和组织学活动指数(HAI)总分( r = 0.3 , P = 0.02 ),分别。CD20表达所有57肝脏活检样本submembranous和膜染色模式及其表达式与海总分显著相关( r = 0.32 , P = 0.01 )和纤维化阶段( r = 0.31 , P = 0.02 )。乙型肝炎病毒的易感B淋巴细胞可能与免疫介导的炎症的发展HBV-induced肝损伤。目前的数据也支持肝脏可能是二级淋巴器官之一。

 1。介绍

慢性乙型肝炎(慢乙肝)病毒(HBV)感染的主要原因是肝硬化和肝细胞癌(HCC) ( 1]。与乙型肝炎病毒有关的慢性肝病的发病机制还不清楚。然而,很明显,相关的免疫机制负责慢性乙肝抗病毒反应结果( 2- - - - - - 4]。在人类肝脏淋巴细胞的存在是代表一个病态的情况( 5]。这个概念源于观察,t细胞在慢性乙型肝炎,可能都参与的免疫清除HBV-infected细胞和肝细胞损伤的发病机制 6]。此外B淋巴细胞和浆细胞的数量在肝硬化患者明显高于那些不活跃的慢性肝炎( 7, 8]。巨大的肝内b细胞大规模生产的IgM和免疫球蛋白和浆细胞渗透进肝小叶也被证明在慢性活动性肝炎HBV-associated 9]。b细胞导致免疫反应效应细胞因子的分泌,有人建议,天真和记忆b细胞优先子集产生不同的效应细胞因子( 10, 11]。

天真的b细胞进行体细胞hypermutation成熟的b细胞受体(BCR)的免疫球蛋白可变区基因与特定的蛋白质可以在树突细胞接触后。然后高亲和抗原受体通常由两个同形像膜IgM IgD继续成熟Ig-secreting浆细胞或记忆b细胞( 12]。抗原主要反应相比,免疫记忆能力提出了增加更快和更有力的体液反应后的抗原再次接触( 13]。虽然针对乙型肝炎核心抗原抗体相关机制(HBcAg)据报道在早先的研究中,一些数据存在于人口B淋巴细胞在慢性乙肝患者的肝脏。细胞标记是独一无二的识别和细胞类型进行分类。CD20表达的是一个b细胞特定的表面抗原,b细胞的各个阶段发展除了早期pro-B-cells或浆细胞和b细胞的激活和增殖中起着重要的作用[ 14]。

阐明肝内的角色B细胞在慢性乙型肝炎的发病机制,我们研究了CD20表达的标记在肝脏活检患者B细胞免疫组织化学。

 2。材料和方法 2.1。病人

肝活检标本57 HBV-associated慢性肝病患者没有参加肝炎的肝肿瘤诊所Shariati医院,德黑兰大学医学科学,2008年到2011年期间进行了研究。乙型肝炎病毒感染被诊断出积极的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)患者的血清。所有患者e抗原阴性,有家族性乙型肝炎病毒感染史,没有与人类immunedeficiency病毒(HIV)合并感染或其他肝炎病毒。没有一个病人自身免疫性肝炎或其他肝脏相关疾病。病人的临床资料当时肝活检获得从他们的医疗记录。之前没有病人接受anti-HBV治疗肝脏活检。该协议为这个医院伦理委员会批准沙里亚梯是研究之一。

 2.2。肝脏的组织学研究

慢性乙肝的存在、纤维化阶段和组织学活动被修改后的组织学活动指数(HAI)评估评分系统( 15)对肝脏部分沾hematoxylin-eosin和天狼星红。

 2.3。免疫组织化学和分析肝活检标本

商用主要针对CD20的单克隆抗体(克隆UCHT1, Dako)被用来染色3.0 μ米的部分肝脏活检deparaffinization后常规微波抗原检索和辣根过氧化物酶(diaminobenzidine)工具包(DAKO Carpinteria, CA),制造商的指示。免疫组织化学得分范围从1到5分(匹配0 - 10%,10 - 25%,25 - 50%,50 - 75%和> 75% CD20阳性细胞)得分越高表明更大比例的阳性细胞(如决定从积极的控制)。枚举CD20阳性b细胞,完成了图像采集 + 10 , + 20. , + 40 目标,但染色细胞数在整个领域 + 40 对应于一个组织面积30毫米2。CD20阳性染色是在细胞的胞质侧膜。阳性染色细胞出现没有明确血浆形态但粒状细胞质和细胞核分裂的b细胞。一段从淋巴结被用作积极控制CD20抗原。

 2.4。统计分析

所有的数据都表示为平均值±标准偏差(SD)。变量之间的相关性进行了分析使用皮尔逊相关系数 ( r ) 斯皮尔曼等级相关系数 ( R ) ,如适当。一个 P < 0.05被认为是具有统计学意义的价值。

 3所示。结果 3.1。病人的特点

57 e抗原阴性患者纳入本研究。基线人口统计数据如表所示 1。均值±SD年龄的病人 33 ± 9 年,40(70%)是男性。海总得分的平均数±标准差纤维化和坏死性炎症的患者如表所示 1。9例(15.7%)有明显的纤维化超过或等于3。

临床和病理变量描述性统计57慢性乙型肝炎患者。

变量 N 最低 最大 的意思是 Std.偏差
年龄(年) 57 21 55 33 9
日志乙肝病毒DNA(拷贝/毫升) 57 1.19 6.30 3.05 1.21
ALT (IU / L) 57 18 132年 40 24
海分总坏死性炎症和纤维化 57 1 9 3.65 1.54
纤维化阶段 57 0 5 1.61 1.031
肝脏CD20(分数) 57 1 4 1.95 0.71
肝脏IgD(分数) 57 1 4 1.95 0.91
3.2。临床研究结果

分析慢性乙肝患者的b细胞数量的影响,CD20表达分数,年龄、性别、日志病毒载量,血清ALT,海总分坏死性炎症和纤维化是包含在multivariable-adjusted逻辑回归模型。有显著联系日志乙肝病毒DNA与ALT和海总得分( r = 0.36 , P = 0.006 , r = 0.3 , P = 0.02 ),分别。血清ALT还显示正相关与总分的海虽然不显著( r = 0.25 , P = 0.06 )。没有证据和变量之间的多重共线性年龄和性别的交互日志HBV DNA和ALT。没有观察到显著相关的表达式之间CD20 b细胞标记表达与血清ALT和HBV DNA水平。

 3.3。免疫组织化学检查的b细胞在肝脏

肝脏弥漫性CD20阳性b细胞渗透,分布式聚合门户地区,小叶内的单个细胞。CD20阳性b细胞中表达都57肝活检submembranous和膜染色模式(图 1)。CD20的表达与海总分显著相关( r = 0.32 , P = 0.01 )和纤维化阶段( r = 0.31 , P = 0.02 )。CD20阳性b细胞出现小集群。15例有分数1,三十人分数2,10分3,4人得分CD20阳性b细胞。

代表故事CD20免疫组织化学标记的乙型肝炎病毒相关的慢性肝脏疾病。((a)、(b))表达式的CD20在慢性乙型肝炎患者肝纤维化和低纤维化(原来的放大,200)。((c)、(d)、(e) CD20免疫反应性观察整个门户地区的慢性乙型肝炎患者肝纤维化(原始放大,100、200和400年)。

 4所示。讨论

在这项研究中,肝内的角色b细胞在慢性乙肝感染的发病机制研究。肝活检的免疫组织化学结果本研究表明b细胞在慢性乙肝的发病机制的主要作用是由CD20阳性b细胞数量增加。我们的证据表明,CD20阳性b细胞聚集在门户地区或单个细胞内的小叶与坏死性炎症和纤维化与先前的研究一致( 9]。事实上我们的组织学结果就组织学图片出现在急性乙型肝炎引起的肝衰竭患者用反光的B细胞反应,可以负责巨大的乙型肝炎病毒核心抗体蛋白的表达(HBcAb)。然而,很少有研究报道内容。我们的研究表明,b细胞参与炎症反应,破坏受感染的细胞。因此,他们扮演着重要的角色在慢性乙肝感染的免疫反应。

与表面抗原和e抗原的免疫原性HBcAg能够直接激活b细胞产生特定抗体的extralymphatic情况和在缺乏t细胞( 9]。此外,它已被证明,b细胞的活化,在t细胞独立通路,产生免疫球蛋白和细胞因子在肝脏纤维化改变反应( 11, 16]。我们最近的研究显示IgD协会积极的B细胞在慢性乙型肝炎肝纤维化阶段( 17]。肝内淋巴细胞被认为是长寿的再循环b细胞和类似于脾B2细胞产生细胞因子- 2、il - 4, TNF α,il - 6与促炎作用和导致疾病发病机理的antibody-independent时尚,也许通过调节T细胞反应( 16, 18]。先前的研究显示,b细胞显然导致肝纤维化的发展生产的profibrotic细胞因子il - 6,诱导肝星状细胞的分化成myofibroblasts和提高胶原蛋白的合成 16, 18, 19]。成熟的B淋巴细胞在肝,都属于B2子集( 16)和b细胞通常休息CD20受体( 14]。因此,我们可以建议CD20标记,代表天真和preswitch记忆b细胞的标志。

评价肝内b细胞的人口是重要的决定b细胞如何应对乙型肝炎病毒感染。在这种背景下,从目前的研究证据表明暴露于病毒抗原可以增加肝脏中b细胞的比例携带精疲力竭的表型,因此功能障碍。我们目前的数据也支持肝脏的财产作为一个免疫系统,这可能影响各种肝脏疾病的发病机理。

 利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

 作者的贡献

所有作者的贡献的研究和讨论他们阅读和批准了期末论文。

 确认

本文的作者想借此机会感谢所有的患者参与了这个研究项目。本研究支持格兰特的消化疾病研究所,德黑兰大学医学科学。

 蒙塔泽里 G。 目前慢性乙型肝炎的治疗 伊朗的医学档案 2006年 9 1 1 10 2 - s2.0 - 31144458261 Mohamadkhani 一个。 Sotoudeh M。 鲍登 年代。 Poustchi H。 Jazii f·R。 Sayehmiri K。 Malekzadeh带领 R。 Downregulation G1896A HLA二类分子的核前突变在慢性乙型肝炎病毒感染 病毒免疫学 2009年 22 5 295年 300年 2 - s2.0 - 70350093026 10.1089 / vim.2009.0031 Poustchi H。 Mohamadkhani 一个。 鲍登 年代。 蒙塔泽里 G。 艾尔斯 一个。 Revill P。 法雷尔 g . C。 Locarnini 年代。 乔治 J。 Malekzadeh带领 R。 precore的临床意义和核心启动子突变基因型D型肝炎B-related慢性肝脏疾病 《病毒性肝炎 2008年 15 10 753年 760年 2 - s2.0 - 48949088106 10.1111 / j.1365-2893.2008.00998.x 所有的 m·A。 普列托 我。 Argudo 年代。 de韦森特 F。 Santamaria l 德·米盖尔 m P。 阿里亚斯 j·L。 阿里亚斯 J。 间质淋巴腹膜间皮轴在门户高血压腹水:当危险,回到大海 国际期刊的炎症 2010年 2010年 10.4061 / 2010/148689 148689年 霍尔特 答:P。 霍顿 e . L。 Lalor p F。 精密过滤器 一个。 巴克利 c, D。 亚当斯 d . H。 肝脏myofibroblasts调节淋巴细胞的浸润和定位在人类肝脏 胃肠病学 2009年 136年 2 705年 714年 2 - s2.0 - 58649089811 10.1053 / j.gastro.2008.10.020 Iannacone M。 Sitia G。 Guidotti l·G。 抗乙型肝炎病毒的致病的和抗病毒免疫反应 未来的病毒学 2006年 1 189年 196年 Oliviero B。 Cerino 一个。 Varchetta 年代。 Paudice E。 拜 年代。 Ludovisi 年代。 Zaramella M。 Michelone G。 Pugnale P。 黑人 F。 Barnaba V。 Mondelli m . U。 增强B细胞分化和增殖能力减少慢性丙型肝炎和慢性乙型肝炎病毒感染 肝脏病学杂志 2011年 55 1 53 60 2 - s2.0 - 79958822254 10.1016 / j.jhep.2010.10.016 马拉 F。 Aleffi 年代。 Galastri 年代。 普洛 一个。 单核细胞在肝纤维化 在免疫病理研讨会 2009年 31日 3 345年 358年 2 - s2.0 - 70349562495 10.1007 / s00281 - 009 - 0169 - 0 有馅的 P。 迪亚兹 G。 陈 Z。 戈文达拉扬 年代。 泰斯 一个。 Agulto l Pittaluga 年代。 恩 D。 余 C。 恩格尔 r·E。 哈斯 M。 西蒙 R。 珀塞尔 r·H。 Zamboni F。 B细胞基因签名与巨大肝内生产乙型肝炎核心抗原抗体在急性肝衰竭乙型肝炎病毒相关 美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国 2010年 107年 19 8766年 8771年 2 - s2.0 - 77952735961 10.1073 / pnas.1003854107 破烂的 M。 Niino M。 Adatia F。 赫伯特 年代。 弗里德曼 M。 阿特金斯 H。 何 j·K。 酒吧或 一个。 不同的效应细胞因子的记忆和天真的人类B细胞子集和多发性硬化症的含义 免疫学杂志 2007年 178年 10 6092年 6099年 2 - s2.0 - 34248230257 Tayebi 年代。 Mohamadkhani 一个。 肿瘤坏死因子-α- 308启动子基因多态性与慢性乙型肝炎病毒感染 肝炎研究和治疗 2012年 2012年 493219年 Avila-Flores R。 麦德林 r。 生态、分类和生理有关的洞穴使用墨西哥蝙蝠 哺乳动物学杂志》 2004年 85年 4 675年 687年 2 - s2.0 - 4344669484 10.1644 / bo - 127 德克尔 d . J。 林惇 P.-J。 Zaharevitz 年代。 Biery M。 Gingeras t·R。 Klinman n R。 定义的子集天真和记忆B细胞能力的基础上他们的子代不良变异体外 免疫力 1995年 2 2 195年 203年 2 - s2.0 - 0028961269 克拉格 m . S。 沃尔什 c。 伊万诺夫 a . O。 Glennie m·J。 CD20及其潜在的生物学马伯治疗的目标 电流方向自身免疫 2005年 8 140年 174年 2 - s2.0 - 16544389341 Ishaka K。 Baptistab 一个。 Bianchic l Callead F。 Grootee j . D。 Gudatf F。 慢性肝炎的组织学分级和分期 肝脏病学杂志 1995年 22 696年 699年 Bhogal r·K。 博纳 c。 B细胞:不再旁观者在肝纤维化 临床研究杂志 2005年 115年 11 2962年 2965年 2 - s2.0 - 27644530112 10.1172 / JCI26845 Mohamadkhani 一个。 Bastani F。 Sotoudeh M。 Sayehmiri K。 Shahnazari P。 蒙塔泽里 G。 Poustchi H。 影响B细胞在肝纤维化与乙型肝炎病毒相关窝藏基底核心启动子突变 医学病毒学杂志 2012年 84年 1889年 1896年 霍尔特 答:P。 Stamataki Z。 亚当斯 d . H。 减毒肝纤维化在B细胞的缺失 肝脏病学 2006年 43 4 868年 871年 2 - s2.0 - 33645973988 10.1002 / hep.21155 Novobrantseva t . I。 Majeau g·R。 Amatucci 一个。 Kogan 年代。 布伦纳 我。 Casola 年代。 Shlomchik m·J。 科特 V。 哈克曼 p S。 Ibraghimov 一个。 减毒肝纤维化在B细胞的缺失 临床研究杂志 2005年 115年 11 3072年 3082年 2 - s2.0 - 27644501080 10.1172 / JCI24798