1。介绍
神经性疼痛通常是由于损伤或躯体感觉系统的病理改变,包括中央神经元和
β,一个
δC外围国家的神经纤维(
1]。由于全球人口老龄化和大多数癌症患者化疗后的幸存,神经性疼痛的流行预计将增加(
2]。机制与神经性疼痛的发病机制包括兴奋和抑制性躯体感觉信号之间的差异,离子通道的变化,以及不一致的疼痛信息调制在中枢神经系统
1,
3]。
因为神经性疼痛可能部分或完全没有响应主要镇痛治疗(
4),医学治疗神经性疼痛往往涉及药物的主要指示不是镇痛等抗癫痫药物,抗心律失常药物和抗抑郁药物
5,
6]。Vincristine-induced在大鼠周围神经病变疼痛是一种常见的模型研究,类似于人类周围神经病变(
4]。传统上,植物有历史证明他们的价值来源的铅补充剂治疗潜力,目前代表的重要储层新药物的发现和开发。制药和研究行业现在主要依靠民间图书馆的植物产品作为药物发现他们的池(
7,
8]。尤其是在非洲加纳北部,包括各个部分的干树皮
b .非洲"传统上被广泛用来治疗疼痛(
9];然而,几乎没有科学证明其有效性。当前的研究因此试图调查的影响
b .非洲"茎皮中提取神经性疼痛的管理在实验大鼠周围神经病变。
2。材料和方法
2.1。化学药品和试剂
硫酸长春新碱(Celon实验室PVT LTD,马哈拉施特拉邦,印度),普瑞巴林(美国辉瑞公司、纽约)、肾上腺素(哄Bioremedies私人有限,哈里亚纳邦,印度),5、5′-dithiobis (2-nitrobenzoic酸)(DTNB) diaminobenzidine(美国科罗拉多州拉夫兰市哈希公司),叠氮化钠(原子科学,海德,曼彻斯特,英国),硫代巴比土酸和牛血清白蛋白(西格玛奥德里奇,圣路易斯。密苏里州,美国)。
2.2。动物
雄性sd大鼠中(200±5 g)用于本研究从植物医学研究中心购买Mampong-Akuapem,东部地区,加纳。五组的动物适应的不锈钢笼子(34 47××18厘米3)的药理学
植物园和美联储低脂啮齿动物食物(购自Agricare有限,Tanoso库马西)。所有的动物保持在12 h昼夜周期和水
随意。研究中所有实验协议采用符合标准的药理学伦理委员会的指导的护理和使用实验动物,8日版。
2.3。收集和提取的植物材料
成熟茎皮的
Burkea africana(钩)收集从玉米粉蒸肉(9°59′29.6797”N;2°30′51.5059”W)北部地区的加纳今年4月,2017年。它是由乔治·亨利·萨姆博士身份验证部门的草药,药学和制药科学学院KNUST,加纳库马西,。凭证标本(KNUST / HM1/2017 / SB005)一直在教员的标本。新鲜的植物材料分类删除所有外国材料和室温风干了五天。干树皮粉碎成粗粉使用锤式粉碎机(克里斯蒂和诺里斯,切姆斯福德,英国)。大约2公斤的树皮粉提取v / v为70%乙醇索氏提取器。提取得到集中使用旋转蒸发器(Rotavapor r - 215, BUCHI Labortechnik AG) Flawil,瑞士)和进一步干(35°C)到一个固体(收益率= 10.85%
w
/
w
)在一个电炉(领导工程,Widnes柴郡,英国)。干提取获得的是保存在冰箱里,直到需要时,表示BAE或提取整个研究。
2.4。植物化学的筛选
植物化学的提取进行了分析使用标准方法所描述的Prashant女子et al。
10]。
2.5。急性口服毒性试验
24只有雄性老鼠(20 - 25克)分成四组(
n= 6)。在调查之前,食物的动物被剥夺了对3 h。组1是控制和老鼠只有车辆;组2、3、4是治疗剂量的50,500和5000毫克公斤−1。药品监督管理局后,动物监测连续在24小时内每30分钟观察形态和行为变化和神经系统和自主反应是否也观察到任何死亡在研究期间。实验协议和程序按照经合组织指导方针是用于检测急性口服毒性的化学物质
11]。
2.6。实验设计
诱导大鼠周围神经病变,0.1毫克公斤−1硫酸长春新碱腹腔内接种了5天之后,2天休息,继续在接下来的5天作为描述Woode et al。
12和奉承和班尼特
13]。疼痛的反应记录之前和之后的最后剂量长春新碱政府确定建立周围神经病变的动物。
老鼠被随机分成7组(
n= 10)。组我担任长春新碱对照组,生理盐水(10毫升公斤−1,
i.p。)。组II、III和IV老鼠收到BAE 50, 500和1000毫克公斤−1,
订单。,分别。第七组V, VI,老鼠与普瑞巴林治疗10、30、100毫克公斤−1,
i.p。,分别。三十分钟后
i.p。注射和口服后1 h政府、响应老鼠的各种行为测试评估为0.5,1,2,3,4,5 h。行为测试包括·冯·弗雷细丝(5、9和14 g),冷水(4±0.5°C),热水(55±0.5°C),和Randall-Sellito测试。
最大可能的影响比例(% MPE)是使用以下公式计算:
(1)
%
迈普
=
l
2
−
l
1
l
0
−
l
1
×
One hundred.
,
在哪里
l1=(药物)之前撤军时间和力量,
l2=(药物)后撤军时间和力量,和
l0代表的截止时间和力量。
在冯·弗雷丝测试,戒断反应后爪子都记录下来,然后表示为一个百分比的回应。因此,如果10·冯·弗雷灯丝的应用,指出6取款,那么反应比例的灯丝是60
13- - - - - -
15]。
2.7。行为评估
2.7.1。触觉异常性疼痛和中间和机械痛觉过敏
在这个评估中,动物被克制,触觉异常性疼痛评估使用·冯·弗雷细丝(IITC生命科学公司,型号2888,林地,CA,美国)的弯曲力5 g。正常大鼠不回应5 g力刺激,所以脚撤出5 g力的实验老鼠描绘了触觉神经病变的异常性疼痛。冯·弗雷丝弯曲力的9和14 g用于确定中间和机械痛觉过敏,分别。老鼠没有神经损伤将退出15 g弯曲力的5 - 10%的响应时间和9 g力视为中间痛觉过敏。后的丝被应用于midplantar脚6次,每次碰了5 s。丝的戒断反应记录和估计反应的比例
12]。
2.7.2。冷触诱发痛
尾巴撤退延迟响应冷刺激评估使用SałatSalat描述的方法等。
16]。这样做是老鼠的尾巴的浸到冷水维持在4±0.5°C。延迟到尾撤军测量与数字计时器。建立了30年代的截止时间以避免尾部组织损伤。对于每一个动物,两个录音的尾巴,和戒断反应报告为两个值的均值和最大百分比(% MPE)计算可能的影响。
2.7.3。热水痛觉过敏
反应的动物热水是如前所述进行回
17]。4±1.5厘米的终端尾巴的老鼠都沉浸在热水维持在55±0.5°C,和尾巴撤军延迟都被记录下来。对于每一个动物,两个录音,和戒断反应记录为两个值的均值和最大百分比(% MPE)计算可能的影响。30年代的截止时间。
第2.7.4。Randall-Sellito测试
长春新碱引起的机械伤害感受测量与analgesimeter (mn - 15776,尤格Basile、Comerio Vareese,意大利)如前所述,何西阿书等。
18]。analgesimeter用于应用压力通过钝有机玻璃锥后左爪,直到背地区的戒断反应。爪子撤军阈值(佩恩表的编制者)记录所需的压力(克)展览爪子撤军。截止250克的重量是用来防止组织损伤肢体。改变痛觉过敏状态计算的比例最大可能的效果(MPE)。
2.8。生物化学分析
大鼠用于研究人道地牺牲了15天的实验大剂量pentobarbitone (0.1 gkg−1
i.p)。坐骨神经的后肢和一些相关的组织分离所述其他地方(
19−4°C)和存储。坐骨神经组织均质使用0.1米tris-HCl缓冲区(pH值7.4)。匀浆收集在样品管保持在3和4°C和离心机在2000 rpm。收集上清液和沉淀成单独的管道。上层清液是用于评估总蛋白质含量和丙二醛(MDA),减少谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的水平。组织匀浆的附加到坐骨神经在5000转离心10分钟在4°C和用来评估髓过氧化酶(MPO)的内容。
2.8.1发布。总蛋白质含量
所描述的方法(
20.)是用于试验。牛血清白蛋白(BSA)被用来作为参考,和光谱测量是在660海里。化验的pH值是保持10到10.5。样品的蛋白质含量的估计BSA校准图表。
2.8.2。超氧化物歧化酶(SOD)水平
SOD活性测定所述由麦考德Maccords和Fridovich [
21]。数量500
μL匀浆是混合了150年
μ750年冰冷的氯仿和L
μL乙醇(96% v / v)和涡前60年代在2000 rpm离心法分离20分钟的上层清液沉淀。一毫升碳酸盐缓冲(0.1米;pH值10.2)和0.5毫升EDTA与500年(0.6毫米)治疗
μ上层清液的L。肾上腺素溶液(0.05毫升的1.3毫米)被添加到启动肾上腺素红的形成。吸光度是读spectrophotometrically在480 nm使用协同H1多模读者(美国BioTek技术、Winooski VT)。草皮需要抑制肾上腺素的自动氧化表达如下:
(2)
%
抑制
=
吸光度
测试
−
吸光度
空白
吸光度
测试
×
One hundred.
SOD活性在单位每毫克蛋白表达,1单位在哪里显示50%所需的酶量超氧化物自由基的歧化作用25°C使用以下公式计算:
(3)
单位的SOD活性
/
毫克的蛋白质
=
%
抑制
50
×
wt的蛋白质
。
2.8.3。过氧化氢酶(CAT)的水平
猫的活动被Sinha[描述评估使用方法
22和队友默契et al。
23]。0.4毫升的量H2O2(1.18米)和1毫升磷酸盐缓冲剂(0.01 M;pH值7.0)被添加到0.1毫升的匀浆和孵化为5分钟25°摄氏度。后来,2毫升dichromate-acetic酸试剂(包含3份冰醋酸和1份5% w / v重铬酸钾)被添加到终止反应。过氧化氢酶的活动表现出被表示为单位每毫克蛋白基于H的摩尔消光系数2O2和39.4−1厘米−1在620 nm使用协同H1多模读者(美国BioTek技术、Winooski VT)。一个单位是需要水解的酶数量1更易与H2O2在中性pH /分钟(25°C),也就是说,
(4)
mUnit猫的活动
/
毫克的蛋白质
=
吸光度
620年
n
米
39.4
×
wt
的蛋白质
×
1000年。
2.8.4。减少谷胱甘肽(GSH)的水平
谷胱甘肽的浓度在测试样本测量其它地方描述的过程(
24]。一百毫升(100
μL)的匀浆和2.4毫升0.02添加EDTA和涡1分钟。解决方案是然后在4°C冷却10分钟。2毫升H2O和0.5毫升的50% w / v柠檬酸被添加到混合,在3000转离心5分钟。后来,50
μL(10毫米DTNB解决方案和2毫升的三羟甲基氨基甲烷缓冲液(0.4 M;pH值8.9)然后与1毫升的上层清液和混合反应混合物在25°C的环境中5分钟。反应混合物也重复了空白。吸光度是spectrophotometrically读在412 nm使用协同H1多模读者(美国BioTek技术、Winooski VT)。谷胱甘肽浓度表示
μ摩尔每毫克蛋白和决定使用曲线,
y
=
0.0004
x
+
0.0026
2.8.5。脂质过氧化产物(丙二醛)含量
的丙二醛(MDA)的形成是如前所述取决于Ohkawa et al。
25]。一毫升(1毫升)的匀浆混合3毫升的混合物(稍后通知3毫升20%柠檬酸含0.5%)在试管中。这是在95°C加热30分钟,立即冷却,然后在5000转离心10分钟。吸光度最初读在532海里,然后再读600海里为非特异性吸收正确使用协同H1多模读者(美国BioTek技术、Winooski VT)。MDA-TBA绑架的摩尔消光系数,155毫米−1厘米−1被用来确定MDA的含量从以下方程:
(5)
nmol MDA
/
毫克的蛋白质
=
吸光度
532年
纳米
−
吸光度
600年
纳米
155年
×
血清总蛋白
×
10
6
。
2.8.6。髓过氧化物酶水平
酶浓度确定spectrophotometrically修改3、3′-diaminobenzidine (DAB)比色法Klangprapan et al。
26]。的反应是由添加匀浆、0.5毫米民建联的解决方案和6毫米H2O2。反应是终止通过增加0.1毫米叠氮化钠,和吸光度是读465海里在600年代60年代周期使用协同H1多模读者(美国BioTek技术、Winooski VT)。MPO具体活动每毫克蛋白表达单位,1单位增加了吸光度0.001每60年代。
2.9。统计数据
所有统计分析GraphPad棱镜v . 6.01(美国圣地亚哥GraphPad软件)。时间进程曲线分析了双向重复测量方差分析(RM方差分析)治疗(主题之间)和时间(试)因素,在每个时间点和平均治疗效果比较Dunnett事后考验。随后,曲线下的面积(auc)计算确定总体治疗效果和总antinociceptive得分。antinociceptive总分的差异决定使用单向方差分析与土耳其的事后测试使用治疗数据作为数据的主客体因素分布正常。被认为具有统计显著性差异
P
值< 0.05。
3所示。结果
3.1。植物化学的筛选
定性植物化学的测试结果显示生物碱的存在,类黄酮、皂苷、丹宁酸、还原糖、植物甾醇和萜类化合物(表
1)。
hydroethanolic干树皮中提取的植物化学的成分
b .非洲"。
| 次生代谢物 |
推理 |
| 生物碱 |
+ |
| 还原糖 |
+ |
| 丹宁酸 |
+ |
| 类黄酮 |
+ |
| 皂苷 |
+ |
| 常用药用 |
+ |
| 植物甾醇 |
+ |
关键:+表示。
3.2。急性毒性
所有的动物存活在整个24小时研究期间,和观察,小鼠没有任何改变的迹象行为和神经和自主神经毒性。口服LD50BAE的估计为5000毫克公斤以上−1。
3.3。影响Hydroethanolic干树皮中提取的<斜体> B。非洲" < /斜体>触觉异常性疼痛
十天的0.1毫克公斤−1长春新碱导致触觉异常性疼痛的发展描绘在长春新碱对照组。BAE治疗或普瑞巴林(PGABA)导致显著降低响应5 g力·冯·弗雷灯丝与长春新碱对照组相比。方差分析(治疗×时间)显示触觉异常性疼痛的治疗产生重大影响的英国宇航系统公司(
F治疗(6252)= 22.31,
P
<
0.0001
;
F时间(3252)= 27.64,
P
<
0.0001
;
F互动(18252)= 1.685,
P
=
0.0422
)(图
1(一))和PGABA (
F治疗(6252)= 27.58,
P
<
0.0001
;
F时间(3252)= 22.56,
P
<
0.0001
;
F互动(18252)= 2.456,
P
=
0.0011
)(图
1(b))。英国宇航系统公司(
F(36)= 13.32,
P
<
0.0001
)(图
1(c))和PGABA (
F(36)= 10.59,
P
<
0.0001
)(图
1(d))治疗大鼠显示显著降低总allodynic分数最高剂量给予最大的禁忌的69.26%和67.69%,分别。
BAE的影响(50 - 1000毫克公斤−1
订单)和普瑞巴林(PGABA)(10 - 100毫克公斤−1
订单。)在老鼠vincristine-induced触觉异常性疼痛(冯·弗雷5 g)。(a, b)时间进程的效果;(c, d)酒吧auc的图表。
∗
∗
∗
∗
P
<
0.0001
;
∗
∗
P
<
0.01
相比vehicle-treated集团(RM双向方差分析其次是Dunnett事后测试)。
+
+
+
+
P
<
0.0001
;
+
+
P
<
0.01
相比vehicle-treated组(普通1路的方差分析之后,土耳其的事后测试)。每个数据提出了均值±SEM (
n= 10)。
![]()
![]()
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3.4。影响Hydroethanolic干树皮中提取的<斜体> B。非洲" < /斜体>中间痛觉过敏
BAE和普瑞巴林(PGABA)中间痛觉过敏是评估使用9 g的冯·弗雷丝弯曲力。车辆控制动物表现出减少爪子撤军延迟与BAE -和PGABA-treated动物相比。方差分析(治疗×时间)发现了一个显著的影响对BAE治疗中间痛觉过敏(
F治疗(6245)= 26.76,
P
<
0.0001
;
F时间(3245)= 39.74,
P
<
0.0001
;
F互动(18245)= 4.081,
P
<
0.0001
)(图
2(一))和PGABA (
F治疗(6252)= 15.32,
P
<
0.0001
;
F时间(3252)= 32.43,
P
<
0.0001
;F互动(18252)= 2.456,
P
=
0.0163
)(图
2(b))。BAE和普瑞巴林产生显著antihyperalgesic效果(
F(36)= 14.99,
P
<
0.0001
(图
2)和(c)
F(36)= 19.80,
P
<
0.0001
(图
2(d))在所有剂量测试最大可能antihyperalgesic效果的90.26%和80.13%,分别。
BAE的影响(50 - 1000毫克公斤−1
订单)和普瑞巴林(PGABA)(10 - 100毫克公斤−1
订单。)vincristine-induced中间痛觉过敏的老鼠(冯·弗雷9 g)。(a, b)时间进程的效果;(c, d)酒吧auc的图表。
∗
∗
∗
∗
P
<
0.0001
;
∗
∗
∗
P
<
0.001
;
∗
∗
P
<
0.01
;
∗
P
<
0.05
而vehicle-treated集团(RM双向方差分析其次是Dunnett事后测试)。
+
+
+
+
P
<
0.0001
;
+
+
+
P
<
0.001
;
+
+
P
<
0.01
;
+
P
<
0.05
相比vehicle-treated组(普通1路的方差分析之后,土耳其的事后测试)。每个数据提出了均值±S.E.米(
n= 10)。
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3.5。影响Hydroethanolic干树皮中提取的<斜体> B。非洲" < /斜体>机械痛觉过敏
方差分析(治疗×时间)发现了一个显著的影响对BAE治疗机械痛觉过敏(
F治疗(6229)= 36.43,
P
<
0.0001
;
F时间(3229)= 45.06,
P
<
0.0001
;
F互动(18229)= 4.485,
P
<
0.0001
)(图
3(一))和PGABA (
F治疗(210)= 19.68,
P
<
0.0001
;
F时间(210)= 31.90,
P
<
0.0001
;
F互动(18210)= 3.047,
P
<
0.0001
)(图
3(b))。英国宇航系统公司(50 - 1000毫克公斤−1)治疗导致显著(
F(33)= 23.11,
P
<
0.0001
机械痛觉过敏)和剂量依赖性降低剂量最高的1000毫克公斤−1生产机械痛觉过敏(图的完成逆转
3(c))。同样,普瑞巴林(10 - 100毫克公斤−1)也存在剂量依赖的相关性和显著(
F(33)= 13.23,
P< 0.0001)机械痛觉过敏,最大可能减少62.78%(图的影响
3(d))。
BAE的影响(50 - 1000毫克公斤−1
订单)和PGABA(10 - 100毫克公斤−1
订单。)在老鼠vincristine-induced静态痛觉过敏(冯·弗雷14 g)。(a, b)时间进程的效果;(c, d)酒吧auc的图表。
∗
∗
∗
∗
P
<
0.0001
;
∗
∗
∗
P
<
0.001
;
∗
∗
P
<
0.01
;
∗
P
<
0.05
车辆相比,治疗组(2 - RM方差分析Dunnett紧随其后的事后测试)。
+
+
+
+
P
<
0.0001
;
+
+
P
<
0.01
相比vehicle-treated组(普通1路的方差分析之后,土耳其的事后测试)。每个数据提出了均值±S.E.米(
n= 10)。
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3.6。影响Hydroethanolic干树皮中提取的<斜体> B。非洲" < /斜体>冷触诱发痛
基线应对冷水(4°C)是在长春新碱治疗的结束。方差分析(治疗×时间)发现了一个显著的影响对BAE治疗冷触诱发痛(
F治疗(6244)= 33.15,
P
<
0.0001
;
F时间(3244)= 89.23,
P
<
0.0001
;
F互动(18244)= 7.043,
P
<
0.0001
)(图
4(一))和PGABA (
F治疗(6244)= 21.50,
P
<
0.0001
;
F时间(3244)= 49.11,
P
<
0.0001
;F互动(18244)= 3.854,
P
<
0.0001
)(图
4(b))。英国宇航系统公司(50 - 1000毫克公斤−1
订单。)产生显著(
F(36)= 40.24,
P
<
0.0001
冷触诱发痛(图)和剂量依赖性抑制作用
4(c))和生产使用的所有三个剂量增加延迟的尾巴撤退到寒冷的刺激。普瑞巴林(10 - 100毫克公斤−1)也显著增加尾巴撤退的延迟(
F(36)= 16.14,
P
<
0.0001
)剂量最高的剂量依赖性的方式给予可能anti-allodynic效果(图182.7±33.23%
4(d))。
BAE的影响(50 - 1000毫克公斤−1
订单)和PGABA(10 - 100毫克公斤−1
订单。)在老鼠vincristine-induced冷触诱发痛。上部面板显示时间进程的效果有时候降低面板分别代表了auc的酒吧图表。
∗
∗
∗
∗
P
<
0.0001
;
∗
∗
P
<
0.01
相比vehicle-treated集团(RM双向方差分析其次是Dunnett事后测试)。
+
+
+
+
P
<
0.0001
;
+
+
P
<
0.01
相比vehicle-treated组(普通1路的方差分析之后,土耳其的事后测试)。每个数据提出了均值±S.E.米(
n= 10)。
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3.7。影响Hydroethanolic干树皮中提取的<斜体> B。非洲" < /斜体>在炎热的异常性疼痛
BAE治疗(50 - 1000毫克公斤−1
订单。)(
F治疗(6112)= 32.34,
P
<
0.0001
;
F时间(3112)= 37.75,
P
<
0.0001
;
F互动(18112)= 3.738,
P
<
0.0001
)(图
5(a))和普瑞巴林(10 - 100毫克公斤−1
订单。)(
F治疗(6112)= 32.21,
P
<
0.0001
;
F时间(3112)= 47.72,
P
<
0.0001
;
F互动(18112)= 3.880,
P
<
0.0001
)(图
5(b))显示一个显著的影响在炎热的异常性疼痛的治疗。英国宇航系统公司(50 - 1000毫克公斤−1
订单。)(
F(36)= 22.58,
P
<
0.0001
)和普瑞巴林(10 - 100毫克公斤−1)(
F(36)= 14.25,
P
<
0.0001
显著),剂量依赖性抑制热异常性疼痛(数字
5(c)和
5(d))和最大百分比224.1±18.79%和332.1±59.39%,分别。
BAE的影响(50 - 1000毫克公斤−1
订单)和PGABA(10 - 100毫克公斤−1
订单。)vincristine-induced thermal-allodynia老鼠。(a, b)时间进程的效果;(c, d)酒吧auc的图表。
∗
∗
∗
∗
P
<
0.0001
;
∗
∗
P
<
0.01
相比vehicle-treated集团(RM双向方差分析其次是Dunnett事后测试)。
+
+
+
+
P
<
0.0001
;
+
+
+
P
<
0.001
相比vehicle-treated组(普通1路的方差分析之后,土耳其的事后测试)。每个数据提出了均值±S.E.米(
n= 10)。
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hydroethanolic干树皮中提取的影响b .非洲机械痛觉过敏(Randall-Sellito测试)。
方差分析(治疗×时间)发现了一个显著的影响对BAE治疗机械痛觉过敏(
F治疗(6246)= 57.24,
P
<
0.0001
;F时间(3246)= 213.10,
P
<
0.0001
;
F互动(18246)= 13.41,
P
<
0.0001
)(图
6(一))和PGABA (
F治疗(6237)= 50.41,
P
<
0.0001
;
F时间(3237)= 183.80,
P
<
0.0001
;
F互动(18237)= 11.83,
P
<
0.0001
)(图
6(b))。英国宇航系统公司(50 - 1000毫克公斤−1
订单。)存在剂量依赖的相关性减弱vincristine-induced机械痛觉过敏(
F(36)= 59.63,
P
<
0.0001
)(图
6(c))剂量最高的百分比最大可能142.1±5.76%的效果。同样,普瑞巴林也显著(
F(36)= 52.18,
P
<
0.0001
)和剂量依赖性抑制机械痛觉过敏最大机械antihyperalgesic效果(图157.9±8.58%
5(d))。
BAE的影响(50 - 1000毫克公斤−1
订单)和PGABA(10 - 100毫克公斤−1
订单。)vincristine-induced hypernociception (Randall-Sellito)的老鼠。(a, b)时间进程的效果;(c, d)酒吧auc的图表。
∗
∗
∗
∗
P
<
0.0001
相比vehicle-treated集团(RM双向方差分析其次是Dunnett事后测试)。
+
+
+
+
P
<
0.0001
相比vehicle-treated组(普通1路的方差分析之后,土耳其的事后测试)。每个数据提出了均值±S.E.米(
n= 10)。
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3.8。影响Hydroethanolic干树皮中提取的<斜体> B。非洲" < /斜体>在坐骨神经匀浆生化
3.8.1。总蛋白质含量
长春新碱控制大鼠坐骨神经匀浆显示显著高水平的血清总蛋白相比,天真和治疗大鼠(表
2)。BAE治疗500毫克公斤−1显著降低(
F(12)= 11.48,
P
=
0.0008
)总蛋白质含量3.13±0.18毫克g−1组织与长春新碱对照组总蛋白质含量为4.37±0.20毫克g−1的组织。几乎以相同的方式,普瑞巴林治疗(10毫克公斤−1)也能够显著降低(
F(15)= 4.531,
P
=
0.0134
老鼠)的总蛋白质含量(表
2)。
影响BAE和普瑞巴林的坐骨神经和组织匀浆生化参数。
| 集团 |
天真的 |
长春新碱控制 |
英国宇航系统公司(毫克公斤−1) |
普瑞巴林(毫克公斤−1) |
| 50 |
500年 |
1000年 |
10 |
30. |
One hundred. |
| TPC |
2.57±0.27 |
4.37±0.20 |
3.12±0.24
∗
|
3.13±0.18
∗
|
3.06±0.49
∗
|
3.41±0.53 |
2.97±0.35
∗
|
2.83±0.18
∗
|
| 草皮 |
0.71±0.01 |
0.07±0.03 |
0.17±0.05 |
0.33±0.01
∗
∗
∗
∗
|
0.43±0.01
∗
∗
∗
∗
|
0.17±0.01
∗
∗
|
0.37±0.02
∗
∗
∗
∗
|
0.42±0.00
∗
∗
∗
∗
|
| 猫 |
7.48±0.29 |
0.77±0.18 |
3.62±0.33
∗
∗
∗
∗
|
4.10±15
∗
∗
∗
∗
|
4.58±0.21
∗
∗
∗
∗
|
3.04±0.11
∗
∗
∗
∗
|
4.06±2.0
∗
∗
∗
∗
|
4.91±0.10
∗
∗
∗
∗
|
| 谷胱甘肽 |
686.7±89.93 |
231.3±16.36 |
358.1±55.02 |
507.40±31.97
∗
|
548.5±19.04
∗
∗
|
332.80±18.70 |
492.10±30.78
∗
|
543.40±44.14
∗
∗
|
| MDA |
30.21±6.08 |
335.60±46.35 |
228.50±23.77 |
163.10±10.96
∗
∗
∗
|
98.06±36.95
∗
∗
∗
∗
|
177.20±47.45
∗
∗
∗
|
144.0±24.64
∗
∗
∗
∗
|
99.20±34.36
∗
∗
∗
∗
|
| MPO |
62.48±10.02 |
230.50±16.27 |
195.80±6.78 |
133.30±4.99
∗
∗
|
106.70±9.02
∗
∗
∗
|
142.90±10.10
∗
|
120.90±5.17
∗
|
107.80±7.20
∗
∗
|
从坐骨神经生化参数估计,伴随组织匀浆。
∗
∗
∗
∗
P
<
0.0001
;
∗
∗
∗
P
<
0.001
;
∗
∗
P
<
0.01
;
∗
P
<
0.05
与对照组相比普通1路的方差分析补充与Dunnett事后测试)。每个数据提出了均值±S.E.米(
n= 5)。TPC =总蛋白质含量、SOD(超氧化物歧化酶,猫=过氧化氢酶、谷胱甘肽,谷胱甘肽=减少MDA =丙二醛和MPO = myeloperoxide。
3.8.2。超氧化物歧化酶(SOD)水平
BAE-treated大鼠SOD含量明显增加(
F(20)= 81.91,
P
<
0.0001
)与长春新碱对照组相比。急性治疗1000毫克公斤−1的提取SOD水平增加到0.43±0.0 SOD单位毫克−1蛋白质(表
2)。同样,pregabalin-treated动物也表现出显著(
F(20)= 235.4,
P
<
0.0001
SOD水平(0.42±0.0)增加SOD单位毫克−1蛋白质与长春新碱相比,对照组为0.074±0.03 SOD单位毫克−1蛋白质(表
2))。
3.8.3。过氧化氢酶(CAT)的水平
长春新碱管理使过氧化氢酶水平明显下降(
P
<
0.0001
与天真组相比)。长春新碱对照组表达减少猫水平为0.77±0.18单元猫毫克−1蛋白质与7.45±0.29单位猫毫克−1蛋白质猫天真集团的水平。与普瑞巴林和BAE治疗后,有一个显著的增加存在剂量依赖的相关性(
F(20)= 97.32,
P
<
0.0001
,
F(420)= 168.2,
P
<
0.0001
分别在猫水平(表)
2)。
3.8.4。减少谷胱甘肽(GSH)的水平
天真的谷胱甘肽水平组为686.7±89.93
μ摩尔毫克−1同231.31±16.36
μ摩尔毫克−1长春新碱对照组。英国宇航系统公司(1000毫克公斤−1)治疗导致显著增加谷胱甘肽水平(
F(4、10)= 12.14,
P= 0.0007)值为548.5±19.04
μ摩尔毫克−1(表
2)。没有显著增加谷胱甘肽水平在治疗组10毫克公斤−1普瑞巴林,50毫克公斤−1英国宇航系统公司。100毫克公斤−1普瑞巴林显示显著(
F(4、10)= 13.77,
P= 0.0004)增加谷胱甘肽水平为543.41±44.14
μ摩尔毫克−1(表
2)。
3.8.5。髓过氧化物酶水平
组织匀浆从天真的大鼠组表现出相对较高的MPO水平与长春新碱的匀浆相比对照组。BAE治疗能够剂量依赖性和显著降低MPO水平(
F(4、10)= 44.21
P
<
0.0001
)。同样,从老鼠匀浆处理普瑞巴林也显示出显著(
F(4、10)= 35.17,
P
<
0.0001
)降低MPO水平(表
2)。
3.8.6。丙二醛含量
长春新碱对照组展出MDA水平显著增加而天真的集团。BAE治疗显著(
F(4、10)= 16.41,
P
=
0.0002
)和剂量依赖性降低MDA的水平与长春新碱对照组相比(表
2)。同样,pregabalin-treated集团还显示一个重要(
F40= 12.60,
P
=
0.0021
)和剂量依赖性降低MDA水平与长春新碱对照组相比(表
2)。
4所示。讨论
Burkea africana提取(BAE)、口服、引发剂量依赖性antiallodynic antihyperalgesic效果在周围神经性疼痛与长春新碱诱导的大鼠模型。长春新碱是一种抗癌剂,干扰
β微管蛋白在长春花域和改变细胞形态通过抑制纺锤体微管的形成(
27]。癌症病变(CIN)的特点是谷氨酸会由于钠离子和钙含量的增加和NMDA受体激活。还CIN的差别会导致对这些阿片受体;因此,吗啡等阿片类止痛药对神经性疼痛(
28]。然而,普瑞巴林是有效的在这两个实验,证明了在这项研究中,和减轻化疗所致的临床设置痛觉过敏(
11,
29日- - - - - -
33]。系统性的管理0.1毫克公斤−1硫酸长春新碱激发从神经胶质的细胞合成和释放细胞因子导致炎症的神经元。炎症刺激Janus kinase-transcription-3通路(Jak-STAT3通路)导致大鼠(神经性疼痛
27,
33- - - - - -
36]。更是如此,长春新碱治疗改变了神经系统并创建瞬态传导神经纤维(C -和一个
β纤维)导致自发性疼痛和不寻常的感觉周边地和集中(
37]。神经性疼痛与各种形式的异常性疼痛包括触觉,冷,热,和机械,这被认为是通过激活介导(C -和一个小直径的纤维
δ和大直径纤维(纤维)
β纤维)[
38,
39]。因此,提取的抑制性影响触觉,冷,热以及机械痛觉过敏在这项研究可能由于变更动作电位的传导无髓鞘的和有髓C - a
δ- - - - - -,
β纤维。也可能是BAE能够减少钙和钠离子的数量,积极提高长春新碱注射后。自BAE已被证实有抗炎作用[
40),它也可以减少炎症相关的神经元vincristine-induced神经病变以及减少NMDA受体激活。然而,BAE的确切的作用机制需要建立于进一步的研究。
在老鼠模型中药物引起的周围神经病变,氧化应激的标记和DNA氧化增加体循环,坐骨神经和腰背
41]。氧化应激是直接参与癌症的发病机制神经性疼痛(
42]。研究建立了共处的增加氧化应激作为中心中介通过线粒体毒性、细胞凋亡的神经炎症,和生物化学变化
42,
43]。Mitotoxicity诱发抗癌药物损害ATP生产和细胞信号(
44]。这是证明了先天抗氧化防御与增强敏感性脂质过氧化(
41- - - - - -
43,
45- - - - - -
48]。更是如此,其他地方的研究表明一些抗癌药物(如长春新碱)可以引发氧化应激在化疗
42]。氧化应激可以影响肌肉的敏感性和报告显示可能存在氧化应激之间的相互交互和骨骼肌容易疲劳和疼痛
49]。此外,自由基是已知的与疼痛有关感应在慢性疼痛导致痛觉受器的阈值降低,导致痛觉过敏(
50,
51]。显著抑制应激SOD的活动下降,猫,谷胱甘肽水平是长春新碱治疗(
42]。从这项研究中,脂质过氧化反应产品、丙二醛和蛋白质羰基含量积累在强调长春新碱控制动物。坐骨神经匀浆(SNH)获得本研究证明与BAE治疗抑制氧化应激所保存的坐骨神经组织抗氧化能力。内源性抗氧化剂谷胱甘肽等标记、SOD和猫在SNH明显升高BAE-treated动物与长春新碱控制动物。相对于BAE-treated Saline-treated老鼠老鼠MDA水平显著提高,氧化应激的一个积极的指标。这是一个迹象表明,潜在的破坏性过程,如脂质过氧化和超氧化物anion-mediated自由基生成由BAE抑制。这个明显的抗氧化作用的BAE符合一些以往的研究报告——提取物的体外抗氧化活性
b .非洲"(
52- - - - - -
54]。它因此可以提出,提高内源性抗氧化防御可以参与的有效性BAE vincristine-induced神经病变的老鼠。
总之,本研究证实,口服hydroethanolic干树皮提取物
b .非洲"施加在vincristine-induced antiallodynic和antihyperalgesic效果在大鼠周围神经病变有可能通过调制氧化剂和抗氧化的平衡在坐骨神经组织和/或抑制炎症介质的产生。