1。介绍
狂犬病是一种人畜共患疾病引起的病毒物种属于11属
Lyssavirus(Rhabdoviridae家庭),包括狂犬病毒(RABV),最常见的(
1- - - - - -
3]。这些病毒负责meningoencephalomyelitis在哺乳动物。病毒的传播健康哺乳动物发生主要通过受感染的哺乳动物咬伤或抓伤(唾液是传染性材料)。蝙蝠是这些病毒的自然宿主10个物种。然而,狗是人类感染的主要来源。据估计,全球每年55000人死亡是由于狂犬病感染其中约56%发生在亚洲和非洲的44%。在非洲和亚洲,这些死亡负责每年损失174万残疾调整生命年(残疾)(
4]。没有有效的治疗疾病时宣布。然而,这是一种有效的治疗RABV和关闭相关狂犬病毒接触后尽快应用。它阻止症状的发病和死亡,由当地治疗伤口,狂犬病免疫球蛋白(如果显示),管理和接种狂犬病疫苗
5]。
狂犬病毒存在于各大洲除了南极洲。RABV是最普遍的,在全球范围内广泛分布,只有少数国家(主要是岛屿和半岛)疾病的自由。马达加斯加岛的西南印度洋的一部分,不属于这些异常(
http://www.who.int/rabies/rabies_maps/en/index.html)。狂犬病病毒已经流传在马达加斯加至少自19世纪。一个管理员的儿子的前法国殖民地在1896年报道死于狂犬病,和他的死亡的一个原因是在马达加斯加巴斯德研究所的成立于1898年。第一个狂犬病曝光后治疗使用狂犬病疫苗在1902年实现。这段时间以来,一些报告所描述的狂犬病局势岛(
6- - - - - -
9]。最后一个,覆盖了1982年到1991年期间,表明狂犬病肆虐在5省的岛和狗在本质上是病毒的向量(
9]。我们报告的结果实验室监测的最后6年(2005 - 2010)完全由国家授权的实验室进行狂犬病诊断(NLR)从马达加斯加巴斯德研究所。
2。材料和方法
2.1。样品
狂犬病动物样本测试通常包括大脑,头部,或地面不飞的哺乳动物的尸体被兽医,动物卫生官员和技术人员,动物的所有者,或个人(或家属)暴露于这些动物。人类样本由尸检脑活检或尸检皮肤活检从颈部,通常发送
+
4
°C的医院工作人员。在接待NLR,保存在大脑切片
+
4
°C和处理在48 h。皮肤活检是保持在−80°C到处理。
此外,从蝙蝠也收集的样本测试。他们获得了在调查寻找病毒相关的蝙蝠。样品包括血清、血液凝块和咽拭子在病毒(VTM)的传输媒介。他们在12小时内发送到实验室,然后储存在−80°C的到来。场时远离实验室,他们存储在液态氮,然后运到实验室。测试时,每个凝块被磨1:10在细胞培养基稀释(DMEM)含30%胎牛血清和离心10分钟每分钟3000转
+
4
°C。接着的10上层清液池或10咽拭子VTM之前构成测试。
2.2。RABV抗原检测
检测狂犬病毒核衣壳是由荧光抗体试验(脂肪)使用兔免疫球蛋白对RABV核衣壳(Bio-Rad、Marnes-la-Coquette、法国),进行大脑解剖切片作为标准(
10]。
2.3。RABV RNA检测
RNA提取从皮肤活检根据Dacheux和他的同事所描述的过程(
11]。RNA提取也从蝙蝠血凝块上层清液池或蝙蝠咽拭子VTM使用试剂盒LS(美国表达载体,加州卡尔斯巴德)和使用试剂盒从脑活检(美国表达载体,加州卡尔斯巴德),制造商推荐的。
Lyssavirus RNA检测执行使用逆转录和heminested PCR针对狂犬病毒(聚合酶基因的保守区域
11]。
2.4。RABV隔离
病毒隔离进行确认的负面结果狂犬病毒抗原检测狂犬病动物样品常规测试。从2005年到2007年,执行病毒隔离在新生鼠
10),然后执行隔离在细胞培养(Murina神经母细胞瘤细胞系)
12]。
病毒隔离在新生小鼠也用于从蝙蝠收集的样本。
2.5。狂犬病毒抗体的检测
抗体RABV拉各斯蝙蝠病毒(LBV),欧洲蝙蝠Lyssavirus 1型(EBLV-1) EBLV-2, Mokola病毒(MOKV)和澳大利亚的蝙蝠Lyssavirus (ABLV)在蝙蝠发现血清使用Lyssavirus快速荧光重点抑制试验(
13]。
3所示。结果
3.1。狂犬病毒检测在人类和国内或驯服野生动物样本
在六年期间,NLR收到了461份标本,450年人类从动物和11。大多数的450年国内食肉动物样本(
n
= 409,90.9%),包括狗(
n
= 353,78.4%)和猫(
n
= 56岁的12.4%)。我们注意到,狐猴,一个从马达加斯加特有的灵长类动物,动物样本的2%计算。狐猴采样都是作为宠物饲养。可用于所有的动物大脑。十一个人疑似狂犬病病例也实验室调查。人类样本包括皮肤活检6例,4例大脑,脑脊液的一个案例。14个样本不足,不能测试,主要是因为存储不足(表
1)。
狂犬病实验室诊断在人类,国内和驯服野生动物,马达加斯加,2005 - 2010。
| 物种 |
|
样品 |
|
|
收到了 |
不充分的 |
阳性(%) |
|
| 人类 |
11 |
1 |
9 (90) |
| 狗 |
353年 |
12 |
185 (54) |
| 猫 |
56 |
1 |
13 (24) |
| 牛 |
26 |
0 |
21 (81) |
| 猪 |
3 |
0 |
2 (67) |
| 兔子 |
2 |
0 |
0 |
| 狐猴 |
10 |
0 |
0 |
|
| 总 |
461年 |
14 |
229 (51) |
437年一半的动物标本测试(所有的大脑)被发现积极使用脂肪。所有的样本测试呈阴性反应的狐猴。牛和猪,而不是频繁的取样,经常发现积极的。超过一半的狗被发现感染(表进行测试
1)。这个百分比变化从26%(12/47),75%(58/77)(图
1)。当比较一些特点确诊患狂犬病的狗和未感染狗RABV抽样从2006年到2010年,阳性预测值最高狗怀疑rabies-clinical疾病或不寻常的自发攻击60.6% (95% CI 53.6% - -67.7%),狗咬50.9% (95% CI 44.3% - -57.5%),或狗小于4岁57.3% (95% CI 48.9% -65.8%)(表
2)。九个十人间病例的样本测试发现积极的(表
1)。样品测试呈阴性反应的是一个皮肤活检。
阳性预测值根据一些特点的狗检测狂犬病(独自)报告说,马达加斯加,2006 - 2010。
| 特征 |
|
狂犬病的实验室结果 |
阳性预测值 |
|
负 |
积极的 |
(%) |
|
| 疑似狂犬病(
n
= 257) |
是的 |
74年 |
114年 |
60.6 |
| 没有 |
59 |
10 |
14.5 |
| 负责咬(
n
= 256) |
是的 |
111年 |
115年 |
50.9 |
| 没有 |
21 |
9 |
30.0 |
| 不到4岁(
n
= 180) |
是的 |
58 |
78年 |
57.4 |
| 没有 |
33 |
11 |
25.0 |
在狗狂犬病实验室诊断,马达加斯加,2005 - 2010。
![]()
在六年期间,447个样本测试收到38 111行政区划的马达加斯加。大多数这些样本(365;收到塔那那利佛省82%)。狂犬病循环被确认在38区(图34
2)。病毒出现在首都塔那那利佛(59受感染动物在155测试)。狂犬病的循环中没有检测到4 38区取样。然而,很少收到样品从他们(6样本从一个地区和1样品各3人)。
人类不能飞的动物样本的分布测试负(green-filled三角形)和正(red-filled圆)狂犬病,和网站的蝙蝠在马达加斯加抽样(blue-filled钻石),2005 - 2010。
![]()
3.2。Lyssavirus和Lyssavirus抗体检测在野生动物样本
大脑收到样本只有两个野生陆地不飞的哺乳动物:一窝(
Cryptoprocta猛鲑)、马达加斯加最大的哺乳动物食肉动物和一个屋顶鼠(
家鼠)。他们测试了负面的。
大量的样本来自食虫和以果实为食的蝙蝠也测试(表
3)。他们(我)一个横向调查期间收集的寻找存在亨德拉尼帕病毒在2004年和2005年进行的便是在马达加斯加
14)和(2)从2005年到2009年进行的一项纵向调查Angavobe和Angavokely洞穴主机马达加斯加稻草色果蝠(
精灵dupreanum)(图
2)。未发现lyssavirus rna在这些血样和口腔拭子。没有lyssavirus隔离在新生小鼠获得这些样品。
蝙蝠lyssavirus样品测试,根据物种和捕获的网站,马达加斯加2005 - 2009。
| 饮食和蝙蝠的家人 |
物种 |
网站的截图 |
没有血液样本 |
没有口腔拭子 |
|
食虫 |
|
|
|
|
| Hipposideridae |
Triaenops鲁弗斯 |
Itampolo |
18 |
0 |
| 蝙蝠科 |
鼠耳蝠goudoti |
Itampolo |
1 |
0 |
|
Miniopterus gleni |
Itampolo |
1 |
0 |
|
Chaerephon、 |
Vangaindrano |
22 |
0 |
| 犬吻蝠科 |
拖把leucostigma |
Farafanga |
14 |
0 |
| Vangaindrano |
17 |
0 |
|
Mormopterus jugularis |
Itampolo |
19 |
0 |
|
以果实为食的 |
|
|
|
|
|
|
Marovoay |
130年 |
104年 |
| 狐蝠 |
狐鲁弗斯 |
Marozevo |
33 |
8 |
| Beroboka |
29日 |
0 |
|
|
Miandrivazo |
112年 |
97年 |
|
|
Vangaindrano |
38 |
32 |
|
|
Angavobe |
54 |
32 |
|
|
Miandrivazo |
2 |
2 |
|
精灵dupreanum |
2005 - 2009 |
|
|
|
|
栖息跟踪 |
753年 |
465年 |
|
|
Angavobe和Angavokely |
|
|
|
| 总 |
|
|
1243年 |
740年 |
从28马达加斯加飞狐(血清
狐鲁弗斯)和来自50个马达加斯加稻草色果蝠
(精灵dupreanum)检测狂犬病毒抗体。EBLV-1和LBV抗体检测在五和一个马达加斯加的狐蝠,分别。LBV抗体检测在12个马达加斯加稻草色果蝠(24%)、滴度从65到35.2不等。未发现抗体对MOKV EBLV-2, ABLV。
4所示。讨论
尽管引入一个世纪前的狂犬病疫苗在马达加斯加,经常性积极的狗狂犬病的实验室诊断表明,这种人畜共患疾病流行的岛(图
1)。狗发现感染的比例RABV在2005 - 2010年期间(54%;185/341)在同一范围内观察到的1959 - 1991年期间(57%;(1416/2475)
9]。狗仍可能在岛上RABV的主要载体。RABV菌株相关狗在马达加斯加被证明属于世界性的血统(
15,
16]。有证据表明RABV循环在塔那那利佛,首都城市。塔那那利佛,2007 - 2008年,一个狗的密度高于许多其他城市地区在非洲,和狗人口无限制的接种狂犬病疫苗不足,这可能有利于病毒的传播特点
17]。这种情况可能不限于马达加斯加的首都,也许可以解释的狂犬病流行情况。
几个流行或(少数)介绍了食肉哺乳动物(家庭灵猫科和Herpestidae)存在于马达加斯加(
18]。到目前为止,很少有疑似来自这些物种的动物测试。一个狂热的发现人窝咬了(
Cryptoprocta猛鲑Ihosy地区),在2007年,从这种情况下获得的应变作为一个物种的lyssavirus RABV确认,系统密切相关的循环在马达加斯加的狗(数据没有显示)。因此,这个问题可能向量在野外陆地食肉哺乳动物仍然悬而未决。这个问题的重要性考虑狂犬病控制规划目标根除狂犬病的岛。
我们的广泛调查蝙蝠未能发现任何lyssavirus这些哺乳动物有关。我们用来检测狂犬病毒的分子技术被证明是敏感的,可再生的,和可重复的
11]。此外,病毒隔离新生小鼠被认为是敏感的我们从蝙蝠标本分离出几个病毒,就像人生病毒从马达加斯加稻草色果蝠(
精灵dupreanum)和达喀尔蝙蝠病毒从彼得斯的wrinkle-lipped蝙蝠(
Mormopterus jugularis)(未公开的数据)。低流行率的活跃感染(病毒)的检测已经在北美和欧洲蝙蝠殖民地(0.1 - 2.9%),尤其是在临床正常蝙蝠(
19]。因为我们取样临床正常蝙蝠和每个网站,因为我们的抽样大小每个物种是最大约100只动物(除了跟踪我们采样的大约750只动物),我们的负面结果在检测lyssavirus因此不令人惊讶。Lyssavirus检测大脑也负采样在1987年和1988年在马达加斯加,从59小无尾蝙蝠(
Chaerephon、)[
20.]。有趣的是,我们得到了血清学证据表明狂犬病毒中传阅马达加斯加的蝙蝠。的lyssavirus LBV已经从非洲稻草色果蝠(孤立
精灵helvum),第二个这两个物种的非洲各非洲国家(属
21]。我们孤立的机上娱乐系统病毒和一个alphaherpesvirus从马达加斯加稻草色果蝠
22]。这两种病毒种类也从非洲被发现稻草色果蝠(
22,
23]。因此,我们高度怀疑存在LBV马达加斯加。因此,曝光后狂犬病疫苗接种后应提供一个接触到马达加斯加的蝙蝠。然而,人们应该记住,狂犬病疫苗是低效率对lyssavirus属于phylogroup 2,包括LBV [
24]。
我们最近显示heminested PCR针对保守地区的狂犬病毒的聚合酶基因和应用于临死前的或后期皮肤活检(比一块标本容易收集大脑)是一个成功的过程执行狂犬病诊断(
11]。我们提高了曝光后预防中心员工的认识这个过程的性能。由于这一时期(2008年),我们收到rabies-suspected后期皮肤活检病例,其中一些远离塔那那利佛,像Taolagnaro,南海岸的国家(数据未显示)。狂犬病感染被确认在5 6例。这些样本容易执行和船到实验室之间应该更加促进了卫生保健人员通过马达加斯加,有一个更好地了解人类狂犬病的流行。此外,这个过程应该还测试了食肉哺乳动物,考虑到皮肤的抽样携带鼻毛(丰富的神经末梢周围这些头发)的基础。这种方法可以帮助避免污染抽样这些动物狂犬病人生物体液和“(分泌物)促进rabies-suspected动物的采样。
由于经济原因,到目前为止,有狂犬病曝光后预防中心在111年只有26岁的马达加斯加的行政区划。我们收到的样品rabies-suspected病例只有13,和狂犬病毒循环被确认的。需要反复确认其发行量在所有这些26区,特别是在两个岛屿(八卦和圣玛丽),没有最新报告狂犬病的动物。抽样应促进在其他13个地区来评估这些中心的针对性。
5。结论
一个多世纪后的引入在马达加斯加狂犬病疫苗,狂犬病流行的岛。到目前为止,通过预防人类狂犬病狗狂犬病控制和最终消除一直局限于当地的倡议。马达加斯加,像其他国家一样,面临着众多的公共卫生问题。因为低收入的国家,流行病学数据的缺乏,这种疾病没有优先级,和一个控制程序不合理的开始。然而,马达加斯加岛,和消除狂犬病及其可持续性应促进引入的风险有限的动物,因此,这些数据的集合(人类和动物监测、狗生态学研究中,动物咬伤,等)应提倡首先试点规模,以验证所使用的工具。之后,数据收集应该扩展到这个国家的其他地方,而飞行员狂犬病控制程序(狗接种疫苗,狗人口管理、人类曝光后预防、教育、信息等)应该开始试点网站,然后扩展到其他国家。