兰花、兰科的成员,是开花植物的最大和最多样化的家庭,763属,28000多人接受了物种的组成( 1]。兰花被发现在各种栖息地,主要(70%)在森林树干附生植物,生长在树荫下,组成几乎世界上三分之二的附生植物的植物;剩下的25%是陆地,5%被发现在各种支持系统( 2, 3]。

兰花种子储存食物组织有限,发芽和原球茎发育所需,让种子发芽在自然条件相对较低(< 5%) 4, 5]。在自然条件下,成熟种子萌发和早期发展取决于兼容的菌根真菌( 6, 7]。因此, 在体外兰花种子发芽是一个至关重要的方面在传播和保护计划。种子培养 在体外可以发展成完全幼苗没有真菌的援助,这是一个合适的方法为商业兰花生产( 8- - - - - - 12]。

最初, 在体外种子萌发菌根真菌隔离从各种自然环境用于刺激和被称为“共生种子发芽。“添加有机营养物质 在体外文化是为了促进种子萌发。1922年,努森 13)成功地发明了一种方法来刺激原球茎产量培植兰花的种子 在体外,洒在无菌营养媒体+蔗糖。这种技术被称为“asymbiotic种子发芽”,因为它没有涉及到菌根真菌。这两种方法都是有效的。

兰花种子生产的最小的开花植物,因此被称为“尘埃种子”[ 14]。然而,尽管他们的微观结构,表现出各种各样的形状、大小、颜色、重量、外种皮(手机号、尺寸、装饰)和胚胎特征。

根据Molvray和科莱( 15],兰花种子可以新月,一般椭球,丝状,纺锤形,梭形,长圆形,不规则,或棍棒状的。时et al。 16)建立卵圆形,丝状,spatulate-shaped存在于种子 Androcorys monophylla, Goodyera biflora, Platanthera clavigera,分别。

种子颜色也不同,包括橙色黄色 石斛兰formosum和 石斛兰densiflorum,褐色黄 石斛兰hookerianum,黄色 兰花二色的,白色的 Eria dalzellii淡黄色, 利帕里elliptica和 石仙桃属pallida,金黄 Bulbophyllum mysorense,淡黄色 Coelogyne breviscapa( 16, 17]。Molvray和科莱 15)表明,种子大小不同的从150年到6000年 μ米和重量范围从0.31到24 μg。

细胞组织的种子很简单,由一个未分化的胚胎细胞的质量和一个基本的胚乳,覆盖着一个透明的外种皮( 18]。根据《甘尼( 14],兰花胚胎相对小而简单,通常椭圆形或球形形状,有时包括只有少数细胞,没有胚乳。

的发展和再生 在体外植物组织培养可以提高通过添加各种各样的有机营养物质 19- - - - - - 21]。这些可能包括椰子汁(CW)、蛋白胨(P),土豆匀浆(PH),香蕉匀浆(BH)、壳聚糖(本),番茄汁(TJ)和酵母提取物(你们)。有机营养物质的来源维生素、氨基酸、脂肪酸、碳水化合物、多肽、生长因子,促进经济增长( 22]。很少有有机营养研究的内容和作用,提高种子萌发和发展原球茎的兰花 在体外模型(表 1,图 1)。这些研究将在以下部分中讨论。

连续波是一种无色液体胚乳获得 椰子。通常添加到文化传播媒体包含快速诱导生长素和细胞生长。使用连续波在组织文化中首次尝试Van Overbeek et al。 64年, 65年)报道,将它添加到培养基是谁年轻的发展至关重要 曼佗罗胚胎。

连续波包含可溶性糖作为碳的自然来源,以及氨基酸和维生素,如维生素b1、维生素b6、抗坏血酸和矿物质 66年, 67年]。它还包括各种有机离子如磷、镁、钾、钙、铁和锰( 68年, 69年),所有这些都促进发芽( 70年]。此外,连续波包含吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)和玉米素( 71年],它通常作为增长补充植物组织培养。

兰花种子萌发通常是增加了CW添加到中(表 1)。例如,托马斯和迈克尔( 23报道93%的萌发 Rhynchostylis婆罗种子后,加入150毫升·L⁻¹连续波的半歇工Murashige和斯库中(½女士;Murashige和斯库 72年])。对比,得出了类似的结论皮尔et al。 24),他说的CW 150毫升·L⁻¹Mitra介质(M;Mitra et al。 73年)是最适合种子的萌发 Acampe papillosa。

根据哈et al。 25),女士中补充了CW提高种子萌发和原球茎的形成 凤仙花macranthos。在研究不同的有机补充,包括连续波,桦树汁(BS)、枫sap (MPS),黑洞,P,在不同浓度,使用100毫升·L⁻¹连续波导致最高发芽率(70.8%)和原球茎的形成率(74.2%)。曾庆红et al。( 26]还建立了½女士中含有0.5毫克·L⁻¹ α-naphthaleneacetic酸(NAA)和1.0 g·L⁻¹活性炭(AC)补充与连续波、增强种子萌发和幼苗的形成 Paphiopedilum wardii。在不同有机补充,包括连续波、PH值、黑洞、胰蛋白胨(T)和P与不同浓度,100毫升·L⁻¹连续波增加种子萌发(65.33%)和幼苗形成最高(35.67%)与其他治疗方法相比,虽然吴et al。 27)得出的结论是,¼女士中含有0.5毫克·L⁻¹NAA和1 g·L⁻¹交流,补充了200毫升·L⁻¹连续波和1 g·L⁻¹P, 75天后在文化、适合种子萌发和原球茎的发展 Renanthera imschootiana。

连续波不仅影响发芽和原球茎发育,但也扮演着重要的角色在protocorm-like的形成身体(拉钮),植株生长,和多个感应开枪。根据Baque et al。 28),Hyponex介质,卡诺( 74年),补充了连续波有效增强植株观赏兰花的生长 Calanthe混合动力车。连续波在不同浓度的测试(0,10、30、50、100毫升·L⁻¹),一个50毫升的浓度·L⁻¹显著增加植株干重。Maharjan et al。 29日]化验的影响不同浓度的连续波(0、50和100毫升·L⁻¹)拍摄药用兰花的形成 万带兰pumila原球茎,发现拍摄的数量和长度增加时,与连续波½MS培养基上培养的补充。类似的结论是由Punjansing et al。 30.)确定的连续波(50 mL·L⁻¹)½包含50克·L MS培养基⁻¹PH值是最好的促进射杀的乘法 Phaius tankervilleaevar.阿尔巴。这个结果支持Jainol和Jualang(早些时候 31日)观察到的影响不同的有机补充(CW, TJ,黑洞,P,你们)在不同浓度在多个射击形成 Dimorphorchis lowii在150毫升,发现连续波·L⁻¹导致最多的芽。Kaur et al。 32)研究的影响的各种有机补充(BH、连续波和控制没有有机添加剂)在不同浓度的 在体外原球茎的增殖药用兰花( 石斛兰高贵的)。在他们的研究中,M中补充了200毫升·L⁻¹连续波是最适合原球茎增殖的增强。

P是偶尔在兰花栽培作为交换媒介来使用补充,促进外植体生长和发育。众多研究表明,P补充剂增强发芽(表 1)。例如,Utami et al。 33)评估的影响不同的P浓度(0,1,2,3 g·L⁻¹在种子萌发和芽的形成 石斛兰lasianthera、观察到4、8、12周后文化。在不同P浓度测试,种子发芽率(100%)获得了在所有治疗12周后孵化。然而,他们也报告说,拍摄的形成是Vacin最高(84.0%),中等(大众;Vacin去( 75年与2 g·L])补充⁻¹种子萌发率 Epidendrum ibaguense肯和观赏兰花 Spathoglottis plicata布卢姆米或更高Phytamax介质(点;Phytamax™,西格玛化工有限公司、美国)补充了2 g·L⁻¹比在治疗,不包含P P [ 34, 35]。同样,Buyun et al。 36]找到了种子发芽率为100% 石斛兰parishii努森与介质(KC;努森( 13与2 g·L])补充⁻¹根据斯利瓦斯塔瓦et al p。 37),种子的发芽率 Aerides摔跤当在KC培养基培养包含8.9显著增加 μM benzylamino嘌呤(BAP)和补充P P不同浓度的测试(0.25,0.5,和0.75 g·L⁻¹),萌发率最高(89.28%)获得了0.5 g·L⁻¹P作为添加剂后30天的孵化。

P也刺激多个射击和原球茎的形成。Devi et al。 38)报道,P改善了 在体外原球茎的增殖药用附生兰花 Taprobanea spathulata。不同浓度的测试,5 g·L⁻¹P是一个适合多个原球茎的诱导的浓度。考尔和同事( 39)评价不同的有机添加剂的影响(BH和P)在不同浓度的 在体外芽的增殖 Paphiopedilum venustum,发现修改的陆生兰花介质(BM-1;电波和Debergh 76年])补充了P (1 g·L⁻¹)是最有效的在刺激多个芽,每外植体和三个芽。除了促进多个芽和原球茎的形成,蛋白胨促进幼苗生长( 77年因为它含有高含量的氨基酸( 78年)和维生素,包括维生素b1、生物素、吡哆醇,氮( 79年]。

兰花种子萌发影响显著的PH值在中(表 1)。伊斯兰教等。 40)评估PH值的影响 在体外发芽的 万带兰roxburgii和显示Hyponex介质和PH值增加了种子发芽率,促进了幼苗的发展。同样,Bakar et al。 41)评估的影响不同的有机补充(PH值、连续波和TJ)在不同浓度对种子发芽的 Dimorphorchis lowii,发现10% (w / v)的PH值导致种子萌发率最高。此外,PH值增强幼苗生长 石斛兰tosaense( 42)和刺激的乘法和增长 石斛兰officinale芽( 43]。此外,75 g·L⁻¹PH值在大众中包含100毫升·L⁻¹连续波是最适合的 在体外在扩散 Bulbophyllum nipondhii假鳞茎( 44]。

PH值包含重要的维生素,如C, B1、B6和矿物元素,如钾、铁、镁、碳水化合物和氨基酸,促进种子萌发( 80年, 81年]。Miransari和史密斯 82年)报道,种子发芽期间消耗大量的氮,PH值,因此在中会影响种子萌发率。

种子萌发和BH原球茎发育受到影响的媒体(表 1)。佩雷拉et al。 45)评价不同的有机添加剂的影响(BH和TJ)的发芽 Chloraea gavilu和显示Malmgren修改陆生兰花介质(毫米;Malmgren [ 83年])补充了BH成功改善种子发芽。

伊斯兰教等。 46)调查的影响不同的BH浓度(0、2.5、5、10和20%;w / v)拉钮的增长和发展 石斛兰sp.,表明½MS培养基补充10%的黑洞是最适合拉钮再生。根据曾庆红et al。 47),植株观赏lithophytic兰花的形成 Paphiopedilum hangianum当拉钮亚文化在HO显著增加₂₆介质(曾庆红et al。 84年包含1 g·L])⁻¹P和1毫克·L⁻¹NAA和黑洞补充。同一项研究表明Harvais介质(Harvais [ 85年])与各种有机补充剂有效诱导幼苗生长 凤仙花macranthos。在各种有机补充研究(CW、PH值和黑洞),黑洞的浓度25或50克·L⁻¹改进的拍摄和根数和枝条和根长 48]。Goncalves et al。 49)发现的数量 Hadrolaelia purpurata幼苗产生最高KC中包含90 g·L⁻¹黑洞。此外,Utami和Hariyanto [ 50补充)观察到的效果与150毫升·L⁻¹连续波与不同BH浓度(0、5、10、15 g·L⁻¹)的植株发展 蝴蝶兰属amboinensis,发现连续波与黑洞的有机补充显著增加植株的生长。香蕉经常被用作有机添加剂 在体外文化因其高水平的钾、锰、钙、钠、铁、锌、硫胺素、核黄素、烟酸、维生素b6、泛酸、抗坏血酸、叶酸( 86年),和自然生长调节剂如玉米素、赤霉素、IAA ( 87年, 88年]。它还富含碳水化合物,提供能量异养植物的早期阶段 在体外培养( 89年]。

的生物聚合物衍生物、甲壳素,是发现在节肢动物的外骨骼和甲壳类动物 90年),已在各个领域的应用,包括农业( 91年]。

众多研究表明,兰花种子萌发影响的CHT媒体(表 1)。Kananont et al。 51]研究了各种类型的影响在不同浓度、不同种兰花的种子发芽,发现没有一个六本契约类型测试(CHT聚合物:P_70年P_80年P_90年;十、寡聚物:阿_70年阿,_80年阿,_90年)五个浓度(0、10、20、40和80 mg·L⁻¹)对种子萌发有显著影响 石斛兰bigibbumvar.紧统;然而,除了显著增加发芽 石斛兰formosum。萌发率最高(91.2%)使用O型、本记录_80年在10 mg·L⁻¹。Restanto et al。 52)评估CHT合子的胚胎发展的影响 石斛兰sp。 在体外并观察到CHT显著影响受精卵的胚胎生长和分化。不同的CHT浓度测试(0、5、10、15、20和25 mg·L⁻¹)、数量拉钮拉钮鲜重,和植株的数量是最高的使用15 mg·L⁻¹本契约。字等。 53)也研究了影响虾、不同浓度(0、5、10、15、20、25 mg·L⁻¹)分生芽的增长 石斛兰蝴蝶兰属和显示,大众媒介补充15 mg·L⁻¹CHT导致拉钮的最高鲜重。此外,同一项研究表明½女士的液体培养基中补充本契约有效地诱导拉钮的发展 Grammatophyllum speciosum。不同浓度的CHT测试(0、5、10、15、20、25、50、100 mg·L⁻¹),一个集中的15 mg·L⁻¹导致最高的增长率(4倍增加) 54]。Samarfard和Kadir也 55]调查CHT在拉钮扩散的影响 蝴蝶兰属gigantea,其中六个浓度(0、5、10、15、20、25 mg·L⁻¹)测试,10 mg·L⁻¹在大众媒介、鲜重都是最高的,次高经过20周的培养。

壳聚糖也刺激在温室条件下植株生长和发育。Pitoyo et al。 56)本契约的成长的影响进行了研究 Grammatophyllum scriptum植株和建议CHT一些参数有明显影响,包括植株高度和叶片长度。Kumari et al。 57)调查的影响不同CHT浓度(2.5,5,7.5,10 mg·L⁻¹)的增长和发展 石斛兰简历。索尼娅17。的四个浓度测试,7.5毫克·L⁻¹导致最多的峰值/植物,花朵直径,增加一个增强的穗长、穗小花数更高。同样,Charoenwattana [ 58]研究了十对植株的生长的影响 石斛兰兰花和报道,一个最优的叶数的浓度达到100毫克·L⁻¹在10周的移植。据说增加植株生长的影响下光合作用。根据Barka et al。 92年),添加CHT导数,即。Chitogel、改进的有限公司₂固定的1.5倍和O₂生产的2倍,表明CHT衍生品有可能增加光合作用,从而提高植物的生长。根据Uthairatanakij et al。 93年],本契约的有益作用可能引起信号合成植物激素、生长素和赤霉素。

TJ显著影响兰花种子的萌发和随后的原球茎开发(表 1)。大卫et al。 59)研究了不同的复合添加剂的影响(TJ,连续波、P、你们)在不同浓度对种子发芽 万带兰helvola体外。在他们的研究中,KC培养基补充15% (v / v) TJ是最适合促进发芽。Muthukrishnan et al。 60]还研究了各种有机添加剂的影响(TJ、连续波和PH值)在不同浓度对种子发芽 Geodorum densiflorum和显示½MS培养基补充5% (v / v) TJ导致种子发芽率最高,原球茎的生长。同样,Gnasekaran et al。 61年)报道,20到30% (v / v) TJ改进拉钮扩散 万带兰珊的喜悦超过添加木瓜提取物(PE)或PH值。

番茄汁含有碳水化合物、维生素和矿物质( 94年)、葡萄糖和果糖( 95年),有利于细胞分裂和支持系统。西红柿含有番茄红素,一种有力的抗氧化剂的能力,消除自由基的形成,修复受伤的细胞,抑制DNA氧化( 96年]。西红柿还包含其他抗氧化剂,如 α胡萝卜素, β胡萝卜素、抗坏血酸( 97年- - - - - - One hundred.]。根据Gnasekaran et al。 61年),糖和抗氧化剂发挥重要作用在细胞增殖和生产健康拉钮。

你们也是一个重要的氨基酸和维生素,特别是肌糖和维生素b1,并有效地用于提高种子萌发和再生在许多种兰花( 101年]。众多研究表明,兰花种子萌发和原球茎再生影响你们培养媒体(表 1)。Gansau et al。 62年]你们调查的影响不同浓度(0、0.1、0.2和0.3%;w / v)的原球茎增殖和生长 Dimorphorchis俄罗斯。在他们的研究中,MS培养基补充你们原球茎再生增加0.2%。早些时候,Jualang et al。 63年)评估的影响不同的有机补充(你们,P,黑洞、连续波和TJ)在不同浓度对种子发芽的 万带兰dearei你们,发现0.5% (w / v)增强种子发芽。

根据文献调查,我们得出结论,添加有机补充,包括连续波、P,黑洞,PH值,,TJ,你们,兰花种子萌发媒体支持种子萌发,沉淀形成幼苗,收益率激烈的植株。他们也有效地增加拉钮,诱导丛生芽形成,刺激在温室条件下植株的生长和发育。这些有机补充代表自然来源的氨基酸,维生素、矿物质、有机酸、糖类、蛋白质、和自然生长调节剂,协助兰花传播通过刺激asymbiotic种子的发育和形态发生的文化。许多种兰花的栖息地受到土地流转管理不善。Asymbiotic种子萌发的有机补充为大众传播是一个优秀的技术和有效的适应环境的兰花再引入自然栖息地,这将促进保护濒危兰花品种。