非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是脂肪酸的积累、甘油三酯和胆固醇在肝细胞的细胞质中。它发生在那些不喝酒或喝适度(< 20克/天)和肝脏中被认为是表达一个复杂的综合征称为“代谢综合症。“非酒精性脂肪肝临床实体包括两个:非酒精性脂肪肝(副功拜),指肝脂肪变性的存在没有证据表明肝细胞损害或纤维化和非酒精性脂肪肝(NASH),肝脂肪变性的存在,是与炎症和肝损伤有或没有相关纤维化。纳什可能发展为肝硬化、肝衰竭和肝癌( 1]。

非酒精性脂肪肝的患病率并不广为人知,可能是低估了。这是因为大多数病人保持无症状或有离散的生物变化,缺乏精确的血清学标记,肝活检明确诊断的必要性。然而,我们知道,脂肪变性是最常见的肝脏疾病之一,在西方世界,与肥胖和代谢综合征的增加有关,而且富于变化取决于人口研究。两艘日本研究[ 2, 3)发表了一普通人群的发病率31和86例,分别疑似非酒精性脂肪肝每1000人/年。严重肥胖患者接受减肥手术,非酒精性脂肪肝的患病率可能超过90%和5%肝硬化。

肝脂肪变性的治疗一旦建立实现主要通过饮食限制和生活方式的改变 4- - - - - - 7]。药物用于治疗代谢综合征(抗糖尿病药,他汀类药物等)也被使用( 8]。最近,各种抗氧化的功效,如维生素E和褪黑激素( 9- - - - - - 11),已被证明在治疗肝脂肪变性。目前还没有具体的无害和有效治疗肝脂肪变性。

褪黑素是一种天然的松果体激素合成的动物。褪黑素合成没有找到专门在松果体,作为其分泌被描述在众多周边视网膜等器官,骨髓,皮肤、胃肠道和在某些细胞如淋巴细胞和血小板( 12, 13]。

褪黑激素的主要特性之一是其强大的抗氧化作用[ 12),这是由于它能中和自由基及其间接排毒动作通过刺激抗氧化酶( 14]。已经证明褪黑激素补充剂可以预防一些疾病,如动脉粥样硬化、癌症和阿尔茨海默氏症。在肝脏代谢,褪黑激素测试作为药物来防止缺血再灌注过程中( 15)也作为治疗肝损伤的毒素如酒类、四氯化碳,黄曲霉素,或化疗药物 16- - - - - - 19]。

褪黑素已被证明是有益的在非酒精性脂肪肝的治疗和预防小鼠实验模型。实验研究进行了在啮齿动物中,大部分的意图防止食源性肝脂肪变性,观察降低血脂,改善肝酶和氧化应激减少参数,以及改善组织学( 20.- - - - - - 25]。几乎没有研究在大或小动物,证明这种效果。在人类中,证明脂的研究一直在进行,降低和cytoprotective褪黑素在肝脂肪变性的能力建立后,虽然是事实,几乎没有研究证实组织学改善( 26- - - - - - 29日]。

我们的工作假说是基于事实,褪黑素是一种有效的治疗逆转建立和诱导肝脂肪变性的一个特殊的饮食在猪的动物模型中,以及在小鼠模型中。我们研究的目的是评估褪黑激素的口服药物在脂质代谢的影响,肝组织学和氧化压力参数。

非酒精性脂肪肝肝过程是一种最普遍的西方社会,一个西方世界的肝衰竭的主要原因。通常伴随,但不仅限于,肥胖和代谢综合症,它可能会导致在未来真正的流行。众多作者表明,减少多余的重量和随之而来的胰岛素抵抗可以恢复肝脏生理学和组织学 8, 9]。但目前,没有有效的药物治疗非酒精性脂肪肝,不是一种生活方式的改变,包括减肥。hepatoprotectors许多药物,抗氧化剂,维生素复合物,自由基食腐动物,等测试过的想法避免肝细胞的脂质积累或从细胞中提取脂质,表现出有益的影响。

虽然需要更多的研究来定义其效用在非酒精性脂肪肝 32- - - - - - 37),一种药物的发现与这些属性可以改变疾病的范围和影响。

褪黑素,普遍在不同浓度激素产生,在几乎所有我们的解剖,研究了作为一个可能的解决方案的改变脂质代谢和脂肪沉积在肝细胞( 12]。实验研究表明,褪黑激素对脂肪代谢的作用,可以概括为减少脂质过氧化,减少氧化应激 13),生化现象密切相关,肝细胞中脂类的积累。其他影响归因于褪黑激素如下:刺激肝细胞抗氧化酶的抗氧化剂酶转录调节基因,清除氧自由基,刺激谷胱甘肽合成,增加其他抗氧化剂分子的活性,减少在线粒体自由基的生成,减少蛋白质的表达,影响肝细胞的脂质积累细胞质,细胞膜脂质过氧化,保护和减少促炎因子纳什负责非酒精性脂肪肝的发展。

描述了实验模型类似于人类的非酒精性脂肪肝。理想的模型是一个反映了组织学和疾病的生理病理学处于不同的阶段。当然,这个模型应该是可再生的,可靠、简单、可预测的和经济的。大多数这些模型在啮齿动物中均有描述。有几个模型肝脂肪变性的大型动物,他们中的大多数,肝损伤诱导的毒素如酒精管理局( 38, 39]。

李等人描述,2009年首次在大型动物纳什模型由饮食操纵使用Ossabaw小型猪( 40]。这个模型不是很有用的限制使用这些动物。在我们的工作中,我们使用一个实验模型,猪White-Landrace,我们复制脂肪变性。这个模型是原始和先前的研究充分证明了我们的群,只有通过饮食控制的特殊性,没有使用药物或毒物,控制和高程度的脂肪变性。迄今为止我们还没有找到任何模型发布诱发,不使用对肝脏有害的物质或积极的饮食(超过多不饱和、果糖脂肪或元素的赤字所必需的机会,如胆碱和蛋氨酸),一定程度的微小脂肪和我们的类似,在这么短的时间内,以最小的动物的生理影响。我们的实验模型的另一个优点是,它允许我们检查肝损伤和量化脂肪变性进行肝脏活检之前和之后的发展脂肪变性;在许多小鼠模型,这是不可能的,在人类,没有作者执行他们。

所有steatogenic饮食诱导描述动物的体重的增加。在我们的研究中,所有的动物在体重增加的引入steatogenic饮食。数据是一致的数据中发现文学(Ossabaw猪)。褪黑激素的影响是零在动物的重量。

为了探讨褪黑素对脂质代谢的影响,我们研究了脂质过氧化反应的多不饱和脂肪酸(法律流程外包)肝细胞(肝细胞脂质积累的过程中,自由基对脂类的作用主要发生在细胞样本的多不饱和脂肪酸,导致他们的过氧化反应)。这个过程的最终产品的法律流程外包是醛类,烃类气体,和各种化学残留物,MDA和4-HDA是多数。因此,MDA + 4-HDA是一个指标的浓度的脂质过氧化程度的生物膜( 41]。

在我们的研究中,我们发现,MDA和羰基减少服用褪黑素的团体对那些没有收到;因此,这表明一个激素对细胞内的脂质代谢的影响水平。

血浆胆固醇和甘油三酯水平增加动物受到steatogenic饮食但没有修改褪黑激素的影响有统计学意义。不过,我们可以观察到动物,继续饮食和褪黑激素(组1)表现出降低低密度脂蛋白和胆固醇水平和增加高密度脂蛋白水平。这可能表明一些保护作用的褪黑激素在这群动物,尽管它缺乏统计学意义。在文献中,我们发现作品批准褪黑素的降脂效果( 22, 24, 28, 42, 43]。可能认为这个结果的一个原因是,在我们的实验模型中,我们从建立肝脂肪变性,长期血脂水平升高,这种情况并没有发生在其他实验研究,由于褪黑激素是管理与政府的高脂肪饮食预防。

对肝酶的水平(ALT和GGT)、胆红素、FA,在我们的研究中,水平没有被褪黑激素的作用。在其他实验研究在小鼠模型中,锅等。 20.)能够证明政府的腹腔内褪黑激素剂量的5到10毫克/公斤/天12天是有效地降低血清ALT和AST。不同的是,与我们的工作之前的共同作者给实验动物的脂肪饮食和褪黑激素和我们的工作从动物与已建立的非酒精性脂肪肝;也就是说,也许褪黑激素不可能预防早期肝损伤时的效果(之前积累的脂肪在肝细胞),非酒精性脂肪肝时影响空已经建立。

这项工作由Hatzis et al。 21)在这方面给了我们一些光。作者能够证明肝细胞坏死在老鼠收到了显著降低饮食富含脂肪和褪黑激素在5毫克的剂量或10毫克/公斤/天通过腹腔内4 - 8周,发现AST和ALT水平低在收到药物。然而,在他们的工作,一群动物接受诱导脂肪变性(通过饮食)褪黑激素治疗之前,因为最后这群动物没有获得任何肝cytoprotective效果,就像动物在我们的研究中。它可以得出结论,褪黑激素是无效的建立非酒精性脂肪肝的治疗一次。在我们的工作中,非酒精性脂肪肝饮食后达到的程度是非常高的,比与其他实验模型进行的研究的结果类似,也许有中等度的脂肪浸润,褪黑激素可能会有些效果,这极端应该调查。

传统的肝脂肪变性程度的评价方法,使用世界上大多数作者,是由评估组织样品沾Hematoxylin-Eosin病理学家进行或多或少的主观评价。为了避免主观性,提高精度,我们也使用评价数字图像分析的方法通过程序创建的团队本身,对比这主观性。在我们的研究中,观察到测量脂肪变性的数字分析提供了在所有情况下一些平均值低于的直接视觉获得的病理学家。发表在《文学研究证实这种高估 44]。过高的一个解释,一些作者解释,是测量领域的肝细胞液泡是由计算机测量方法比纯粹的视觉方式,自从计算机能够消除样本具有相似的视觉方面(我们的计算机程序设计中,我们考虑到这一事实)。在我们的研究中,比例变化pretime之间的脂肪变性和posttime主题跟踪显示了两种方法的线形关系。总之,在我们的研究中,我们获得了这两种方法之间的相关性高,但过高的脂肪变性程度的病理学家分析。

在我们的研究中,褪黑激素无法恢复组织学,即使是低脂肪变性在基线数据,尽管我们观察到的脂肪浸润程度的现象,逐渐增加,如果动物继续把脂肪饮食,保持稳定,如果他们被给予褪黑素,有显著差异。这些数据证实在小鼠模型实验数据。Hatzis et al。 21]表明褪黑素的保护作用与高脂肪饮食管理同步;然而,这种效果不能被证明的老鼠接受褪黑激素在实验后期,即。一旦建立了肝脂肪变性,作为一个治疗。锅等。 20.)还表明,中等或高剂量的褪黑激素(5 - 10毫克/公斤/天)改善肝脂肪变性的程度当管理与此同时高脂肪饮食。

人类研究的障碍,他们不执行后活检证实肝脂肪变性的改善管理的褪黑素,可能是因为并发症的不小的比例,这种诊断方法。

通过这项工作,我们可以证明有保护作用的褪黑激素的低发展的组织样品中脂肪变性;然而,我们不能显示改进,如其他研究。我们还发现了一种降血脂药的影响褪黑激素,因为动物保持脂肪饮食和褪黑素减少总额的水平和低密度脂蛋白胆固醇同时提高高密度脂蛋白胆固醇的水平,尽管这些结果并不显著。如前所述,在我们的工作中,我们从非常高水平的脂肪变性。啮齿动物在实验研究服用褪黑素与来自饮食,所以这些研究旨在发现褪黑素的保护作用建立肝脂肪变性,肝脂肪变性的逆转,这是我们研究的目的。另一方面,在人类研究中,从我们开始的脂肪变性程度没有达到高水平的脂肪变性,我们开始。因此,可能褪黑素对肝损伤有预防效果,甚至作为治疗肝脂肪变性肝细胞的脂肪参与程度较低,难以扭转,当肝细胞的参与是大多数,不停止生产它的刺激。

要记住的另一个方面是褪黑激素管理时间。我们已经看到,在我们的研究中得到了积极的结果在分子水平上,在非酒精性脂肪肝的亲密的产生机理;也就是说,我们观察到褪黑激素变弱氧化应激和脂质过氧化作用组动物继续饮食;然而,在组织学水平上的变化只有被证明的时候防止恶化。这可能是因为政府时期的褪黑激素(4周)或剂量(10毫克/公斤/天)不足以观察肝细胞脂质积累的变化在组织学水平。研究时间管理时间的褪黑激素或高剂量需要证明这种效果。

我们相信,我们的研究最大的优点之一是使用的实验模型。从我们组原来那些有经验的在另一个工作 45]。此外,我们试图有个性的影响作用的褪黑激素的摄入脂肪的饮食。许多论文不包括组织与饮食中止或寻求纯粹的保护作用药物管理与饮食。在我们的工作中,我们更喜欢使用4个不同组的动物,这迫使我们使用相当数量的实验动物但允许我们模拟不同场景褪黑素可以作为一种药物管理治疗非酒精性脂肪肝。