BMRI 生物医学研究的国际 2314 - 6141 2314 - 6133 Hindawi出版公司 10.1155 / 2016/2401657 2401657 研究文章 压敏电阻器的msc发生独立失活带正电的残留在跨膜域 http://orcid.org/0000 - 0001 - 8955 - 3426 野村证券 武 1、2 2 Sokabe Masahiro 1、3 3 Yoshimura Kenjiro 1、4 4 三好 Daisuke 1 国际合作研究项目(ICORP) /解决方案面向科学技术研究(SORST) Cell-Mechanosensing项目 日本科学技术振兴机构 名古屋466 - 8550 日本 jst.go.jp 2 的康复 九州大学营养福利 北九州800 - 029 日本 knwu.ac.jp 3 力学生物学实验室 名古屋大学研究生院医学 名古屋466 - 8550 日本 nagoya-u.ac.jp 4 机械和控制系统 Shibaura理工学院 埼玉县337 - 8570年 日本 shibaura-it.ac.jp 2016年 22 12 2016年 2016年 05年 09年 2016年 23 11 2016年 2016年 版权©2016北野野村等。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

msc (mechanosensitive通道小电导)是无所不在地发现在细菌和中起着重要作用在避免对快速渗透downshock细胞溶菌作用。msc是调制的控制电压,但不知道如何msc感官膜电位。三个精氨酸残基(Arg-46 Arg-54, arg - 74)的跨膜域(TM)是可能的响应电压从msc结构。检查这些残留是否参与msc对电压的依赖关系,我们中和电荷的残渣用与天冬酰胺(R46N, R54N, R74N)。机械阈值的表达野生型msc和天冬酰胺突变体与电压范围从没有改变 - - - - - - 40 + 100 mV。相比之下,失活过程中野生型msc强烈受到电压的影响。的野生型msc灭活+ 60 + 80 mV,但不是 - - - - - - 60 + 40 mV。所有突变体的电压依赖性失活率测试,也就是说,R46N, R54N, R74N,和R46N / R74N msc,几乎与野生型的msc。这些发现表明,电压依赖性失活发生独立的正电荷R46, R54, R74。

 教育部、文化、体育、科学和技术 26460300 1。介绍

各类mechanosensitive (MS)通道存在于几乎所有生物体和探测部队由于机械刺激如触觉、听觉、肿胀,渗透压改变( 1- - - - - - 6]。小(msc)的细菌女士渠道和大型(MscL)电导被认为是作为一个“安全阀”保护细胞免受细胞溶解在渗透downshock通过释放osmolytes [ 7- - - - - - 9]。

msc直接激活膜拉伸( 10)和控制是由膜电压调制( 11- - - - - - 13]。msc晶体结构解析为3.9表明,msc是亚基与TM三螺旋的homoheptamer (TM1, TM2、TM3)。一个大胞质前庭与七方门户网站和一个远端入口可能充当离子渗透分子预滤器( 14- - - - - - 18]。msc的电导~ 1 nS和有轻微的偏好阴离子离子渗透( 10, 11]。

msc显示显著的压敏去极化条件下失活( 13, 19- - - - - - 22]。失活是当一个TM和胞质域之间的静电相互作用是中断( 21]。在TM1中精氨酸残基的位置46和74年TM2、分别,msc的预测作为电压传感器的候选人考虑电压门控钠<年代up>+K<年代up>+,Ca<年代up>2 +频道有一个数组的精氨酸残基特别是第四TM段(S4)携带的大部分控制电荷的电压传感器( 23- - - - - - 27)(图 1)。Arg-54在TM1中也可能容易因为它是嵌入在脂质双分子层膜电压模型结构( 28]。然而,这些精氨酸残基的上下文中没有检查压敏失活( 13, 19- - - - - - 21, 29日]。

Homoheptameric msc结构(2非统 30.])。残留46 ( 红色的),54 ( 蓝色的)和74年( 绿色)所示空间填充表示。跨膜(白色)和胞质(绿色)域丝带表示所示。

在目前的研究中,我们调查是否三个带电残基(R46、R54 R74)在msc的TM1和TM2领域参与压敏电阻器的失活利用膜片钳技术和低渗的冲击实验。我们的研究结果表明,压敏电阻器失活发生独立的带正电的残留TM msc的域。

 2。材料和方法

的 大肠杆菌应变PB111 ( Δ 米 年代 c 年代 )和MJF455 ( Δ 米 年代 c l Δ 米 年代 c 年代 )用于主机msc表达式在膜片箝和低渗的冲击实验 21, 31日]。在执行定点诱变 米 年代 c 年代 基因在pB10b向量mega-primer PCR方法( 32]。成功的诱变是由DNA测序验证。突变体在PB111或MJF455表示。

巨大的球形体准备描述( 33]。短暂,PB111细胞生长在修改磅(Luria Bertani)中含有0.5%的生理盐水代替1%的氯化钠( 11在头孢氨苄的存在(最终浓度:0.06毫克/毫升)。孵化后为1.5 h, IPTG(异丙基- β-D-thiogalactoside)添加(最终浓度:1毫米)诱导msc表达式。诱导时间是10分钟。消化的细胞收获溶菌酶(0.2毫克/毫升),并通过离心收集。

msc的频道活动被记录在由内向外膜块模式的膜片箝技术如前所述 32]。吸管的解决方案包含200毫米氯化钾,90毫米MgCl<年代ub>210毫米CaCl<年代ub>2,5毫米玫瑰(pH值6.0),而另外浴的解决方案包含300毫米蔗糖。用注射器负压应用在不同电压(细胞内潜在的对细胞外)从−100 + 40 mV获得msc和MscL的控制阈值。失活过程,评估压力控制使用高速Pressure-Clamp装置(HSPC-1;阿拉巴马州科学本月。Inc .韦斯特伯里,纽约)[ 34协议后,由Akitake et al。 13]。电流放大b AXOPATCH 200放大器(轴突仪器,促进城市,CA),和数据是5 kHz的采样率2千赫低通滤。pCLAMP 9软件(轴突仪器,促进城市,CA)是用于数据采集和分析。msc / MscL控制阈值比率测定压力(正比于膜张力)应用通过补丁吸量管所需的第一通道开放msc和MscL 32]。

细胞生存能力低渗的冲击后由先前描述的方法( 9, 31日, 35]。当细胞密度达到OD<年代ub>600年= ~ 0.15基本培养基,IPTG(1毫米)诱导表达。经过1 h的增长,这些细胞被稀释1:20 prewarmed基本培养基有或没有0.5 M氯化钠。downshock到0 M氯化钠介质应用于细胞为5分钟。downshock后,每个样本磅平皿上传播包含1毫米IPTG和孵化一夜之间在37°C计数集落形成单位的比值。downshock实验每个msc突变体进行了三次。

 3所示。结果

候选人精氨酸残基(R46, R54, R74)可能参与电压传感与天冬酰胺代替检查电荷中和的效果。因此,我们生成的三个单突变体(R46N、R54N R74N)和一个双突变(R46N / R74N)。检查这些突变对msc的控制阈值的影响,测量通道活动,同时通过一个补丁应用负压吸管由内向外膜块巨大的球形体表达野生型和突变体msc。图 2(一个)显示典型的野生型msc在膜电压的频道活动+ 20 mV。在增加负压,msc首先出现 (箭头)。通道电导~ 1 nS。进一步增加负压MscL开放~ 2.5 nS的电导 (箭头所指)。msc和MscL分配基于电导和阈值。使用MscL作为内标,msc的阈值是表示为比MscL (msc / MscL )。野生型msc的门槛时不断~ 0.6之间的膜(细胞质)可能是扫描−100和+ 40 mV(图 2(b))。每个msc的控制阈值突变(R46N, R54N、R74N R46N / R74N)也不断在这个电压范围0.6 ~。

野生型和突变体的特点PB111 msc (ΔmscS)细胞。(一)PB111细胞表达野生型msc。通道电流 (上)通过吸管和压力 (底部)所示。msc的insets显示放大和MscL痕迹表示 箭头和 箭头,分别。膜电压:+ 20 mV。(b)控制阈值比率(msc / MscL)野生型和突变体msc在不同电压(100−+ 40 mV)。值表示为均值±SEM(平均数标准误差)( n = 5 7)。(c) MJF455低渗的冲击的影响 (ΔmscSΔmscL)细胞表达msc或窝藏空向量(pB10b) (±SEM, n = 9 )。没有观察到显著差异之间的野生型和突变体msc。从野生型星号显示显著差异( p < 0.05 通过 t以及)。

当 E。 杆菌细胞暴露于低渗的条件,避免开msc和MscL细胞溶菌作用。一致,大多数MJF455 double-knockout (ΔmscLΔmscS)细胞窝藏空向量(pB10b)没有生存在低渗的冲击从0.5到0 M氯化钠(图 2(c))。低渗的冲击实验有利于膜片钳实验的msc活动可以在自然条件下进行评估。当细胞表达msc突变体与低渗的冲击、挑战与野生型阈值没有统计学差异msc (R46N; One hundred. ± 8 %,R54N; 108年 ± 7 %,R74N; 101年 ± 8 %和R46N / R74N; 105年 ± 13 %;图 2(c)),这表明电荷中和不改变细胞生存的msc活动在一定程度上受到影响。

msc展品突出压敏电阻器在去极化条件下失活( 13, 19- - - - - - 21]。测试是否带正电的中和残留在TM段修改失活,我们记录了失活胞质潜力从-60 + 80 mV。图 3(一个)说明了当前野生型msc的频道活动的痕迹 (上跟踪)。快速下降通道目前观察+ 60 + 80 mV,而当前的衰变是在负电位明显放缓。R46N msc还灭活+ 60 + 80 mV但不是在负电位(图 3(一个), 较低的跟踪)。此外,R54N msc、R74N msc, R46N / R74N msc显示快速失活的积极的潜力+ 60 + 80 mV(图S1)网上(见补充材料 http://dx.doi.org/10.1155/2016/2401657)。图 3 (b)描绘了失活的电压和时间常数之间的关系当一个指数函数拟合。所有msc突变体显示快速电流减少+ 60 + 80 mV速度类似于野生型msc。

失活的野生型和突变体在MJF455 msc表示 (ΔmscSΔmscL)细胞。(一)通道电流 (上)野生型和R46N msc在不同电压从−60 + 80 mV (中间)。Subsaturating负压 (底部)应用电压的变化。(b)在每个电压失活的时间常数。时间常数是更快的去极化电压+ 60 + 80 mV (±SEM, n = 5 9)。

在上面的实验中,失活的初始阶段并没有解决,因为它与激活阶段重叠。分离的失活过程激活过程,我们激活msc−20 mV通过应用负压,然后交换膜电位60 + mV(图 4(一))。从全开到关闭状态的转变两个指数函数拟合最好在野生型+ 60 mV msc:快和慢的时间常数 τ = 0.28 ± 0.03 证券交易委员会和 τ = 0.88 ± 0.27 分别交会。这个观察表明,压敏电阻器失活过程有多个流程。当相同的协议应用于R46N msc(图 4(一) 较低的跟踪),R54N msc、R74N msc, R46N / R74N msc(图S2),当前的衰退速度大致类似于野生型msc。

野生型和突变体的失活率MJF455 msc (ΔmscSΔmscL)细胞。(一)野生型的宏观电流 (上)和R46N msc (底部)。电压是由−20到60 + mV (中上)在压力的存在 (中下)。红色痕迹显示痕迹在msc被激活的压力完全(野生型和−−183 mmHg R46N msc 203毫米汞柱)。(b)时间常数的快和慢组件的野生型和突变体msc (±SE, n = 5 7)由当前跟踪两个指数函数拟合。

图 4 (b)总结了快速和慢速时间常数的野生型和突变体msc。要么组件在野生型和突变msc之间没有显著差异。以上的观察表明,带电残基在TM域不参与压敏电阻器的失活过程。

 4所示。讨论

带正电的数组S4段残留的电压门控离子通道负责压敏电阻器频道活动( 23, 24]。msc电压的依赖关系也可以归因于在TM1中带正电的残留物和TM2 27]。在目前的研究中,我们调查了在TM1中精氨酸残基的作用和压敏电阻器TM2 msc的失活。msc的信道特性突变体进行使用膜片箝技术和细胞生存能力测试。对我们的预测,我们发现的正电荷中和TM1和TM2 msc失活电压依赖性的影响很小。

电压传感器的电压门控钠、钾和钙通道包含6 - 7带正电的残留的保守模式(参数或赖氨酸)在他们的S4段( 36]。这些指控继续电势梯度的变化在TM域,导致通道控制。Kv通道的控制电荷被估计为每通道(12 - 13 37]。另一方面,msc的开放只是弱压敏电阻器,因此浇注的msc估计小每通道(约0.8 13]。相比之下,msc的失活是更依赖于电压和两个正电荷提出转移( 13]。

控制费用至关重要的运动理解压敏电阻器的机制msc的失活。带正电的残留R46、R54 R74预计接近的胞质表面脂质双分子层的封闭的静息状态。一般来说,当超极化去极化条件的膜电位变化,TM螺旋线与正电荷向细胞外端( 36]。另一方面,TM1和TM2 msc与膜脂质和疏水残基的两端TM1和TM2提供lipid-protein互动的重要mechanosensitivity [ 31日]。因此,即使电场改变,TM1和TM2可能移动方向垂直于膜因为紧两端lipid-protein交互的TM螺旋线。这种猜测认为反对这个主意,TM1和TM2继续去极化,但与目前的结果是一致的。

在分子动力学(MD)模拟研究中,中和R46和R74减少孔隙的水合作用,导致电导率的损失,尽管他们是遥远的孔隙( 38]。然而,我们的研究结果表明,中和这些带正电的残留物并不影响msc的电导。医学研究发现运动TM1和TM2±100 mV但不是在较小的电压;R46突变体的运动大大减少。这一发现也不适合我们的数据,失活发生在+ 60 + 80 mV,像野生型msc R46N msc使其失去活性。这些差异可能是由于医学研究中使用的晶体结构不同于结构下的脂质双分子层或膜。

各种型号的msc失活过程提出了:(1)收缩的细胞质前庭 39),(2)扭结pore-lining之间形成螺旋TM3a TM3b,连接门和细胞质技工( 29日),(3)的上表面之间的静电相互作用胞质技工和循环连接TM1-TM2螺旋 21]。然而,这些模型将残留在TM1和TM2指控。因此,我们推测,电位梯度不仅在TM领域还存在细胞质,细胞质前厅技工负责msc的电压依赖性失活过程。

总之,我们已经表明,在TM1中精氨酸残基的中和、TM2并不影响拉伸激活和压敏电阻器msc的失活。我们还发现,压敏电阻器失活过程有两个( 快和 慢)组件。这些组件的结构基础尚未确定。

 相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突。

 确认

这项工作得到了教育部的补助金,文化,体育,科学和技术,日本野村证券(Nomura)武(26460300)。

 Anishkin 一个。 龚 C。 微生物mechanosensation 目前在神经生物学的观点 2005年 15 4 397年 405年 16006117 10.1016 / j.conb.2005.06.002 2 - s2.0 - 23044447229 16006117 奈史密斯 j . H。 展位 i R。 细菌mechanosensitive channels-MscS:进化的解决方案创建灵敏度函数 年度回顾的生物物理学 2012年 41 1 157年 177年 10.1146 / annurev - biophys - 101211 - 113227 2 - s2.0 - 84861365324 龚 C。 一个可能的mechanosensation统一原则 自然 2005年 436年 7051年 647年 654年 16079835 10.1038 / nature03896 2 - s2.0 - 23644451510 16079835 考克斯 c, D。 中山 Y。 野村证券 T。 Martinac B。 的进化“修修补补”MscS-like通道:一代的结构和功能的多样性 弗鲁格档案欧洲生理学杂志》上 2014年 467年 1 3 13 24819593 10.1007 / s00424 - 014 - 1522 - 2 2 - s2.0 - 84939893555 24819593 哈米尔 o . P。 Martinac B。 活细胞转导的分子基础 生理上的评论 2001年 81年 2 685年 740年 11274342 2 - s2.0 - 0035069134 11274342 Perozo E。 控制原核mechanosensitive渠道 自然评论分子细胞生物学 2006年 7 2 109年 119年 16493417 10.1038 / nrm1833 2 - s2.0 - 33244458728 16493417 布朗特 P。 施罗德 m·J。 龚 C。 突变细菌mechanosensitive通道改变渗透压力的细胞反应 《生物化学》杂志上 1997年 272年 51 32150年 32157年 10.1074 / jbc.272.51.32150 2 - s2.0 - 0031463940 Ajouz B。 浆果 C。 Garrigues 一个。 Besnard M。 勇士 一个。 释放的硫氧还蛋白通过渗透downshock期间MscL mechanosensitive频道 大肠杆菌细胞 《生物化学》杂志上 1998年 273年 41 26670年 26674年 10.1074 / jbc.273.41.26670 2 - s2.0 - 14444277712 Levina N。 Totemeyer 年代。 斯托克斯 n R。 路易 P。 琼斯 m·A。 展位 i R。 保护 大肠杆菌激活细胞对极端夸张的msc和MscL mechanosensitive通道:识别msc活动所需的基因 在EMBO杂志 1999年 18 7 1730年 1737年 10.1093 / emboj / 18.7.1730 2 - s2.0 - 0345196593 Sukharev 年代。 净化的小mechanosensitive通道 大肠杆菌(msc):亚基结构、传导和控制脂质体的特征 生物物理期刊 2002年 83年 1 290年 298年 10.1016 / s0006 - 3495 (02) 75169 - 2 2 - s2.0 - 0036280794 Martinac B。 布埃赫纳 M。 Delcour a . H。 阿德勒 J。 龚 C。 压敏的离子通道 大肠杆菌 美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国 1987年 84年 8 2297年 2301年 10.1073 / pnas.84.8.2297 2 - s2.0 - 0000574498 Koprowski P。 Kubalski 一个。 Voltage-independent mechanosensitive改编的渠道 大肠杆菌原生质体 膜生物学》杂志上 1998年 164年 3 253年 262年 10.1007 / s002329900410 2 - s2.0 - 0032145657 Akitake B。 Anishkin 一个。 Sukharev 年代。 的“减震器”机制stretch-dependent闸门在msc 普通生理学杂志 2005年 125年 2 143年 154年 10.1085 / jgp.200409198 2 - s2.0 - 13544268703 低音 r B。 磨 P。 巴克莱 M。 里斯 d . C。 晶体结构的 大肠杆菌msc, voltage-modulated mechanosensitive通道 科学 2002年 298年 5598年 1582年 1587年 10.1126 / science.1077945 2 - s2.0 - 2242431668 Koprowski P。 Kubalski 一个。 C末端的 大肠杆菌mechanosensitive离子通道(msc)分开的通道打开 生物化学杂志 2003年 278年 13 11237年 11245年 10.1074 / jbc.m212073200 2 - s2.0 - 0037500247 米勒 年代。 爱德华兹 m D。 奥兹德米尔 C。 展位 i R。 msc mechanosensitive通道的封闭结构。交联的半胱氨酸突变体 生物化学杂志 2003年 278年 34 32246年 32250年 12767977 10.1074 / jbc.M303188200 2 - s2.0 - 0042858140 12767977 米勒 年代。 巴特利特 W。 Chandrasekaran 年代。 辛普森 年代。 爱德华兹 M。 展位 i R。 域msc mechanosensitive通道的组织 大肠杆菌 在EMBO杂志 2003年 22 1 36 46 10.1093 / emboj / cdg011 2 - s2.0 - 0037413692 考克斯 c, D。 野村证券 T。 齐格勒 c·S。 坎贝尔 答:K。 什么时候 k . T。 Martinac B。 选择性机制mechanosensitive通道msc揭示了探测通道subconducting状态 自然通讯 2013年 4,货号。2137年 23842527 10.1038 / ncomms3137 2 - s2.0 - 84880264602 23842527 Vasquez V。 Perozo E。 电压敏感闸门在msc 生物物理期刊 2004年 86年 545年,一个 索托马约尔 M。 Vasquez V。 Perozo E。 斯考尔滕 K。 离子传导通过msc取决于电生理学和仿真 生物物理期刊 2007年 92年 3 886年 902年 17114233 10.1529 / biophysj.106.095232 2 - s2.0 - 33846828514 17114233 野村证券 T。 Sokabe M。 Yoshimura K。 胞质和跨膜域之间的交互mechanosensitive通道msc 生物物理期刊 2008年 94年 5 1638年 1645年 17993482 10.1529 / biophysj.107.114785 2 - s2.0 - 41449096446 17993482 罗 我。 Anishkin 一个。 Kamaraju K。 Yoshimura K。 Sukharev 年代。 的细胞质笼域mechanosensitive通道msc是大分子拥挤的传感器 《普通生理学杂志》上 2014年 143年 5 543年 557年 10.1085 / jgp.201311114 2 - s2.0 - 84899548584 Mannuzzu l . M。 Moronne M . M。 Isacoff e . Y。 直接的物理测量构象重排底层钾通道控制 科学 1996年 271年 5246年 213年 216年 10.1126 / science.271.5246.213 2 - s2.0 - 0030059224 查 一个。 Bezanilla F。 描述压敏电阻器构象的改变瓶K<年代up>+与荧光通道 神经元 1997年 19 5 1127年 1140年 10.1016 / s0896 - 6273 (00) 80403 - 1 2 - s2.0 - 0030840167 Aggarwal 美国K。 麦金农 R。 贡献的S4段闸门在瓶K<年代up>+通道 神经元 1996年 16 6 1169年 1177年 10.1016 / s0896 - 6273 (00) 80143 - 9 2 - s2.0 - 0030175348 Seoh 美国的。 希克 D。 Papazian d . M。 Bezanilla F。 Voltage-sensing残留的S2和S4段 瓶K<年代up>+通道 神经元 1996年 16 6 1159年 1167年 10.1016 / s0896 - 6273 (00) 80142 - 7 2 - s2.0 - 0030175867 Bezanilla F。 Perozo E。 结构生物学:力和电压传感器在一个结构 科学 2002年 298年 5598年 1562年 1563年 10.1126 / science.1079369 2 - s2.0 - 0037159727 Anishkin 一个。 Akitake B。 Sukharev 年代。 休息msc描述:关闭细菌mechanosensitive信道的建模和分析小电导 生物物理期刊 2008年 94年 4 1252年 1266年 10.1529 / biophysj.107.110171 2 - s2.0 - 38949147131 Akitake B。 Anishkin 一个。 刘 N。 Sukharev 年代。 矫直和顺序pore-lining螺旋屈曲的定义的控制周期msc 自然结构和分子生物学 2007年 14 12 1141年 1149年 18037888 10.1038 / nsmb1341 2 - s2.0 - 36849026098 18037888 罗伯塔 年代。 低音 R。 磨 P。 里斯 d . C。 结构的原核mechanosensitive渠道MscL和msc 当前膜的话题 2007年 58 1 24 10.1016 / s1063 - 5823 (06) 58001 - 9 2 - s2.0 - 34047126893 野村证券 T。 Sokabe M。 Yoshimura K。 Lipid-protein msc mechanosensitive通道的交互检查扫描诱变 生物物理期刊 2006年 91年 8 2874年 2881年 16861270 10.1529 / biophysj.106.084541 2 - s2.0 - 33749527976 16861270 Yoshimura K。 Batiza 一个。 施罗德 M。 布朗特 P。 龚 C。 内的单个氨基酸残基亲水性MscL与通道mechanosensitivity增加 生物物理期刊 1999年 77年 4 1960年 1972年 10512816 10.1016 / s0006 - 3495 (99) 77037 - 2 2 - s2.0 - 0032826458 10512816 布朗特 P。 Sukharev 我美国。 Moe p C。 Martinac B。 龚 C。 Mechanosensitive渠道的细菌 1999年 294年 软硬件技术在酶学 Besch s R。 Suchyna T。 萨克斯 F。 高速压力夹 弗鲁格档案欧洲生理学杂志》上 2002年 445年 1 161年 166年 12397401 10.1007 / s00424 - 002 - 0903 - 0 2 - s2.0 - 0036812080 12397401 Yoshimura K。 野村证券 T。 Sokabe M。 丧失突变的边缘漏斗的mechanosensitive MscL频道 生物物理期刊 2004年 86年 4 2113年 2120年 10.1016 / s0006 - 3495 (04) 74270 - 8 2 - s2.0 - 1942423623 Bezanilla F。 压敏电阻器的电压传感器离子通道 生理上的评论 2000年 80年 2 555年 592年 10747201 2 - s2.0 - 0034017867 10747201 Schoppa n E。 麦科马克 K。 Tanouye m·A。 Sigworth f·J。 控制费用在野生型和突变体的大小瓶钾离子通道 科学 1992年 255年 5052年 1712年 1715年 1553560 10.1126 / science.1553560 2 - s2.0 - 0026594721 1553560 斯蒲克 美国一个。 爱尔摩 d E。 多尔蒂 d . A。 压敏电阻器的水合作用和传导特性的疏水孔隙mechanosensitive通道的电导 生物物理期刊 2006年 90年 10 3555年 3569年 16500980 10.1529 / biophysj.105.080432 2 - s2.0 - 33646200263 16500980 Grajkowski W。 Kubalski 一个。 Koprowski P。 表面的变化mechanosensitive通道msc在其激活,失活,和关闭 生物物理期刊 2005年 88年 4 3050年 3059年 15665126 10.1529 / biophysj.104.053546 2 - s2.0 - 22144455991 15665126