c反应蛋白 心脏病学研究和实践 2090 - 0597 2090 - 8016 Hindawi 10.1155 / 2021/8869264 8869264 研究文章 切割的效果和机制上胸交感神经干在动态狗持续性房颤的心室率 蔡 杰 唐 最小值 刘 郝 丁 Shiao 陆 荣鑫 王 魏 马 南 https://orcid.org/0000 - 0002 - 3419 - 7978 梅 居 https://orcid.org/0000 - 0002 - 5206 - 0852 江 Zhaolei 罗查 Manoel Otavio C 心胸外科部门 新华医院 医学院的 上海交通大学 上海200092 中国 sjtu.edu.cn 2021年 2 2 2021年 2021年 17 9 2020年 27 12 2020年 18 1 2021年 2 2 2021年 2021年 版权©2021杰Cai et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

客观的。目的是观察切割的效果和神经机制上胸交感干(TST)心室率(VR)在持续性心房纤颤(房颤)。 方法。十二个小猎犬的狗被减半对照组和实验组,每组6只狗。两组进行左心室快速节奏(600次/分钟)诱发心房颤动持续实验组接受削减上结核菌素持续房颤模型建立之后,而对照组接受开胸没有削减结核菌素。两国星状神经节(SG)和左心室心肌收获了酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色。 结果。切割上测试了30分钟后,平均VR bpm 121.5±8.7 (95% CI, 114.8 - 128.0)在实验组,这明显慢于对照组(144.5±4.2 bpm (95% CI, 141.5 - 148.0)) ( P < 0.001 )。切割上结核菌素1月后,实验组的平均VR bpm (106.5±4.9 (95% CI, 102.0 - 110.0))也显著放缓与对照组的bpm (139.2±5.6 (95% CI, 135.0 - 143.8)) ( P < 0.001 )。与对照组相比,都离开了星状神经节(汉莎天厨)和右星状神经节(显示)引起的实验组神经重构的特点是神经节细胞密度减少和降低染色。TH-positive组件的左心房明显减少实验组与对照组相比。 结论。切割上结核菌素可以减少快速VR在持续性房颤。切割上结核菌素诱导双边SG神经重构,降低交感神经密度在左心房,这可能导致房颤期间VR的底层机制控制。

 中国国家自然科学基金 81570290 81600264 81974023 上海市科学技术委员会 19411963800 20 y11910700 上海年轻医生培训项目,国家重点临床专业 1。介绍

心房颤动(房颤)是最常见的心律失常在临床实践中,它具有较高的发病率和死亡率( 1]。节奏和速度控制都是可接受的策略在管理房颤患者( 2]。自主神经活动与心房arrhythmogenesis增加了作为一个触发器,可以诱发心房tachyarrhymias如心房心动过速(AT)和房颤( 3- - - - - - 5]。增加交感神经活动中扮演一个重要的角色在房颤的发生和维护 6- - - - - - 8]。胸交感神经干(TST)是心脏交感神经,最重要的资源已成为一种新颖的目标为房颤管理( 6- - - - - - 9]。

星状神经节(SG)是最重要的组成部分,上部结核菌素( 7, 9]。目前,很少有研究实现阻塞SG抑制结核菌素去除或成就阵发性房性心动过速的感应(PAT)或阵发性心房纤颤(PAF)参谋长( 8, 10]。然而,成就的上部SG可能导致霍纳氏综合征;结核菌素减少的影响,只剩下切除的下部时星状神经节(汉莎天厨)持续性房颤和心脏神经重塑仍不确定。本研究的目的是观察切割的影响上结核菌素只有成就汉莎天厨在下部的心室率(VR)在持续性房颤走动的狗。同时,本研究观察切割的影响上结核菌素在心脏神经重塑双边SG和左心房的持续性房颤的犬模型,这可能是一个可能的削减上结核菌素的抗心律失常的作用机制。

 2。方法

动物协议是机构批准的动物保健和使用委员会在新华医院、上海交通大学医学院和符合的保健指南和使用实验动物(xhec - f - 2018 - 057)。十二个成熟健康的男性小猎犬的狗(动物实验中心、新华医院、上海交通大学医学院)15 - 25公斤减半被随机对照组和实验组,每组6只狗。对照组仅仅是执行与左心室快速节奏(600次/分钟)诱导持续性房颤。实验组与快速处理左心室踱步(600次/分钟)和接收上层TST持续性房颤后记录。

2.1。持续性房颤模型的建立

所有狗的两组与左心室节奏快速构建一个处理持续性房颤模型。每个狗注射Zoletil(10 - 15毫克/公斤,肌内)与2%∼4%异氟烷麻醉诱导和维持气管插管,机械通气,然后接受开胸后通过第四肋间左边的胸部。两个心外膜起搏器电极被缝到左心房附件分别在2厘米的距离,这是连接到一个植入式无线设备的心电图(ECG)采集和刺激器(ensen esst - 79 5,恩施医疗科技(上海)有限公司,有限公司)。另两个电极被缝合皮下组织的左胸部记录心电图信号。后踱步参数设置适当(节奏模式,不断刺激;电压,1500 mV;频率、10赫兹;脉冲宽度,1 ms),左边的植入式装置是皮下注射定位胸部。每个狗收到为期3天抗生素手术后为0.5 g / d头孢呋辛。经过一个星期的术后恢复,快速(600 bpm)左心室踱步然后连续一个星期。 After one week, the stimulating model of the device was turned off to determine the presence of sustained AF (lasting >48 hours) [ 11, 12]。如果犬没有持续性房颤,心房节奏持续了一个星期,心电图监控每周直到房颤持续记录。

 2.2。上胸交感神经干和记录虚拟现实

持续性房颤的建立后,狗被不断监控2周。实验组的狗然后接受削减上测试的过程只有成就汉莎天厨通过下部的左边第三肋间隙,而对照组的犬只收到了开胸没有削减上测试。左边第三个开胸肋间后,蜂窝和周围脂肪组织分离的7th颈椎和第一肋骨,汉莎天厨被暴露在左胸腔 (图 1(一) );汉莎天厨切除的下部 (图 1 (b))。

上测试。汉莎天厨(黄色箭头)(a)被暴露在左胸腔。汉莎天厨切除(b)的下部(黄色箭头)。

心电图记录,分别在不同的时间点(之前的实验小组,麻醉,麻醉后30分钟,在切割之前测试,切割测试后30分钟;为对照组,在麻醉,麻醉后30分钟,开胸之前,开胸后30分钟)。每个狗收到为期3天的抗生素,头孢呋辛在第二次手术0.5 g / d。心电图记录后再复苏的一个月。心电图是用于虚拟现实分析。然后,狗被安乐死。

 2.3。免疫组织化学研究

双边SG组织和左心室心肌组织得到了所有的狗和固定在4%福尔马林45分钟,其次是存储在70%的酒精酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色使用anti-TH抗体(美国Immunostar 22941)。组织石蜡包埋,切成5 μ通常米厚的部分。所有幻灯片都检查下手动DP72显微镜(奥林巴斯、东京、日本)。一个失明的观察者见随机选择200 x领域最高的神经节细胞密度。神经节细胞的平均数量和TH-negative神经节细胞的平均百分比计算。左心室心肌内的密度TH-positive神经组织与图像J软件决定。

 2.4。数据分析

数据报告为平均值±标准偏差(SD)和95%可信区间(CI)。所有数据进行正常使用达和皮尔森正常测试。配对 t以及进行比较的差异在不同实验时间点在同一组。独立的 t以及进行比较实验组和对照组之间的差异。为数据与nonnormality Wilcoxon rank-sum测试是用来比较组之间的数据。一个 P ≤0.05被认为是具有统计学意义的价值。

 3所示。结果 3.1。持续性房颤模型建立

左心室快速节奏3∼6周后,一个稳定的持续性房颤模型已成功开发的所有的狗。房颤治疗没有显著差异,实验组之间的诱导时间(4.2±0.8周(95% CI, 3.6 - 4.8))和对照组(4.5±1.0周(95% CI, 3.7 - 5.3)) ( P = 0.541 , t=−0.632)。

 3.2。房颤期间削减上结核菌素对虚拟现实的影响

表 1显示切割上结核菌素的影响在VR房颤在不同时间点在实验组和对照组。成立后持续性房颤,平均VR在房颤是bpm 157.3±7.9 (95% CI, 151.0 - 163.7)实验组和bpm 154.2±5.8 (95% CI, 149.8 - 158.8),对照组( P = 0.450 , t= 0.787)在麻醉前走动的狗(AF基线)。麻醉后,在切割之前上测试,之间没有显著差异平均虚拟现实实验小组bpm (143.7±5.2 (95% CI, 139.8 - 148.0))和对照组(146.0±3.0 bpm (95% CI, 143.6 - 148.4)) ( P = 0.362 , t=−0.954)。切割上测试了30分钟后,平均VR bpm 121.5±8.7 (95% CI, 114.8 - 128.0)在实验组,这明显慢于对照组(144.5±4.2 bpm (95% CI, 141.5 - 148.0)) ( P < 0.001 , t=−5.829)。切割上结核菌素1月后,实验组的平均VR bpm (106.5±4.9 (95% CI, 102.0 - 110.0))明显慢与对照组的bpm (139.2±5.6 (95% CI, 135.0 - 143.8)) ( P < 0.001 , t=−10.763)。

切割上结核菌素的影响在VR房颤。

参数 实验组(bpm) 对照组(bpm) t价值 P 价值
之前(AF基线) 157.3±7.9 154.2±5.8 0.787 0.450
麻醉后,在切割之前上测试 143.7±5.2 ∗ 146.0±3.0 ∗ −0.954 0.362
切割上测试后30分钟 121.5±8.7 ∗ 144.5±4.2 −5.829 < 0.001
切割上测试后1个月 106.5±4.9 ∗ 139.2±5.6 ∗ −10.763 < 0.001

∗ P < 0.05 与房颤基线。

 3.3。切割的影响上TST汉莎天厨神经重塑

汉莎天厨组织成功收获所有狗的分析。图 2显示了一个示例的神经重塑的汉莎天厨对照组和实验组。与对照组相比,神经重构的特点是神经节细胞密度减少和降低TH染色可见汉莎天厨研究在低功耗领域所有切割上测试后1个月实验组。与对照组(76.3±0.8,95%置信区间CI: 74.8 - -77.9),平均神经节细胞数量显著减少的汉莎天厨实验组(58.7±2.3,95%置信区间CI: 54.1 - -63.2) ( P < 0.001 , t= 7.160)。的平均百分比TH-negative汉莎天厨的神经节细胞实验组(28.2%±3.2%,95%置信区间CI: 21.9% - -34.5%)显著高于汉莎天厨对照组(6.3%±0.6%,95%置信区间CI: 5.1% - -7.5%) ( P < 0.001 , t= 6.711)。

TH染色的汉莎天厨对照组和实验组。(一)汉莎天厨对照组低倍镜下看到。(b)的汉莎天厨实验组低倍镜下看到。与对照组相比,TH染色的汉莎天厨在实验组较弱。汉莎天厨对照组(c)高倍镜下看到。TH染色显示TH-negative神经节细胞(红色箭头)和TH-positive神经节细胞在汉莎天厨(棕色)。(d)的汉莎天厨实验组高倍镜下看到。与对照组相比,TH染色显示,神经节细胞的数量明显减少,但TH-negative神经节细胞的数量显著增加在汉莎天厨的实验组。切割的影响上结核菌素的神经重塑对SG(显示)。

对SG(显示)的狗是成功获得了分析。图 3显示了一个示例显示神经重塑的对照组和实验组。TH染色显示TH-negative神经节细胞(红色箭头)和TH-positive神经节细胞(棕色)。与对照组(73.5±2.3,95%置信区间CI: 69.0 - -78.0),显示的意思是神经节细胞数量显著减少在实验组(63.2±1.6,95%置信区间CI: 60.1 - -66.2) ( P = 0.004 , t= 3.713)。此外,平均值的百分比TH-negative神经节细胞显示的实验组(12.8%±0.9%,95%置信区间CI: 11.1% - -14.6%)明显高于对照组(5.4%±0.8%,95%置信区间CI: 3.8% - -7.1%) ( P < 0.001 , t= 6.074)。

TH的染色显示实验组对照组(a)和(b)。(a)的显示对照组高倍镜下看到。TH染色显示TH-negative神经节细胞(红色箭头)和TH-positive神经节细胞(棕色)显示。(b)的显示实验组高倍镜下看到。与对照组相比,TH染色显示,神经节细胞的数量明显减少,但TH-negative神经节细胞的数量显著增加的显示实验组。

 3.4。切割上结核菌素对神经的影响左心房重构

左心室心肌组织的所有狗都成功地获得了分析。图 4显示了一个典型的例子,神经在两组之间的左心房重构。与对照组(4.1‰±0.4‰,95%置信区间CI: 3.3‰- -4.9‰),平均TH-positive面积比在左心房心肌在实验组显著下降(2.2‰±0.2‰,95%置信区间CI: 1.8‰- -2.6‰) ( P = 0.002 , t= 4.041)。

左心房的TH染色实验组对照组(a)和(b)。对照组(a)的左心房高倍镜下看到。(b)的左心房实验组高倍镜下看到。TH染色显示TH-positive组件(红色箭头)显著降低左心房的实验组与对照组相比。

 4所示。讨论

这项研究证明了以下几点:(1)切割上结核菌素迅速有效控制虚拟现实在房颤的狗有节奏引起持续的房颤和(2)切割上结核菌可能导致心脏神经重构,降低交感神经密度与房颤持续双边SG狗,这有利于抑制心脏交感神经活性和控制快速VR在持续性房颤。

4.1。减少之间的关系上测试和VR在房颤

持续性房颤可以诱发心脏重构包括电气改造,这可能快速VR和减少心脏功能。节奏和速度控制都是可接受的策略在管理持续性房颤患者( 2, 13]。自主神经系统起着重要的作用在房颤的发生和维护 3- - - - - - 5]。在过去的几十年里,虚拟现实的替代策略控制包括迷走神经的神经刺激(VNS)开发 11, 12, 14, 15]。上测试是心脏交感神经的最重要的资源,已成为一种新的房颤的目标管理( 6- - - - - - 9]。

SG上测试是最重要的组成部分,它是一个交感神经节融合形成的颈下神经节和第一胸神经节( 7, 9]。以前的研究已经表明SG神经活动(SGNA)与虚拟现实加速和自发的心律失常,在抑制和减少SGNA可能有用快速心律失常和减少VR ( 16- - - - - - 18]。沈等人表明,慢性左低级迷走神经刺激法能有效地抑制左SGNA和减少走动的狗(PAT的发病率 14]。此外,西元等人也发现间歇性VNS可能导致减少SGNA和VR控制在持续性房颤走动的狗( 12]。然而,削减的影响上结核菌素只有成就汉莎天厨持续性房颤和下部的心脏神经重塑是不确定的。在这项研究中,我们观察到的影响减少上层结核菌素只有成就汉莎天厨在VR的下部。与对照组相比,平均VR明显慢30分钟和后一个月削减上结核菌素实验小组。我们的研究结果表明,切上结核菌素是有效的在控制快速VR和快速性心律失常在持续性房颤走动的狗。

 4.2。切割上结核菌素导致双边SG神经重塑与持续性房颤狗

在心脏arrhythmogenesis同情的语气是重要的。多项研究表明,SGNA VR加速度和心律失常有关,和减少SGNA可能有助于抑制心律失常( 16- - - - - - 18]。先前的研究已经表明,迷走神经刺激法可以抑制SGNA,拥堵的抑制的发生,或减少VR在房颤诱发SG神经重塑。这些研究表明,迷走神经刺激法导致神经重塑的SG TH-positive神经节细胞密度减少和更多TH-negative神经节细胞( 12, 14]。

在这项研究中,平均神经节细胞数量显著减少汉莎天厨和显示在两个实验组与对照组相比。的平均百分比TH-negative汉莎天厨和神经节细胞显示实验组的汉莎天厨和显示显著高于对照组。结果表明,切上结核菌素诱导双边SG神经重塑,这是虚拟现实的可能机制之一的控制上测试。然而,汉莎天厨似乎更重要的神经重塑的显示。

 4.3。切割上结核菌素与持续性房颤导致犬心脏神经重塑

心脏神经系统包括内在心脏神经系统(icn)是由心脏内的神经结构和外在心脏神经系统(ecn)组成的神经结构之外的心。ecn和icn已知与增加心房arrhythmogenesis或快速VR ( 6, 19, 20.]。蔡等人已经表明,有一个重要的时态关系外在心脏神经活动(ECNA;包括星状神经节神经活动和迷走神经的神经活动)和内在的神经活动(ICNA;包括心外膜ganglionated plexi马歇尔神经活动的神经活动和韧带),表明有一个ecn和icn[之间的通信 19]。刺激ecn通过迷走神经刺激法已被证明是有效地抑制房颤的发生和减少VR在持续性房颤( 12, 14, 15]。

在这项研究中,我们不仅发现切割上结核菌可能导致汉莎天厨和显示神经重构,但也发现切割上结核菌素可以降低交感神经密度在左心房心肌组织。与对照组相比,TH-positive组件的左心房明显降低实验小组。结果表明,切上结核菌素可以减少心脏交感传出,这可能是另一个可能的VR控制切削机理上测试。

 5。研究的局限性

本研究有两个局限性。首先,我们没有评估SGNA SG函数通过直接录音。其次,我们只观察切割左上角结核菌素的影响。削减右上结核菌素或双边结核菌素的影响应该在未来研究。

 6。结论

切割上结核菌素可以减少快速VR在房颤与节奏诱发房颤持续流动的狗。切割上结核菌素诱导双边SG神经重塑和左心房的交感神经密度下降,这可能会导致房颤期间VR的底层机制控制。

 数据可用性

数据存储在心胸外科部门,新华医院、医学院、上海交通大学、上海(200092),中国。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

 作者的贡献

杰唐Cai和最小的贡献同样工作。

 确认

作者感谢金融支持中国的国家自然科学基金(批准号。81570290,81570290,81974023),上海市科学技术委员会(批准号。19411963800和20 y11910700),和上海的年轻医生培训项目,国家重点临床专业。

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