APS 药理科学的进步 1687 - 6342 1687 - 6334 Hindawi出版公司 10.1155 / 2016/6392656 6392656 研究文章 自由基清除活性和铁减少的能力 Juniperus thurifera(l), j . oxycedrus(l), j . phoenicea(l)和 Tetraclinis关节动物(l) http://orcid.org/0000 - 0001 - 8365 - 9457 El Jemli Meryem 1 卡迈勒 拉比 1 Marmouzi 伊利亚斯 1 Zerrouki Asmae 2 Cherrah · 1 Alaoui 卡蒂姆 1 地 罗伯特。 1 Pharmacodynamy研究团队,ERP 药理学和毒理学实验室 医学院和药房 穆罕默德五世大学 6203年英国石油公司,Rabat-Instituts 拉巴特 摩洛哥 um5.ac.ma 2 免疫学实验室 医学院和药房 穆罕默德五世大学 拉巴特 摩洛哥 um5.ac.ma 2016年 16 5 2016年 2016年 21 10 2015年 14 04 2016年 2016年 版权©2016 Meryem El Jemli et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

客观的。这项工作的目的是研究和比较水叶提取物的抗氧化性能和酚类内容 Juniperus thurifera, Juniperus oxycedrus, Juniperus Phoenicea,和 Tetraclinis关节动物从摩洛哥。 方法。抗氧化提取物进行评估的活动2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)免费自由基清除能力,Trolox等效抗氧化能力(问题),和铁降低抗氧化能力(收紧)化验。还总酚和类黄酮提取的内容spectrophotometrically决定。 结果。所有提取显示有趣的抗氧化活动相比,标准的抗氧化剂(丁羟甲苯(二叔丁基对甲酚),槲皮素,和Trolox)。的水提物 Juniperus oxycedrus显示最高的抗氧化活性以DPPH,与集成电路问题,收紧化验50的值 17.91 ± 0.37 μg / mL, 19.80 ± 0.55 μg / mL 24.23 ± 0.07 μ分别g / mL。强抗氧化能力和总酚含量之间的相关性观察表明,酚类化合物是主要的贡献者这些植物提取物的抗氧化性能。 结论。这些结果表明,溶液提取的 Juniperus thurifera, Juniperus oxycedrus, Juniperus phoenicea,和 Tetraclinis关节动物可以构成一个有前途的新来源的天然化合物与抗氧化剂的能力。

 1。介绍

研究人员正在寻找天然抗氧化剂,对人体健康没有任何副作用。搜索正在寻找新的、有效和安全的抗氧化剂,为了使用在食品和医药制剂替代合成的。

药用植物是具有抗氧化活性的化合物的主要来源。几项研究已经报道了有趣的摩洛哥药用植物的组成,包括类黄酮、酚酸和单宁闻名健康福利作为抗氧化剂 1- - - - - - 3]。

摩洛哥植物包含超过4200种维管植物物种。然而,几个人进行了药理筛选或化学性质 4]。其中,柏科是最常见的裸子植物(裸子植物)在世界各地。事实上,他们做一个引人注目的印象地中海盆地的植物景观,是世界生物多样性热点地区之一。柏科长大从海岸到高海拔地区,也能够在极端生态环境和发展视为最重要的芳香植物在摩洛哥传统医学。

最近的调查重申他们的许多传统使用的有效性和报道,摘录柏科包含最重要的酚类化合物,尤其是黄酮类化合物,neolignans,糖类( 5- - - - - - 7]。在这种背景下,基于分类标准指示关闭四个选择物种相似性( Juniperus thurifera, Juniperus phoenicea, Juniperus oxycedrus,和 Tetraclinis关节动物),有趣的是评估chemotaxonomic和药理差异描述这种植物的家庭。这些物种有许多用于传统医学在世界的一些地方。 瞻博网络浆果是用作香料,尤其是在欧洲菜,这是唯一的香料源于松柏。在摩洛哥,柏科焦油、树叶和水果被广泛用于治疗不同的头发和皮肤问题像头皮屑一样,湿疹、瘙痒,真菌感染( 8]。此外,注入柏科物种内部的干树叶是用于治疗风湿病,腹泻,和糖尿病。这些健康的好处可以部分归因于他们的潜在影响抗氧化剂如酚类化合物在人体内产生的活性氧( 9, 10]。

因此,本研究旨在确定和比较水叶提取物的抗氧化潜力的 Juniperus thurifera, Juniperus phoenicea, Juniperus oxycedrus,和 Tetraclinis关节动物利用DPPH自由基清除自由活动(DPPH) Trolox等效抗氧化能力(问题),和铁降低抗氧化能力(收紧)化验并确定其总酚含量和调查总酚含量与抗氧化活性之间的关系。

 2。材料和方法 2.1。植物材料

2014年2月,叶子的 j . thurifera, j . Phoenicea, j . oxycedrus和 t .关节动物收集从野生种群位于Oukaimeden Essaouira, Ourika,张明和河中的小岛Ihahan区域,分别。收集网站的特点如表所示 1。树叶被公关了。Fennane,凭证标本存放标本的拉巴特的科研机构和被称为79594 ( j . thurifera),79592 ( j . phoenicea),79588 ( j . oxycedrus)和79589年( t .关节动物)。收集到的植物材料室温风干(20 - 24°C)。叶子的干燥植物分离从植物和黑暗储存在密封容器之前使用。

收集网站和物种的地理坐标研究和水提取物的百分比收益率(%)。

物种 收藏的网站 凭证标本 纬度/经度 高度(米) 收益率% (v / w)
JT Oukaimeden 79594年 N 31°14′/ W 7°41′ 2700年 17.69 ± 0.22
摩根大通 Essaouira 79592年 N 31°10′/ W 09°30′ 724年 20.13 ± 0.05
乔 Ourika 79588年 N 31°13′/ W 08°03′ 1170年 18.01 ± 0.08
助教 河中的小岛张明Ihahan 79589年 N 30°91′/ W 09年43°′ 1300年 16.87 ± 0.38
2.2。植物提取物的制备

准备水提取,10 g的干燥植物粉材料浸泡在100毫升沸腾的蒸馏水,站在室温下30分钟。热注入然后使用绘画纸滤纸过滤,集中在真空旋转蒸发器在60°C和储存在4°C为进一步使用。

 2.3。抗氧化活性 2.3.1。免费DPPH自由基清除活性

水提取物的能力 j . thurifera, j . Phoenicea, j . oxycedrus和 t .关节动物清除DPPH自由基估计使用Şahin描述的方法等。 11]。一个整除的50 μL各种样品浓度添加到卷2毫升的DPPH methanolic解决方案(60 μ米),反应混合物是动摇和孵化20分钟在黑暗中在室温和吸光度被记录在517海里。空白是由甲醇代替提取。丁羟甲苯(二叔丁基对甲酚)和槲皮素被用作积极控制。对DPPH自由基的抑制百分比样本计算使用以下方程: (1) % 抑制 = 一个 0 - - - - - - 一个 1 一个 0 × One hundred. , 在哪里 一个 0 控制样品的吸光度和吗 一个 1 的吸光度测试样本。样品浓度为50%的抑制(IC50)确定使用几个浓度绘制曲线的抑制。

 2.3.2。Trolox等效抗氧化能力分析(问题)

每个样本的abt免费自由基清除活性根据描述的方法取决于Loizzo et al。 12]。abt激进的阳离子是由反应abt和钾/硫酸。abt的混合物(2毫米)和过硫酸钾(70毫米)在一夜之间被允许站在黑暗中在室温下形成了激进的阳离子abt, 16 h之前使用。abt溶液被稀释80%甲醇获得的吸光度 0.700 ± 0.005 在734纳米。100年 μL适当稀释样本加入2毫升的abt解决方案和吸光度被记录在734 nm 1分钟后在室温下孵化。标准曲线是通过使用Trolox标准溶液在不同浓度(从0到0.24 μg / mL)。不同浓度的提取物的清除活动和分数abt激进也测量计算IC50,过程类似于上述DPPH清除方法。

 2.3.3。还原能力测定

提取的铁还原能力调查使用ferricyanide-ferric钾氯方法( 13]。短暂,0.2毫升每个提取物在不同的浓度,2.5毫升的磷酸盐缓冲剂(0.2米,pH值6.6),和2.5毫升的铁氰化钾K3铁(CN)6(1%)混合和孵化20分钟50°C,减少铁氰化物亚铁氰化物。反应是停止通过添加2.5毫升的10% (w / v)三氯乙酸在1000转离心10分钟紧随其后。最后,2.5毫升的上层和2.5毫升蒸馏水和0.5毫升FeCl3(0.1%)和吸光度测量在700海里。吸光度(IC的样品浓度为0.550)被绘制吸光度计算相应的样品浓度。二叔丁基对甲酚和槲皮素作为参考。

 2.3.4。总酚含量测定

总酚含量(TPC)测定spectrophotometrically根据Folin-Ciocalteu比色法( 14]。简单地说,20 μL整除的提取的解决方案是混合1.16毫升蒸馏水和100年 μL (Folin-Ciocalteu试剂,其次是增加300 μL (Na2有限公司3解决方案(20%)。30分钟后孵化40°C,反应混合物的吸光度测量在760海里。没食子酸作为参考标准,结果表示为微克没食子酸当量( μ克GAE) /毫克干重的植物提取物(仓库)。

 2.3.5。总类黄酮含量的测定

总类黄酮含量测定的氯化铝比色测定( 15]。0.5毫升的槲皮素的提取或标准的解决方案是混合着AlCl 0.5毫升的2%3。1小时后在室温下,吸光度测量在420海里。总类黄酮含量是表示为微克相当于槲皮素( μg QE) /毫克干植物提取物(仓库)。

 2.4。统计分析

所有的分析进行了一式三份。的手段和标准偏差(SD)测定使用SPSS 20版,结果和酚类化合物成分的抗氧化活动表示为平均值±SD,而方差分析进行确定显著差异。

 3所示。结果 3.1。抗氧化活动

抗氧化活性发生是一个复杂的过程通常通过几种机制和受多种因素的影响,不能完全描述一个方法。因此,至关重要的是执行超过一种类型的抗氧化能力测量考虑各种抗氧化作用机制( 16- - - - - - 18]。在这项研究中,三个互补测试是用来评估的抗氧化活性 j . thurifera, j . phoenicea, j . oxycedrus和 t .关节动物注入:免费DPPH自由基清除活性,Trolox等效抗氧化能力(问题),并减少化验。

总结如表 2,抗氧化能力的等级次序对所有化验是相同的,即在减少订单, j . oxycedrus,紧随其后的是 j . thurifera, t .关节动物和 j . oxycedrus。

集成电路50值( µg / mL) j . thurifera j . oxycedrus j . phoenicea和 t .关节动物输液和二叔丁基对甲酚、槲皮素和Trolox。

化验 注入 积极的控制
j . thurifera j . phoenicea j . oxycedrus t .关节动物 二叔丁基对甲酚 槲皮素 Trolox
DPPH 24.85 ± 0.42 30.74 ± 0.11 17.91 ± 0.37 27.38 ± 0.02 4.20 ± 0.02 1.29 ± 0.01 - - - - - -
abt 30.36 ± 0.24 47.37 ± 0.59 19.80 ± 0.55 32.92 ± 0.56 - - - - - - - - - - - - 1.93 ± 0.01
收紧 35.83 ± 0.37 46.85 ± 0.42 24.23 ± 0.07 47.12 ± 0.15 7.02 ± 0.02 2.06 ± 0.01 - - - - - -

价值观代表意味着±SD(标准差)一式三份的实验。

所有提取物能够降低稳定,purple-coloured自由基DPPH成黄色的DPPH-H。从获得的水提取物 j . oxycedrus有最强的自由基清除活性与IC有空吗50的价值 17.91 ± 0.37 μ克/毫升(表 2)。另一方面减少观察DPPH最低的能力 j . phoenicea水提取物(集成电路50= 30.74 ± 0.11 μg / mL)。

所有水提取物效果低于合成抗氧化剂二叔丁基对甲酚(IC50= 4.20 ± 0.02 μg / mL)和槲皮素(IC50= 1.29 ± 0.01 μg / mL)。同样的, j . oxycedrus提取物表现出最好的性能与IC abt和还原能力测定50= 19.80 ± 0.55 μ克/毫升, 24.23 ± 0.07 μ分别g / mL。

 3.2。总酚类化合物

的水提取物 j . thurifera, j . phoenicea, j . oxycedrus和 t .关节动物的特点是大量的酚类化合物的存在(图 1)。最高的总酚类物质被发现 j . oxycedrus( 278.56 ± 9.67 ) μg GAE / mg企业级数据仓库,紧随其后 j . thurifera( 193.79 ± 6.47 ) μg GAE /毫克企业级数据仓库, t .关节动物( 175.67 ± 10.21 ) μg GAE / mg企业级数据仓库, j . phoenicea( 116.35 ± 9.71 ) μg GAE /毫克仓库。

总多酚含量表示为没食子酸等价物( μ克GAE) /毫克植物提取物 j . thurifera(JT), j . oxycedrus(乔), j . phoenicea(JP), t .关节动物(TA)注资。数据表示为平均数±标准差( n= 3)。

 3.3。总类黄酮含量

研究物种类黄酮的浓度从6.70到20.81不等 μ仓库(图g (QE) /毫克 2)。高浓度的类黄酮是确定 j . oxycedrus占 20.81 ± 0.63 , 14.93 ± 0.40 , 11.78 ± 0.30 μg (QE) / mg仓库 j . thurifera和 t .关节动物分别。类黄酮浓度最低的决心 j . phoenicea( 6.69 ± 0.22 μg (QE) / mg仓库)。

总类黄酮含量表示为槲皮素等价物( μg QE) / mg植物提取物 j . thurifera(JT), j . oxycedrus(乔), j . phoenicea(JP), t .关节动物(TA)注资。数据表示为平均数±标准差( n= 3)。

 3.4。总抗氧化能力和酚含量之间的关系

评价的适用性和可靠性三种分析方法用于确定总抗氧化能力的四个柏科物种,我们进行了相关分析,这些方法获得的总抗氧化能力的价值。如表所示 3,所有 R 2 价值观是积极的在 P < 0.01 显著性水平,表明抗氧化能力化验的值由三个不同的方法是高度相关的。与abt活动(DPPH值有紧密的关联 R 2 = 0.951 )和合理与收紧的值( R 2 = 0.957 )。abt和收紧值之间的关系也是非常重要的( R 2 = 0.848 )。

抗氧化剂之间的相关系数分析和总酚和类黄酮含量。

DPPH abt 收紧
abt 0.951 - - - - - - - - - - - -
收紧 0.957 0.848 - - - - - -
TPC 0.986 0.967 0.911
交通 0.986 0.981 0.929

相关性是显著的 P < 0.01 。

 3.5。总酚含量之间的相关性、总黄酮含量和抗氧化活性

抗氧化能力之间的相关性和酚类内容的四个摩洛哥柏科样本中描述表 3。抗氧化活性数据从DPPH方法获得高度相关的总酚含量( R 2 = 0.986 )和总类黄酮浓度( R 2 = 0.986 )。总酚和类黄酮含量与abt也相关( R 2 = 0.967 ; R 2 = 0.981 )和收紧值( R 2 = 0.911 ; R 2 = 0.929 )。

 4所示。讨论

氧化应激已经涉及到几种疾病,包括糖尿病、风湿性关节炎、心血管疾病、动脉粥样硬化、神经退行性疾病(帕金森、老年痴呆症和亨廷顿),癌症和衰老( 19- - - - - - 21]。天然抗氧化剂酚酸、黄酮等化合物从植物可能提供抵抗氧化应激,清除自由基,抑制脂质过氧化反应,通过其他机制( 22, 23]。因此本研究进行,目的是展示四个柏科物种已知的抗氧化潜力用于民间医药在摩洛哥使用三个广为人知的方法(DPPH、abt和收紧)并建立可能的抗氧化活性之间的相关性和总酚和类黄酮提取的内容。

实际上,使用的方法有不同的反应机制 24]。例如,DPPH和abt化验是基于电子和H原子转移,而收紧分析是基于电子转移反应( 24- - - - - - 26]。然而,三种方法研究清楚地表明,植物拥有相当大的抗氧化剂和反激进主义的活动。

此外,well-pronounced这些方法之间的相关性观察确认三个化验都是合适的和可靠的评估植物提取物的总抗氧化能力。

筛查结果的四个柏科物种生长在摩洛哥表明叶水提取物 j . oxycedrus有最强的对DPPH清除活动( 17.91 ± 0.37 μg / mL)、abt ( 19.80 ± 0.55 μg / mL),最佳性能减少权力活动( 24.23 ± 0.07 μg / mL)叶提取物的紧随其后 j . thurifera( 24.85 ± 0.42 μ克/毫升(DPPH); 30.36 ± 0.24 μ克/毫升(abt); 35.83 ± 0.37 μ克/毫升(收紧)), t .关节动物( 27.38 ± 0.02 μ克/毫升(DPPH); 32.92 ± 0.56 μ克/毫升(abt); 47.12 ± 0.15 μ克/毫升(收紧)) j . phoenicea( 30.74 ± 0.11 μ克/毫升(DPPH); 47.37 ± 0.59 μ克/毫升(abt); 46.85 ± 0.42 μ克/毫升(收紧))(表 2)。这项工作也显示,主要多酚类(类黄酮和酚酸)是常见的在不同物种和一些多酚化合物被确定之前的各种研究不同柏科物种( 27- - - - - - 30.]。

有不同的报告柏科物种的数量的抗氧化活性。的叶子和果实 j . phoenicea显示强大的抗氧化活性在abt和DPPH自由基清除活性试验提供一些酚醛树脂(单宁酸、花青素和类黄酮),这些规定是自由基拾荒者在这种植物 31日]。在土耳其的抗氧化活性研究 Juniperus( 32),水和ethanolic提取的水果和树叶 j . oxycedrus使用两个不同的测试检查铁降低抗氧化能力的测定和DPPH自由基清除活性和他们中的大多数显示强大的抗氧化作用在这些系统中,这是符合我们的数据。高DPPH清除活性 Tetraclinis关节动物收集的树叶在突尼斯也报道( 33]。

总抗氧化能力之间的强相关性通过DPPH化验,abt和收紧方法和酚醛含量(表 3)表明,酚类化合物主要贡献的抗氧化活动这些柏科物种,因此可以发挥重要作用的有利影响这些重要的药用植物。与其他研究结果一致,几项研究已经发现,在选定的植物酚类化合物是主要的抗氧化剂成分,有抗氧化活性和总酚含量之间的直接关系[ 34- - - - - - 37]。

 5。结论

这一研究获得的结果支持传统使用的植物物种作为治疗药物。较高的抗氧化潜力的摩洛哥柏科是授予酚醛含量高。 J。 oxycedrus介绍了TPC最高,交通,和抗氧化能力值。此外,酚醛之间有良好的相关内容和树叶提取物的抗氧化能力。这些结果表明,注入水的叶子 j . thurifera, j . oxycedrus, j . phoenicea和 t .关节动物构成抗氧化代谢物的有价值的资源。需要进一步的调查来确定他们的活性代谢物。

 缩写 DPPH:

免费的自由基清除活性

 问题:

Trolox等效抗氧化能力

 收紧:

铁降低抗氧化能力

 二叔丁基对甲酚:

丁羟甲苯

 j . thurifera:

Juniperus thurifera

 j . phoenicea:

Juniperus phoenicea

 j . oxycedrus:

Juniperus oxycedrus

 t .关节动物:

Tetraclinis关节动物

 集成电路50:

提供50%抑制浓度

 TPC:

总酚含量

 交通:

总类黄酮含量

 SD:

标准差。

 相互竞争的利益

所有的特约作者声明没有利益冲突。

 确认

作者感谢公关。Taoufik贾马尔,CeDoc主任医学院和药房拉巴特,对他的支持,鼓励,和兴趣的研究工作,博士El Hassani Abdelmounaim,工程师在水和森林的区域联合和沙漠化控制,他的帮助收集植物材料,公关,Fennane Mohamed科学研究所的植物学家,拉巴特,他的帮助识别的物种,和实验室的所有成员的药理学和毒理学,医学院和药房,穆罕默德五世大学,拉巴特,摩洛哥,尤其是公关。Zellou阿米娜和Doukkali Zohra,建议在实验工作。

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