胎儿游离DNA (cffDNA)循环在母亲的血浆最初确定大约二十年前;然而,cffDNA检测胎儿染色体异常的实验室使用直到2011年才可用( 1]。cfDNA筛查(也称为捏,NIPT)分析cffDNA循环在母亲的血浆。临床利用cfDNA筛查已经迅速融入产科实践,因为它提供了改进的敏感性,特异性,PPV相比一线和中期筛选。然而,cfDNA筛查也有局限性。cffDNA来源于凋亡胎盘滋养层细胞( 2];因此,cffDNA可能并不总是代表胎儿的染色体组成。尽管胎盘和胎儿组织的遗传因素在绝大多数的怀孕是一样的,假阳性或假阴性结果可能是由于胎儿胎盘镶嵌性。在几个报告的病例中,后续羊膜穿刺术基于积极cfDNA筛查结果已经确认正常核型,表明假阳性cfDNA筛选结果( 3- - - - - - 8]。虽然公布的数据表明高灵敏度(≥99%称21三体综合症,≥92%为三倍体18,三倍体13和≥87%)和特异性(≥99%称21三体综合症,18岁,和13)用于非整倍性检测( 9),假阳性结果已报告在胎盘镶嵌性,双胞胎或cotwin灭亡消失,胎儿染色体重排,和孕产妇染色体异常或恶性肿瘤 10- - - - - - 14]。根据一些报道,假阴性结果胎儿非整倍性比假阳性(不常见 4- - - - - - 6, 15, 16]。人们普遍认为假阴性cfDNA筛查结果主要是由于低水平的cffDNA分数在母亲的血浆,因此可以克服技术改进( 17]。然而,除了技术原因,数量有限的假阴性cfDNA筛查病例由于胎儿胎盘镶嵌性和/或结构染色体重排也被报道( 13, 18]。

19岁,孕妇2,帕拉1,女性接受产科超声在19岁5/7周的妊娠,这确定了多个胎儿异常包括左心房发育不良、双边唇裂,双边回波的肾脏肾盂积水,回波的肠道,右股骨鞠躬。提供遗传咨询和风险,福利,和备选方案的进一步遗传评估,包括羊膜穿刺术和cfDNA筛选,进行了讨论。病人的风险表示担忧关于入侵检测和选择继续cfDNA筛查。综述了cfDNA在此设置的局限性。cfDNA筛选了20周的胎龄。负面cfDNA染色体筛查结果发布13日,18日,21日,X, y尽管胎儿分数(胎儿DNA的比例在所有DNA在母亲的血浆)不包含在最终报告,后来调查测试实验室显示胎儿分数的8.5%。遗传咨询提供给病人在24-5/7周的妊娠期,在此期间与细胞遗传学分析进一步探讨羊膜穿刺术。病人再次拒绝侵入性测试。后引产术由于多个胎儿异常,一个男婴儿是顺产38-4/7周的胎龄。阿普加分数8、7和9日在一个,五个,分别为十分钟。 Physical examination revealed multiple anomalies including cutis aplasia on the scalp, cleft lip and palate, polydactyly, and cryptorchidism; postnatal echocardiogram confirmed hypoplastic left heart. The newborn also had respiratory insufficiency and was intubated due to signs of airway obstruction. A peripheral blood specimen was collected at birth and sent to the Cytogenetics Laboratory for postnatal evaluation.

20中期染色体分析,确定额外染色体13在每个中期(47,XY, + 13),表明nonmosaic三倍体13(图 1(一))。鱼也进行分析,和100%的核表示三个信号的13号染色体探针,也符合nonmosaic三倍体13(图 1 (b))。不幸的是,婴儿在出生后4天去世了。

我们建议不整合cfDNA和产后由于胎儿胎盘镶嵌性细胞生成的结果。为了验证这个假设,我们进一步评估胚胎外的组织样本。胎盘的正常体重(588克)和总出现胎盘和脐带正常妊娠38周的。绒毛膜绒毛显示轻微的绒毛状肿大和水肿增加Hofbauer细胞,但没有其他形态学异常。羊膜脐带的代表区域,绒毛滋养层,从胎盘绒毛间质,中间滋养层标识部分为非整倍性分析鱼。如图 1 (c),所有五种胚胎外的组织展示了不同级别的胚胎外的镶嵌性的三倍体13(58%,57%,32%,46%,和64%的核与三倍体13脐带,羊膜,绒毛滋养层,绒毛间质,和中间滋养层,分别地。、数据表中列出 1)。这些结果表明,镶嵌性的胚胎外的组织负责假阴性cfDNA筛查结果在这种情况下。

cfDNA筛查是革命性的产前筛查结果与增加的健壮的测试性能检测的敏感性和特异性常见的常染色体非整倍性(预断13、18和21)相对于其他非整倍体产前筛查方法。临床问世以来,曾有一些报道说cfDNA性能的高危人群(由先进的母亲的年龄,表示屏幕积极的在第一次——或中期血清生化检查、超声检查胎儿异常的存在,或个人或家庭成员的一个染色体异常),以及在低风险人群(大众) 4, 5, 9]。在高危妊娠,cfDNA筛选PPV为常见的常染色体非整倍性变化基于不同的研究从90.9%降至100%,而NPV仍然是99.9% -100% 4, 5, 9]。在低风险妊娠,PPV为常见的常染色体非整倍性已被报道为85.3%与99.9% NPV基于146958怀孕 4]。因此,尽管cfDNA筛查的临床性能被广泛接受和理想的筛查工具,它不适合作为诊断测试。

一些假阳性的原因和负面cfDNA筛查结果包括胎儿胎盘镶嵌性、消失的双胞胎/ cotwin灭亡,孕产妇染色体异常,和孕产妇转移性疾病。几个发表的报道假阳性和假阴性的cfDNA筛查病例涉及胎儿胎盘镶嵌性( 3, 8, 13, 18]。最常见的一种fetal-placental镶嵌性,在胎盘镶嵌性(CPM),是一个概念与正常胎儿和胎盘马赛克染色体异常( 19]。然而,假阴性cfDNA筛查结果不能用CPM来解释。相反,它可能是由于另一种类型的胎儿胎盘镶嵌性,有一个受影响的胎儿(可能nonmosaic)和马赛克或正常的胎盘。虽然假阴性cfDNA筛查结果三倍体13至少报告一次,致病机制的假阴性的结果是不确定的时间 20.]。这是第一次报告的案件与假阴性cfDNA筛查结果为三倍体13,是由胎儿胎盘镶嵌性引起的。预断18和21,这最近描述机制。假阴性三倍体18 cfDNA筛查结果由于48,XXX, + 18胎盘镶嵌性和假阴性2例已报告称21三体综合症由于胎盘镶嵌性( 3, 13]。胎儿胎盘镶嵌性的不和谐的潜在贡献cfDNA筛查结果报告;本研究建议cfDNA筛查的敏感性和特异性永远不会达到100%由于胎儿胎盘镶嵌性的本质。

这份报告描述了一个假阴性的情况下cfDNA三倍体13由于胎儿胎盘镶嵌性的结果。细胞遗传学分析表明,婴儿是三倍体13 nonmosaic三倍体13的胎盘组织马赛克。这种镶嵌性是在至少五个不同的胚胎外的组织包括脐带、羊膜、绒毛滋养层,绒毛间质,中间滋养层。在这种情况下,各种组织调查的三倍体13镶嵌性水平从32%到64%不等。胎儿所需分数健壮的检测水平的商业提供者之间的预断略有不同但通常是在4%的范围内。这里介绍,8.5%的胎儿分数的比例来自三倍体13积极胚胎外的组织很可能不到一半,从而减少功能胎儿分数小于所需的水平。类似的模式镶嵌性已报告与假阴性病例cfDNA筛查结果( 3, 13, 18]。这种类型的胎儿胎盘从CMP镶嵌性是不同的,这是更常见的病因不整合cfDNA婴儿和胎儿/细胞生成的结果。细胞遗传学分析婴儿脐带血以及婴儿体检建议nonmosaic三倍体13。然而,因为我们的研究仅限于单个标本类型的婴儿,我们不能排除这样一种可能性,即婴儿可能有镶嵌性在其他组织。这种情况下,连同其他的报告不整合cfDNA筛查结果,表明供应商应该理解和病人应建议关于cfDNA筛查的局限性。设置的一个积极cfDNA筛查结果,证实诊断测试是强烈推荐。这个案例报告还强调了诊断测试的重要性设置的多个负cfDNA胎儿异常的结果。预处理和后续测试的遗传咨询是重要的在这种情况下教育的好处和局限性cfDNA筛选,确保患者能够做出明智的决定。

在这里,我们报告一例与消极cfDNA筛查结果,产后诊断测试nonmosaic三倍体13的结果。鱼分析胎盘组织揭示胚胎外的三倍体13镶嵌性,可能负责假阴性cfDNA筛选结果。这个案例说明了cfDNA筛查的限制,如胎儿游离DNA来自胎盘,因此不能准确反映胎儿的遗传信息。因此,在设置多个胎儿异常与消极cfDNA筛查结果,诊断测试建议。