1。介绍
植物性食物通常含有天然抗氧化剂,可以清除自由基
1]。关键活动在绿叶蔬菜类黄酮抗氧化化合物,异黄酮,黄酮,儿茶素,isocatechins,木酚素
2]。活性氧(ROS),包括单线态氧等自由基,超氧化物阴离子,氢氧自由基和过氧化氢(H2O2),不断在人体细胞新陈代谢产生导致慢性疾病如癌症、关节炎、动脉粥样硬化,阿尔茨海默氏症和糖尿病
3,
4]。因此,充足的关注使用抗氧化剂,特别是天然抗氧化剂抑制和防止自由基和活性氧(造成的损害
3]。尽管市场上合成抗氧化剂由于致癌,抗氧化剂的自然起源有重大关注社会
5]。
gydF4y2Ba在植物源性食品的消费,某种程度的烹饪或执行处理提高其可食性和适口性。这些食品加工方法可以有许多影响,并不是所有的属性导致的损失质量和健康(
6]。生物利用度和生物活性化合物的浓度可以影响蔬菜的烹饪;这也是参与诱导显著的化学成分和物理特性的变化(
3]。账户,总酚含量和抗氧化活动他们的原始形式的基础上,预测是不准确的(
7]。
gydF4y2Ba在斯里兰卡背景下,村(绿叶蔬菜)扮演了一个重要的角色在饮食和人民消费村作为一个主餐有不同的准备工作的一部分。这些食物制备方法在家庭层面主要取决于口味偏好和便利而不是他们的营养损失。然而,很少的信息可以在文献中关于不同烹饪方法的影响抗氧化活性和总酚含量(TPC)斯里兰卡绿叶蔬菜。因此,本研究进行调查和量化总酚含量的变化和选择的绿叶蔬菜的抗氧化活性:<我talic>
武靴lactiferum我talic>,<我talic>
Dreaga瓦我talic>,<我talic>
Argyreia populifolia我talic>在斯里兰卡国内不同的烹饪方法。至关重要确定可用的生物活性化合物的百分比是丢失或保留内村在国内烹饪方法并确定最好的方法,提高或降低生物活性化合物的降解。
2。材料和方法
2.1。化学物质
使用的所有化学品和溶剂均为分析纯。Folin-Ciocalteu试剂、没食子酸、2、2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)、氯化铝、醋酸钠,2,2’-azinobis——(3-ethylbenzo-thiazoline-6-sulfonic酸)联胺盐(abt), 2, 4, 6-tripyridyl-S-triazine (TPTZ),铁氯化三世,槲皮素,6-hydroxy-2, 5, 7, 8-tetramethylchroman-2-carboxylic酸(Trolox),碳酸钠,和甲醇从西格玛奥德里奇,圣路易斯,密苏里州,美国,通过分析仪器(Pvt)有限公司,科伦坡,斯里兰卡。
2.2。叶样本收集和识别
新鲜,无病叶<我talic>
Argyreia populifolia我talic>,<我talic>
Wattakaka瓦我talic>,<我talic>
武靴lactiferum我talic>收集从科伦坡,斯里兰卡。三个样本(500克)的绿叶蔬菜都来自三个不同的位置。这些收集的绿叶蔬菜是立即进行实验室装一塑料袋。获得的植物标本进一步确定班达拉奈克纪念阿育吠陀研究所Nawinna Maharagama。凭证标本的植物样本<我talic>
Argyreia populifolia我talic>(2048),<我talic>
Wattakaka瓦我talic>(2049)和<我talic>
武靴lactiferum我talic>(2041)存入的标本。
2.3。样品制备
收集到的三个样品的绿叶蔬菜(每500克)混合以获得一个同质样本。然后,绿叶蔬菜可食用部分被浓密的茎,叶部分在自来水冲洗和干纸巾。清洗和清洗的叶子被分成五等分每个烹饪治疗(约300克)。一开始,绿叶蔬菜(300克)的一个部分是储存在-18°C拉链锁袋子里作为参考样本。一分(细分为三个复制的每100克)作为控制没有任何治疗,和其他被煮熟的一式三份(每100克)在三种不同的方法:回火(70°C),浅煎(120°C),和油炸(170°C) [
8]。选择三种烹饪方法常用在斯里兰卡的美食根据斯里兰卡的饮食习惯。样本切成小块,每个部分是这三个勇士的随机分配到一个治疗(回火(70°C),浅煎(120°C),和油炸(170°C)),煮5分钟。处理样品烘干的在45°C(模型:领袖,英国)直到常数含水率5%然后粗粉使用机械搅拌器,生产不出优质同质样本。这个过程被重复的三个绿叶蔬菜。粉植物材料储存在密封的三层袋在4°C到提取。
2.4。直接测定成分的绿叶蔬菜
分析化学家协会的官方批准的标准方法(
9)是用来确定水分含量,粗蛋白质含量,脂肪含量,灰分烘干的样本。水分含量是由烤箱干燥常数的样品重量在105°C。粗蛋白是决定采用凯氏法(Digester-VELP Scientifica™, DK 6日意大利和蒸馏unit-VELP Scientifica™, UDK 129年,意大利),灰分含量是评估使用马弗炉的重量法(Wisetherm)。脂肪含量是由索格利特量化的方法。总糖含量测定按杜布瓦等的修改方法。
10]。
2.5。样本提取植物化学的分析
提取后立即进行烹饪后治疗方法报道Gunathilake和Ranaweera
11用细微的修改。大约1.25 g的粉末样品与25毫升的70%甲醇提取使用机械搅拌器(模型:Flash shaker-SF1斯图亚特,S / S-R00102429 (150 rpm)在室温下过夜)。提取是离心机(HERMLE Z326K) 15分钟在3000 rpm和绘画纸滤纸过滤(不:01)获得particle-free提取。提取量调整到25毫升70% (<我nline-formula>
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)甲醇之前存储在黑暗中在4°C进行进一步分析。
2.6。测定植物化学物质
2.6.1。总酚含量(TPC)
植物提取物的总酚含量估计根据ISO 14502 - 1 (
12)做了一些调整。0.5毫升的整除的植物提取物混合2.5毫升的10% (<我nline-formula>
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彻底)Folin-Ciocalteu试剂和内容不一。3 - 8分钟内,2毫升的7.5% (<我nline-formula>
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碳酸钠是转移到个人管和漩涡。最后反应混合物在室温下培养60分钟,和蓝色的强度复杂使用紫外可见分光光度计测量在765海里(600年模型:舱口博士)。控制样品由0.5毫升的70% (<我nline-formula>
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)与2.5毫升的甲醇Folin-Ciocalteu试剂和2毫升的碳酸钠溶液。实验是为每个样本一式三份。总酚含量测定为没食子酸当量(GAE)校准曲线(<我nline-formula>
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)策划利用没食子酸浓度的参考标准10、20、30、40、50、60、70 mg / L。没食子酸的结果表示为毫克当量(GAE) / g的植物材料(DW)。
2.6.2。总类黄酮含量(交通)
总类黄酮含量测定的方法提出了Ramkissoon et al。
13]。简单地说,2.50毫升整除的植物提取物,150<我talic>
μ我talic>L 5%的亚硝酸钠(<我nline-formula>
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),150<我talic>
μ我talic>L 10%的铝氯(<我nline-formula>
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),1毫升1 M氢氧化钠用移液器吸取到管,分别。之后,体积的解决方案是增加了通过添加蒸馏水5毫升。混合的内容是正确涡,光密度测量使用UV / VIS分光光度计在510海里。实验是为每个样本一式三份。总类黄酮含量决定了校准曲线(<我nline-formula>
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)绘制使用槲皮素浓度的参考标准1000,500,250,125,62.5和31.25 mg / L。槲皮素的结果表示为毫克当量(q) / g的植物材料(DW)。
2.6.3。abt化验
abt自由基清除活性决定根据方法受雇于Proestos et al。
14用细微的修改。abt试剂溶液被混合7更易与abt刚做好的解决方案处理2.45更易与过硫酸钾。abt粉和过硫酸钾粉都有单独的去离子水溶解所需的浓度,然后混合在1:1的比例在离心管中。16小时后在黑暗中潜伏在37°C,合成深蓝色颜色abt的解决方案是稀释为70% (<我nline-formula>
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)甲醇1:40比例,直到吸光度读数<我nline-formula>
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在734纳米。植物提取物0.04毫升的混合4毫升的abt / K2年代2O8股票的解决方案。反应混合物是涡对适当的混合和蒙在鼓里15分钟。吸光度测量在734 nm使用紫外可见分光光度计。实验是为每个样本一式三份。抗氧化能力是由校准曲线(<我nline-formula>
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0.9947米米l:mn>
)绘制使用Trolox参考标准浓度的400年,300年,200年,100年,50岁和25 mg / L。结果表示为正常人的Trolox当量(TE) / g的植物材料(DW)。
2.6.4。铁降低抗氧化能力分析(收紧试验)
铁降低抗氧化能力水平决定Benzie提出的使用方法和应变
15与一些细微的修改。工作收紧试剂是由混合10卷300毫米醋酸缓冲(pH值3.6),1卷10毫米TPTZ (2、4、6-tripyridyl-S-triazine) 40毫米盐酸和氯化铁1体积的20毫米。所有需要的解决方案之前刚做好分析。150年<我talic>
μ我talic>L(样本与4.5毫升的准备收紧试剂混合,反应混合物是孵化30分钟37°C。样品的吸光度测量使用紫外可见分光光度计在593海里。实验是为每个样本一式三份。抗氧化能力是量化的校准曲线(<我nline-formula>
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132年米米l:mn>
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0.9921米米l:mn>
)绘制使用Trolox参考标准浓度的100年,80年,70年,60岁,50岁,40岁,30岁和20 mg / L。结果表示为毫克Trolox当量(TE) / g的植物材料(DW)。
2.6.5。2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl化验(DPPH实验)
DPPH自由基清除活性评估利用Petlevski等建议的过程。
16)做了一些调整。简单地说,2.0毫升的0.16毫米DPPH methanolic解决方案添加到2.0毫升的水methanolic植物提取物(样本)。混合物被漩涡1分钟,然后离开站在黑暗中在室温下。之后,30分钟吸光度是使用紫外可见分光光度计在517海里。实验是为每个样本一式三份。抗氧化能力的量化是一个校准曲线(<我nline-formula>
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0.9946米米l:mn>
)绘制使用Trolox参考标准浓度的25日,12.5,6.25,3.125,和1.5625 mg / L。结果表示为毫克Trolox当量(TE) / g的植物材料(DW)。
2.7。统计分析
分析了每个参数在一式三份。数据记录的<我nline-formula>
的意思是米米l:mtext>
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标准米米l:mtext>
偏差米米l:mtext>
(SD)。单向方差分析(方差分析)申请每个参数。图基测试申请均值比较95%显著性水平。平衡方差分析应用于研究两个变量的影响:热处理和品种。所有使用MINITAB 17软件包进行统计分析。
3所示。结果与讨论
3.1。近似构成的绿叶蔬菜
标准程序来确定水分,粗蛋白,脂肪,和灰三种蔬菜,他们直接构成提出了表
1。