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IJFS

国际食品科学杂志》上

2314 - 5765 2356 - 7015

Hindawi

10.1155 / 2021/2213814 2213814

研究文章

Hydrolase-Treated蜂王浆变弱H2O2- - - Glutamate-Induced SH-SY5Y细胞损伤和促进认知增强的血管性痴呆大鼠模型

Sirinupong Nualpun ¹ Chansuwan Worrapanitch ¹

https://orcid.org/0000 - 0002 - 6214 - 7767 Kaewkaen Pratchaya ² ³

Amante 埃德娜

^{1

农用工业学院

王子Songkla大学

帽子Yai

宋卡90110

泰国

psu.ac.th} ^{2

学院的研究方法和认知科学

Burapha大学

Mueang

20131年春武里

泰国

buu.ac.th} ^{3

动物认知神经科学实验室(ACoN)

认知科学与创新研究中心(CSIRU)

Burapha大学

Mueang

20131年春武里

泰国

buu.ac.th}

2021年

5 10 2021年

2021年 26 5 2021年 23 9 2021年 5 10 2021年

这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

血管性痴呆(VaD)是第二个最常见的类型的痴呆阿尔茨海默病后,但治疗效果仍不是有效的。这使得寻找新的神经保护药物重要。因此,我们推测,蜂王浆,著名的传统医学,可以减弱记忆障碍和血管性痴呆的脑损伤。本研究确定的影响水解蜂王浆(RJH)和细胞损伤的可能机制和认知加强型效果在动物研究。一个在体外研究评估了RJH对乙酰胆碱酯酶抑制剂的影响,细胞生存能力,细胞损伤在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞。然后,一个在活的有机体内研究了血管性痴呆右侧大脑中动脉的闭塞(Rt.MCAO);成年雄性Wistar鼠已经口头RJH剂量范围从10,50 - 100毫克/公斤前14天,14天后Rt.MCAO模仿的闭塞和监督情况。大鼠的空间记忆是评估使用莫里斯水迷宫和摇臂迷宫Rt.MCAO每7天后在14天实验时间,然后,他们牺牲和乙酰胆碱酯酶(疼痛)海马的活动。结果表明,RJH没有细胞毒性效应与最终的浓度高达500 μg蛋白/毫升,减少细胞死亡的H2O2- - - glutamate-induced细胞损伤在体外神经母细胞瘤细胞。重要的是,RJH显著提高内存性能在莫里斯水迷宫测试和摇臂迷宫和减少乙酰胆碱酯酶水平的活动。总之,RJH是潜在的神经和认知增强剂和监督。农业研究发展机构 CRP6205030750 1。介绍</gydF4y2Batitle> <p>目前世界上许多国家正面临老龄化社会二重唱低出生率和人口寿命更长。据世界卫生组织(世卫组织)、高级60岁及以上人口的数量每年增加至少3%在2100年可以达到31亿。泰国人口老龄化与许多发达国家相当;这是排名第三在亚洲迅速老龄化,预计在2030年总人口的26.9%,相当于总人口的四分之一。衰老,生命的一种自然现象,是身体的恶化随着时间的推移,因此导致各种疾病的退化的各种器官,特别是大脑。大脑是人体最复杂的一部分,控制我们的思想,记忆,和演讲,包括情报、胳膊和腿的运动,解释的感觉,和行为,这是所有我们定义人性品质的来源(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B1"> 1</gydF4y2Baxref>]。岁大脑和神经细胞损伤变得非常容易神经退行性疾病如阿尔茨海默病(AD)和帕金森病(PD)的恶化在内存中,思想,行为,移动,和执行日常活动的能力,以及痴呆综合征通常的慢性或进行性认知功能有恶化除此之外可能会从正常老化。它影响记忆、思维、定向、理解、计算、学习能力、语言和判断(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B2"> 2</gydF4y2Baxref>]。</pgydF4y2Ba> <p>根据自由基的生成和氧化应激的老化理论(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B3"> 3</gydF4y2Baxref>,<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B4"> 4</gydF4y2Baxref>之间的不平衡,内源性和外源性活性氧和氮物种(罗恩)积累和抗氧化防御过程会导致氧化应激促进细胞衰老和细胞凋亡。老化的氧化应激理论是基于假设与年龄有关的功能损失是由于RONS-induced赔偿的积累。与此同时,氧化应激参与一些与年龄有关的症状包括神经退行性疾病(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B5"> 5</gydF4y2Baxref>]。因此,使用自由基清除分子细胞内活性氧物种的减少是在神经退行性病变的临床管理中使用的策略。</pgydF4y2Ba> <p>在实现减缓恶化的重要因素之一的器官和大脑是饮食。如今,人们开始转向更加关注他们的健康和消费功能食品和膳食补充剂的兴趣。蜂王浆是一个最流行的和有价值的天然产物来源于蜜蜂的咽下的腺体(<gydF4y2Baitalic> 的蜜蜂</gydF4y2Baitalic>)。从过去,蜂王浆主要用作传统医学,长寿健康食品,化妆品,和膳食补充剂。一些研究报道,蜂王浆展览各种药理作用包括抗衰老的、抗氧化剂、神经营养,抗炎,immunomodulating,低血糖,一般的补药。因此,它通常被用来补充疾病如癌症、糖尿病、心血管痴呆,蜂王浆显示显著的神经保护措施(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B6"> 6</gydF4y2Baxref>]。它已经表明,蜂王浆有有益作用在神经功能和研究在大鼠空间学习和记忆的体外实验模型零星的阿尔茨海默病(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B7"> 7</gydF4y2Baxref>]。此外,蜂王浆长期政府可以影响大脑神经递质在老龄大鼠自然<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B8"> 8</gydF4y2Baxref>]。此外,RJ提取物促进神经发生通过增加大脑的神经干细胞分化成不同类型的细胞,包括神经元(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B9"> 9</gydF4y2Baxref>]。在一项研究中,口服治疗蜂王浆icv-STZ鼠模型的零星的阿尔茨海默病大脑葡萄糖和能量代谢降低,认知障碍,氧化应激,神经元损失,和淀粉样血管病(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B10"> 10</gydF4y2Baxref>]。</pgydF4y2Ba> <p>然而,尽管蜂王浆有很多好处,有一些消费者对蜂王浆过敏,特别是那些与哮喘等呼吸道疾病。蜂王浆的引起过敏的物质是蛋白质。有研究和应用报道,蛋白质分解成肽酶消化等能够减少过敏感觉的活动。我们以前的研究表明,水解enzymatic-treated蜂王浆变弱IgE antigen-mediated过敏反应(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B11"> 11</gydF4y2Baxref>]。因此,在这项研究中,动物模型是为了检查hydrolase-treated蜂王浆在神经元保护的效果<gydF4y2Baitalic> 在体外</gydF4y2Baitalic>和<gydF4y2Baitalic> 在活的有机体内</gydF4y2Baitalic>,包括影响加强学习、记忆和回忆的旧记忆受损神经元的再生在正常大鼠血管性痴呆模型。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec2"> <title>2。材料和方法</gydF4y2Batitle> <sec id="sec2.1"> <title>2.1。材料</gydF4y2Batitle> <p>三个批次的纯新鲜蜂王浆(RJ)蜜蜂的物种<gydF4y2Baitalic> 的蜜蜂</gydF4y2Baitalic>在泰国北部直接从养蜂人那里获得的。RJ转移了冷藏卡车和保持冷冻(−20°C)。本研究中使用的存储段样品不超过6个月。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec2.2"> <title>2.2。化学试剂</gydF4y2Batitle> <p>人类神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞(写明ATCC®crl - 2266™)写明ATCC,来自美国。最低基本培养基鹰(MEM), 3 - (4 5-dimethyl-2-thiazolyl) 2, 5-diphenyl-2H-tetrazolium溴化(MTT)和纯化乙酰胆碱酯酶(疼痛)购买的σ。胎牛血清(FCS)来自Gibco。QuantiChrom™乙酰胆碱酯酶抑制剂筛选工具(iace - 100)从生物测定系统,美国。实验中使用的所有化学品均为分析纯。多奈哌齐(安理申®)是一个标准的药物用于治疗轻度认知障碍。</pgydF4y2Ba> </sec> </sec> <sec id="sec3"> <title>3所示。方法</gydF4y2Batitle> <sec id="sec3.1"> <title>3.1。水解制备蜂王浆(RJH)</gydF4y2Batitle> <p>蜂王浆被酶水解,根据以前的工作(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B11"> 11</gydF4y2Baxref>]。简单地说,用于水解的最佳条件是基于从供应商推荐的条件。RJ样本与去离子水混合在一个比1:2。执行的反应是在不断搅拌在200 rpm,蛋白酶添加水平的1.0% (<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M1"> <mml:mi> w</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> /</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mi> w</gydF4y2Bamml:mi> </mml:math> </inline-formula>)。连续流水浴温度稳定。的水解进行了四个小时;反应是终止在85°C通过加热冷却在冰上前15分钟。然后离心机在水解<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M2"> <mml:mn> 10000年</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> ×</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mi> g</gydF4y2Bamml:mi> </mml:math> </inline-formula>在4°C,持续15分钟。可溶性分数收集然后冻干保存在−20°C进行进一步分析。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec3.2"> <title>3.2。体外测定<斜体> < /斜体>疼痛抑制剂</gydF4y2Batitle> <p>乙酰胆碱酯酶抑制作用是由从Ellman方法应用方法<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B12"> 12</gydF4y2Baxref>),用现成的试剂盒,QuantiChrom™乙酰胆碱酯酶抑制剂筛选工具(iace - 100)快速比色检测乙酰胆碱酯酶抑制剂(生物测定系统,美国)。实验中使用的样本与3 RJH水解酶在不同水解时间。疼痛酶活性是基于下面的反应决定。产生的黄色产品测量的强度在412 nm示例中提供的酶活性成正比。多奈哌齐(疼痛抑制剂)(一种药物用于治疗阿尔茨海默氏症)是作为一个积极的控制。通常,一种神经递质如乙酰胆碱(Ach)扮演了一个角色在大脑内的神经冲动传输必不可少的一个人的记忆。如果乙酰胆碱的量减少,它会导致痴呆。<gydF4y2Badisp-formula> <mml:math display="block" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M3"> <mml:mtable> <mml:mlabeledtr id="eq1"> <mml:mtd> <mml:mtext> (1)</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:mtd> <mml:mtd> <mml:mtext> Acetylthiocholine</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mover> <mml:mrow> <mml:mo> ⟶</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 呵呀</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:mrow> </mml:mover> <mml:mtext> Thiocholin</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> +</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 醋酸</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mtext> </mml:mtext> <mml:mtext> Thiocholin</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> +</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> Dithiobisnitrobenzoate</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> ⟶</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 黄色的</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:mtd> </mml:mlabeledtr> </mml:mtable> </mml:math> </disp-formula></p> </sec> <sec id="sec3.3"> <title>3.3。细胞培养</gydF4y2Batitle> <p>SH-SY5Y,人类神经母细胞瘤细胞悬液是37°C和EMEM F12培养基培养下的孵化器有限公司5%<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>条件。中含有3.7毫克/毫升碳酸氢钠,10%胎牛血清和抗生素青霉素G钠(100单位/毫升)和链霉素(100<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>g / ml) 5 - 7天。在那之后,细胞被trypsin-EDTA使胰蛋白酶化0.25%。细胞悬液离心机在1200 rpm 20°C 5分钟,然后,细胞颗粒温柔地溶解在DMEM包含10%的边后卫。活细胞的数量被台盼蓝排斥法计算。10<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>与10 l细胞悬液的悬浮<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>台盼蓝染料和10 l<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>l转入一个血球计,细胞在显微镜下看到了。细胞被培养为下一段新的75厘米<gydF4y2Basup>2</gydF4y2Basup>细胞培养瓶增加细胞的数量。媒介取代每隔4 - 5天,细胞收获时瓶区域约80 - 90%。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec3.4"> <title>3.4。MTT测定细胞生存能力</gydF4y2Batitle> <p>SH-SY5Y细胞可行性分析进行了使用MTT比色法根据先前描述的研究(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B11"> 11</gydF4y2Baxref>]。简单地说,48 h后孵化与测试样本,麻省理工的解决方案(10<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>在PBS l 5毫克/毫升)被添加到井中。4 h孵化后,介质被并添加DMSO溶液溶解甲瓒生产的细胞。甲瓒溶液的光密度测量标在570海里。测试样品被认为是细胞毒性的光密度处理组的不到80%,在控制(vehicle-treated)组。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec3.5"> <title>3.5。神经保护作用的确定在H <子> < /订阅> O <子> 2 < /订阅>,Glutamate-Induced细胞损伤</gydF4y2Batitle> <sec id="sec3.5.1"> <title>3.5.1。适当浓度的测定H <子> < /订阅> O <子> 2 < /订阅>和谷氨酸</gydF4y2Batitle> <p>RJH决心对人类神经母细胞瘤的神经保护效应SH-SY5Y细胞损伤引起的H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>和谷氨酸。30% H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>解决方案(相当于9.794)被稀释在磷酸盐(PBS;美国Sigma-Aldrich)获得各种浓度的25岁,50岁,100,200,300,400,500<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>m .然后,每个浓度添加到48 h培养SH-SY5Y细胞的数量<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M4"> <mml:mn> 3</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> ×</gydF4y2Bamml:mo> <mml:msup> <mml:mrow> <mml:mn> 10</gydF4y2Bamml:mn> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn> 4</gydF4y2Bamml:mn> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>细胞/厘米<gydF4y2Basup>2</gydF4y2Basup>。治疗细胞是不断培养24小时。control-treated细胞增加了PBS代替H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>。然后,细胞生存能力是决定使用MTT试验如前所述。H的浓度<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>允许50%的细胞生存选择进一步诱导细胞损伤。最优浓度谷氨酸导致50% SH-SY5Y细胞生存能力将用于诱导细胞损伤,和类似的方法进行H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>。谷氨酸溶液与PBS稀释得到不同浓度的1,10、25、50、75和100毫米和然后用于细胞感应。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec3.5.2"> <title>3.5.2。测定神经保护作用</gydF4y2Batitle> <p>针对H RJH的神经保护作用<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>——glutamate-induced细胞损伤与培养SH-SY5Y测试的数量<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M5"> <mml:mn> 3</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> ×</gydF4y2Bamml:mo> <mml:msup> <mml:mrow> <mml:mn> 10</gydF4y2Bamml:mn> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn> 4</gydF4y2Bamml:mn> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>细胞/厘米<gydF4y2Basup>2</gydF4y2Basup>48小时。治疗分为两组,cotreatment和预处理。在cotreatment RJH样本添加适当浓度的H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>或谷氨酸溶液进入细胞而在预处理RJH样本添加到细胞和孵化37°C下5%的股份有限公司<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>条件6小时前添加H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>谷氨酸或解决方案;然后,治疗细胞继续培养24小时。细胞的生存能力是通过MTT试验评估。的最终浓度H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>和200毫米和50毫米的谷氨酸,分别被用来诱导细胞损伤。的最终浓度Flavourzyme-treated RJH用于治疗细胞是200年<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>g蛋白/毫升。</pgydF4y2Ba> </sec> </sec> <sec id="sec3.6"> <title>3.6。行为研究在动物研究的决心</gydF4y2Batitle> <sec id="sec3.6.1"> <title>3.6.1。动物</gydF4y2Batitle> <p>成年雄性Wistar鼠(250 - 300克,8周大)是来自野村暹罗国际有限公司,有限公司和被安置在每笼组5标准的金属笼子<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M6"> <mml:mn> 22</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> ±</gydF4y2Bamml:mo> <mml:msup> <mml:mrow> <mml:mn> 2</gydF4y2Bamml:mn> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> °</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mtext> C</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>12:12 h认知神经科学实验室的光暗周期。所有的动物提供食物和水<gydF4y2Baitalic> 随意</gydF4y2Baitalic>。实验进行,以减少动物痛苦按照国际公认原则实验室使用和护理机构的动物保健和使用委员会Burapha大学、泰国(26/2562)。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec3.6.2"> <title>操作。实验协议设计</gydF4y2Batitle> <p>在动物的研究中,我们采用的方法Kaewkaen et al。<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B13"> 13</gydF4y2Baxref>]。所有的老鼠被随机分为5组。每组包含8老鼠。</pgydF4y2Ba> <p>组1:vehicle-treated组:动物在这个组服用丙二醇(PG)</pgydF4y2Ba> <p>组2:积极control-treated组:阳性对照组与标准治疗药物用于治疗相关的条件。阳性对照组在治疗多奈哌齐(安理申®,胆碱酯酶抑制剂)剂量的1毫克/公斤</pgydF4y2Ba> <p>3 - 5组:治疗组:动物与RJH各剂量组治疗3 - 5从10,50到100毫克/公斤,分别通过口服途径管理两周每天一次在整个实验周期和诱导大脑中动脉闭塞后两周</pgydF4y2Ba> </sec> </sec> <sec id="sec3.7"> <title>3.7。体内<斜体> < /斜体>对血管性痴呆的评价</gydF4y2Batitle> <p>在本部分中,老鼠接受了外科手术诱导大脑中动脉闭塞(MCAO)模拟血管性痴呆。局灶性脑缺血诱导的执行根据巴隆等的修改方法。<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B14"> 14</gydF4y2Baxref>]。总之,老鼠与硫喷妥钠麻醉剂量50毫克/公斤体重。右颈总动脉和颈外动脉通过下腹正中颈部切口,暴露的结扎步骤。一个涂硅尼龙单丝(4 - 0)缝合(USS DGTM缝合线;泰科医疗集团,美国康涅狄格)以其尖端圆角通过加热火焰附近插入颈总动脉的arteriectomy略低于颈动脉分叉然后先进到颈内动脉大约17 - 18毫米远端颈动脉分叉到轻微的抵抗。阻塞大脑前动脉的起源、大脑中动脉、后动脉是沟通从而实现。然后,伤口缝合;老鼠回到笼子里有免费的食物和水。切口网站渗透有10%聚乙烯吡咯酮碘消毒手术后护理的解决方案。</p> <sec id="sec3.7.1"> <title>3.7.1。莫里斯评估认知功能的水迷宫(微波加工)</gydF4y2Batitle> <p>动物空间记忆的测试通过水迷宫测试(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B15"> 15</gydF4y2Baxref>]。170厘米直径的装置是一个池填满自来水40厘米深,水面是无毒粉末覆盖着。池被划分为四个象限,可逃避平台放置在中心的一个象限水位以下。对动物来说,平台的位置是整个培训看不见它,它仍然在那里。动物们必须记住环境线索来定位平台。每个动物都放置在开始象限中的水,并允许游泳,直到它找到并爬上平台。每个老鼠都面临的水轻轻地放在池壁的四个起点沿着周长的游泳池,和动物被允许游泳,直到它找到并爬上平台。在训练期间,河鼠轻轻放置在平台时不能达到60秒的平台。在这两种情况下,平台上的主题是左15秒,然后从池中删除。动物到达的时间隐藏平台记录为逃避延迟或收购。 Approximately twenty-four hours later, each animal was subjected to the identical conditions as before with the exception of the removal of the submerged platform. This study also assessed the amount of time that each animal spent swimming in the quadrant that had previously housed the submerged platform also known as retention time.</p> </sec> <sec id="sec3.7.2"> <title>3.7.2章。认知功能的评估摇臂迷宫(RAM)</gydF4y2Batitle> <p>摇臂迷宫是一个装置组成的圆形中心室8等距的扩展(武器)。每个部门都是一个细长的列相等的距离。短期工作参考记忆检查大鼠使用摇臂与八臂迷宫(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M7"> <mml:mn> 9</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mtext> </mml:mtext> <mml:mtext> 厘米</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> ×</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 63年</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mtext> </mml:mtext> <mml:mtext> 厘米</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>)来自中央平台(30厘米宽八角)。奖励杯包含一个蔗糖丸是位于每个臂的末端。每个老鼠都单独放置在内存每天7天,并允许探索迷宫,直到所有八个手臂被访问或直到6分钟过期。这次收购完成的培训期间,所有的动物都完成了迷宫小于1的工作显示错误返回到之前访问过的手臂在同一试验(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B16"> 16</gydF4y2Baxref>]。</pgydF4y2Ba> </sec> </sec> <sec id="sec3.8"> <title>3.8。体内<斜体> < /斜体>乙酰胆碱酯酶测定</gydF4y2Batitle> <p>RJH-treated老鼠都牺牲了,然后,大脑被孤立,在冰桶。然后,海马体的组织均质与玻璃4卷1.15%氯化钾Potter-Elvehjem均质器。疼痛使用比色法[执行分析<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B12"> 12</gydF4y2Baxref>与一些细微的修改。海马体是均质0.1磷酸盐缓冲剂,pH值8.0。反应混合物由2.6毫升的0.1米磷酸缓冲pH值8.0,0.4毫升整除的匀浆和0.1毫升0.01 dithiobisnitrobenzoic酸(DTNB)。衬底0.075 acetylthiocholine碘化增加,吸光度的变化是指出每2分钟10分钟用分光光度计在412海里。每毫克疼痛活动表示为微克分子水解蛋白的组织(<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>摩尔/毫克蛋白)。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec3.9"> <title>3.9。统计分析</gydF4y2Batitle> <p>数据进行方差分析(方差分析)和邓肯的多个测试范围。SPSS统计程序(16.0版)是用于数据分析。统计显著性进行了测试<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M8"> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>。</pgydF4y2Ba> </sec> </sec> <sec id="sec4"> <title>4所示。结果与讨论</gydF4y2Batitle> <sec id="sec4.1"> <title>4.1。体外<斜体> < /斜体>乙酰胆碱酯酶抑制RJH</gydF4y2Batitle> <p>筛选最优RJH神经活动,消化条件的乙酰胆碱酯酶(疼痛)抑制剂筛选工具(iace - 100)快速比色检测Ellman方法的改性方法(1961)。多奈哌齐(疼痛抑制剂)被用作积极控制(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B17"> 17</gydF4y2Baxref>]。疼痛负责加速分解乙酰胆碱的突触大脑内部空间。乙酰胆碱是一种重要的神经递质为人类记忆和认知功能如果这种神经递质减少导致痴呆,如阿尔茨海默病(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B18"> 18</gydF4y2Baxref>]。</pgydF4y2Ba> <p>最优消化条件包括水解酶类型和时间疼痛抑制活动显示在图<gydF4y2Baxref ref-type="fig" rid="fig1"> 1</gydF4y2Baxref>。结果表明,RJH Flavourzyme处理显著抑制疼痛的能力高于RJH接受Alcalase和Protamax水解时间240 - 360分钟。Flavourzyme-treated RJH表现出疼痛的抑制百分比24 - 26%,这是最有效的抑制。然而,对疼痛抑制肽的能力在RJH不到积极的控制、多奈哌齐,显示疼痛抑制约98%。有大量的来自不同来源的天然多肽具有积极影响神经退行性预防措施和治疗方法通过疼痛抑制活动包括陆地的动物多肽、植物肽、海洋肽和有毒的两栖动物肽(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B19"> 19</gydF4y2Baxref>]。体内的一种肽Ziziphus jujuba水果是追究其抑制活性对疼痛和butyrylcholinesterase (BChE)酶以及抗氧化活性<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B20"> 20.</gydF4y2Baxref>]。最近,大麻种子肽针对疼痛抑制酶的玉米胚芽蛋白酶解物获得使用六个不同的蛋白酶。胃蛋白酶麻籽多肽显示更高的疼痛抑制效应(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B21"> 21</gydF4y2Baxref>]。之后,乙酰胆碱酯酶抑制活性(疼痛)pepsin-produced大麻种子蛋白玉米胚芽蛋白酶解物(HPH)是增强通过反相高效液相色谱法分离之后,鉴定肽序列中最活跃的部分。低分子量肽的HPH由主要< 11个氨基酸残基,主要包含至少一种疏水性氨基酸(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B22"> 22</gydF4y2Baxref>]。有识别polysaccharide-peptide复杂的疼痛从蘑菇抑制活动<gydF4y2Baitalic> 蛹虫草</gydF4y2Baitalic>(CPSP)和疼痛抑制特性的描述<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B23"> 23</gydF4y2Baxref>]。鳀鱼蛋白玉米胚芽蛋白酶解物(aph)显示抗氧化活性和疼痛抑制活动,和体内小鼠试验表明,所有aph展出memory-improving行动scopolamine-induced健忘小鼠(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B24"> 24</gydF4y2Baxref>]。惠普的疼痛抑制性能- 1935,一种自然肽从阿根廷青蛙的皮肤分泌物中提取(<gydF4y2Baitalic> Boana pulchella</gydF4y2Baitalic>),进行了研究[<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B25"> 25</gydF4y2Baxref>]。此外,据报道合成肽展览anti-AChE活动如八肽与催化阴离子交互网站(CAS)疼痛的酶,抑制疼痛活动(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B26"> 26</gydF4y2Baxref>]。另一项研究显示,五肽酰胺酯类似物的加兰他敏,广告的医学<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B27"> 27</gydF4y2Baxref>]。</pgydF4y2Ba> <fig id="fig1"> <label>图1</gydF4y2Balabel> <p>乙酰胆碱酯酶的抑制能力三个enzyme-treated蜂王浆玉米胚芽蛋白酶解物。不同字母代表值明显不同(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M9"> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>)相比,积极控制和不水解的团体。</pgydF4y2Ba> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.001"></graphic> </fig> </sec> <sec id="sec4.2"> <title>4.2。神经保护作用对H RJH <子> < /订阅> O <子> 2 < /订阅>,Glutamate-Induced细胞损伤</gydF4y2Batitle> <p>SH-SY5Y细胞被用来评估的cytoprotective效果Flavourzyme-treated RJH对氧化应激损伤。首先,SH-SY5Y细胞治疗各种RJH最终浓度在0 - 500<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>g蛋白/毫升通过MTT试验评估其潜在毒性效应。结果表明,RJH没有细胞毒性效应的最终浓度高达500<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>g蛋白/毫升(图<gydF4y2Baxref rid="fig2a" ref-type="fig"> 2(一个)</gydF4y2Baxref>)。SH-SY5Y细胞生存能力通过MTT分析也确定了合适的浓度<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>并在不同浓度如图谷氨酸<gydF4y2Baxref rid="fig2b" ref-type="fig"> 2 (b)</gydF4y2Baxref>和<gydF4y2Baxref rid="fig2c" ref-type="fig"> 2 (c)</gydF4y2Baxref>;结果显示,如H的浓度<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>和谷氨酸,增加细胞活力降低,继续下降到低于50%浓度时,超过200人<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>M为H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>和谷氨酸的50 mM。为了看到RJH肽能够保护细胞损伤的影响之后,200年的最终浓度<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>M H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>选择和50毫米谷氨酸诱导的氧化损伤细胞RJH最终浓度为200<gydF4y2Baitalic> μ</gydF4y2Baitalic>g蛋白/毫升。图<gydF4y2Baxref rid="fig2d" ref-type="fig"> 2 (d)</gydF4y2Baxref>表明SH-SY5Y细胞使用RJH之前被H暴露于氧化应激<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>或谷氨酸比SH-SY5Y幸存细胞cotreated RJH和暴露于氧化应激的H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>或谷氨酸。结果表明,RJH肽可以恢复细胞活力的降低H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>——glutamate-induced细胞损伤。</pgydF4y2Ba> <fig-group id="fig2"> <label>图2</gydF4y2Balabel> <p>Cytoprotective神经活动Flavourzyme-treated RJH在第240分钟水解预处理和过氧化氢,cotreatment glutamate-induced SH-SY5Y细胞损伤。(一)RJH的影响,(b) H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>,(c)谷氨酸SH-SY5Y细胞生存能力和(d)的保护RJH H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>- - - glutamate-induced孵化24小时后细胞损伤。不同字母代表值明显不同(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M10"> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>)。</pgydF4y2Ba> <fig id="fig2a"> <label>(一)</gydF4y2Balabel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.002a"></graphic> </fig> <fig id="fig2b"> <label>(b)</gydF4y2Balabel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.002b"></graphic> </fig> <fig id="fig2c"> <label>(c)</gydF4y2Balabel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.002c"></graphic> </fig> <fig id="fig2d"> <label>(d)</gydF4y2Balabel> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.002d"></graphic> </fig> </fig-group> </sec> <sec id="sec4.3"> <title>4.3。通过微波加工认知加强型RJH效果</gydF4y2Batitle> <p>RJH在空间记忆的影响,hippocampal-dependent记忆,决心使用莫里斯水迷宫测试(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B15"> 15</gydF4y2Baxref>]。老鼠接受车辆多奈哌齐(1毫克/公斤)或RJH在不同剂量从10,50岁,通过口服100毫克/公斤的路线。老鼠的逃脱延迟决定在莫里斯水迷宫测试后30分钟内物质管理,24小时后,他们还暴露在相同的测试和保留时间确定,如图<gydF4y2Baxref rid="fig3" ref-type="fig"> 3</gydF4y2Baxref>和<gydF4y2Baxref rid="fig4" ref-type="fig"> 4</gydF4y2Baxref>。</pgydF4y2Ba> <fig id="fig3"> <label>图3</gydF4y2Balabel> <p>RJH逃脱延迟时间的影响的健康状况良好。老鼠车处理、多奈哌齐或RJH各剂量从10,50岁,通过口服100毫克/公斤体重14天的路线;然后,他们逃离延迟时间决心在莫里斯水迷宫测试。测试后30分钟内进行物质管理。数据了<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M11"> <mml:mtext> 的意思是</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> ±</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 扫描电镜</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M12"> <mml:mi> n</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> =</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 8</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> /</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 集团</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M13"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated组。</pgydF4y2Ba> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.003"></graphic> </fig> <fig id="fig4"> <label>图4</gydF4y2Balabel> <p>健康状况的RJH对保留时间的影响。老鼠车处理、多奈哌齐或RJH各剂量从10,50到100毫克/公斤体重。数据了<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M14"> <mml:mtext> 的意思是</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> ±</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 扫描电镜</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M15"> <mml:mi> n</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> =</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 8</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> /</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 集团</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M16"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated组;<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M17"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M18"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.001</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated组。</pgydF4y2Ba> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.004"></graphic> </fig> <p>目前的结果表明,donepezil-treated老鼠明显减少逃脱延迟两单管理和7天的治疗后(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M19"> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>与对照组相比,)。有趣的是,老鼠接受RJH剂量还显示显著减少逃脱后延迟两个单一管理局(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M20"> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>所有,而治疗的对照组)和14天显示50和100毫克/公斤(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M21"> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>与对照组相比,)。</pgydF4y2Ba> <p>RJH在空间记忆的影响VD条件由MCAO决心使用莫里斯水迷宫测试。老鼠接受车辆多奈哌齐(1毫克/公斤)或RJH在不同剂量从10,50岁,通过口服100毫克/公斤的路线。老鼠的逃脱延迟决定在莫里斯水迷宫测试后30分钟内物质管理,24小时后,他们还暴露在相同的测试和保留时间确定,如图<gydF4y2Baxref rid="fig5" ref-type="fig"> 5</gydF4y2Baxref>和<gydF4y2Baxref rid="fig6" ref-type="fig"> 6</gydF4y2Baxref>。</pgydF4y2Ba> <fig id="fig5"> <label>图5</gydF4y2Balabel> <p>RJH逃脱延迟时间在中风的影响条件。老鼠车处理、多奈哌齐或RJH各剂量从10,50岁,通过口服100毫克/公斤体重14天的路线;然后,他们逃离延迟时间决心在莫里斯水迷宫测试。测试后30分钟内进行物质管理。数据了<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M22"> <mml:mtext> 的意思是</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> +</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 扫描电镜</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M23"> <mml:mi> n</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> =</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 8</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> /</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 集团</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M24"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated组。</pgydF4y2Ba> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.005"></graphic> </fig> <fig id="fig6"> <label>图6</gydF4y2Balabel> <p>中风的RJH对保留时间的影响条件。老鼠车处理、多奈哌齐或RJH各剂量从10,50到100毫克/公斤体重。数据了<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M25"> <mml:mtext> 的意思是</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> ±</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 扫描电镜</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M26"> <mml:mi> n</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> =</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 8</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> /</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 集团</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M27"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated组;<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M28"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.01</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M29"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.001</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated组。</pgydF4y2Ba> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.006"></graphic> </fig> <p>结果表明donepezil-treated老鼠明显减少逃脱延迟两个政府MCAO后7天的治疗后(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M30"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.01</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M31"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.001</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated集团)。大鼠治疗与RJH逃跑的剂量还显示显著减少延迟在MCAO后14天(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M32"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.01</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M33"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.001</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated集团)。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec4.4"> <title>4.4。认知加强型效应RJH的RAM</gydF4y2Batitle> <p>调查的影响是否RJH(10、50和100毫克/公斤)影响记忆形成空间,摇臂迷宫中的老鼠进一步评估任务,表明RJH显著提高工作记忆在单剂,7和14天的管理局(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M34"> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>)与vehicle-treated组,如图<gydF4y2Baxref rid="fig7" ref-type="fig"> 7</gydF4y2Baxref>和<gydF4y2Baxref rid="fig8" ref-type="fig"> 8</gydF4y2Baxref>。</pgydF4y2Ba> <fig id="fig7"> <label>图7</gydF4y2Balabel> <p>RJH的影响时间获取食物的健康状况良好。老鼠车处理、多奈哌齐或RJH各剂量从10,50到100毫克/公斤体重。数据了<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M35"> <mml:mtext> 的意思是</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> +</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 扫描电镜</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M36"> <mml:mi> n</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> =</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 8</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> /</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 集团</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M37"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M38"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.01</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated组。</pgydF4y2Ba> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.007"></graphic> </fig> <fig id="fig8"> <label>图8</gydF4y2Balabel> <p>RJH时间获取食物的影响状况中风。老鼠车处理、多奈哌齐或RJH各剂量从10,50到100毫克/公斤体重。数据了<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M39"> <mml:mtext> 的意思是</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> +</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 扫描电镜</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M40"> <mml:mi> n</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> =</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 8</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> /</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 集团</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M41"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M42"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.01</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated组。</pgydF4y2Ba> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.008"></graphic> </fig> </sec> <sec id="sec4.5"> <title>4.5。在海马体RJH对疼痛的影响活动</gydF4y2Batitle> <p>老鼠接受车辆或多奈哌齐RJH 10的剂量,50和100毫克/公斤通过口服一周,Rt.MCAO执行。然后,老鼠被牺牲在海马体确定疼痛的活动活动。数据显示,所有剂量的RJH减少疼痛活动在海马区,如图<gydF4y2Baxref rid="fig9" ref-type="fig"> 9</gydF4y2Baxref>。</pgydF4y2Ba> <fig id="fig9"> <label>图9</gydF4y2Balabel> <p>RJH的影响在海马乙酰胆碱酯酶酶活性的改变。老鼠车处理、多奈哌齐或RJH各剂量从10,50到100毫克/公斤体重。数据了<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M43"> <mml:mtext> 的意思是</gydF4y2Bamml:mtext> <mml:mo> +</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 扫描电镜</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>(<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M44"> <mml:mi> n</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> =</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 8</gydF4y2Bamml:mn> <mml:mo> /</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mtext> 集团</gydF4y2Bamml:mtext> </mml:math> </inline-formula>)。<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M45"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.05</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M46"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mrow> <mml:mo> ∗</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:mrow> </mml:msup> <mml:mi> p</gydF4y2Bamml:mi> <mml:mo> <</gydF4y2Bamml:mo> <mml:mn> 0.01</gydF4y2Bamml:mn> </mml:math> </inline-formula>相比之下,vehicle-treated组。</pgydF4y2Ba> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/ijfs/2021/2213814.fig.009"></graphic> </fig> </sec> </sec> <sec id="sec5"> <title>5。讨论</gydF4y2Batitle> <p>过氧化氢和过多的谷氨酸兴奋性神经递质)被称为神经毒素导致氧化应激的生产过量的活性氧(ROS) (<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B28"> 28</gydF4y2Baxref>- - - - - -<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B30"> 30.</gydF4y2Baxref>]。ROS的被认为是细胞损伤的一个重要原因导致各种神经退行性疾病,如阿尔茨海默病和帕金森病(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B31"> 31日</gydF4y2Baxref>,<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B32"> 32</gydF4y2Baxref>]。细胞可能由抗氧化系统免受氧化损伤。在一些研究中,据报道,从天然产物活性化合物作为抗氧化剂在神经元细胞。神经保护作用的玉米胚芽蛋白酶解物和缩氨酸已经证明。相似的结果显示在这项研究中,从H RJH减少细胞死亡<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>——glutamate-induced细胞损伤。张等人的研究。<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B33"> 33</gydF4y2Baxref>)报道,从乳清蛋白水解物的神经保护效应增加氢peroxide-induced下PC12细胞损伤的可行性。确定了这两种抗氧化肽和家蝇alcalase水解物的特征(<gydF4y2Baitalic> 有我</gydF4y2Baitalic>蛹。活性肽能有效保护PC12细胞氧化损伤引起的过氧化氢通过减少细胞内活性氧和malonaldehyde复苏细胞线粒体膜电位和增加细胞内超氧化物歧化酶的活性指导下abt阳离子自由基清除活性(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B34"> 34</gydF4y2Baxref>]。抗氧化肽来源于核桃粉蛋白质和通过胃肠道消化显示abt自由基清除活性和分析上也表现出显著的保护作用SH-SY5Y细胞免受氧化损伤(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B35"> 35</gydF4y2Baxref>]。不到3 kDa和10 kDa肽分数商业酶水解得到的高级神经活动和抗氧化活动氢peroxide-treated SH-SY5Y细胞,不影响细胞毒性。此外,< 3 kDa肽分数降低DNA碎片和活性氧生成和超氧化物歧化酶活性和过氧化氢酶水平增加H<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>O<gydF4y2Basub>2</gydF4y2Basub>对待SH-SY5Y细胞。两个肽分数显示强大的抗氧化活动2,2<gydF4y2Bainline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M47"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′</gydF4y2Bamml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic酸)联胺盐、铁螯合,还原能力测试(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B36"> 36</gydF4y2Baxref>]。最近,一个<gydF4y2Baitalic> 在活的有机体内</gydF4y2Baitalic>研究报道,40寡肽(19二肽、三肽,12个四肽,6五肽1 hexapeptide,和1 heptapeptide)确定从海参展出空间记忆和学习的提高;体外作用包括抑制MDA和蛋白质氧化羰基和巯基等抗氧化酶(SOD和氧化酶)(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B37"> 37</gydF4y2Baxref>]。</pgydF4y2Ba> <p>莫里斯水迷宫行为评估中使用最广泛的任务之一的啮齿动物研究空间学习和记忆的神经机制。在这项研究中,它是证明RJH可以显著减少逃避延迟时间和增加保留时间在莫里斯水迷宫测试,此外,乙酰胆碱酯酶活性降低的程度与vehicle-treated集团相比。结果与之前的研究一致表明,长期口服RJH诱发的动物受伤的有利影响,icv-STZ注入,增加工作空间记忆的保留时间(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B10"> 10</gydF4y2Baxref>]。RJH时间获取食物的影响在健康状况评估在摇臂迷宫显示RJH能阻止诱导赤字老鼠的记忆力,作为诱导的动物表现出更好的性能在Rt.MCAO VaD和减少疼痛大脑的海马组织的活动。最近的一项研究报告的影响RJ和/或其组件的寿命/健寿在各物种通过评估最相关的研究。此外,RJ对健康的积极作用维护和与年龄相关的疾病是评估(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B38"> 38</gydF4y2Baxref>]。</pgydF4y2Ba> <p>在大脑中动脉闭塞的影响涉及认知能力下降和发展为痴呆报道(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B39"> 39</gydF4y2Baxref>]。痴呆的严重程度可能取决于脑动脉损伤的位置和大小。证据支持和描述两种最常见的形式的老年性痴呆阿尔茨海默病和血管性痴呆。在血管性痴呆有关不同的血管机制包括缺血性中风或脑部出血,临床表现包括记忆丧失、混乱和执行功能障碍,障碍的运动控制,可能导致中风(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B40"> 40</gydF4y2Baxref>]。血管性痴呆的致病途径仍然阐明,但许多研究描述,胆碱能通路起到降低乙酰胆碱生产和影响卒中后认知障碍。许多研究发现,胆碱能系统的损伤涉及到大脑皮层和海马区(<gydF4y2Baxref ref-type="bibr" rid="B41"> 41</gydF4y2Baxref>]。生物活性化合物的丰富内容RJH多样化的健康发挥福利的生物通路。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec id="sec6"> <title>6。结论</gydF4y2Batitle> <p>总之,一个<gydF4y2Baitalic> 在体外</gydF4y2Baitalic>获得的分析表明,RJH enzymatic-treated蜂王浆导致活性低变应原的肽显示疼痛抑制活动。在细胞培养实验中,RJH发挥神经保护作用,增加细胞生存能力对氧化压力诱导神经母细胞瘤细胞损伤。在<gydF4y2Baitalic> 在活的有机体内</gydF4y2Baitalic>鼠模型,RJH显著提高内存性能在莫里斯水迷宫测试和摇臂迷宫。RJH也能减少海马乙酰胆碱酯酶活动的水平。综上所述,RJH是潜在的神经和认知增强剂和监督。</pgydF4y2Ba> </sec> <back> <sec sec-type="data-availability"> <title>数据可用性</gydF4y2Batitle> <p>的数据支持本研究的发现可以在请求从相应的作者。</pgydF4y2Ba> </sec> <sec sec-type="COI-statement"> <title>的利益冲突</gydF4y2Batitle> <p>作者宣称没有利益冲突有关的出版。</pgydF4y2Ba> </sec> <ack> <title>确认</gydF4y2Batitle> <p>这项工作是由政府财政支持的预算拨款(CRP6205030750),农业研究发展机构(社会团体),泰国。</pgydF4y2Ba> </ack> <ref-list> <ref id="B1" content-type="book"> <label>1</gydF4y2Balabel> <element-citation publication-type="book"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 大厅</gydF4y2Basurname> <given-names> j·E。</ggydF4y2Baiven-names> </name> <name> <surname> 盖顿</gydF4y2Basurname> <given-names> a . C。</ggydF4y2Baiven-names> </name> </person-group> <source> <italic> 医学生理学教科书</gydF4y2Baitalic> <year> 2011年</gydF4y2Bayear> <edition> 12日</gydF4y2Baedition> <publisher-loc> 美国费城,宾夕法尼亚州</pgydF4y2Baublisher-loc> <publisher-name> 桑德斯/爱思唯尔</pgydF4y2Baublisher-name> </element-citation> </ref> <ref id="B2" content-type="article"> <label>2</gydF4y2Balabel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Duong</gydF4y2Basurname> <given-names> 年代。</ggydF4y2Baiven-names> </name> <name> <surname> 帕特尔</gydF4y2Basurname> <given-names> T。</ggydF4y2Baiven-names> </name> <name> <surname> 常</gydF4y2Basurname> <given-names> F。</ggydF4y2Baiven-names> </name> </person-group> <article-title> 痴呆</gydF4y2Baarticle-title> <source> <italic> 加拿大药剂师期刊/ Revue des药剂师du加拿大</gydF4y2Baitalic> <year> 2017年</gydF4y2Bayear> <volume> 150年</gydF4y2Bavolume> <issue> 2</gydF4y2Baissue> <fpage> 118年</gydF4y2Bafpage> <lpage> 129年</gydF4y2Balpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1177 / 1715163517690745</pgydF4y2Baub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 85015737750</pgydF4y2Baub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B3" content-type="article"> <label>3</gydF4y2Balabel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 嚎叫</gydF4y2Basurname> <given-names> G。</ggydF4y2Baiven-names> </name> </person-group> <article-title> 更新老化的线粒体自由基理论:一个集成的观点,关键方面,混淆概念</gydF4y2Baarticle-title> <source> <italic> 抗氧化剂和氧化还原信号</gydF4y2Baitalic> <year> 2013年</gydF4y2Bayear> <volume> 19</gydF4y2Bavolume> <issue> 12</gydF4y2Baissue> <fpage> 1420年</gydF4y2Bafpage> <lpage> 1445年</gydF4y2Balpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1089 / ars.2012.5148</pgydF4y2Baub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 84885217983</pgydF4y2Baub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B4" content-type="article"> <label>4</gydF4y2Balabel> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 大马哈鱼</gydF4y2Basurname> <given-names> 答:B。</ggydF4y2Baiven-names> </name> <name> <surname> 理查森</gydF4y2Basurname> <given-names> 一个。</ggydF4y2Baiven-names> </name> <name> <surname> 佩雷斯</gydF4y2Basurname> <given-names> 诉我。</ggydF4y2Baiven-names> </name> </person-group> <article-title> 更新老化的氧化应激理论:氧化应激在老化中发挥作用或健康老化?</gydF4y2Baarticle-title> <source> <italic> 自由基生物学和医学</gydF4y2Baitalic> <year> 2010年</gydF4y2Bayear> <volume> 48</gydF4y2Bavolume> <issue> 5</gydF4y2Baissue> <fpage> 642年</gydF4y2Bafpage> <lpage> 655年</gydF4y2Balpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1016 / j.freeradbiomed.2009.12.015</pgydF4y2Baub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - 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