广告 自身免疫性疾病 2090 - 0430 2090 - 0422 Hindawi出版公司 10.1155 / 2016/5690935 5690935 研究文章 新峰胶囊在Adjuvant-Induced关节炎的机制通过尿代谢组学的分析资料 江 回族 1、2 2 刘 江ydF4y2Ba 1 王 停 3 高 Jia-rong 1 太阳 悦 1 黄 Chuan-bing 1 孟 梅 1 秦 Xiu-juan 3 法师 Rizgar 1 的药店 安徽中医药大学第一附属医院 梅山路117号 合肥230031年 中国 ahtcm.edu.cn 2 医学院的基本 安徽医科大学 梅山路81号 合肥230022年 中国 ahtcm.edu.cn 3 药学院 安徽中医药大学 梅山路103号 合肥230038年 中国 ahtcm.edu.cn 2016年 18 2 2016年 2016年 02 07年 2015年 15 10 2015年 18 10 2015年 2016年 版权©2016回族江等。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

我们旨在探索新峰胶囊(XFC)的潜在影响在adjuvant-induced关节炎(AA)大鼠尿液代谢分析通过使用气相色谱飞行时间质谱(GC-TOF / MS)。GC-TOF / MS技术结合多元统计方法,如主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和正交投影判别分析潜在的结构(OPLS-DA)。这些方法被用来区分健康组,治疗组和XFC治疗组和阐明潜在的生物标记物。9个潜在生物标志物如马尿酸、腺嘌呤、和左旋多巴被当成潜在的生物标记,表明嘌呤代谢、脂肪代谢、氨基酸代谢、能量代谢紊乱在AA大鼠。本研究表明,XFC有效RA和其潜在的代谢组学机制来解释。

 1。介绍

类风湿性关节炎(RA)是一种常见的慢性系统性自身免疫性疾病,特点是滑膜组织的炎症。经常复发,长期的,痛苦的,导致僵硬和受损的骨头和软骨。风湿性关节炎发病率和伤残率高,严重影响患者的生活质量( 1, 2]。

新安江医学理论的指导下,新峰胶囊(XFC、安徽医学系统Z20050062)是一种传统的中药(TCM)有着悠久历史的处方应用于临床治疗类风湿性关节炎( 3- - - - - - 5),已在中国注册的专利证书(ZL 201310011369.8和ZL201410101266.5)。XFC由 薏苡仁(Yiyiren), 蜈蚣(武功), 黄芪(黄芪), 雷公藤(Leigongteng)。XFC配方的提取和制备方法研究了在我们先前的实验;他们表明,提取方法是合适的,简单,可行;质量控制数据是可用的。一个合适的化学调剖效果评价 薏苡仁, 蜈蚣, 黄芪, 雷公藤已经研究[ 6]。在我们之前的研究中,XFC有很好的缓解关节疼痛的程度,减轻晨僵和增强握力在RA,没有明显不良反应( 7, 8]。然而,新峰胶囊治疗RA的代谢组学机制还不清楚。

代谢组学技术,所有的内源性代谢物进行分析通过高通量检测和数据处理获得潜在生物标记物( 9]。这种技术可以阐明生物体的状态在一个特定时间和特定的环境下 10]。代谢组学综合分析,可以动态地操作,这有利于研究中医,有复杂的代谢产物混合物和化合物 11]。因此,代谢组学可以用来探索之间的关系一个生物系统的生理状态的变化和潜在的生物标记物( 12]。

在这项研究中,我们使用一个基于气相色谱飞行时间质谱分析的代谢组学方法(GC-TOF / MS)技术来发现潜在的尿液中内源性生物标志物。我们旨在探索XFC的疗效和代谢机制在RA的典范。

 2。材料和方法 2.1。实验动物

协议是由动物实验的伦理委员会批准安徽中医药大学(许可证号码:2012 ah - 038 - 01)。戊巴比妥钠麻醉下进行手术,所有的努力都是尽量减少痛苦。成年男性Sprague-Dawley (SD)大鼠(180 - 200 g)指定的病原体免费(SPF)购买安徽医科大学实验动物中心。所有的动物都被安置在标准笼中控制温度(约22°C)和相对湿度(40% - -60%)条件下,与相同数量的食物和水在例行的日常时间。

 2.2。药品和试剂

内部标准:L-2-Chlorophenylalanine (CAS: 103616-89-3)是购自上海恒博生物科技有限公司、中国。N, O-bis-trimethylsilyl-trifluoroacetamide (BSTFA)与1%三甲基氯硅烷(tmc)是购自瑞吉斯Technologies Inc。美国。脲酶从Canavalia ensiformis(杰克bean),类型III,粉,从σ公司购买。多聚甲醛溶液从化学试剂国药控股有限公司购买XFC是由安徽中医药大学第一附属医院(批号:2012100407,合肥,中国)。

 2.3。仪器、设备

仪器、设备如下:GC色谱:安捷伦7890 a,安捷伦,美国;质谱仪:LECO浓度TOF飞马4 d, LECO,美国;GL-20A自动高速冷冻离心机(湖南仪器工厂离心机工厂);−80°C超低温Freezer-Uplight类型(三洋公司);37°C孵化器(湖北黄石医疗器械厂)。

 2.4。感应、治疗和测量Adjuvant-Induced关节炎(AA)

SD大鼠自适应地喂了一个星期。所有的老鼠被随机分为三组:健康组,治疗组,和XFC治疗组,每组8老鼠。治疗组和XFC治疗组建立了一个皮内的注入为0.1毫升的完全弗氏佐剂(CFA)到右后跖骨拦路贼( 13]。健康组给予液体石蜡进行比较在同一时间。从19天CFA注入后,XFC (3 g / kg)是由填喂法一天一次的30天XFC治疗组。老鼠在健康和生理盐水治疗组有0.9%。尿液收集过去管理和保持在12 h后−80°C。两个不同的临床参数,爪肿胀和关节炎指数(AI),被用来评估治疗XFC对AA大鼠的影响。后左爪的体积与pv - 200测量容积式流量计(成都Taimeng科技有限公司、成都、中国)在免疫后(正常价值,天0)和上届政府(30天)。二级爪肿胀( E )计算公式 E ( % ) = ( V t - - - - - - V 0 ) / V 0 × One hundred. % ,在那里 V 0 和 V t 代表的体积爪子建模之后,建模之前,分别为( 14]。对于评价AA,关节炎严重程度被记录在四点规模,,0表示没有肿胀;1分表示肿胀;2点显示轻微的肿胀的手腕或脚踝关节;3点表示整个关节和爪子的严重肿胀;和4点显示关节僵硬或畸形的爪子 15]。

 2.5。组织学检查

所有的老鼠都牺牲在上届政府后12小时。膝盖被放置在4%多聚甲醛溶液。组织学变化后观察病理染色使用传统的光学显微镜。两个盲观察员评估软骨和骨破坏细胞渗透,滑膜增殖,血管翳形成,和软骨侵蚀,使用下面的评分系统:细胞渗透:年级0,没有变化;1级,很少有局灶性浸润;2级,广泛的局灶性浸润;三年级,广泛浸润入侵与聚合形成胶囊;滑膜增生:0级,扩散是缺席;1级,增殖与二至四层的活性synoviocytes温和;二年级,增殖与四加层活性synoviocytes温和,有丝分裂活动,增加和轻微或没有滑膜细胞入侵相邻骨骼和结缔组织; and Grade 3, proliferation was severe and characterized by invasion and effacement of joint space and adjacent cartilage, bone, and connective tissue; pannus formation: Grade 0, no changes; Grade 1, pannus formation at up to two sites; Grade 2, pannus formation at up to four sites, with infiltration or flat overgrowth of joint surface; and Grade 3, pannus formation at more than four sites or extensive pannus formation at two sites; cartilage erosion: Grade 0, no changes; Grade 1, superficial, localized cartilage degradation in more than one region; Grade 2, localized deep cartilage degradation; and Grade 3, extensive deep cartilage degradation at several locations [ 16]。

 2.6。样品制备

尿液样品在室温下解冻和涡15年代,100年之后 μL的尿液转移到1.5毫升埃普多夫管和随后10 μL(脲酶悬浮在水(160毫克/毫升)是添加和涡10年代。900 μL(甲醇和氯仿的混合物(3/1,卷/期)和50 μL L-2-Chlorophenylalanine(0.2毫克/毫升)作为内部标准添加到每个样本和漩涡,随后在12000 rpm离心机离心10分钟10分钟在4°C。将上层清液(大约0.35毫升)到新的2毫升GC-TOF /女士的玻璃小瓶。收集上清液集中完成干燥在真空浓缩器没有供暖。80年 μL methoxymethyl胺盐添加,旨在枯竭代谢物在37°C 2 h后在烤箱混合和密封。然后干样本derivatized的100 μL双(三甲基硅烷基)-trifluoroacetamide三甲基氯硅烷为1%到每个瓶。反应混合物剩下1 h在烤箱70°C。孵化后,样本再次涡1分钟准备GC-TOF / MS分析。

 2.7。GC-TOF / MS分析

GC-TOF / MS分析使用安捷伦7890气相色谱仪系统加上一个飞马HT飞行时间质谱仪。系统利用DB-5MScapillary列涂以5%二苯交联95%二甲基聚硅氧烷(30 m×250 μ0.25 m内径 μm膜厚度;美国CA J&W科学、福尔松的)。一个1 μL整除的分析物在离注入模式。氦用作载气,前进气清洗流3毫升/分钟,和气体流速通过列是20毫升/分钟。初始温度保持在50°C 1分钟,然后提高到330°C的速度10°C / min,然后保持5分钟在330°C。注射、传输线和离子源温度是280,280,和220°C。−70电动汽车的能量电子的影响模式。在全扫描质谱数据获取的方式 米 / z 范围85 - 600的速度每秒20光谱溶剂延迟后的366年代。

 2.8。数据分析

色度TOF4.3X LECO软件公司和LECO-Fiehn Rtx5数据库被用于原始山峰严格,基线数据过滤和校准的基线,峰对齐,反褶积分析,峰鉴别和集成的峰面积 17]。利用主成分分析法(PCA)得到的归一化峰强度进行了分析,PLS-DA, OPLS使用演示(期刊Umetrics AB,瑞典)。数据处理Spss 17.0版(Spss, Inc .,芝加哥,IL),并使用学生的统计分析处理 t 以及。

 3所示。结果 3.1。XFC对二级爪肿胀的影响和关节炎指数(AI)

胃内的政府XFC之前,与健康组相比,治疗组大鼠有更显著的中等爪肿胀和高等关节炎指数( p < 0.01 )。二级爪肿胀和关节炎指数XFC治疗组与对照组相似。胃内的XFC管理局30天之后,AA大鼠没有二级爪肿胀和降低关节炎指数XFC治疗组相比,治疗组( p < 0.01 )。这一结果表明,XFC AA大鼠(表中可以抑制继发性炎症 1)。

影响XFC在AA大鼠爪肿胀和关节炎指数。

集团 爪肿胀(%) 关节炎指数
一天0 30天 一天0 30天
健康的 34.79±10.56 42.21±10.32 0.00±0.00 0.00±0.00
未经处理的 61.19±12.92 ∗ ∗ 78.15±12.28 ∗ ∗ 7.50±1.60 ∗ ∗ 8.63±2.07 ∗ ∗
XFC治疗 64.67±11.99 ∗ ∗ 56.78±17.67 # # 7.75±1.83 ∗ ∗ 5.38±1.59 ∗ ∗ # #

注意:天0显示爪肿胀和关节炎指数XFC在胃内的管理;一天30爪肿胀和关节炎指数XFC胃内的管理后30天。数据代表均值±SD ( n = 8 )。 ∗ ∗ p < 0.01 与健康组相比; # # p < 0.01 与对照组相比。

 3.2。XFC对组织病理学的影响

通常在他染色,健康组安排滑膜细胞,没有滑膜增生,没有炎症细胞浸润,没有软骨侵蚀。治疗组的局部增厚周围滑膜组织炎性细胞浸润伴有剥落血管翳形成,关节腔变窄,一些软骨侵蚀。病理组织损伤XFC治疗组低于对照组的不同程度(数字 1和 2)。

XFC对AA大鼠的病理变化的影响。代表组织病理标本的显微照片左后关节健康组(a), SD大鼠对照组(b),和XFC治疗组(c)。1:炎性细胞浸润;2:关节腔变窄;3:中性粒细胞浸润;4:血管翳形成;5:软骨侵蚀。原始放大400倍。

组织学得分的AA大鼠, p # < 0.05 , p # # < 0.01 与对照组相比。

 3.3。总离子色谱的尿液样本

GC-TOF /女士抽搐色谱健康的尿液样本组,治疗组和XFC治疗组如图 3。基于LECO-Fiehn Rtx5数据库,发现大约有1166种代谢物。在使用浓度TOF4.3X软件正确的空白值,消除噪音,和正确的内部标准,确定了914种代谢物。水平轴代表时间代谢物发生;每个峰值代表代谢物的相对。为了说明代谢的差异,GC-TOF / MS谱进一步进行预处理和模式识别进行了分析。

抽搐色谱AA大鼠的尿液样本;棕色的线代表健康组;绿线代表治疗组;蓝线代表XFC治疗组。

 3.4。主成分分析(PCA)的尿液样本

主成分分析,结果证明算法用于代谢组学研究中,是用来处理GC-TOF / MS数据使用软件开发的SIMCA-P (Umetrics、期刊、瑞典)。同时比较大量的复杂的变量是通过减少维通过三维映射过程和输出显示与分数的阴谋,代表样本的分布多元空间( 18]。在PCA得分图(图 4),每组的尿液样本没有完全独立,需要进一步分析。

PCA得分块adjuvant-induced关节炎大鼠尿液代谢分析的健康组,治疗组和XFC治疗组使用GC-TOF /女士。

 3.5。偏最小二乘判别分析(PLS-DA)的尿液样本

因为PCA未能完全独立,PLS-DA分析来实现更大的群体之间的分离,提高代谢产物的鉴定。PLS-DA Ctr (mean-centered缩放)用于处理数据尺度转换模式,在那里 x - - - y 组件相互重合代表第一和第二原则。分析交叉验证的方法被用来评估的实际性能建立模型( 19]。 R 2 的分数是平方和(SS)的解释模型,代表模型健身; 问 2 的分数是 Y 预测的变化 X 组件模型,代表了预测能力。这些都是获得使用交叉验证后评估模型的有效性。PLS-DA分析之后,健康,未经处理的,XFC治疗组完全分离。 R 2 Y = 0.997 和 问 2 Y = 0.553 ,这表明,该模型有一个完美的配件,有可靠的预测能力。在随机化( n = 200年 ),我们得到 R 2 = 0.803 和 问 2 = - - - - - - 0.156 ,表明这两种PLS-RA模型展示了良好的表现( 20.]。结果如图所示 5。

基于adjuvant-induced PLS-DA关节炎尿。(一个)显示了PLS-DA分离大量健康、治疗,XFC治疗组。(b)代表PLS-DA模型的验证(使用200个随机排列)。

 3.6。正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)的尿液样本

OPLS-DA是正交校正模型的正交信号校正可以过滤掉不相关的正交可变信息。这个方法只保留相关正交可变信息的准确性,提高了歧视。OPLS-DA使用SIMCA-P软件执行,最大化模型的内部差异不同群体之间( 21]。OPLS-DA使用Ctr (mean-centered缩放)过程的数据尺度转换模式 X - - - Y 分别相互重合代表第一和第二原则组件。OPLS-DA分析后,每组尿液代谢物集群。这一结果表明,AA大鼠代谢模式显著改变,XFC干预会影响AA大鼠的代谢。结果如图 6(一)和 6 (b)。

OPLS-DA尿液代谢分析的健康组与治疗组(a);OPLS-DA尿液代谢分析的治疗组和XFC治疗组(b);OPLS-DA变量加载情节(c)。

我们从OPLS-DA获得载荷图。每个点代表一个代谢物。点靠近中心代表小差异模型分类、和点远离中心被认为是提高分类模型。红点代表了九个潜在生物标记在我们的测试。结果如图 6 (c)。

 3.7。潜在生物标志物的尿液样本

OPLS-DA过滤掉无关的正交信号,所以更可靠的潜在生物标志物。贵宾是一个参数,总结的重要性 X 的变量 X 和 Y 对投影模型,称为变量影响,估计每个变量的重要性在OPLS-DA模型使用的投影。一个变量与一个VIP分数接近或大于1可以被认为是重要的在一个给定的模型。VIP价值和学生的 t 以及的 p 值被用来反映代谢物的重要性。变量和VIP > 1 p < 0.05 被选为潜在生物标志物进一步统计分析使用SPSS 17.0版(美国SPSS Inc .,芝加哥,IL)。9个潜在生物标记观察与健康组( p < 0.05 ),这是与adjuvant-induced关节炎。XFC,治疗后的水平2,2-dimethylsuccinic酸,phenaceturic酸、左旋多巴、1,4-dihydroxy-2-naphthoic酸显著改变( p < 0.05 )。dehydroshikimic酸的水平、tartronic酸、腺嘌呤、马尿酸,和蜜二糖趋势倾向健康组,但无显著性差异。结果如表所示 2。

潜在的生物标记选择,在每组的变化趋势。

数量 VarID 复合 RT 贵宾 p H-U p U-X p x h
1 251年 2,2-Dimethylsuccinic酸 11.0616 2.70266 0.011313387 0.03490986 0.249996112
2 314年 Tartronic酸 11.8754 2.94527 0.024742601 0.15475148 0.010899989
3 636年 Dehydroshikimic酸 16.7414 3.05951 0.032774968 0.1022563 0.077357634
4 646年 马尿酸 16.9083 3.21815 0.01018095 0.19488332 0.049258272
5 684年 腺嘌呤 17.5117 2.73672 0.021520896 0.59814266 0.035198717
6 697年 Phenaceturic酸 17.7171 4.18817 0.016864462 0.02460963 0.503834004
7 807年 左旋多巴 19.405 1.31514 0.026524125 0.0252176 0.771814517
8 865年 1,4-Dihydroxy-2-naphthoic酸 20.474 3.69942 0.003037716 0.00524929 0.612627294
9 1110年 蜜二糖 25.9579 2.33593 0.040379626 0.0682718 0.501486543

注意:VarID代表尿液筛查1166峰复合的序列号;RT代表化合物的保留时间。一个变量重要性的投影(VIP)获得OPLS-DA模型阈值为1.0; p H-U 代表 p 通过健康组与治疗组; p U-X 代表 p 值治疗组与XFC治疗组; p x h 代表 p 价值XFC治疗组与健康组。

为了更好地可视化潜在生物标志物的变化,箱形图创建使用简单的统计图形来描述几组的分布的定量数据,并比较他们之间的分歧。盒子的高度代表四分位范围,水平线代表值,和扩展上下两端的线代表最大值和最小值,如图 7。

盒子的尿液样本中数据健康组(H),治疗组(U)和XFC治疗组(XFC)。 p ∗ < 0.05 和 p ∗ ∗ < 0.01 与健康组相比; p # < 0.05 与对照组相比, p # # < 0.01 与对照组相比。

 3.8。相关网络分析的潜在生物标志物

为了说明潜在生物标志物代谢途径中的链接,我们使用了病理生理学、生物化学、生理学、和人类代谢组数据库提供定量生物代谢产物和代谢信息。我们也提到了有关文献。九个潜在生物标志物参与嘌呤代谢、脂肪代谢、氨基酸代谢、能量代谢。因此,我们构建了一个网络的潜在生物标记物的代谢途径,如图 8。

相关网络的潜在生物标志物对RA的回应。9个潜在生物标记被用来解释可能的代谢途径。代谢物与红盒子在治疗组相比,健康组显著增加。蓝盒子的代谢物在治疗组相比,健康组显著降低。

 4所示。讨论

AA, T-cell-mediated慢性炎性压力,是一种行之有效的体内模型,该模型被用在许多研究探讨RA的发病机制和潜在的治疗靶点的识别( 22]。后胃内的30天,XFC管理有显著减少AA大鼠关节肿胀( p < 0.01 )和组织学损伤更少,而大鼠模型。因此,XFC对AA大鼠有温和的治疗效果。

代谢组学主要关注生物体液的变化来表示一个生物系统的变化( 23]。近年来,代谢组学已经被用于分析生物代谢的差异来识别潜在的生物标记物。这些差异可以阐明生物体的整体功能在特定时间和特定的环境。GC-TOF / MS、液相色谱-光谱法和核磁共振代谢组学中常用( 24- - - - - - 26]。GC-TOF /女士是各种功能包括简单,重现性,分离效率高,灵敏度高,标准谱库,可量化的代谢物在代谢组学 27]。我们使用GC-TOF /女士,发现9个潜在的生物标记物。生物标志物主要参与葡萄糖、脂肪、氨基酸和能量代谢途径。XFC胃内的政府后,2的水平,2-dimethylsuccinic酸,phenaceturic酸、左旋多巴、1,4-dihydroxy-2-naphthoic酸显著改变XFC治疗组( p < 0.05 )。dehydroshikimic酸的水平、马尿酸和蜜二糖是趋势,倾向健康组,但无显著性差异。

研究表明,自由基氧化损伤中扮演一个重要的角色在RA的发病机制 28]。内源性或外源性刺激可以导致代谢异常,从而产生过多的活性氧。当氨基酸供应不足,减少抗氧化酶导致无序prooxidant /抗氧化剂之间的平衡 29日]。这种不平衡最终离开机体处于氧化应激状态。活性氧可以破坏DNA,脂类,蛋白质,和其他生物分子,从而导致能量代谢障碍。然而,能源消耗也将产生酸性物质和过多的活性氧自由基,进一步加重组织损伤,导致炎症。因此,氧化应激和炎症发挥关键作用在类风湿性关节炎( 30.]。

代谢组学分析AA大鼠的尿液的变化提高我们理解重要在RA代谢变化。马尿酸和phenaceturic酸是脂肪酸的次生代谢物。在RA,线粒体中过多的氧自由基产生,加速脂肪动员和最终显著提高脂肪酸次生代谢产物的水平。我们发现高水平的尿中马尿酸和phenaceturic酸AA大鼠,这意味着RA与脂质代谢障碍( 31日, 32]。XFC治疗组显著降低phenaceturic酸水平比未处理组。马尿酸含量XFC治疗组没有显著差异,但倾向健康组。这个结果意味着XFC能调节脂肪代谢,减少氧自由基生成的线粒体。

左旋多巴是一种酪氨酸氧化产品生成酪氨酸羟化酶。酪氨酸是苯丙氨酸的主要代谢物,它都是氨基酸。在RA,过度的氧化应激和炎症抑制氨基酸摄入或减缓他们的合成,影响关节软骨的生成蛋白质( 31日- - - - - - 33]。治疗组较低水平的左旋多巴与健康组相比,这表明氨基酸代谢就被打断了。XFC治疗组有更高水平的左旋多巴与对照组相比,这意味着XFC可以调节氨基酸代谢,改善关节损伤。

低水平的tartronic酸和更高水平的2,2-dimethylsuccinic酸观察治疗组,这表明三羧酸循环的功能障碍(TCA)可能是因为干扰软骨细胞和软骨的新陈代谢。2,2-Dimethylsuccinic酸琥珀酰甲基化产品和琥珀酸是一种重要的柠檬酸代谢中间物。柠檬酸是最后的三大营养物质代谢途径,碳水化合物、脂类、氨基酸。XFC治疗组显著降低水平的2,2-dimethylsuccinic酸与对照组相比。这些变化表明,柠檬酸XFC监管作用。

1,4-Dihydroxy-2-naphthoic酸是一种芳香族氨基酸,产品涉及各种酶和辅酶q和其它萜类化合物、醌从花色。1,4-Dihydroxy-2-naphthoic酸治疗组较低,可能是因为有太多的氧自由基,导致增加泛醌生产和加强氧化磷酸化。这些变化导致更多ATP ( 34]。XFC治疗组有更高的1,4-dihydroxy-2-naphthoic酸水平与对照组相比,表明改进的能量代谢。

蜜二糖是由半乳糖和葡萄糖。一个水苏糖不仅可以分解成蜜二糖而且它产生甘露三糖增强免疫物质( 35),提高免疫力,对抗炎症符合前期研究( 36]。在RA,半乳糖代谢异常导致低水平的蜜二糖和甘露三糖。XFC组蜜二糖水平较高,这表明XFC可以调整无序半乳糖代谢减少炎症和免疫系统。我们发现低浓度的dehydroshikimic酸尿的AA大鼠与正常对照组相比。异常尿dehydroshikimic酸通常被认为是与疾病相关的糖酵解途径和磷酸戊糖途径。莽草酸有抗炎、镇痛和抗病毒效果符合文献[ 37]。蜜二糖的水平和dehydroshikimic酸XFC治疗组无显著差异,但有一个倾向健康集团,这表明XFC可能达到一定效果调节糖代谢的紊乱和钢筋抗炎能力。

Tartronic酸转化为 β丙氨酸是辅酶a的一个组成部分,它起着重要的作用在柠檬酸。腺嘌呤可以生成尿酸在类风湿性关节炎;腺嘌呤的水平升高导致高尿酸,使软骨损伤。此外,腺嘌呤参与辅因子包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和黄素腺嘌呤二核苷酸(时尚)。这些化合物被逐渐氧化呼吸链生成ATP。我们推测氧化应激导致减少线粒体功能的能力,导致能量代谢障碍( 34]。我们的结果表明,tartronic酸的水平和腺嘌呤在XFC治疗组无显著差异,暗示XFC不规范治疗。

 5。结论

我们使用GC-TOF /女士代谢组学方法,全面有效地阐明AA大鼠代谢产物的变化。使用各种主成分分析等多元统计方法,PLS-DA OPLS-DA, 9个潜在生物标记物被确定。这些生物标志物主要与嘌呤代谢、脂肪代谢、氨基酸代谢、能量代谢。

XFC管理后,2的水平,2-dimethylsuccinic酸,phenaceturic酸、左旋多巴、1,4-dihydroxy-2-naphthoic酸显著改变( p < 0.05 )。dehydroshikimic酸的水平、马尿酸和蜜二糖没有显著差异,但有趋势倾向健康组。这些发现表明GC-TOF / MS-based尿液代谢分析提供可靠的结果,可以使用在现代中医研究。这种技术在识别潜在的应用有效的化合物治疗RA。

 利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

 确认

本研究为国家科技支撑计划资助(2012 bai26b03)。作者感谢Junliang邓博士(Biotree生物技术有限公司,上海,中国)在数据分析提供帮助。

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