APS 药理和制药科学的进步 2633 - 4690 2633 - 4682 Hindawi 10.1155 / 2020/1258707 1258707 研究文章 抗氧化作用, 在活的有机体内抗炎和Antinociceptive活动 Myrciaria多花植物水果皮:Opioidergic系统参与的可能性 桑托斯 路程比安卡·达席尔瓦 1 桑托斯多斯桑托斯 布鲁诺 1 奥利维拉 若昂Ricardhis Saturnino德 1 科斯塔 Wendeo肯尼迪 1 Zagmignan Adrielle 2 https://orcid.org/0000 - 0002 - 4206 - 0904 达席尔瓦 路易斯·克劳迪奥Nascimento 2 https://orcid.org/0000 - 0001 - 8668 - 6223 费雷拉 玛格达Rhayanny Assuncao 3 Lermen Vilmar路易斯 4 Lermen 玛丽亚Silvanete Benedito de Sousa 4 达席尔瓦 亚历山大·戈麦斯 1 西曼乃斯 拉斐尔·马托斯 5 苏亚雷斯 路易斯Alberto里拉 3 https://orcid.org/0000 - 0001 - 6928 - 0897 Paiva 帕特里夏·玛丽亚·古埃德 1 https://orcid.org/0000 - 0003 - 2581 - 9218 秘鲁首都利马 维拉·露西亚de Menezes 1 https://orcid.org/0000 - 0003 - 4920 - 9975 专题 玛丽亚特丽莎多斯桑托斯 1 https://orcid.org/0000 - 0002 - 2221 - 5059 达席尔瓦 玛西娅Vanusa 1 Mutalik 斯 1 Departamento de Bioquimica 大学联邦德伯南布哥 累西腓 聚乙烯50670 - 901 巴西 ufpe.br 2 项目Pos-Graduacao 大学Ceuma 圣路易斯 马65075 - 120 巴西 ceuma.br 3 Departamento de Ciencias Farmaceuticas 大学联邦德伯南布哥 累西腓 聚乙烯50670 - 901 巴西 ufpe.br 4 Comunidade Serra dos加索尔Doias Araripe高地 Exu 聚乙烯56230 - 000 巴西 5 Departamento de Antibioticos 大学联邦德伯南布哥 累西腓 聚乙烯50670 - 901 巴西 ufpe.br 2020年 27 4 2020年 2020年 16 11 2019年 21 02 2020年 13 03 2020年 27 4 2020年 2020年 版权©2020年路程比安卡da Silva桑托斯等。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

抗氧化性能和这项工作评估 在活的有机体内antinociceptive和从水果中提取获得皮的抗炎作用 Myrciaria多花植物(h·西Willd交货。)o·伯格(桃金娘科)。在巴西,这种植物是普遍 Cambui或 camboim。不同提取提交的内容比较分析,以确定所选植物化学的课程(水平的总酚类、类黄酮和单体的花青素)和 在体外抗氧化电位。提取与更高的潜在被选中 在活的有机体内评价其antinociceptive和抗炎作用。最后,提取的化学特性是由高效液相色谱法(HPLC)。MfAE(使用丙酮为溶剂提取获得)显示,较高的酚类(296毫克GAE / g)和花青素含量(35.65毫克Cy-3-glcE / g),与更高的抗氧化活性有关。MfAE也表现出 在活的有机体内抗炎、镇痛propertiers。这个分数抑制炎症和神经源性阶段的疼痛,和这种效应被纳洛酮逆转(建议opioidergic系统)的参与。MfAE减少腹部醋酸引起的扭歪。没食子酸的高效液相色谱分析显示存在(及其衍生物)和鞣花酸。综上所述,这些数据支持使用 m .多花植物开发功能食品和nutraceutics水果皮。

 Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de含量优越 慰问Nacional de Desenvolvimento Cientifico e学府 405297/2018-1 307110/2018-4 Fundacao德帕罗Ciencia e Tecnologia Estado de伯南布哥 apq - 0493 - 4.03/14 Fundacao德帕罗尽管e ao Desenvolvimento Cientifico e学府做马拉尼昂 BEPP-02241/18 1。介绍

自由基(和相关的活性物种)一般来源于正常代谢和氧化还原信号通路和免疫防御的关键 1- - - - - - 4]。然而,这些分子能与细胞结构导致障碍的生理系统( 5- - - - - - 7]。从这个意义上说,氧化应激与病因有关的一些疾病如炎症性疾病,慢性疼痛,和退化性疾病 8- - - - - - 10]。

几个刺激引发的炎症反应是一个复杂的条件(机械损伤、有毒物质、组织缺血和传染性病原体)和被组织变更,让强烈的免疫细胞迁移到炎症的焦点( 11- - - - - - 13]。通常,释放促炎的物质(细胞因子、一氧化氮和其他活性物种)根除后减少刺激,导致决议阶段( 13, 14]。然而,在某些情况下,炎症的解析是没有实现,导致过度或不适当的炎症 11]。这种情况与一些疾病如癌症、糖尿病、类风湿性关节炎、牛皮癣( 12, 15]。在这种情况下,高水平的活性物种导致组织损伤和器官功能障碍( 2, 4, 5]。

炎症介质的过度释放会导致炎性疼痛的建立( 16, 17]。例如,细胞因子TNF - α,il - 1 β和il - 6(由巨噬细胞和其他免疫细胞)与疼痛的神经元和调节中枢敏感化,疼痛和痛觉过敏( 18- - - - - - 20.]。此外,其他免疫细胞所产生的物质,如组织胺和前列腺素,也扮演重要角色在疼痛管理 17, 21, 22]。在这种背景下,疼痛和炎症有严格监管的关系,因为疼痛的神经元也调节炎症反应( 17, 21, 23]。

尽管数量在市场上可用的抗炎、镇痛药物,这些临床条件复杂的治疗计划和对全球卫生系统构成巨大的挑战 24, 25]。这个场景中指出的发展迫切需要有效的镇痛和抗炎药( 26- - - - - - 28]。

几个科学证据报告,水果是有价值的化合物具有抗氧化特性的来源,和他们的消费可能有利于减少炎性疾病和慢性疼痛的有害影响 29日- - - - - - 32]。从这个意义上说,越来越多的兴趣知道的抗炎、镇痛性质可食用的水果(和他们的不同部分),以提供更多的洞察支持他们作为功能食品和保健品 30., 33, 34]。

Myrciaria多花植物(h·西Willd交货。)o·伯格(桃金娘科)是美国南部和中部的原生植物,分布在不同的巴西亚马逊等生物群落,Caatinga,塞拉多,大西洋森林。它的果实(在巴西被称为 Cambui或 camboim)是可食用的和经常食用新鲜果汁或含酒精饮料 35]。一些作品已经证明这种植物的不同部分的药理特性,如抗氧化剂,抗菌,抗癌效果 36, 37]。然而,药理作用的水果没有妥善解决 35]。特别是产品的有益方面来自水果的皮 m .多花植物没有被证实。这项工作分析了植物化学的成分以及抗氧化,antinociceptive,抗炎潜力从果皮中提取得到的 m .多花植物。

 2。材料和方法 2.1。植物材料

的果实 m .多花植物被收集的 Serra dos加索尔Doias2015年(Exu、伯南布哥、巴西)。植物材料是由亚历山大·戈梅斯da Silva(抗生素、联邦大学的伯南布哥,巴西)。标本券(号码:92722)是存入伯南布哥的农业研究所的植物标本。

 2.2。植物提取物

水果是用自来水清洗和手工分为纸浆,种子和果皮。水果皮样本在40°C和干细粉。水果皮粉(50克)和500毫升的乙醚提取(1:10 w / v)在棕色玻璃瓶上限为1小时在室温下剧烈的震动(30°C)。提取过滤,和残渣re-extracted两次与500毫升遵循同样的步骤。在这个过程中,与其他溶剂残留提取(序列中的氯仿、丙酮和甲醇),和所有提取步骤重复如上所述。在每一步,得到提取物干在40°C, rotaevaporator生成提取MfEeE(乙醚)MfCE(氯仿)MfAE(丙酮),和MfME(甲醇)。水萃取也表现了10 g的粉100毫升蒸馏水(1:10 w / v);解决方案是过滤和冻干,生成提取MfAqE。

 2.3。植物化学的分析

几种植物化学物质的存在(黄酮类化合物、糖类,三萜,类固醇,皂苷、单萜、倍半萜烯,香豆素类、醌类、生物碱、原花青素,和水溶性单宁)研究了在每个提取用薄层层析硅胶板F254年(ALUGRAMRMacherey-Nagel, 818131年德国),每个洗脱系统,具体可视化代理和标准被用来确定代谢物如表所示 1( 38- - - - - - 41]。

洗脱系统、显色剂和标准中使用的植物化学的分析提取的水果皮 Myrciaria多花植物用薄层色谱法(TLC)。

次生代谢物类 标准 流动相 显色剂
类黄酮和糖类 槲皮素、芦丁和绿原酸 EtOAc-HCOOH-AcOH-H2O (100: 11: 11: 26 v / v) 自然products-polyethylene醇试剂
三萜烯和类固醇 β谷甾醇 甲苯:层(90:10 v / v) Liebermann-Burchard试剂
皂苷 七叶树皂苷 EtOAc-HCOOH-AcOH-H2O (100: 11: 11: 26 v / v) Liebermann-Burchard试剂
Mono和倍半萜烯 百里酚 甲苯:层(97:3 v / v) Anisaldehyde-sulfuric酸试剂
香豆素类、醌类 香豆素和拉帕醇 CHCl3甲醇(98:2 v / v) 氢氧化钾试剂
生物碱 毛果芸香碱 EtOAc-HCOOH-AcOH-H2O (100: 11: 11: 26 v / v) Dragendorff试剂
原花青素 儿茶素 EtOAc-HCOOH-AcOH-H2O (100: 11: 11: 26 v / v) Vanillin-hydrochloric酸试剂
Hydrolysable单宁 没食子酸 n-BuOH-H2O-AcOH (40: 50: 10 v / v) 硫酸铁铵1%
2.4。总酚含量、总类黄酮和单体的花青素

总酚类的水平估计使用Folin-Ciocalteu方法( 42),做了一些调整。20个样品 μ每个提取的L(1毫克/毫升)与100年涨跌互现 μL Folin-Ciocalteu试剂。3分钟后在室温下,80年 μL的碳酸氢钠溶液(0.7米)增加了。的反应是蒙在鼓里在室温下2小时。吸光度测量在735 nm使用标(BioTek uQuant MQX200)。甲醇和蒸馏水作为消极的控制。没食子酸作为标准,计算结果校准曲线的基础上没食子酸(10 - 100 μg / mL),表示为毫克每克相当于没食子酸的提取(GAE / g提取)。

类黄酮含量根据比色法测定铝氯( 43]。提取物进行了测试在1毫克/毫升的浓度和槲皮素被用于获得标准的校准曲线(10 - 100 μg / mL)。样本(100 μL)是100年混合 μL的试剂(氯化铝(AlCl的2%3)在甲醇);1小时后在dark-room-temperature环境下,吸光度是读一个空白的甲醇或更多的蒸馏水,试剂,在420海里。结果被表示为毫克每克相当于槲皮素的提取(mg QE / g提取)。实验是一式三份完成的。

单体的花青素的含量是由微分pH值方法( 44]。氯化钾缓冲区(氯化钾;0.025米;pH值1)和醋酸钠缓冲(CH3有限公司2Na;0.4米;pH值4.5)。样本(200 μL在10毫克/毫升)混合到1.8毫升每个缓冲区。10分钟后,吸光度是读520 nm和700 nm。蒸馏水是用作控制。花青素的浓度是根据以下方程,计算和结果表示为cyanidin-3-glucoside等效(Cy-3-glcE): (1) 花青素含量 = 一个 × 兆瓦 × DF × 10 3 ε × 1 。

一个=(吸光度520海里−吸光度700海里)pH值1−(吸光度520 nm−吸光度700海里)在pH值4.5;兆瓦(分子量)= 449.2克/摩尔Cy-3-glc;DF =稀释系数(0.2毫升的样品被稀释2毫升,DF = 10);1 =在厘米长度; ε= 26900,摩尔消光系数,在L x摩尔−1x厘米−1,因为Cy-3-glc;从g和10³=因素转换到毫克。

 2.5。抗氧化试验 2.5.1。自由基DPPH试验(封存)

隔离的能力评价的DPPH (2, 2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl)激进,40的整除 μ每个提取在不同浓度(8.0625 L到1000 μg / mL)是250年混合 μL(1毫米DPPH解决方案(甲醇)25分钟在室温和免受光( 45]。没食子酸标准作为积极的控制,和甲醇是消极的控制。一个控制解决方案(40 μL的提取和250 μL使用的溶剂稀释样品)被用来排除提取颜色的可能的干扰。每种解决方案的吸光度为517 nm使用标(BioTek uQuant MQX200)。

 2.5.2。abt化验

abt (2, 2-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic酸)激进的是通过混合5毫升的abt原液与88年(7毫米) µL 140毫米的过硫酸钾的解决方案。这种混合物仍然在黑暗中,在室温下使用前16小时。abt激进的解决方案是用乙醇稀释到0.7 nm的吸光度(±0.02)获得了734海里。样品(10 μL)提取物(1毫克/毫升)的混合1毫升abt激进的6分钟,然后读出一个分光光度计在734纳米 46]。Trolox被用作抗氧化剂(100标准 μM - 2000 μ米)。结果表示为Trolox等效抗氧化能力(问题) μM TE / g提取。

 2.5.3。总抗氧化能力(TAC)

样本(100 μL)的提取物(1毫克/毫升)结合1毫升的试剂溶液(0.6 M硫酸,28 mM磷酸钠,钼酸铵和4毫米)。管子在95°C孵化90分钟,然后冷却到室温,每个反应的吸光度是阅读在695海里。100年由控制反应 μL 1毫升的甲醇混合试剂溶液( 47]。所使用的标准是抗坏血酸(1毫克/毫升)。结果是根据下面的公式计算,并表示为总抗氧化能力(TAC)相对于抗坏血酸。 (2) TAC % = 年代 腹肌 − B 腹肌 AA 腹肌 − B 腹肌 ∗ One hundred. , 在哪里 年代腹肌样品的吸光度(提取), B腹肌是控制的吸光度,AA腹肌是抗坏血酸的吸光度。

 2.5.4。测定超氧化物自由基的封存

在这个分析,反应混合物由300 μL的提取物不同浓度(50 - 1000 μg / mL), 100年 μL的电视台(nitrotetrazolium蓝色氯)在DMSO溶液(1毫克/毫升),和1毫升的碱性DMSO(1毫升DMSO包含5毫米在0.1毫升氢氧化钠水),和吸光度测量在560海里 48]。

 2.6。高效液相色谱分析

高性能液相色谱法(HPLC)分析,20毫克的MfAE称重和稀释的甲醇50% (v / v)的2毫升容量瓶和0.45过滤 μm PVDF膜(Macherey-Nagel®)进样。系统最终的3000(热费希尔科学®,欧洲大学协会)耦合到一个光电二极管阵列检测器(爸爸;热费希尔科学®)和配备一个二进制泵(HPG-3x00RS;热费希尔科学®)、脱气装置和自动取样器循环20卷 μL (acc - 3000;热费希尔科学)。分析波长是270海里。

色谱分离了26°C使用一列Dionex®C18(250毫米×4.6毫米的组长。,5 μ米)配备precolumn Phenomenex®(C18;4毫米×3.9 μ米)。溶剂的流动相组成(纯化水、Purelab经典的紫外线,Elga®)和B溶剂(甲醇、高效液相色谱级、Tedia®),两个酸化trifluoracetic酸为0.05% (Vetec®),和流量调整到0.9毫升/分钟。以下使用梯度程序:清廉分钟,10 - 20%的溶剂B;10 - 13.5分钟,20 - 25%的溶剂B;13.5 -18分钟,25 - 40%的溶剂B;年龄在18岁至25岁之间的分钟,40 - 80%的溶剂B;25 - 30分钟,80%的溶剂B;每次30 - 35分钟,80 - 10%的溶剂b的内容物质中发现MfAE决心使用没食子酸从校准曲线(纯度96%)或鞣花酸纯度(95%),从σ购买®(美国)。

 2.7。道德的声明

所有程序使用动物伦理委员会批准使用动物的联邦大学的伯南布哥,巴西(CEUA-UFPE;过程数量:0003/2018)。的提议在会议上被批准CEUA-UFPE在4月23日举行,2018年。

 2.8。动物

实现了实验使用男性瑞士老鼠(g, 10周)提供的免疫病理实验室三Asami (LIKA)。动物获得食物和水标准随意光明/黑暗12 h。每次实验前(6 - 8小时),动物被限制在只有饮食避免食源性干扰物质的吸收。

 2.9。急性毒性评价

急性毒性的MfAE根据指令执行的经济合作与发展组织(2001)。的急性毒性MfAE在两个步骤进行了分析。阶段1:动物被分为三组( n = 3),收到MfAE剂量的10毫克/公斤,100毫克/公斤,1000毫克/公斤。动物被观察24小时监控他们的行为和生存。阶段2:MfAE管理在高剂量(1600、2900和5000毫克/公斤;一个老鼠每剂),然后观察行为和生存(24小时 49]。的LD50计算以下方程: (3) LD 50 = D 0 × D One hundred. , D0=最高剂量没有引起死亡率和 DOne hundred.=最低剂量导致小鼠死亡。

 2.10。抗炎试验

的 在活的有机体内评价了抗炎作用MfAE carrageenan-induced爪子水肿。为此,老鼠分配成四组( n = 6),收到了以下治疗:(i) MfAE 50毫克/公斤( 订单。),(2)MfAE 100毫克/公斤( 订单。),(iii)车辆(0.9%生理盐水)( 订单。),或(iv)吲哚美辛在20毫克/公斤( 订单。)。1小时后,爪子水肿是由2%的注射角叉菜胶诱导的解决方案(15 μL /动物)到正确的后爪的subplantar地区( 50]。控制、生理盐水(0.9%;15 μL)注入左后爪。爪子卷用数字游标卡尺测量每小时5小时( 51]。抑制水肿被评估计算的左、右爪之间的差异。

 2.11。Antinociceptive化验 2.11.1。醋酸引起的腹痛

老鼠被分为四组( n = 6),如上所述。伤害感受是诱导的腹腔内注射醋酸(0.8%;100毫升/ 10 g)。开始5分钟乙酸注射后,腹部弯曲的数量记录10分钟的伸展运动的数量( 52]。

 2.11.2。福尔马林试验

在这个试验,动物被分成五组 n = 6/组),收到了以下治疗:(i), (2) MfAE 50毫克/公斤( 订单。),(3)MfAE 100毫克/公斤( 订单。),(iv)吲哚美辛在20毫克/公斤( i.p。),(v)吗啡在10毫克/公斤( 订单。)。1小时后,福尔马林溶液(2.5% 0.9%生理盐水;20 μL /爪)管理到subplantar区域的后爪( 53]。老鼠在一室镜子安装在三面允许爪子的观察。所花费的时间(以秒为单位),舔注入的爪子疼痛的测量作为一个指标。这个响应测量5分钟(第一阶段,神经源性疼痛)和15至30分钟后注射福尔马林(第二阶段,炎性疼痛)。

评估可能的参与阿片系统的MfAE antinociceptive效应,老鼠用纳洛酮治疗(1毫克/公斤, i.p。)前30分钟MfAE管理局(100毫克/公斤, 订单。)和吗啡(10毫克/公斤, 订单。)。

 2.12。统计分析

的 在体外至少在两个独立的分析进行了一式三份化验。结果表示为(±标准错误)。之间的区别意味着统计学意义的测试使用单向或双向方差分析(方差分析)为多个比较图基的测试。的集成电路50(浓度,抑制50%)是由线性回归计算。统计分析的结果的价值 p < 0.05 被认为是具有统计学意义。

 3所示。结果与讨论 3.1。植物化学的分析

每个提取的收率为8.50%,6.60%,2.05%,5.17%,49.27%,MfAqE, MfEeE, MfCE, MfAE和MfME分别。提取物的色谱配置文件 m .多花植物水果皮显示存在的几类次生代谢物(表 2)。MfEeE和MfCE、单萜、三萜、倍半萜烯和类固醇被发现。MfAE由类黄酮,糖类,三萜和类固醇的痕迹,皂甙,hydrolysable单宁。另一方面,MfME和MfAqE黄酮类化合物,聚合物含有花青素,hydrolysable单宁的痕迹。

植物化学的分析提取的水果皮 Myrciaria花束月季。

类次生代谢物 提取的水果皮 Myrciaria多花植物
MfEeE MfCE MfAE MfME MfAqE
类黄酮 − − + ∗ + ∗ + ∗
Phenylpropanoid − − + − −
三萜烯 + + tr − −
类固醇 + + tr − −
皂苷 − − + − −
单萜和倍半萜烯 + + − − −
生物碱 − − − − −
香豆素 − − − − −
醌 − − − − −
Proanthocyanidin和leucoanthocyanidin − − − + ∗ ∗ + ∗ ∗
Hydrolysable单宁 − − + + +

−:消极;+:积极的。 请注意。 ∗ 类黄酮3′,4′-哦(苷配基,mono - di -, triglycosides)。 ∗ ∗ 聚合物含有花青素。

一些类次生代谢物中发现水果皮的提取物 m .多花植物属已经描述了吗 Myrciaria,如类固醇、原花青素、类黄酮和单宁hydrolysable [ 36, 37, 54]。此外,食用的部分 m .多花植物水果是由类胡萝卜素(叶黄素、玉米黄质、 β玉米黄质,13 - 独联体- - - - - - β胡萝卜素, α胡萝卜素, β胡萝卜素,9 - 独联体- - - - - - β胡萝卜素)、类黄酮(芦丁)和酚酸(没食子酸和鞣花酸)( 35]。

 3.2。总酚类化合物的浓度的比较分析,类黄酮、花青素和单体的

为了选择提取最高的潜力,我们进行了比较评价的酚类、类黄酮、花青素和单体的。总酚类的内容不同提取物中7.54毫克GAE GAE 296.27毫克/ g / g(表 3)。MfAE得到酚含量最高(296.27毫克GAE / g)(表 3)。

总酚类化合物的浓度、总类黄酮和单体的不同从果皮中提取得到的花青素 m .多花植物。

样品 总酚含量(毫克GAE / g) 总类黄酮含量(毫克QE / g) 花青素含量(毫克Cy-3-glcE / g)3
MfEeE 7.54 16.62 ND
MfCE ND 3.46 ND
MfAE 296.27 0.74 35.65
MfME 158.29 ND 4.34
MfAqE 62.28 ND 14.42

未检测到ND =。

总类黄酮含量的水平范围从0.74毫克QE / g QE / g(表16.62毫克 3)。MfEeE显示最高浓度(16.62毫克QE / g)。最后,单体的花青素的含量范围从4.34毫克Cy-3-glcE Cy-3-glcE 35.65毫克/ g / g(表 3)和MfAE显示最高的内容(35.65 Cy-3-glcE / g)。总之,MfAE显示,酚类化合物和花青素的含量最高。这些类的化合物与几个有益的食品和药用植物的属性( 55- - - - - - 57]。

 3.3。抗氧化活性的比较评价

后,四个抗氧化剂化验了选择最好的提取潜在的(表 4)。在DPPH实验,降低集成电路50值被发现MfAE (63.84 μg / mL),其次是MfME (343.12 μg / mL), MfAqE (350.41 v)和MfEeE (854.94 μg / mL)。同样,MfAE显示最高的抑制能力abt激进(1630.11 µ问题/ g)和总抗氧化能力(123.91%)。最后,只有MfAE和MfME能够隔离超氧化物自由基,IC50值为260.27 μ和446.31克/毫升 μ分别为g / mL(表 4)。

从水果中提取获得皮的抗氧化活性 Myrciaria多花植物。

样品 DPPH集成电路50( µg / mL) abt+( µ问题/ g) TAC (%) 超氧化物集成电路50( µg / mL)
MfEeE 854.94 597.89 109.45 > 1000
MfCE > 1000 347.89 68.87 > 1000
MfAE 63.84 1630.11 107.43 260.27
MfME 343.12 660.11 102.82 446.31
MfAqE 350.41 793.44 123.91 NT
没食子酸 3.46 - - - - - - - - - - - - - - - - - -

集成电路50=所需浓度减少50%的DPPH或超氧化物自由基。问题= Trolox等价的抗氧化能力。元=不测试。

MfAE所展现出来的最高的抗氧化作用可能是由于其较高的花青素含量和酚类化合物,因为这些phytocompounds表明积极的水平相关性的结果 在体外抗氧化剂化验(表 4)。此外,MfAE提出了植物化学的概要文件与不同类型的次生代谢产物,如类黄酮、糖类,三萜皂苷,hydrolysable单宁。总的来说,结果表明MfAE是最有前途的提取,导致我们选择它的 在活的有机体内抗炎和antinociceptive评估。

 3.4。高效液相色谱法分析<斜体>丙酮提取的M。多花植物< /斜体>

丙酮提取物的色谱资料皮的水果(MfAE)如图 1。分析发现没食子酸的存在(峰保留时间为7.56分钟)和一个指示性的鞣花酸(峰值7,保留时间为25.52分钟)。其他山峰(2 - 6)没食子酸衍生品。化合物计算的内容如下:0.29±0.0012克%没食子酸,0.33±0.0204克%没食子酸(2 - 6)衍生品,山峰,和0.54±0.0012 g %鞣花酸。证明的山峰(没食子酸和鞣花酸)被确定通过比较保留时间和紫外光谱标准。同时,他们证实了飙升的样本与少量的标准解决方案。没食子酸和鞣花酸以前检测到的水果 m .多花植物( 35]。

色谱概要的酚酸丙酮提取物(MfAE)。分析了提取单位270海里。发现化合物:(1)没食子酸,(2)-(6)没食子酸衍生物,和(7)鞣花酸。

没食子酸和鞣花酸(及其衍生物)通常发现在水果和其他植物的产品( 55, 58)与抗氧化活性,其中包括 Myrciaria属( 59, 60]。此外,一些报道称,这些化合物是有效的抗炎,镇痛,和神经保护药物 60- - - - - - 62年]。

 3.5。急性毒性

口服致死量(LD50)的丙酮提取大于2000毫克/公斤(LD50= 2154.06毫克/公斤),因此,它可以被分类为低毒性药物根据经济合作与发展组织( 63年]。因此,剂量50毫克/公斤和100毫克/公斤的选择应用 在活的有机体内化验。

 3.6。抗炎活性

的 在活的有机体内抗炎MfAE的评估模型,水肿的形成由角叉菜胶诱导。动物对待两个剂量的MfAE证明爪子水肿显著减少,在所有时间评估,相比vehicle-treated组( p < 0.001 )(图 2)。最大抑制(98.87%)观察治疗2小时MfAE在100毫克/公斤。的剂量50毫克/公斤,效果越高(93.75%)5小时后观察。参考药物吲哚美辛(20毫克/公斤)表现出最大抑制(96.22%)治疗后3小时。

水果皮的丙酮提取的效果 Myrciaria多花植物(MfAE、50和100毫克/公斤,v.o)。在carrageenan-induced爪子水肿。每个点代表均值±SEM的六个动物。星号指示意义与汽车集团。 ∗ p < 0.001 ,双向方差分析。

Carrageenan-induced爪子水肿是一种实验模型用于评估新药剂作用于急性炎症( 64年- - - - - - 66年]。这个测试被认为是两相的事件;在最初的阶段(1 - 3小时),释放炎症介质如组胺、5 -羟色胺、缓激肽发生,而在后期阶段(3小时到4小时),发生环氧酶2 (cox - 2)对碘氧基苯甲醚的合成,导致前列腺素和一氧化氮释放( 67年, 68年]。MfAE减少水肿在五个小时的观察,表明它的作用在这两个阶段的急性炎症过程。此外,摘录 Myrciaria植物也表现出抗炎作用在这个模型( 64年, 65年]。

的结果表明,影响MfAE水肿的形成可能涉及多个点等合成的抑制和/或释放炎症介质,通过COX或不同的特定酶的机制。丰富的多酚类(类黄酮、花青素)MfAE了向抗炎活动( 60]。然而,互补的研究基于这些炎症介质和考克斯抑制应该探索,以及植物化学的隔离。

 3.7。Antinociceptive活动

治疗剂量的MfAE也显著地抑制弯曲的数量(95.16%和95.59%,分别地。),相比汽车(生理盐水)( p < 0.001 )。无论是不同浓度之间没有差异,也没有与吲哚美辛控制(图 3)。在该测试中,醋酸诱发痛觉过敏通过一个机制,取决于居民细胞(巨噬细胞和肥大细胞)在腹膜腔。这些细胞释放细胞因子(TNF - α白介素1 β和白介素8)参与扭曲的响应( 69年]。然而,这个模型不能推断出的antinociceptive行动是否MfAE核心或外围。

影响丙酮提取的水果皮 Myrciaria多花植物(MfAE、50和100毫克/公斤,v.o)在腹部醋酸引起的扭弯。每一列表示数量的平均值±SEM扭歪的六个动物。星号指示意义与汽车集团。 ∗ p < 0.001 、单因子变异数分析。

关于福尔马林测试,结果如图 4显示,在第一阶段(神经源性阶段)的测试中,只有100毫克/公斤的浓度显示舔的显著减少(86.52%; p < 0.001 )。吗啡(10毫克/公斤)在这个阶段诱导减少83.98%。然而,在第二阶段(炎症期),MfAE浓度都显著减少舔时间( p < 0.001 )。MfAE抑制69.47%和82.58%的50毫克/公斤和100毫克/公斤,分别。积极控制,消炎痛(20毫克/公斤)和吗啡(10毫克/公斤),抑制分别为76.45%和94.91%的舔。纳洛酮恢复MfAE只有在神经源性阶段的影响。

影响丙酮提取的水果皮 Myrciaria多花植物(MfAE、50和100毫克/公斤,v.o)。福尔马林试验。阶段1:0到5分钟的测试,神经性的阶段;阶段2:15到30分钟的测试,炎症阶段。每一列表示均值±SEM的六个动物。相比汽车组星号指示意义。 ∗ p < 0.001 、单因子变异数分析。

福尔马林测试是一个伤害感受模型基于两相的疼痛反应;这是一个有用的工具来研究新药剂的作用是否具有镇痛和抗炎作用[ 70年]。发生在第一阶段(神经源性疼痛),5分钟后注射福尔马林的爪子,直接传入纤维和化学刺激痛觉受器激活导致物质p的释放炎症阶段(15到30分钟后注入),发生炎症介质的释放,引发周围炎症反应( 53, 71年]。

中央代理镇痛药物(如吗啡)能够抑制福尔马林的两阶段测试;相比之下,外围地作用的药物(如吲哚美辛)抑制只有第二阶段( 72年]。我们的结果表明,MfAE剂量100毫克/公斤可以减少疼痛的反应两个阶段( p < 0.001 )。在第一阶段,MfAE的镇痛效果(100毫克/公斤)是由行动的阿片受体,纳洛酮逆转MfAE的效果。这个观察是归因于opioidergic机制已经引起了政府的纳洛酮(选择性阿片受体拮抗剂)。

 4所示。结论

这项工作的结果表明,提取的皮 m .多花植物水果与抗氧化活性的化合物来源。水果皮的使用,可能残留的水果消费,代表了一种可持续的应用这些自然产品。此外,比较分析的抗氧化剂和植物化学的配置文件允许选择MfAE(富含酚类化合物和一小部分花青素)代理高药理的潜力。MfAE也显示出明显的抗炎和antinociceptive活动(效果涉及opioidergic系统)。考虑到目前的结果,水果的皮 m .多花植物高价值的生物活性化合物的来源,可能导致一些有利影响与消费相关的水果。从这个意义上讲,水果皮可以用于功能食品和保健品的发展。

 数据可用性

的数据支持本研究的发现可以从相应的作者在合理的请求。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

 作者的贡献

肠易激综合症、AGS MTSC, MVS构思研究,进行研究设计。肠易激综合症、JRSO AGS WKC, MVS收集植物材料和植物识别和提取进行准备。肠易激综合症,BSS, JRSO WKC执行 在活的有机体内和 在体外化验。军区空军、RMX和拉尔的化学特征进行提取。肠易激综合症,BSS, AZ, LCNS、PMGP VLML, MTSC, MVS,军区空军,RMX,拉尔解释和讨论的结果。肠易激综合症,BSS, AZ, LCNS MVS起草和修订后的手稿。所有作者批准了最终版本的手稿。

 确认

作者承认自然产品的技术支持由实验室、分子生物学实验室生物化学系的联邦大学的伯南布哥(UFPE)。这项工作得到了巴西机构:Coordenacao de Aperfeicoamento Pessoal de含量比(斗篷;财务代码001),慰问Nacional de Desenvolvimento Cientifico e学府(CNPq)(赠款405297/2018-1号和307110/2018-4),Fundacao德帕罗Ciencia e Tecnologia做Estado de伯南布哥(FACEPE) (apq - 0493 - 4.03/14),和Fundacao de帕罗尽管e ao Desenvolvimento Cientifico e学府做马拉尼昂(BEPP-02241/18)。

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