主题包括7 6到12岁的男性患自闭症的定义DSM-IV-TR和回归的历史在父母报告他们的语言和社交能力。病人有自身免疫功能障碍在一级亲属或他们的母亲怀孕期间或之后。因为历史的回归,一个彻底的评估是在所有的病人在此之前做研究来评估他们的自闭症和排除退行性疾病。这个评估包括神经影像,24小时的脑电图,基因检测,代谢测试和取样的血清和CSF获得细胞因子面板。升高患者脑脊液TNF - α(> 50 pg / mL)指出0-24几个月前研究开始被要求对这项研究进行检查。因为更高百分比的男性和女性被诊断为自闭症和lenalidomide的潜在的致畸效应,只有男性为本研究选择。下列条件的患者被排除在研究:PPD-NOS和DSM-IV-TR埃斯博格综合症,遗传病,活跃的自身免疫性疾病如克罗恩氏或桥本甲状腺炎,或任何血液,肝或肾功能状况,将对象如果他们参与风险不可接受。

参与是自愿的,没有补偿。食品和药物管理局试验性新药申请批准这项研究(IND102897)。书面知情同意是通过研究协调员从至少一个父对象的基线。这项研究是萨特健康中央机构审查委员会的批准。病人的药效学数据收集和分析了Celgene公司实验室。细胞因子测量分析跨学科实验室,Inglewood, CA (CLIA批准),使用他们的商业协议对血清和CSF冷冻和运输。

Lenalidomide 2.5毫克每天12周。这个选择低剂量以减少不利影响的风险。此外,由于这是一个试点研究,目的是为了测试的最低剂量可能导致改进。

基线行为和神经心理学评估包括接收和表达的单词图片词汇测试中,自闭症诊断量表(节选),儿童期孤独症评定量表(汽车),以及临床改善全球印象(CGI-I)。行为和神经心理学评估测量基线再次访问和6周和12周后基线。

脑脊液和血清样本冷冻后收集和分析国际科学研究所(ISI), Inglewood, CA (CLIA认证05 d0549406)使用固相用单克隆抗体ELISA技术具体的TNF - α(研发系统/ Quantikine)。三个内部控制与高、中,低浓度被包括在分析中。作为标准preanalytical程序的一部分,任何观察脑脊液样本含有泥沙在1300 g离心5分钟去除颗粒物。试验是否则根据标准协议执行。标本稀释1:1和1:10 5名患者在基线和四个病人在12周,除了两个病人只有稀释值越低,TNF -建立比较值 α。连续稀释线性先前验证1:32。一个标准点添加了一个额外的稀释延长低范围的报告。患者的脑脊液和血清分析和比率计算。

ISI的灵敏度分析是建立在10复制。平均灵敏度为0.298 pg / mL的LOD 0.3133 pg / mL。Interassay intra-assay变化建立了用高、中、低控制材料。interassay 20连续检测,目标值变化控制材料的21.7,323.5,和628.2 pg / mL,变异系数(CV)的9.2,3.5和1.7%,分别。intra-assay变异目标值为21.8,333.3和621.0 pg / mL,分别与简历的9.8、2.7和1.5%。的线性化验了 r 2 用一个值为0.9999 r0.9999和斜率为0.9903;经济复苏也有类似的观察值 r值斜率为0.9992,平均回收率为102%。

在基线访,病人住进一个门诊儿科中心,简单介绍了物理。主题的父母有选择对血液吸引或盐水锁有四个静脉穿刺的药代动力学是样品。样本收集1,2,4,8小时后首次研究药物剂量。血液样本被收集在一个6毫升K2-EDTA管。样本立即沉浸在冰。收集时间的15分钟内,样本被送往实验室和放置在冷冻离心机在1500 g 10分钟4°C。等离子体被整除2 prelabeled cryovials。在30分钟的采血时间,cryovials被安置在−20°C冰箱。样本保持冷冻,在批量分析。验证HPLC-MS / MS方法被用来确定lenalidomide浓度在人血浆样品。 Lenalidomide was analyzed after the liquid-liquid extraction (with methyl 叔丁基醚(MtBE):乙酸乙酯,50:50,v / v)从0.2毫升的人血浆样品。lenalidomide稳定isotope-labeled内部标准的参考标准(¹³C₅]cc - 5013合成Celgene公司公司(峰会,NJ)。在协同Polar-RP 4 -高效液相色谱法进行 μ米列(美国Phenomenex托兰斯,CA)。三重四极质谱仪(API 4000,应用生物系统公司,促进城市、钙、美国)被用于质量分析和检测。量化是使用multiple-reaction执行监控( 米/ zlenalidomide和265.1/149.2的260.3/149.2)与电喷雾正离子模式。lenalidomide标准曲线是线性的( r 2 > 0.99 从1到200 ng / mL)等离子体。定量的下限是等离子体5 ng / mL。验证质量控制样品在4浓度(1、3、60和180 ng / m)被用来确定分析准确度和精密度。Interday测定精度介于−1.3偏离标称浓度的6.5%。Interday精度不超过8.0%的简历的方法验证。所有样品都分析了每秒(美国纽瓦克,德)。

Lenalidomide 2.5毫克每天12周。研究受试者每周访问后管理第一剂量。父母给予指示如何管理lenalidomide包括药物预防措施处理。随后进行了疫苗接种的父母每天的主题。访问开始时,进行实验室检测和处理。研究者进行了物理和记录CGI-I。在完成体检和收据的实验室结果评估的条件可能与药物毒性,药物是下周。

数据图形化显示和描述性统计用来评估分布的测量。的Wilcoxon signed-ranks测试是用于分析之间的差异测量基线,6和12周的跟踪。曲线下的面积(AUC)、最大观测浓度( C 马克斯 )和采样时间(小时) C 马克斯 发生( t 马克斯 )被用来评价药代动力学测试的结果。

在为期12周的跟踪,1:10稀释血清TNF - α获得了三个相同的儿童1:10稀释血清基线。一次加工使用1:1在基线处理他的血清稀释使用1:1在为期12周的跟踪。一个孩子的血清处理使用1:1稀释在基线和处理使用1:10稀释在随访;因此,这种情况下被排除在分析(从跨学科实验室协议改变)。脑脊液TNF - α值都测量了四个受试者完成了研究(表 1)。CSF-TNF - α平均下降 57 % ± 25 % 从 80.5 ± 41.03 来 38.0 ± 31.27 四个孩子的样本测量和研究在12周内完成( P = 0.068 )。血清肿瘤坏死因子- α显示下降57% ( 92.50 ± 68.92 来 40.25 ± 44.53 ; P = 0.068 )。只有TNF - α作为一个探索性的结果测量因为其他细胞因子在所有患者并不总是可用的。研究者也观察和报道的自闭症患者的CSF /血清比率升高( 7]。

在前六周的跟踪中,意味着接受语言的三个六个患者最初从短语演讲 60.67 ± 12.06 来 65.00 ± 15.10 ( P = 0.110 )(表 3)。六个孩子完成了六周的跟踪中显示减少孤独症的症状根据汽车分数显著改变(基线40.75±5.96和6周 38.67 ± 7.90 , P = 0.043 )。

全球临床印象调查员表示一些改进评级的社会化,语言表达和接受演讲(表 4)。意思是基线CGI富有表现力的语言 5.43 ± 1.27 在6周,从统计学角度改善( 4.00 ± 2.12 , P = 0.042 在12周)和( 4.17 ± 1.60 , P = 0.023 )。CGI的评估接受基线之间的语言表现出相似的进步( 4.50 ± 1.56 )和6周( 2.50 ± 1.18 , P = 0.027 ),但仍没有显著的改进在12周( 3.33 ± 1.63 , P = 0.066 )。在社交技能成绩提高6周( 2.50 ± 1.00 )和12周( 3.00 ± 1.41 基线相比),差异不显著( 4.83 ± 1.17 ) P = 0.066 。