ECAM 以证据为基础的补充和替代医学 1741 - 4288 1741 - 427 x Hindawi出版公司 10.1155 / 2016/7954982 7954982 研究文章 在Cl TongXie-YaoFang效果<年代up>−和 H C O 3 - - - - - - 腹泻型肠易激综合征大鼠的运输 陆 小芳 1 http://orcid.org/0000 - 0003 - 0457 - 1727 张 Shengsheng 1 杨 程 1 王 Zhengfang 1 赵 绿青白 1 吴 宇 1 谢 京 1 阴 Jieyun 消化系统疾病中心 北京中医医院隶属于首都医科大学 北京100010年 中国 ccmu.edu.cn 2016年 14 6 2016年 2016年 15 02 2016年 05年 05年 2016年 10 05年 2016年 2016年 版权©2016陆小芳et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

TongXie-YaoFang (TXYF)能有效缓解腹泻型肠易激综合征的症状(D-IBS)患者。然而,治疗机制尚未完全阐明。这项研究旨在调查TXYF在结肠的影响引起的离子运输5 -羟色胺(5 -)D-IBS老鼠。多重压力的一种方法(新生儿产妇分离(NMS)结合约束应力(RS))被用来诱导D-IBS模型。模型大鼠随机分为两组:NMS + RS组和TXYF-formula组,正常的控制(不处理)老鼠分为NH组。NMS + RS组中,短路电流的变化( Δ 我 年代 c 5是低于)诱导的NH和TXYF-formula组。删除后细胞外Cl<年代up>−或 H C O 3 - - - - - - 基底或Na<年代up>+或阻止囊性纤维化跨膜电导调节(雌性生殖道,Na<年代up>+- k<年代up>+2氯<年代up>−转运蛋白(NKCC), N 一个 + - - - - - - H C O 3 - - - - - - 转运蛋白, C l - - - - - - / H C O 3 - - - - - - 换热器,K<年代up>+通道或Na<年代up>+/ K<年代up>+atp酶分别在5-HT-induced没有差别 Δ 我 年代 c 在三组。这些数据表明,TXYF可以调节5-HT-induced Cl<年代up>−和 H C O 3 - - - - - - 分泌,可能由雌性生殖道的联合行动,NKCC, Na<年代up>+- - - - - - H C O 3 - - - - - - 转运蛋白, C l - - - - - - / H C O 3 - - - - - - 换热器,K<年代up>+频道,Na<年代up>+/ K<年代up>+腺苷三磷酸酶。

 1。介绍

腹泻型肠易激综合征(D-IBS)是一种慢性功能性胃肠疾病,它的特征是腹部疼痛/不适和腹泻没有明显的病理证据根据罗马III标准( 1]。IBS患者的最常见的类型之一,D-IBS病人的生活质量低于其他亚型( 2, 3]。然而,D-IBS的多因素疾病,发病机制复杂,尚未完全理解为。因此,对患者的治疗效果并不令人满意,虽然开发了多种药物可选的治疗包括洛派丁胺,胆汁酸螯合剂,抗痉挛,三环类抗抑郁药,rifaximin [ 4- - - - - - 9]。目前,一系列的随机对照试验表明,中药(TCM)等代表公式TongXie-YaoFang (TXYF)可以显著缓解症状和改善D-IBS病人的生活质量( 10, 11]。然而,治疗效果的机制尚未知道,这限制了大规模TXYF的应用。

5 -羟色胺(5 -)是一种重要的单胺神经递质brain-gut轴,使一个伟大的贡献D-IBS的发生和发展。5的多动症D-IBS患者被发现,被认为是与扰动内脏敏感性,上皮细胞分泌,平滑肌收缩 12- - - - - - 14]。在生理的研究,表明5 -作为一个有效的促分泌素产生显著影响肠道离子运输包括Cl<年代up>−或 H C O 3 - - - - - - 转运蛋白分泌通过多种离子通道,换热器,如囊性纤维化跨膜电导调节(雌性生殖道,Na<年代up>+- k<年代up>+2氯<年代up>−转运蛋白(NKCC), Na<年代up>+- - - - - - H C O 3 - - - - - - 转运蛋白,Cl<年代up>−/ H C O 3 - - - - - - 换热器,或K<年代up>+相关频道,都是创造的渗透压拖流体进入肠腔( 15, 16]。目前,许多工作已经证实5-HT-induced肠道内离子转移压力的变化( 17)或腹泻疾病( 18]。然而,在D-IBS疾病密切相关的慢性压力,可以通过腹泻的症状表现 19),现在仍不清楚改变离子运输由5。进一步TXYF-formula能否在离子传输还需要探索。因此,本研究的目的是调查的影响TXYF 5-HT-induced离子运输在D-IBS老鼠同时探讨相关机制。

 2。材料和方法 2.1。动物

Sprague-Dawley雄性老鼠(产后第一天)获得至关重要的河实验室动物科技有限公司有限公司(中国,北京),保存在隶属于北京中医药大学东直门医院。所有的老鼠被安置在一个12小时的光/暗周期(灯在上午8点)标准温度(研讨会°C)和湿度(50%±5%),获得食物和水随意。在这项研究中,雌性老鼠被排除在外,消除可能影响雌激素或其他雌性激素分泌和感官反应小肠( 20.]。上午8点至11点之间的所有操作进行每天昼夜节律的影响降到最低。在产后一天22,窝断奶和关在单独的笼子里3 - 4每笼幼崽。

这项研究是根据制度伦理准则和执行符合机构的要求动物保健和使用委员会北京中医药大学。所有动物保健和实验程序批准的动物伦理委员会隶属于北京中医药大学东直门医院。

 2.2。新生儿产妇分离(NMS)结合约束应力(RS)

产后几天2-21,新生儿产妇进行分离(如前所述)( 21, 22]:NMS + RS窝被从家里的笼子里,分开孕产妇老鼠每天3小时。期间分离,窝住单独的隔间,温度保持在23±0.5°C热监管设施。窝是分离后立即回到家中的笼子里。正常的控制窝留在家里与孕产妇老鼠笼子。

在产后50 - 59天之间,克制压力进行如下( 23, 24]:NMS + RS老鼠放在一个透明塑料克制气缸(4×4×18厘米<年代up>3),3个小时,他们可以向前或向后移动,但不能转身。

 2.3。TXYF组成和管理

TXYF-formula由下列中国传统草药所记录的“方剂学”[ 25]:Baizhu(苍术Macrocephalae) 93.75 g, Baishao(白芍)62.5 g, Chenpi (Pericarpium Citri Reticulatae) 46.875克,和Fangfeng(基数Saposhnikoviae) 31.25 g,在6:由4:3:2的比例。公式检查所有原材料的质量控制标准 中国药典( 26]。这是生产准备室的北京医院的中医中药。

NMS + RS老鼠分成两组(NMS + RS组和TXYF-formula组)和正常的控制(不处理)老鼠分为NH组。从产后60天,老鼠TXYF-formula组被给予胃内的政府与TXYF-formula (4.92 g / 100 g / d)。NH组和NMS + RS组和蒸馏水。交货数量在每组总是100 mL / g / d,一天两次,连续14天。

 2.4。试剂和设备

Krebs-Henseleit解决方案的准备(k - h,更易/ L)如下:117年氯化钠,氯化钾4.7,MgCl<年代ub>21.2,NaHCO<年代ub>324.8,KH<年代ub>2阿宝<年代ub>41.2,CaCl<年代ub>22.56,11.1和葡萄糖;k - h不Cl<年代up>−:氯化钠,氯化钾,MgCl<年代ub>2,CaCl<年代ub>2取而代之的是葡萄糖酸钠、葡萄糖酸钾、镁葡萄糖酸,和葡萄糖酸钙,分别;k - h不 H C O 3 - - - - - - :NaHCO<年代ub>3取而代之的是氯化钠和解决方案是缓冲10更易与L HEPES-free酸,都洋溢着100%啊<年代ub>2;k - h不Cl<年代up>−和 H C O 3 - - - - - - :葡萄糖酸钠氯化钠和NaHCO的地方<年代ub>3葡萄糖酸和钾、葡萄糖酸镁和葡萄糖酸钙的氯化钾,MgCl<年代ub>2,CaCl<年代ub>2分别与10更易被缓冲/ L O玫瑰和喝醉酒的100%<年代ub>2;k - h不Na<年代up>+:N-methyl-D-glucamine氯(NMDGCl)和HCO胆碱<年代ub>3氯化钠和NaHCO的地方<年代ub>3,分别。如果需要,同渗重摩被调整至290年与D-mannitol mOsmol / L。

以下使用:5,批号:1001156278;吲哚美辛,批号:1001087688;N-phenylanthranilic酸(DPC),批号:101078880;雌性生殖道(异烟肼)-172年,批号:6311;格列本脲,批号:1001068037;4,4′-diisothiocyano-2 2′-stilbenedisulfonic酸(做),批号:1001339605;布美他尼,批号:101016760;阿米洛利,批号:101093389;4-acetamido-4′-isothiocyanatostilbene-2 2′-disulfonic酸(坐),批号:1001208418;BaCl<年代ub>2批号:1398;乌本苷,批号:101354363。所有试剂都从Sigma-AldrichCo购买。

多路电压、夹(VCC MC6)从生理仪器公司购买;桥放大器(ML228)和生理数据的记录和分析系统(电力实验室)从广告购买仪器公司。

 2.5。组织准备

三组治疗后,所有的老鼠被杀与颈椎脱位的方法。远端结肠(6 - 7厘米从肛门)很快被删除,减少纵向肠系膜边境,与冰冷的k - h刷新。组织与粘膜下硅胶固定到培养皿底部。培养皿中充满了冰冷的k - h含95%氧气和二氧化碳的5%。浆膜、肌肉和黏膜下的层是经过仔细分开粘膜层在显微镜下用好镊子。然后粘膜层切成小片地区超过0.5厘米<年代up>2为进一步的测量。两张可以获得远端结肠段之一。

 2.6。我们室的实验

远端结肠的粘膜准备安装在我们室测量短路电流( 我 年代 c )。k - h(5毫升)注入我们室的两个相邻车厢,分别与循环95%氧气和二氧化碳的5%;pH值维持在7.35 - -7.45,温度在37°C。组织了孵化60分钟稳定电参数。通过组织夹紧于零的电压和基底 我 年代 c 测量。后添加的药物或阻滞剂基底外侧或细胞的顶面30分钟,5 (10 μ摩尔L<年代up>−1)被添加到基底外侧。 我 年代 c 被一个图表记录器记录不断。的变化 我 年代 c (Δ 我 年代 c )计算评价离子运输前后差值5 -刺激和粘膜被规范化为当前单位面积( μ一个/厘米<年代up>2)。测量跨膜电阻,电刺激应用1 mV和电阻是根据欧姆定律来计算的。吲哚美辛(10 μ摩尔L<年代up>−1)经常添加到基底外侧组织块的内源性前列腺素的影响在实验 27]。

 2.7。统计分析

统计分析采用SPSS 17.0软件(美国SPSS,芝加哥,IL)和每个值被表示为±SEM手段。研究中的所有原始数据分布正常,符合方差的同质性。三组之间的差异进行了分析使用单向方差分析(方差分析)其次是最低的区别(LSD)测试比较两组之间的差异。 P < 0.05 被认为是具有统计学意义。

 3所示。结果 3.1。TXYF效应的基本电生理特性和5-HT-InducedΔ< inline-formula > < mml:数学xmlns: mml = " http://www.w3.org/1998/Math/MathML " id = " M21 " > < mml: mrow > < mml: msub > < mml: mrow > < mml:多行文字mathvariant =“斜体”>我< / mml:多行文字> < / mml: mrow > < mml: mrow > < mml:多行文字> sc < / mml:多行文字> < / mml: mrow > < / mml: msub > < / mml: mrow > < / mml:数学> < / inline-formula >

在基底没有明显差异 我 年代 c 、电位差(PD)和跨膜电阻(TR)在三组( P > 0.05 ,数据 1(一)- - - - - - 1 (c))。后5 - (10 μ摩尔L<年代up>−1Δ)基底外侧 我 年代 c NMS + RS组减少超过NH组;治疗后与TXYFΔ 我 年代 c TXYF-formula组相比显著增加了NMS + RS集团( P < 0.0 1 ,图 1 (d))。

 3.2。TXYF对5-HT-InducedΔ< inline-formula > < mml:数学xmlns: mml = " http://www.w3.org/1998/Math/MathML " id = " M33 " > < mml: mrow > < mml: msub > < mml: mrow > < mml:多行文字mathvariant =“斜体”>我< / mml:多行文字> < / mml: mrow > < mml: mrow > < mml:多行文字> sc < / mml:多行文字> < / mml: mrow > < / mml: msub > < / mml: mrow > < / mml:数学> < / inline-formula >后删除Cl <一口>−< /一口>,< inline-formula > < mml:数学xmlns: mml = " http://www.w3.org/1998/Math/MathML " id = " M34 " > < mml:多行文字> HC < / mml:多行文字> < mml: msup > < mml: mrow > < mml: msubsup > < mml: mrow > < mml:多行文字> O < / mml:多行文字> < / mml: mrow > < mml: mrow > < mml:多行文字> 3 < / mml:多行文字> < / mml: mrow > < mml: mrow / > < / mml: msubsup > < / mml: mrow > < mml: mrow > < mml:莫> - < / mml:莫> < / mml: mrow > < / mml: msup > < / mml:数学> < / inline-formula >,或Na <一口> + < /一口> k - h

当Cl<年代up>−和 H C O 3 - - - - - - 分别从k - h,没有显著差异在5-HT-inducedΔ吗 我 年代 c 在三组;在Cl<年代up>−- - - H C O 3 - - - - - - 无k - h,三组中没有发现显著差异( P > 0.05 ,图 2(一个))。此外,删除后顶端Na<年代up>+从k - h, 5-HT-inducedΔ 我 年代 c 较低的NMS + RS集团与NH ( P < 0.0 1 ,图 2 (b))和TXYF-formula集团( P < 0.05 ,图 2 (b))。相比之下,当Na<年代up>+无应用k - h的基底外侧结肠粘膜,没有发现显著差异在5-HT-inducedΔ 我 年代 c 在三组( P > 0.05 ,图 2 (c))。

 3.3。TXYF对5-HT-Induced < inline-formula > < mml:数学xmlns: mml = " http://www.w3.org/1998/Math/MathML " id = " M50 " > < mml: mi >Δ< / mml: mi > < mml: msub > < mml: mrow > < mml:多行文字mathvariant =“斜体”>我< / mml:多行文字> < / mml: mrow > < mml: mrow > < mml:多行文字> sc < / mml:多行文字> < / mml: mrow > < / mml: msub > < / mml:数学> < / inline-formula >后通道阻滞剂的应用

下面的顶端应用非选择性Cl<年代up>−通道阻断剂,即L DPC(1更易<年代up>−1),或格列本脲(1更易与L<年代up>−1-172(100)或雌性生殖道(异烟肼) μ摩尔L<年代up>−1),称为囊性纤维化跨膜电导调节(雌性生殖道)阻滞剂,Δ 我 年代 c 由5 -三组之间没有显著差异( P > 0.05 ,图 3(一个))。相比之下,在Ca<年代up>2 +端依赖Cl<年代up>−通道(中国)拦截器,即做(500 μ摩尔L<年代up>−1)添加到顶端,5-HT-inducedΔ 我 年代 c NMS + RS组仍低于TXYF-formula组和NH集团( P < 0.01 ,图 3(一个))。同样,阿米洛利的顶端应用(100 μ摩尔L<年代up>−1),一个上皮Na<年代up>+Δ通道(钠)拦截器 我 年代 c 由5 - NH价格高,比NMS TXYF-formula组+ RS集团( P < 0.05 ,图 3 (b))。然而,在基底的应用K<年代up>+通道抑制剂,即BaCl<年代ub>2(5更易与L<年代up>−1),无统计差异5-HT-inducedΔ 我 年代 c 在三组( P > 0.05 ,图 3 (c))。

 3.4。TXYF对5-HT-InducedΔ< inline-formula > < mml:数学xmlns: mml = " http://www.w3.org/1998/Math/MathML " id = " M65 " > < mml: mrow > < mml: msub > < mml: mrow > < mml:多行文字mathvariant =“斜体”>我< / mml:多行文字> < / mml: mrow > < mml: mrow > < mml:多行文字> sc < / mml:多行文字> < / mml: mrow > < / mml: msub > < / mml: mrow > < / mml:数学> < / inline-formula >后转运蛋白或换热器抑制剂的应用

在布美他尼(100 μ摩尔L<年代up>−1在基底外侧),Na的抑制剂<年代up>+- k<年代up>+2氯<年代up>−转运蛋白(NKCC),在Δ三组中无显著差异 我 年代 c 由5 - ( P > 0.05,图 4)。后基底外侧增加(100 μ摩尔L<年代up>−1),Na的抑制剂<年代up>+- - - - - - H C O 3 - - - - - - 转运蛋白或Cl<年代up>−/ H C O 3 - - - - - - 换热器,Δ 我 年代 c 由5 - 3组中无显著差异( P > 0.05,图 4)。同样,在基底外侧用乌本苷治疗后(1更易与L<年代up>−1),钠<年代up>+/ K<年代up>+腺苷三磷酸酶抑制剂,Δ 我 年代 c 在三组在统计学上并不显著( P > 0.05,图 4)。

 4所示。讨论

在目前的研究中,人们发现TXYF可以调节Cl的分泌失调<年代up>−和 H C O 3 - - - - - - 在D-IBS老鼠;结肠粘膜时使用雌性生殖道的抑制剂,NKCC, Na<年代up>+- - - - - - H C O 3 - - - - - - 转运蛋白,Cl<年代up>−/ H C O 3 - - - - - - 换热器,K<年代up>+通道或Na<年代up>+/ K<年代up>+腺苷三磷酸酶,没有区别TXYF和NMS + RS组织被发现,表明TXYF可以调节离子传输通过这些元素作为雌性生殖道,NKCC, Na<年代up>+- - - - - - H C O 3 - - - - - - 转运蛋白,Cl<年代up>−/ H C O 3 - - - - - - 换热器,K<年代up>+频道,Na<年代up>+/ K<年代up>+腺苷三磷酸酶。

TXYF作为一个受欢迎的公式中医首次记录 丹溪心法律,这是一个全面的医学书编辑元朝。四种中药处方中,这是Baizhu(三两),Baishao(2两),Chenpi(一两半),和Fangfeng(一两)。TXYF代表antidiarrhea公式和镇痛和认可D-IBS的另类疗法。临床研究由锅等。 10]表明TXYF可以显著减轻腹部疼痛/不适和改进D-IBS病人的粪便性质。一个最近的动物实验也表明,TXYF可以提高痛阈,减少粪球在IBS大鼠( 28]。然而,治疗机制还不是很清楚虽然已经完成了大量的工作。

目前,尽管D-IBS的发病机理尚未了解清楚,brain-gut轴的功能障碍被认为是其中一个最重要的病理生理学,主要由各种brain-gut肽包括5 - [ 29日]。D-IBS患者,增加platelet-depleted血浆5 -浓度在禁食和美联储的条件下被发现( 13]。除此之外,在动物实验中,远端结肠5级,脊髓,在D-IBS模型大鼠下丘脑玫瑰( 30.),这表明,调节5 -导致D-IBS发病水平。除了调节肠道蠕动和敏感性,5 -作为一个有效的肠促分泌素起着重要的作用在维护肠道电解质和液体的平衡,这是相关腹泻的发生( 31日]。在我们的研究中,当外源性5 -添加到结肠粘膜的基底外侧, 我 年代 c 增加在所有三组。此外,在NMS + RS集团Δ下降 我 年代 c 是引起与NH组。结果可能是体外的另一项研究支持了由Goldhill et al。 32),发现包装约束压力的老鼠显示响应减少到5。TXYF-formula进一步治疗后,粘膜反应5 -恢复NH组中观察到的类似的水平,这表明TXYF-formula能够调节结肠分泌的改变引起5 D-IBS老鼠。

然而,有趣的是,诱导的分泌5 -结肠粘膜的NMS + RS组低于NH组和TXYF-formula集团似乎矛盾的分泌过多的腹泻。考虑可能的原因可能是由于体内和体外测试之间的差异和相关增加5级或5 -受体的脱敏D-IBS老鼠。在我们之前的研究中,增加和减少5 - 5水平<年代ub>4受体表达D-IBS老鼠已经证明( 33),但具体的机制需要进一步讨论。

众所周知,在正常情况下,Cl<年代up>−运输是关键链接在维护肠道电解质的平衡,分泌入肠腔并生成水的渗透驱动力( 34]。Cl的一般过程<年代up>−阐述了分泌 Frizzell和汉拉罕( 35]:Cl<年代up>−在基底膜进入由NKCC并分泌到肠腔从顶端通过营地和Ca<年代up>2 +端依赖Cl<年代up>−频道。在目前的研究中,我们发现TXYF-formula能够调节Cl的分泌<年代up>−由5 -诱导。证据显示如下:(1)在正常的k - h, 5-HT-inducedΔ 我 年代 c NMS + RS组TXYF-formula组显著的不同,但当细胞外Cl<年代up>−被免职,差异就消失了;(2)在雌性生殖道的顶端应用阻滞剂或基底NKCC抑制剂的应用程序组织,Δ 我 年代 c 没有统计学差异NMS + RS组和TXYF-formula组。除此之外,这些结果还显示,雌性生殖道和NKCC参与在结肠TXYF Cl的效果<年代up>−交通工具。然而,当中国商用飞机有限责任公司被阻塞,统计差异NMS + RS组和TXYF-formula组仍暗示TXYF-formula监管5-HT-induced Cl<年代up>−通过cAMP-dependent Cl分泌<年代up>−渠道而不是中国商用飞机有限责任公司。推理是由生理实验,它表明,中国商用飞机有限责任公司没有影响5-HT-induced Cl<年代up>−在大鼠结肠分泌 15]。

在最近的一次试验中,它已被证明 H C O 3 - - - - - - 分泌5 -诱导大鼠结肠中( 16]。在我们的研究中,除了Cl的监管<年代up>−分泌,我们发现TXYF也改变了 H C O 3 - - - - - - 在结肠粘膜分泌。当细胞外 H C O 3 - - - - - - 被删除或Na<年代up>+- - - - - - H C O 3 - - - - - - 转运蛋白或Cl<年代up>−/ H C O 3 - - - - - - 换热器被阻塞,5-HT-inducedΔ 我 年代 c NMS + RS组没有差异和TXYF-formula组。此外,细胞外Cl时获得了相同的结果<年代up>−和 H C O 3 - - - - - - 都删除。因此,它是证明TXYF-formula可以改变结肠分泌调节Cl的运输<年代up>−和 H C O 3 - - - - - - 。

此外,我们进一步探索更多可能的调节机制TXYF阴离子分泌和发现,除了特定的渠道,转运蛋白,和交换机、K的运输<年代up>+基底和Na<年代up>+参与了Cl的分泌<年代up>−和 H C O 3 - - - - - - ,这是证明了以下证据。(1)以前的研究报道,基底外侧K<年代up>+电导可以维护的电动力阴离子分泌( 35]。在我们的研究中,存在的非选择性K<年代up>+通道阻断剂(BaCl<年代ub>2),5-HT-inducedΔ 我 年代 c 相似NMS + RS组和TXYF-formula组之间,这表明TXYF对阴离子分泌的影响可能与基底外侧K<年代up>+交通工具。然而,因为至少两种类型的K<年代up>+通道被发现,精确管理子类型需要进一步的研究。(2)除了K<年代up>+运输,还发现基底外侧Na<年代up>+参与这一过程,与电化学的生成动力阴离子分泌( 36]。如图所示在我们的研究中,删除后基底外侧Na<年代up>+或者在Na的存在<年代up>+- k<年代up>+腺苷三磷酸酶抑制剂(乌本苷),5-HT-inducedΔ 我 年代 c 没有TXYF-formula和NMS + RS团体之间的不同,表明在阴离子TXYF分泌的规定在一定程度上依赖于基底外侧Na吗<年代up>+交通工具。

此外,在我们的研究中,我们调查的影响TXYF Na<年代up>+吸收。删除后顶端Na<年代up>+或应用程序的上皮Na<年代up>+Δ通道阻滞剂(阿米洛利) 我 年代 c 仍然NMS + RS集团和TXYF-formula集团之间的不同。因此,可以看出,对Na TXYF-formula几乎没有影响<年代up>+吸收。这可能是因为,在生理条件下,Na<年代up>+吸收扮演小角色的5-HT-induced分泌反应大鼠结肠,据Ning et al。 15]。

总之,本研究表明,TXYF能够调节5-HT-induced Cl<年代up>−和 H C O 3 - - - - - - 在D-IBS-like老鼠分泌,可能由CFTR交通元素检测NKCC, Na<年代up>+- - - - - - H C O 3 - - - - - - 转运蛋白,Cl<年代up>−/ H C O 3 - - - - - - 换热器,K<年代up>+频道,Na<年代up>+/ K<年代up>+腺苷三磷酸酶,至少在部分。

 相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

 确认

本研究支持由(1)中国国家自然科学基金(没有。81473644);(2)临床医学开发项目北京市医院管理局(没有。ZYLX201411);(3)卫生技术人员的项目北京卫生系统(没有。2011-2-13)。作者感谢上面的三个项目的所有成员的合作和支持。