循环粘附分子(Circulating adhesion molecules, CAMs)是表达于血管内皮的表面蛋白,已成为心血管疾病(cardiovascular disease, CVD)的危险因素。CAMs参与细胞间通讯,被认为在动脉粥样硬化中发挥作用。中药“丹东丸”(DP)(又称“补心丸”)由丹参、三七和冰片三种中草药组成,在中国用于预防和管理心血管疾病。此前的实验室和动物研究表明,该制剂可以减少动脉粥样硬化发生和粘附分子表达。一项平行双盲随机安慰剂对照研究评估DP对轻度-中度高胆固醇血症患者三种CAM(细胞间细胞粘附分子-1 (ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1和内皮细胞选择素(e-选择素))的影响。次要终点包括生化和血液学变量和临床效果。40名参与者被随机分为治疗组和对照组,为期12周。DP治疗与ICAM-1下降有统计学意义(9%下降,据italic> P.据/italic>= .03)和e -选择素(下降15%,据italic> P.据/italic>= 04)。在肾功能试验、肝功能试验、葡萄糖、脂质或c反应蛋白水平没有显著变化,临床不良反应在活动组和对照组之间没有差异。在接受安慰剂的参与者中没有相关的变化。这些结果表明,这种草药可能有助于发展一种新的方法,以降低心血管风险。据/p>
循环粘附分子(CAMs)是由血管内皮表达的蛋白,参与细胞间通讯,被认为在动脉粥样硬化过程的开始中发挥作用。CAMs有几个家族,包括整合素、钙粘蛋白、选择素和免疫球蛋白超家族成员[据xref ref-type="bibr" rid="B1"> 1据/xref>].在动脉粥样硬化中最重要的粘附分子是细胞间细胞粘附分子-1 (intercellular cell adhesion molecule-1, ICAM-1)、内皮细胞选择素(endothelial cell selectin, E-selectin)和血管细胞粘附分子-1 (vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)。ICAM-1水平的升高被发现预示着心血管事件风险的增加[据xref ref-type="bibr" rid="B2"> 2据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B3"> 3.据/xref>],包括健康人士[据xref ref-type="bibr" rid="B4"> 4.据/xref>].p -选择素和e -选择素水平已被发现可以预测健康女性的心血管疾病风险[据xref ref-type="bibr" rid="B5"> 5.据/xref>],而在稳定的冠状动脉疾病患者中,e -选择素的血浆水平似乎反映了系统性动脉粥样硬化的严重程度[据xref ref-type="bibr" rid="B6"> 6.据/xref>].VCAM-1可能是晚期动脉粥样硬化更特异的标志物,因为它通常在动脉粥样硬化斑块中表达[据xref ref-type="bibr" rid="B7"> 7.据/xref>],而较高的水平与现有心血管疾病患者发生冠状动脉事件的风险增加有关[据xref ref-type="bibr" rid="B2"> 2据/xref>].有一些证据表明,降低粘附分子循环水平的措施也能降低心血管风险[据xref ref-type="bibr" rid="B8"> 8.据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B9"> 9.据/xref>].据/p>
在西方社会,草药和草药疗法的使用是广泛和日益增加的,特别是在疾病预防和慢性病管理方面。丹参和三七是中国传统医学中常用的预防或治疗心脏和血管疾病的中药材。天津天士力制药有限公司将这两种草药和第三种药物冰片混合在一起生产,命名为“丹通丸”(DP)(也称为“心脏强直丸”),在中国、澳大利亚和美国政府机构认证的“GMP”和“GLP”条件下。该产品已在中国销售据inline-formula>
我们之前的研究表明,在培养的人血管内皮细胞中,DP能显著降低肿瘤坏死因子据italic> α据/italic>粘附分子的表达诱导的ICAM-1和以剂量依赖的方式并抑制血小板衍生的生长因子VCAM-1 BB诱导的DNA合成和细胞增殖培养的人血管平滑肌细胞[据xref ref-type="bibr" rid="B13"> 13据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B14"> 14据/xref>].此外,我们发现,在一个小鼠模型atherosclerosis-apolipoprotein E缺乏老鼠的硬化的diet-administration DP防止增加VCAM-1表达和抑制脂肪条纹的发展和胸主动脉粥样硬化斑块的不改变流通的脂质水平的(据xref ref-type="bibr" rid="B15"> 15据/xref>].据/p>
本研究旨在检测DP对轻度至中度高胆固醇血症患者粘附分子表达的影响,并获得该产品在西方人群中的耐受性和安全性数据。据/p>
本研究采用平行双盲、随机、安慰剂对照设计。40名轻度至中度胆固醇升高的受试者被随机分配给DP或匹配安慰剂,为期12周。这项研究是一项关于中草药对心血管风险影响的更大调查的一部分,其他方面的研究将在其他地方报道。这项研究是根据世界医学协会的《赫尔辛基宣言》(2000年)进行的。据/p>
研究对象为18岁及以上健康人群,血浆总胆固醇5.0 mmol/l及以上,甘油三酯水平为据inline-formula>
在基线评估(来访1)后,参与者被随机分为胶囊型DP或安慰剂组,每天3次,每次3粒,持续12周,之后再次进行评估(来访2)。参与者被要求在研究期间保持他们目前的饮食和运动方案。他们每三周就会通过电话联系他们,以确定副作用并鼓励他们遵守,这是通过检查未使用的退回包来评估的。在研究的第一周和最后一周,他们还被要求完成一份为期4天的饮食日记和锻炼问卷。据/p>
主要结果变量为ICAM-1、VCAM-1和e -选择素的循环水平。次要结果包括血清尿素、电解质、肌酐、葡萄糖、肝功能、血脂、全血检查和高敏c反应蛋白。据/p>
DP是由天津天士力制药有限公司生产的草药产品,由丹参、三七和冰片合成三种中药混合而成。该制剂和单个草药已被澳大利亚治疗用品管理局批准在澳大利亚使用,并广泛可用。据/p>
天津天士力制药公司在中国进行的动物毒性研究表明,在长达6个月的研究中,DP对小鼠没有毒性作用。采用小鼠单胃管法测定DP提取物的致死剂量(LD50),并采用中国政府推荐的“Bliss法”计算LD50据italic> 新药(中药)临床前研究指南据/italic>[据xref ref-type="bibr" rid="B16"> 16据/xref>].LD50为25.807 g/kg,相当于临床人体口服剂量6.56 mg/kg的3934倍。据/p>
采用荧光激活细胞分选法(FACS)检测循环白细胞中ICAM-1、VCAM-1和e-选择素的表达。分离血浆后收集全血细胞,置于裂解缓冲液(BD Pharm Lyse (Cat。No. 555899), BD Biosciences Pharmingen, San Diego, CA, USA)据inline-formula>
在阿尔弗雷德医院病理科使用已建立的技术对其他血清标志物进行检测。这些包括总血清胆固醇、甘油三酯、hdl -胆固醇和c -反应蛋白(前3个月采用罗氏方法,其余研究采用雅培方法,交叉校准值的一致性)、LDL胆固醇(雅培,伊利诺伊州,美国)、同型半胱氨酸(雅培AxSym)、纤维蛋白原(诊断Astago STAR上的Von Claus方法)、Von Willebrand因子(ELISA手册法)。据/p>
该研究旨在能够识别总血清胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的10%变化,1型误差为0.05,乘数为0.8。对所有确定的结果变量进行组内分析。数据是正常的,配对的学生据italic> T.据/italic>以及使用。如果数据的正态性检验被违反,则使用Wilcoxon符号秩检验。一个双边据italic> P.据/italic>- 0.05的值被认为具有统计学意义。据/p>
共有40名受试者中,每个药物组20中,完成了研究协议。参与者每个组中的特性被列于表据xref ref-type="table" rid="tab1">
1据/xref>.在参与者的平均年龄、饮酒量、体育活动、饮食内容或身体质量指数方面,两组之间没有显著差异。根据贝克身体活动问卷,在研究期间,两组的身体活动都没有显著变化[据xref ref-type="bibr" rid="B17">
17据/xref>].据/p>
在DP组中,循环中ICAM-1和e -选择素水平显著下降(分别下降9和15%)。在安慰剂组中,任何CAMs测试都没有显著变化。两组中VCAM-1水平均无显著变化(见表)据xref ref-type="table" rid="tab2">
2据/xref>).据/p>
有两组之间的不良反应没有差别。五名参加DP组,安慰剂组和三个在报道各种症状,在自然界中主要是胃肠道,如腹胀,大便,轻度恶心的改变,嗳气和胃液返流。安慰剂组中的一个参与者退出研究随机6周后因消化不良。据/p>
没有临床上或统计学上在尿素和电解质,血糖,脂质,血红蛋白显著变化,血小板计数,在任一组白细胞计数或C反应蛋白(数据未显示)。有在派生血液学参数和胆红素的参考范围两组正常成人,这是在两组之间不同内的微小的变化。肝酶丙氨酸转移酶的DP组中的基准范围内显著下降(据inline-formula>
本研究表明,对轻度至中度脂质水平升高的男性和女性给予中药复方DP 12周,与CAMs ICAM-1和e -选择素表达降低有关。研究还表明,在这种环境下,该制剂具有良好的耐受性,并且没有显著的生化不良反应。据/p>
的CAM已成为心血管疾病的危险因素。他们被认为通过调解中白细胞招聘的各个步骤在动脉粥样硬化过程开始发挥重要的作用。动脉粥样硬化的发展粘附分子表达的上调已经在动物模型和人类[被观察据xref ref-type="bibr" rid="B18"> 18据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B19"> 19据/xref>].动脉粥样硬化部位的白细胞募集是由内皮细胞表面表达的CAM介导的,在动脉粥样硬化早期,内皮细胞结合循环白细胞到血管内皮[据xref ref-type="bibr" rid="B6"> 6.据/xref>].CAM基因表达在炎症状态下通过内皮细胞、平滑肌细胞和白细胞等多种细胞释放细胞因子上调[据xref ref-type="bibr" rid="B1"> 1据/xref>].除了细胞因子刺激外,血流动力学剪切应力也能增加ICAM-1的表达[据xref ref-type="bibr" rid="B20"> 20.据/xref>].ICAM-1和VCAM-1介导了白细胞对内皮细胞更强的附着,而选择素(e -选择素,p -选择素)介导了短暂的白细胞在内皮表面滚动[据xref ref-type="bibr" rid="B7"> 7.据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B20"> 20.据/xref>].据/p>
ICAM-1水平的升高被发现预示着心血管事件风险的增加[据xref ref-type="bibr" rid="B2"> 2据/xref>-据xref ref-type="bibr" rid="B4"> 4.据/xref>].患者E-选择的稳定型冠状动脉疾病的血浆水平被合成和出口在炎性情况下内皮细胞表面[上据xref ref-type="bibr" rid="B21"> 21据/xref>],似乎反映了系统性动脉粥样硬化的严重程度[据xref ref-type="bibr" rid="B6"> 6.据/xref>].p -选择素水平预测健康女性心血管疾病风险[据xref ref-type="bibr" rid="B5"> 5.据/xref>].VCAM-1可能是晚期动脉粥样硬化的特异性标志物,因为它通常在动脉粥样硬化斑块上表达[据xref ref-type="bibr" rid="B7"> 7.据/xref>]和VCAM-1的水平与动脉粥样硬化的程度相关[据xref ref-type="bibr" rid="B22"> 22据/xref>].鉴于这些事实,有人认为粘附分子及其相互作用可能是降低心血管风险和管理CVD的有用的治疗靶点[据xref ref-type="bibr" rid="B23"> 23据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B24"> 24据/xref>].据/p>
这些CAMs主要由内皮细胞产生,尽管骨髓基质细胞和一些其他细胞在特定条件下也有适度表达ICAM-1和VCAM-1 [据xref ref-type="bibr" rid="B25"> 25据/xref>].循环水平的CAMs增加白细胞结合,可以被FACScan分析准确量化[据xref ref-type="bibr" rid="B1"> 1据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B2"> 2据/xref>].我们的结果清楚地表明,在白细胞表面可以检测到ICAM-1、VCAM-1和e -选择素,DP治疗12周可降低e -选择素和ICAM-1的表达。据/p>
丹参对心血管系统的一些作用已经被证实,包括降低胆固醇和甘油三酯水平,促进心肌缺血后的恢复[据xref ref-type="bibr" rid="B26"> 26据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B27"> 27据/xref>和减少粘附分子表达[据xref ref-type="bibr" rid="B28"> 28据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B29"> 29据/xref>].丹参含有多种活性化学成分,目前已鉴定的活性化学成分近100种。其中最重要的是亲脂性丹参酮如丹参酮IIA和亲水酚酸,特别是丹参素、原儿茶醛和丹酚酸[据xref ref-type="bibr" rid="B30"> 30.据/xref>].据/p>
三七传统上用于内出血和外出血的止血作用[据xref ref-type="bibr" rid="B31"> 31据/xref>,据说能增加冠状动脉血流量,减少心肌耗氧量[据xref ref-type="bibr" rid="B32"> 32据/xref>及扩张冠状动脉[据xref ref-type="bibr" rid="B26"> 26据/xref>].三七的有效成分有胡麻皂苷A、胡麻皂苷B、胆碱、三叶油[据xref ref-type="bibr" rid="B31"> 31据/xref>].人们发现皂素可以降低血脂[据xref ref-type="bibr" rid="B33"> 33据/xref>],动脉粥样硬化限制通过抑制主动脉平滑肌细胞的增殖[据xref ref-type="bibr" rid="B34a"> 34据/xref>那据xref ref-type="bibr" rid="B34b"> 35据/xref>]及减少炎症[据xref ref-type="bibr" rid="B35"> 36据/xref>].在大鼠模型中,三叶油具有抗氧化作用,减少血栓形成并抑制缺氧缺血期间的心律失常[据xref ref-type="bibr" rid="B36"> 37据/xref>].合成冰片的主要化学成分为倍半萜:外消旋冰片、异冰片和樟脑[据xref ref-type="bibr" rid="B37"> 38据/xref>].据/p>
在目前的研究中,DP中包含的草药混合物的作用似乎是专门降低粘附分子ICAM-1和e -选择素的循环水平。结合之前在减少动脉粥样硬化发生的动物模型中证实的效果,这表明该产品可能为进一步研究CVD的潜在机制提供了一个有用的模型。它也可能有助于发展新的策略来预防CVD和限制现有动脉粥样硬化病变的发展。进一步的研究是必要的,以确定该草药制剂的成分,负责这些作用。据/p>
然而,重要的是要注意到这项研究的局限性,该研究的人数较少,主要针对的是基本健康的个体,不服用传统药物,依赖替代药物而不是临床终点。草药产品的效果可能在其他临床环境中有所不同,特别是在活跃的CVD受试者中。这种大小的循环黏附分子变化的意义尚不确定。众所周知,体育锻炼可以减少粘附分子的表达,而心理压力会增加粘附分子的表达[据xref ref-type="bibr" rid="B38"> 39据/xref>].在我们的研究中,体育锻炼没有改变。虽然没有理由相信,在研究期间,两组之间的心理压力水平存在差异或压力水平的变化,但我们没有直接测量这些,因此压力应该被视为一个潜在的混杂因素。据/p>
总之,在患有轻度人类受试者到中度升高的脂质水平包含在DP草药的混合物似乎对降低的CAM ICAM-1和E-选择一个特定的效果。本产品可能会导致心血管疾病,并为它的预防和管理两新策略发展机制的进一步调查。据/p>
澳大利亚联邦教育科技部、中国科技部(澳中基金资助);天津天士力制药股份有限公司(科研经费)。Ling博士得到了澳大利亚国家健康和医学研究委员会的一个行业协会的支持。据/p>
作者要感谢杰奎琳·怀特黑德女士的饮食分析。K. A. O 'Brien博士和P. A. Komesaroff教授是莫纳什大学的员工,并从天津天士力制药公司获得了时间补偿。Z.-X博士。Guo和R. Luo女士是天士力制药公司的员工。据/p>