IJCB 国际细胞生物学杂志》上 1687 - 8884 1687 - 8876 Hindawi出版公司 674753年 10.1155 / 2014/674753 674753年 研究文章 链接器组蛋白H1.2是一个中间的凋亡反应细胞因子在T-Effectors剥夺 Garg 此举使 1、2 Perumalsamy 拉克希米·R。 1、3 Shivashankar g . V。 4 http://orcid.org/0000 - 0003 - 0851 - 4818 萨林 之一Apurva 1 Giampietri 克劳迪亚 1 国家生物科学中心 Bellary路 班加罗尔 卡纳塔克邦560065 印度 ncbs.res.in 2 生物技术部门 迈索尔大学 迈索尔 卡纳塔克邦570005 印度 uni-mysore.ac.in 3 生物技术部门 印度理工学院的马德拉斯 钦奈 泰米尔纳德邦600036 印度 iitm.ac.in 4 力学生物学研究所 新加坡国立大学 新加坡 117411年 nus.edu.sg 2014年 13 2 2014年 2014年 03 11 2013年 03 01 2014年 05年 01 2014年 13 2 2014年 2014年 版权©2014此举加戈et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

组织体内平衡是一个动态的过程涉及扩散和消除冗余或受损细胞。这是为协调deletion-triggered通过限制营养因子/细胞因子在细胞外的环境有区别的T细胞过度繁殖哺乳动物的免疫反应。然而,细胞外信号的感知和转导机制触发凋亡仍然不完全理解。T-effectors生存依赖于细胞因子和凋亡细胞因子撤军。这里我们报告leptomycin B (LMB),核出口机械的抑制剂,保护T-effectors从细胞凋亡暗示凋亡通路中的核中间。证据了,链接器组蛋白H1.2定位到细胞质,监管机制敏感LMB,激活凋亡信号最终核和线粒体损伤T-effectors针对细胞因子不足。H1.2检测到在一个复杂的proapoptotic线粒体居民贝克及其亚细胞定位由Jun-N-terminal激酶(物),一个中间在T-effectors凋亡级联。这些数据表明,代谢压力可能影响H1.2线粒体动力学支持其活性,从而功能作为t效应细胞凋亡的分子开关。

 1。介绍

细胞分裂和分化获得不同的细胞在多细胞生物的命运。然而,分化和增殖平衡的程序删除多余的或受损的细胞,是组织内稳态的关键。核心元素的细胞机制调节细胞死亡是保存在不同的类群 1),至少有两个主要的通路调节细胞凋亡在哺乳动物细胞中描述。信号级联中的活动发起的TNFR(肿瘤坏死因子受体)总科构成外在途径( 2]。的内在途径被激活线粒体代谢和基因毒性压力和集成,bcl - 2家族的成员,包括支持和凋亡成员成为这些反应的主要监管部门 1, 3, 4]。相声这两个通路之间是有据可查的。细胞死亡途径是不同的在开发和部署在成人组织如神经、生殖、免疫系统细胞凋亡过度繁殖,然后删除( 5- - - - - - 9]。限制竞争营养物质在细胞外环境是一种广泛流行机制调节细胞的数量( 10- - - - - - 12]。然而,感知机制细胞微环境的变化并不完全理解。

在这项研究中,我们试图解决这个问题在一个良好的模型系统,概括有区别的T细胞在细胞培养的缺失。成熟的T细胞室的特点是在细胞数量显著增加针对抗原的挑战,其次是最终消除antigen-reactive T效应细胞生成,循环重复整个成年生活和必要的免疫功能( 13, 14]。T-effectors免疫反应中生成依赖于细胞因子或营养吸收的营养因素和实验 在体外和 在活的有机体内模型系统表明,营养不足的凋亡反应是由活性氧(ROS)——表明收敛依赖的线粒体 15- - - - - - 18]。而t细胞依赖细胞因子和ROS-Bcl-2家族生存和凋亡信号轴,分别建立,感官的细胞机制和整合细胞外环境的变化仍无特征,形成本研究的重点。

核效应物启动凋亡信号的一个关键的角色在T-effectors以来,我们的实验表明阻断核出口机械保护细胞免于凋亡。建立在先前描述的角色链接器组蛋白H1.2在随后凋亡级联传播我们的空间动态链接器组蛋白H1.2 T-effectors同种型。我们的实验表明,核出口机械和物活动调节H1.2易位和活动T-effectors发生细胞凋亡。我们提供的证据H1.2交互bcl - 2家族proapoptotic蛋白质贝克和建议H1.2收敛线粒体在凋亡信号级联集成。它的角色在细胞凋亡由废除表示凋亡损伤后细胞因子反应不足H1.2 T-effectors消融。最后,我们的实验涉及到Jun-N-terminal激酶(物)在调节H1.2动态,提出一个更广阔的角色在组织内稳态信号级联。

 2。材料和方法 2.1。老鼠

C57BL / 6小鼠从杰克逊实验室(美国缅因州)获得和维护动物设施的国家生物科学中心(ncb),印度班加罗尔。操作涉及动物ncb机构动物伦理委员会的批准,班加罗尔,印度,和遵循规范委员会指定的控制和监督的目的动物实验(CPCSEA),印度政府。

 2.2。试剂

抗体被用于稀释表示,采购从下列来源:H1(1: 1000)和p38MAPK(1: 1000)从圣克鲁斯(圣克鲁斯,CA);如果从Chemicon (1: 500) (Billerica, MA);从欧洲Proteintech H1.2(1: 1000)(英国曼彻斯特);H3 (1: 500), H3Ac(1: 500),和HP1 α(1:1000)从北部生物技术(普莱西德湖,纽约); α肌动蛋白(1:500)和 α微管蛋白(1:250)从Neomarker (Fremont, CA);和贝克(1:1000),Cox-IV(1: 250),和p-JNK / SAPK(1: 500)从细胞信号技术(贝弗利,MA)。的shRNA质粒从Origene H1.2和紧急控制技术(马里兰州罗克维尔市)。TMRM(四甲基罗丹明甲酯)从σ(圣路易斯);Annexin-V alexafluor - 488从英杰公司(美国卡尔斯巴德);anacardic酸,leptomycin B, SP600125来自Calbiochem (CA)圣地亚哥。

 2.3。代T-Effectors

从脾脏T细胞分离6-8-week-old C57BL / 6小鼠,用鼠标免疫球蛋白涂磁(GAMT)珠子(美国内)或使用CD3 + T细胞隔离包(研发系统)。T-effectors生成所述[ 17]。简单地说,t细胞刺激使用 αcd3 / αcd28珠子(英杰公司)为2.0×106细胞/毫升或在某些情况下可溶性anti-CD3 (500 ng / mL,克隆2 c11;研发系统)为2.5×106被注入10 T细胞/毫升的文化4脾细胞附着。T-effectors 48小时后生成用于化验或继续在文化与1 μ克/毫升细胞因子白介素2(研发系统)24-36小时。激活建立了表达CD69、CD25以及形态学的改变和增加t细胞的大小 19]。

 2.4。细胞凋亡的检测

检测细胞因子的不足进行描述( 17]。0.4×106/毫升T-effectors清洗三次超过中、磷酸缓冲盐(PBS)删除绑定的细胞因子,然后继续在有或没有IL-7文化。细胞凋亡是化验后不同时间点细胞因子剥夺实验表明。化验的亚细胞分离、细胞通常是收获在6小时分析H1.2动力学和8小时的延迟时间点检查AIF的易位。在实验H1.2 AIF易位一起检查,样本收获在更早的时间点的6个小时。

评估凋亡核损伤,细胞被染3分钟了。赫斯特- 33342 (1 μg / mL)在环境温度和核形态在每个样本中至少200个细胞,利用现有的荧光显微镜配有紫外线过滤器。与Annexin-V染色,0.3×106T-effectors孵化了Annexin-V (1: 60/106细胞)在室温下15分钟,用PBS洗一次,添加后立即通过流式细胞术分析propidium碘。线粒体跨膜电位的评估,细胞被孵化50 nM mitochondria-specific染料,TMRM,在中等15分钟37°C,其次是两个温和洗PBS和立即通过流式细胞术分析。

 2.5。逆转录病毒感染

对小鼠逆转录病毒包装shRNA质粒,1 μ与1 g的DNA是cotransfected μ克pClEco(包装矢量)HEK293T细胞。48小时后,文化上层清液集中和用于感染t细胞由前所述协议( 17, 20.]。感染T细胞保持在RPMI完全培养基补充1 μg / mL - 2, 2 ng / mL IL-7, 1 μg / mL嘌呤霉素为3天。细胞被孤立使用聚蔗糖和继续生活在文化与前24小时被用于细胞因子- 2剥夺化验。蛋白质含量是评估免疫印迹分析。

 2.6。免疫印迹分析

0.3 - -0.5×106细胞细胞溶解在SDS裂解缓冲(2% SDS、甘油、溴酚蓝),1 M德勤,和1 M Tris-HCl pH值6.8补充,蛋白酶抑制剂cocktail-aprotinin,亮抑酶肽、胃酶抑素(2 μPMSF g / mL), 1毫米,1毫米的氟化钠,1毫米Na3签证官410分钟100°C。使用先前建立协议( 17, 20.),完整的细胞溶解产物被解决通过sds - page和转移到硝酸纤维素(通用电气医疗集团)和孵化一夜之间在4°C主要抗体浓度制造商推荐的。膜与TBS-Tween20接着洗了三次HRP-conjugated二级抗体(CST, 1: 1000稀释)为1小时沿膜是通过公开使用一个x射线胶片Amersham Hyperprocessor或ImageQuant拉斯维加斯4000年生物分子成像(通用电气医疗集团)。

 2.7。亚细胞分离

10×106T-effectors用于亚细胞分离协议( 21]。细胞质和核分数获得使用NE-PER核和胞质提取工具包(热科学)制造商的指示。等效的核和细胞质分数煮在SDS裂解缓冲进行免疫印迹分析。

 2.8。免疫沉淀反应

10×106T-effectors培养缺乏细胞因子的细胞溶解1小时在4°C 1%皮套裤裂解缓冲和蛋白酶抑制剂(2补充 μg / mL抑肽酶,亮抑酶肽抑肽素1毫米PMSF, 1毫米的氟化钠,1毫米Na3签证官4)。10 μL抗体被用于沉淀免疫复合物2小时在4°C使用G蛋白琼脂糖珠(皮尔斯生物技术)旋转。珠子与冰冷的PBS洗五次在SDS裂解缓冲1700 rpm,然后煮10分钟的免疫印迹分析。细胞质分数时用作输入IP, 20×106t细胞受到亚细胞分离如上所述,细胞质分数获得用于免疫沉淀反应。True-blot合(Ebioscience)已经被用于免疫印迹的贝克和H1.2。

 2.9。统计方法

图表显示所有数据作为平均数±标准差最小的三个独立的实验。统计学意义是使用两个人口学生的计算 t 测试,下面的置信区间:* * *分别持股99%和99.9%。

 3所示。结果 3.1。细胞凋亡在T-Effectors受核事件

t细胞增殖和分化抗原,产生lineage-committed效应器,大部分死亡,标志着终止的免疫反应 14]。这个过程可以重现的关键元素 在体外,允许调查t细胞凋亡的分子调控 16- - - - - - 18, 20., 21]。使用这个实验系统表明,细胞因子退出T-effectors触发凋亡损伤表现为核分裂和外化的磷脂酰丝氨酸(PS)细胞膜(数字 1(一)和 1 (b))。失去线粒体完整性是细胞发生凋亡胁迫的另一个特性是反映在空间黄素蛋白的再分配,如果(细胞凋亡诱导因子) 22]。如果是线粒体膜间隙居民蛋白质,也就是从线粒体释放由于损失外线粒体膜的完整性,并把核调解DNA损伤( 21, 23]。t细胞培养中细胞因子评估开始前剥夺协议(T0),如果检测到的细胞质分数与其定位线粒体(图一致 1 (c))。亚细胞分离的t细胞细胞因子表示,大量撤出后如果检测到的信号核分数(图 1 (d))。在这些分析中,我们还对分布的核异染色质绑定Hp1蛋白 α和线粒体基质居民Cox-IV建立纯洁的分数(数字 1 (c)- - - - - - 1 (e))。

LMB T-effectors剥夺阻断细胞因子诱导凋亡损伤。(一)——(b) 0.3 × 10 6 T-effectors是培养有或没有IL-7 (20 ng / ml)的车辆控制或LMB (0.003 ng / ml)。凋亡核子损害(a)和Annexin-V绑定(b)得分8 - 15小时后,分别。(b)中的虚线表示细胞在细胞因子。图显示了均值±SD从4实验。* * P < 0.001 。(c) - (e) 10 × 10 6 T-effectors培养在表示条件(T0:刚激活),8小时后细胞分级中描述的材料和方法。免疫印迹的核和细胞质分数获得探测,如果HP1 α,Cox-IV。数据是代表三个独立的试验。

Leptomycin B (LMB),一个块核出口Crm1抑制剂,大大减少凋亡损伤T-effectors(数字 1(一)和 1 (b)),暗示核中间级联中。LMB通常使用的浓度范围从0.3到10 ng / mL虽然低浓度也有效地阻止核出口( 24]。自0.3 ng / mL LMB毒性t细胞在文化中,我们测试了低浓度,发现0.03毫克/毫升或0.003 ng / mL LMB被T-effectors用细胞因子培养良好的耐受性。因为浓度也防止细胞凋亡与类似的功效(没有显示),使用低浓度的实验LMB已经使用在当前的研究中。如果在细胞培养的细胞因子的分布但LMB的存在(图 1 (e))是恢复到活细胞(图的模式 1 (c)),这表明LMB阻止线粒体外膜损伤,释放AIF的必要步骤。这些观察表明,核事件的早期影响,premitochondrial凋亡级联的步骤。链接器组蛋白H1.2已被证明会启动凋亡级联集成到线粒体,首次报道的不成熟的t细胞DNA损伤反应( 25]。激活H1.2依赖性凋亡信号与离原子核位移。因此,在后续的实验中,我们评估了细胞分布和可能H1.2参与t效应细胞凋亡。

 3.2。H1.2定位在T-Effectors发生细胞凋亡的变化

H1.2通常是在细胞核中发现的分析证明了核和细胞质分数的细胞培养条件,促进生存(图 2(一个))。这个分布相比,亚细胞分离后的细胞细胞因子撤军(6小时内剥夺协议)的特点是细胞质的H1.2池(图的外观 2 (b))。这个职位的易位H1.2在较早的时间点凋亡过程,之前公开的在实验条件下核损害的证据。线粒体的分布居民HP1蛋白Cox-IV和核蛋白质 α建立纯洁的细胞质和核分数,分别在这些化验。与抑制凋亡的核损害相一致,如果LMB是包含在cytokine-withdrawal条件,H1.2的分布是恢复到活细胞的模式,只有在细胞核中发现(图 2 (c))。评估的功能影响H1.2定位的变化,阐明其作用,如果有的话,在细胞凋亡,RNA干扰的方法被用来烧蚀H1.2 T-effectors函数。

H1.2是引发的凋亡级联的中间细胞因子不足。(一)——(c) 10 × 10 6 T-effectors培养在表示条件(T0:刚激活),6小时后亚细胞分离。免疫印迹H1.2核和细胞质分数被探测的HP1 α、贝克或Cox-IV。数据是代表三个独立的试验。(d) - (e) T-effectors转导使用逆转录病毒表达炒控制或组蛋白H1.2成分,如材料和所述方法,是培养有或没有细胞因子10个小时。对凋亡细胞中核损害使用赫斯特- 33342 (d)或使用TMRM线粒体跨膜电位(e)中描述的材料和方法。图表显示平均±标准差从5实验(d)和2 (e),实验规范化与细胞因子的文化。插图:免疫印迹H1.2蛋白和微管蛋白表达T-effectors(奇偶校验加载)成分。* P < 0.01 。

T-effectors使用逆转录病毒转导shRNA H1.2或炒控制和培养嘌呤霉素含介质,如材料和方法所述,为了丰富转染细胞( 17]。功效成分的损耗H1.2成立的(没有显示)和NIH3T3成纤维细胞系明显减少蛋白表达在T-effectors(图所示 2 (d)插图)。T-effectors对待炒或H1.2成分对细胞因子进行了评估不足的实验。与细胞转导炒成分,细胞与H1.2蛋白质水平降低受核子损害引发的细胞因子不足(图 2 (d))。为了评估如果失去H1.2也从线粒体损伤保护我们使用基于流式细胞术分析完整的细胞。线粒体跨膜电位的损失是一个敏感的指标受损细胞器和细胞发生细胞凋亡的特征。因此我们测试如果H1.2消融保护T-effectors从线粒体损伤引发的细胞因子不足。在这些实验中,线粒体活动的变化被评估的吸收电位染料TMRM。细胞表达控制相比,炒shRNA TMRM强度相当,细胞因子在细胞的存在与否的消融H1.2与防止死亡(图一致 2 (e))。这强烈表明,H1.2水平降低保护细胞免受损伤线粒体否则观察到细胞细胞因子提取的条件。我们没有观察到有害的影响H1.2损耗在细胞因子T-effectors继续在文化中,表示一个特定的角色H1.2凋亡刺激反应。这些数据定位H1.2易位和活动在一个步骤控制事件最终破坏线粒体功能和核T-effectors凋亡级联的完整性。

 3.3。H1.2 Associates T-Effectors Bak

H1.2报道本地化线粒体和参与涉及线粒体凋亡级联居民蛋白质贝克( 25, 26]。前面的章节中描述的实验表明,H1.2活动聚集在线粒体功能。因此,我们下一个测试贝克和H1.2 T-effectors在细胞因子之间的相互作用不足。immune-precipitation (IP)这些蛋白质是一个复杂的物理协会(图的证据 3(一个)),它被证实使用抗体识别H1家族的蛋白质或抗体特定H1.2(数字 3(一个)和 3 (b))。虽然溶菌产物用作输入IP分析postnuclear浮在表面的,我们确认核心组蛋白H3中没有检测到免疫沉淀反应复杂(IP)表明核的H1.2池不太可能在免疫印迹(图中发现 3(一个))。注意洗涤剂敏感性的bcl - 2家族蛋白( 27),这些实验使用温和的清洁剂皮套裤生成细胞溶解产物来评估这些交互。贝克和H1.2 t细胞之间的联系也证实了反向免疫沉淀反应(图 3 (c))。为了排除可能的污染与核蛋白质的免疫沉淀反应复杂,T-effectors剥夺(纯度的细胞质分数确定的排除核HP1蛋白 α)是用于免疫沉淀反应Bak。H1.2免疫沉淀反应在复杂贝克细胞质分数作为输入时,确认该协会发生原子核外(图 3 (d))。到目前为止的实验表明H1.2 T-effectors的凋亡反应的关键中间体。在以前的工作 17),层次交互涉及Jun-N-terminal激酶(物)已经证明调节t效应细胞凋亡。因此,在实验中,我们试图位置H1.2活动的上下文中premitochondrial中间体在T-effectors凋亡级联。

H1.2免疫沉淀反应,线粒体外膜居民T-effectors Bak。(一)——(b) 10 × 10 6 T-effectors培养没有细胞因子和6小时后免疫沉淀反应和抗体(IP)贝克。整个细胞溶解产物的免疫印迹(水控制法)或IP与抗体探测H1.2 H1抗体(a)或者一锅(b) α微管蛋白。(c)反向IP与抗体H1 T-effectors培养中描述(a) (b)和免疫印迹探测Bak。肌动蛋白的特异性控制。(d) 10 × 10 6 6小时T-effectors培养没有细胞因子和胞质亚细胞分离获得的分数中描述的材料和方法被用来输入IP贝克的抗体。代表免疫印迹H1的复杂的IP。 α微管蛋白的特异性控制。

 3.4。物活性调节H1.2 T-Effectors动力学

ROS-dependent的激活物调节deprivation-induced T-effectors细胞凋亡,凋亡级联在其他细胞类型( 17, 28]。因此我们要求如果物抑制T-effectors H1.2的易位。我们使用抑制剂调节物活动,SP610025,演示了在早期实验调节物活动T-effectors [ 17]。在分析核和细胞质分数,在文化SP610025添加开始剥夺协议,H1.2与控制细胞的分布,只发现在核分数(图 4(一))。早些时候确认报告和符合其影响H1.2的亚细胞定位,阻塞物(图 4 (b)(图)也保护t细胞凋亡的损害 4 (c))。越来越多的证据表明信号转导途径之间的相声和细胞的代谢状态,在证据表明代谢压力触发乙酰化作用,因此线粒体功能的变化( 29日- - - - - - 31日评估可能的监管,促使我们t效应细胞凋亡细胞乙酰化作用机制。

物调节H1.2 T-effectors位移。(一)代表免疫印迹的核和细胞质分数T-effectors培养没有细胞因子+ 100 nM SP600125 6小时。探索了免疫印迹H1.2抗体,HP1 α,用分数Cox-IV和控制生成的在以前的实验。数据显示是两个独立的试验的代表。(b)代表免疫印迹磷酸化在T-effectors培养物中描述(一)p38MAPK加载控制。(c)凋亡的核损害T-effectors培养有或没有细胞因子(IL-7)在车辆控制的存在与否或100海里SP600125 24小时。图显示了均值±SD从3实验。* * P < 0.001 。

 3.5。乙酰化依赖t效应细胞凋亡

证据被乙酰化作用的蛋白质的传统染色质之外的目标显示一个更广泛的阵列和各种细胞过程受这一修改 32- - - - - - 34]。作为第一近似,乙酰化作用的可能角色激活T-effectors H1.2介导凋亡级联的进行了测试。Anacardic酸(AA)、赖氨酸的广谱抑制剂acetyl-transferases保护t细胞凋亡损伤如化验的核形态(图 5(一个))。评估如果AA延迟而不是抑制细胞死亡,propidium碘的吸收(PI)也以这些条件。18小时后文化没有细胞因子,同时染色和πAnnexin-V表示膜损伤的发生,在细胞因子与细胞培养(图 5 (b))。在细胞培养与AA,π和Annexin-V染色相当(低),表明AA阻止膜完整性的损失(图 5 (b))。进一步,易位H1.2 (AIF)在细胞治疗抑制AA相对于组织培养细胞因子(图 5 (c)),支持可能角色的变化在乙酰化状态作为监管一步T-effectors凋亡反应。这个修改的目标分子(s)仍有待确定。实验可能性之间的歧视,H1.2位移可能是应对acetylation-dependent染色质组织变化与影响组蛋白或调制的非组蛋白的蛋白质会提供额外的洞察本条例。

乙酰化作用的亚细胞定位依赖H1.2 T-effectors细胞凋亡。(a)凋亡的核损害T-effectors培养没有细胞因子IL-7 (20 ng / ml),有或没有anacardic酸(AA) (20 μ米)表示时间点。图表显示了三个实验的平均数±标准差。插图:乙酰化H3 (H3Ac)和免疫印迹 α微管蛋白在T-effectors培养细胞因子(6小时)在AA的存在与否。(b) T-effectors培养18个小时的显示条件沾propidium碘化( x 设在)和Annexin-V ( y 设在)通过流式细胞术分析。在右上象限值,在每一个情节,表明死细胞。(c) 10 × 10 6 T-effectors培养没有细胞因子IL-7 (20 ng / ml),有或没有AA (20 μ米)6小时。免疫印迹的核和细胞质分数对H1或H1.2, HP1 α,如果。数据显示是代表三个独立的试验。

 4所示。讨论

限制竞争营养物质在细胞外环境是一种广泛流行机制调节的细胞数量和细胞机制感知这些微环境的变化继续积极调查。减少可用性的细胞外生长因子通常是协调删除在发育或分化细胞的过度繁殖。我们解决这个问题在一个模型系统,概括删除(细胞因子引起的撤军)t细胞分化的细胞培养。我们提供的证据表明,细胞外的核函数作为集成的网站营养提示t细胞生存产生了重要影响。这是显示在实验中LMB阻止凋亡损伤T-effectors针对细胞因子剥夺暗示核中间的信号级联。核事件被证实参与实验,细胞因子撤军后,我们观察到H1.2流离失所离原子核可能促使线粒体,启动瀑布在细胞死亡。离原子核H1.2易位之前已经报道过在不成熟的胸腺细胞和慢性淋巴细胞白血病细胞响应基因毒性和nongenotoxic药物治疗 25, 26, 35]。支持这一点,我们目前的证据H1.2与线粒体外膜的交互居民proapoptotic蛋白质贝克,其监管的损伤线粒体和细胞核T-effectors发生细胞凋亡。这些数据开放possibilities-not相互不包括H1.2调节凋亡相关分子的结果,或者修改H1.2本身因其活动在线粒体可能是必要的。

层次结构的交互涉及bcl - 2家族蛋白(伯灵顿和Bak)和活性氧与t细胞的凋亡删除 3, 13- - - - - - 15, 17, 18]。当前的理解凋亡信号分子具有良好的功能定位在线粒体t细胞凋亡的关键中间体。因为消融H1.2保护细胞免受细胞凋亡在文化、放大的数据显示一个有趣的可能性或加强循环由H1.2,收敛于线粒体凋亡级联传播。我们推测,如果信号造成H1.2和活性氧激活收敛在一个事件/细胞器,共同监管流程可能会。早期的研究从实验室表明Jun-N-terminal激酶(物)激活NADPH-mediated ROS生产和监管线粒体损伤的凋亡反应T-effectors [ 17]。支持的层次结构相互作用的可能性,物活动H1.2的亚细胞分布控制,也就是说,其解放从细胞核后生长因子不足。底层的分子特性和后果H1.2与贝克仍有待阐明。基于观测在这项研究中我们推测,染色质可能执行nontranscriptional回应物活动发起H1.2的观察非核的功能。这一结果可能与表观遗传状态由物活动的调制,在其他系统(优先级 36- - - - - - 38]。

AA的防护效果是一致的与一个角色的乙酰化调节H1.2搬迁和由此引起的细胞凋亡。赖氨酸的可能性acetyl-transferases形成一个有益的元素凋亡H1.2-dependent级联建议由这些观察,然而,需要更详细的分析。我们试图追踪t细胞抗原后收缩的挑战在老鼠身上注射了AA未果,因为抑制AA对t细胞活化的影响反应 在活的有机体内(没有显示)。遗传操作H1.2水平T细胞数量正在直接设想H1.2通路的作用在促进T效应器的生存 在活的有机体内。

综上所述,实验表明细胞因子输入所需养分吸收,因此生存在细胞核T-effectors集成。这些观察位置的分子耦合H1.2基因组完整性和线粒体功能,演示了在T-effectors的程序删除。它很容易推测,因为细胞反应在细胞代谢压力是守恒的,这里所描述的途径很可能在其他细胞的情况下被激活涉及分化细胞的体内平衡。

 5。结论

限制竞争营养物质在细胞外环境是一个无处不在的细胞数量的监管机制。细胞内信号传导网络构成细胞应对这些变化保持积极的调查。在这项研究中我们提供了证据表明,核事件的整合细胞外营养提示t效应的数量和这些事件的复杂连接到营养不足引发的凋亡反应。具体来说,针对细胞因子提取链接器组蛋白H1.2是流离失所的离原子核可能促使线粒体和线粒体居民交往蛋白质贝克触发t效应细胞凋亡。最后,H1.2动力学是由物信号和响应在t细胞乙酰化状态的变化。

 利益冲突

作者没有利益冲突声明。

 确认

作者承认中央成像和流式细胞术设施(CIFF)和ncb的小动物设施。我们感谢Nithyakala博士的帮助。此举使加戈和拉克希米·r·Perumalsamy奖学金支持的生物技术和科学和工业研究理事会,分别为印度政府。

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