广告 自身免疫性疾病 2090 - 0430 2090 - 0422 Hindawi出版公司 683829年 10.1155 / 2012/683829 683829年 研究文章 作用,基于结构的变化由于高度同源的体细胞突变dna结合蛋白和DNA-Hydrolyzing自身抗体以A23P VH域替换 Kozyr 答:V。 1 Kolesnikov 答:V。 1、2 Khlyntseva 答:E。 1 Bogun a·G。 1 sachenko g。 1 Shemyakin i G。 1 Gabibov a·G。 3 西村 ) 1 应用微生物学和生物技术研究中心 142279年Obolensk Serpuhov区 俄罗斯 istc.ru 2 免疫工程研究所 Lyubuchany 142380 俄罗斯 istc.ru 3 Shemyakin & Ovchinnikov有机化学研究所 俄罗斯科学院 Miklukho-Maklaya街16/10,117997年莫斯科 俄罗斯 ras.ru 2012年 11 11 2012年 2012年 04 06 2012年 27 09年 2012年 2012年 版权©2012 A。诉Kozyr et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

在狼疮Anti-DNA自身抗体负责组织损伤。DNA-specific抗体能力的一个子集的DNA乳沟更加有害后进入活细胞破坏核DNA。的起源anti-DNA自身抗体还没有完全理解,DNA-cleaving活动的感应机制仍然是投机。的自身抗体BV04-01源自lupus-prone鼠标是唯一DNA-hydrolyzing免疫球蛋白与已知三维结构。抗体的识别和分析同源BV04-01有助于理解的分子基础和起源DNA-cleaving自身抗体的活性。爆炸搜索确定小鼠anti-DNA自身抗体MRL-4与可变区基因序列高度同源的自体抗体BV04-01。尽管BV04-01显著的同源性,不仅MRL-4没有DNA-cleaving活动,而且降级的生殖系丙氨酸不寻常P23突变导致巨大的亲和力DNA损失。这种效应相反,转移P23突变的BV04-01导致DNA结合显著下降,几乎完全失去催化活性。本文分析两个同源自身抗体和突变体的性质,讨论了不同寻常的体细胞突变的影响发展的自身抗体与dna结合蛋白和DNA-hydrolyzing活动。

 1。介绍

Anti-DNA自身抗体被称为组织损伤的重要因素,在自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮( 1]。主要包含anti-DNA抗体免疫复合物形成组织存款在肾脏导致凋亡细胞死亡和严重的组织损伤 2, 3]。

核酸酶抗体代表自身抗体的一个子集,能够单链和双链DNA和RNA水解( 4, 5]。Anti-DNA自身抗体穿透细胞膜和本地化活细胞的细胞核 6]。此外,某些DNA-cleaving抗体也可以穿透活细胞以caspase-dependent方式导致细胞凋亡,可能是通过引入裂纹核DNA ( 7]。进入细胞的死亡由于DNA-hydrolyzing抗体可以促进组织损伤中观察到的自身免疫性疾病。

尽管经过数十年的研究,发展完整的dna结合蛋白和DNA-hydrolyzing活动缺乏自身抗体。收购亲和力和特异性自身抗体的DNA被认为通过抗原驱动选择继续受损的背景审查机制,通常删除或沉默autoreactive b细胞克隆的健康状态( 1- - - - - - 3]。长期范式,它认为核小体代表主(汽车)antigen-inducing anti-DNA抗体,观察质疑的,外国dna蛋白质复合物也能作为有效的抗原诱导anti-DNA抗体导致lupus-like肾炎蛋白尿和肾小球免疫球蛋白存款( 8, 9]。其他机制,如分子拟态也可能参与诱导anti-DNA自身抗体( 10]。目前,尚不清楚,如果损伤免疫系统审查通常删除autoreactive克隆的成熟需要的高亲和性anti-DNA抗体。外国DNA蛋白质抗体复合物以及与DNA特异性抗体引起的其他迄今未知机制有助于自身免疫性疾病的发展。

在研究小鼠DNA-cleaving自身抗体BV04-01 [ 11, 12),我们认为其关闭同族体anti-DNA抗体MRL-4 [ 13]。重链MRL-4包含一个不寻常的体细胞突变和替换的生殖系Ala-23脯氨酸。在这项研究中,我们证明了单一突变不参与直接与抗原可以引起深刻的交互影响的绑定和催化性质DNA-specific自身抗体。

 2。材料和方法 2.1。化工、材料、菌株和向量的DNA

除非另有规定,化学品购买σ。细菌生长媒体和媒体补充VWR科学(BD Difco)。向量和pET-22b (+) 大肠杆菌菌株 BL21和 BL21( DE3从Novagen获得的)。 DH12S大肠杆菌是表达载体以及pBluescript SK(−)质粒DNA。寡核苷酸是由Syntol和Evrogen。在这项研究中使用的所有解决方案都用18 MΩ超纯水从微孔合成站,高压灭菌消毒。

 2.2。克隆、表达和纯化的单链抗体片段

pET22b(+)向量被PCR-guided诱变取代GCG修改(编码Ala-20 pelB信号肽)的同义词的GCC同时破坏原始Nco我引用。这允许克隆单链抗体结构与5′附加Nco我网站和3′末端pelB基码,以便处理pelB周质的分泌系统释放原生成熟抗体轻链的末端。此外,原癌基因序列编码肽(EQKLISEEDL)两侧5′-Xho II和3′sal我识别网站,是在坐标系与下游His6标记插入Xho我网站。

单链抗体SCA04-01,包含变量的区域BV04-01重和轻链基因,早些时候准备( 12]。这是前进VKF扩增使用菌进行基因(5′土 CCATGGCCGATGTTGTGATGACCCAA)和反向VHR (5′-TTA CTCGAGTGCAGAGACAGTGACCAGAGT)引物引入上游和下游Xho Nco我克隆网站(下划线部分引物序列)。结果PCR产品被甲我和Xho消化,和结扎与修改后的Nco I-Xho我消化pET22b (+)。互补编码VH和六世的dna结合蛋白抗体MRL-4是从相应的放大的RNA,隔绝杂种瘤细胞(a . Theofilopoulos博士提供)使用试剂盒试剂。了VH扩增引物MRL1F (5′-AAGAGCTCTGAGGGTAAAGGCGAGGTGCAGCTTGTTGAGACT)正向引物和VHR反向引物。

放大cDNA编码为六世当时修改附加上游Nco和下游Spe我网站的一部分scFv链接器序列,使用正向VKF和反向KLR (5′aac ACTAGTACCAGATTTTATTTCCAGCTTGGTCCCCGA)引物。VH cDNA放大使用MRLF(5′柠檬酸 ACTAGTAGCGGCTCTGGTAAGAGCTCTGAGGGTAAAGGCGAGGTGCAGCTTGTTGAGACT)向前,VHR反向引物附加下游Xho我站点和上游Spe网站连同其他链接器序列(GSTSGSGKSSEGKG) [ 14]。放大DNA相应VH和六世BV04-01链MRL-4被相应的限制性内切酶消化和克隆到修改pET22b(+)消化由甲我和Xho 3-fragment结扎使用快速结扎DNA试剂盒(罗氏)。

轻链抗体BV04-01准备通过加入V κ来自SCA04-01通过PCR和VKF KRR (5′-ATACTCGAGTTATTC AAGCTTGGTCCCCGAATACGGAACA)引物,C κ放大,使用C小鼠RNA(见上图) κF (5′-TCGGGGACC AAGCTTGAAATAAAA)和C κR (5′tct CTCGAGACACTCATTCCTGTTGAAGCT)引物。V κ片段克隆到修改pET22b(+)向量之间的Nco和Xho我网站,和C κ下克隆下游到V是吗 κ使用PCR-introduced后三世Xho我网站和网站。

DH12S细胞被构造转换编码单链抗体使用电穿孔,和正确的克隆被菌落PCR和DNA测序鉴定。质粒编码BV04-01和MRL-4 scFvs被孤立起来,用于转换BL21 (DE3)细胞。转化株,镀密度足以形成一个草坪的2 xyt介质,包含1%的琼脂,葡萄糖1%,和100年 μg / mL氨苄青霉素,一夜之间成长,从洗培养皿2 xyt介质/ 0.5%葡萄糖,并用于接种4升2 xyt培养基,含有葡萄糖和100年的0.1% μ克/毫升氨苄青霉素。细胞生长在37°C到OD600达到0.9,然后冷却到20°C在冰上,IPTG是添加到文化达到0.2毫米的最终浓度。蛋白质生产持续了额外的10小时20°C和激烈的颤抖。隔离周质的scFvs早些时候执行以下描述协议( 15]。生长完成后,文化是在冰上冷却20分钟和15分钟的离心颗粒状的3000 × g在4°C。缓冲区包含200毫米的颗粒被Tris-HCl, 20%的山梨糖醇,1毫米EDTA, pH值8.0,resuspended 50毫升相同的缓冲和孵化冰与偶尔搅拌1小时。细胞碎片在30000年被离心分离 × g 40分钟。上层清液对螯合广泛透析缓冲区(100毫米氯化钠、50 mM Tris-HCl和pH值8.0)。蛋白质和DNA纯化进行了使用FPLC AKTA系统(通用电气医疗集团)与相应的软件及配件。澄清周质的比例加载在列,预填充了10毫升的爪螯合树脂(Clontech)和平衡同样的缓冲区。洗后列,scFvs筛选了250毫米咪唑,pH值8.0,稀释10倍的离子交换缓冲区(10毫米Tris-HCl、10毫米氯化钠和pH值8.0),和加载MonoQ列(通用电气医疗集团)。洗脱了用人0到0.5 M氯化钠梯度。纯化的重组样本ScFv被Laemmli sds - page分析和验证用单克隆抗体免疫印迹原癌基因肽(罗福斯生物制品)。

2.2.1。定点诱变

这是使用QuikChange闪电定点诱变工具包(安捷伦)执行根据制造商的协议。

 2.3。DNA裂解试验

纯超螺旋形式的pBluescript DNA制备如前所述[ 4]。不同浓度的纯化重组scFvs孵化了1 μ克的质粒DNA在1毫米MgCl面前212小时37°C。反应产物在1%琼脂糖凝胶和可视化解决溴化乙锭染色。百分比从超螺旋质粒转化到环形和线性形式的计算是基于测密度术的结果。收购琼脂糖凝胶图像和随后的微测量是使用GelDoc 2000凝胶文档系统(Bio-Rad)。

 2.4。DNA酶联免疫吸附试验

双链DNA片段的扩增基因组DNA的菌进行基因254个核苷酸 镰刀菌素avenaceum采用5′生物素化的引物(5′Bio-CGAACCATCGAGAAGTTC和5′Bio-CCAGTGGTTAGTGACTGC),由Syntol合成。PCR产品被phenol-chloroform混合物,颗粒状的三卷与后续乙醇离心(10分钟10000 g)和溶解在缓冲包含20 米氯化钠Tris-HCl pH值7.5和100毫米。纯化的DNA片段进行使用凝胶过滤列Superdex G75(流量0.5 mL / min,样本体积0.2毫升)。

纯化PCR片段被稀释缓冲和固定化HBC NeutrAvidin条(热科学)1 μ克每口井的DNA。游离DNA被通过三轮洗涤缓冲Tween-20补充0.02%。井的表面与超块阻塞阻止缓冲区(热科学)。重组scFvs被应用于油井在一系列浓度从0.005到5 μg抗体/在相同的缓冲区,在室温下培养1小时,和洗了三次缓冲区a绑定单链抗体被杂化anti-c-myc单克隆抗体(罗福斯生物制品),上述洗涤过程,随后是探测到anti-mouse Fc-fragment过氧化物酶共轭和可溶性三甲衬底(热科学)。反应是停止添加10% H2所以4在405纳米和吸光度测定。分光光度测量是采用Varioskan Flash multimodal板分光光度计(热)。

 2.5。SPR测量

表面等离子体共振试验进行雇佣ProteOn XPR 36分析仪(Bio-Rad)。测量进行了缓冲区,包含20毫米Na2HPO4/不2阿宝4渐变20,137毫米氯化钠0.01%,100 mg / L牛血清白蛋白。生物素化的DNA片段,获得如前一节所述,是表面的固定化NLS ProteOn传感器芯片。单链抗体与DNA相互作用的确定在75流量 μL / min。使用ProteOn管理软件处理实验数据,计算动力学参数进行了基于朗缪尔模型的蛋白质吸附。

 3所示。结果

在试图探索DNA-hydrolyzing抗体的发病率已经DNA-specific特征自身抗体,我们跑爆炸搜索使用序列编码六世和VH BV04-01领域。

爆炸的同系物的催化轻链抗体BV04-01透露的相对丰度相同或高度同源的测序抗体轻链。同时,包含这些L-chains大都是针对抗原的抗体核酸。从ELISA数据来看,孤立的重组L-chain BV04-01没有显示任何DNA-hydrolyzing活动。

只有几个抗体L-chains高度同源的BV04-01特异性DNA和被列为自身抗体。令人惊讶的是,其中一个anti-DNA autoantibodies-MRL-4 [ 13]包含VH域,不同于VH BV04-01只有为数不多的残留物。

因此我们试图执行比较分析MRL-4和BV04-01对dna结合蛋白和DNA-cleaving活动为了获得新的信息关于潜在的起源在自身免疫性抗体anti-DNA催化活性。

基因编码MRL-4 VH和六世从相应的杂种细胞克隆细胞株用于构造scFv作为BV04-01是( 14]。重组MRL-4 scFv生产 大肠杆菌显示没有DNA-hydrolyzing活动使用超螺旋质粒DNA作为衬底。孵化的MRL-4 scFv各种寡核苷酸并没有导致检测DNA-hydrolyzing活动。同时,更换BV04-01 MRL-4六世六世的单链抗体BV04-01产生了抗体与DNA-hydrolyzing活动区别于BV04-01 scFv(质粒乳沟的87%和83%,分别地。根据密度测量数据)。

因为它已经复杂的3 d结构的推断BV04-01 Fab片段与(dT3) [ 11),后来由预测抗体活性位点的分子模拟和metal-binding口袋 12),形成antibody-DNA复杂弯曲DNA,可能激活的磷酸二酯键。随后的水解和产品发布必要的催化营业额需要ligand-antibody构象变化复杂。从以前的研究,符合假设抗原驱动的本质anti-DNA自身抗体( 1- - - - - - 3),众所周知,一些元素的重链包括CDRH3直接接触DNA抗体结合部位( 11]。同时,对结构的构象决定因素动力学DNA-hydrolyzing抗体。酶催化意味着是营业额的能力,换句话说,重复的构象变化伴随衬底绑定,过渡态的形成,产品发布。因此,我们试图确定抗体元素的变化可以影响构象antibody-antigen复杂的重组。为此,我们进行了定点诱变在选定地点MRL-4 BV04-01抗体链,这可能会影响这些抗体的构象变化,和筛选DNA结合蛋白的能力产生的突变体的DNA ELISA。对齐的一级结构单链抗体BV04-01, MRL-4,他们获得的突变体呈现在图 1。

氨基酸序列对齐的轻、重链可变区抗体BV04-01, MRL-4及其突变体。

一个不同寻常的体细胞突变,L4P(卡巴特编号)存在于BV04-01重链。降级的生殖系基因序列突变,以及更换脯氨酸,丙氨酸,并不影响DNA的绑定和水解BV04-01 ScFv。另一个不寻常的变异中发现MRL4替换的生殖系Ala-23 Pro。与BV04-01 L4P回归,回归的P23 MRL-4 scFv生殖系序列导致重大损失的DNA抗体的结合能力。然后问如果收购P23 BV04-01 VH片断能够造成任何改变DNA的DNA结合蛋白和DNA水解反应和分析活动A23P突变的BV04-01 ScFv。出乎意料地,不仅DNA裂开活动被废除,但也DNA结合显著下降是由于A23P突变BV04-01 VH,从ELISA数据。ELISA结果呈现在图 2。超螺旋DNA水解底物突变体如图 3。

DNA结合BV04-01和MRL-4单链抗体ELISA及其突变体化验。纵轴代表吸光度测量405海里。水平轴显示大量的重组抗体/ ELISA: 1: 5 μg, 2: 1 μ0.5 g, 3: μ0.1 g, 4: μ0.05 g, 5: μ0.01 g, 6: μ0.005 g, 7: μ8 g,缓冲区没有抗体。实验误差对测定吸光度值计算在一系列5-independent ELISA实验和中等吸光度值没有超过5%。

DNA单链抗体BV04-01水解,MRL-4及其突变体。超螺旋质粒基质与0.1 mkg孵化一夜之间不同ScFv缓冲区,包含20毫米Tris-HCl pH值7.5,100毫米氯化钠,MgCl 1毫米2。巷1:控制质粒没有抗体;巷2:质粒与ScFv突变BV04-01 VH A23P;巷3:质粒与ScFv突变MRL-4 VH P23A;巷4:质粒与ScFv MRL-4;巷5:质粒与ScFv BV04-01。

考虑重大损失的DNA结合突变效应MRL-4 Pro在VH23阿拉巴马州,我们接下来分析了降级的Pro的生殖系Ala MRL-4 VH。DNA结合的MRL-4 scFv包含P23A VH域降至水平可比的SCA04-01 VH A23P。提供准确的定量数据改变dna结合蛋白的突变体和野生型变异能力MRL-4 scFv SCA04-01,我们分析了这些抗体使用表面等离子体共振(SPR)技术。SPR数据表明,DNA结合效率最大的减少被发现的SCA04-01 VH A23P突变。取代丙氨酸,脯氨酸导致下降约2.5个数量级 K d 和损失DNA-hydrolyzing活动的超螺旋DNA裂解试验检测不到的水平。降级的P23 MRL-4 VH生殖系Ala的影响不明显,导致20倍的损失 K d (表 1)。

亲和常数BV04-01和MRL-4 ScFvs及其突变体由SPR。

野生型和突变ScFv ds DNA ELISA * ds DNA SPR, M1 * *
BV04-01 One hundred. ± 1.21 ( 1.8 ± 0.31 ) × 10 - - - - - - 9
BV04-01 A23P 1.2 ± 0.02 ( 2。9 ± 0.67 ) × 10 - - - - - - 7
MRL-4 One hundred. ± 1.52 ( 1.7 ± 0.18 ) × 10 - - - - - - 8
MRL-4 P23A 4.6 ± 0.61 ( 8.5 ± 0.84 ) × 10 - - - - - - 6

*绑定的野生型和突变体单链和双链DNA在固相抗体ELISA。结果突变体表达相对单位利用野生类型标准,相对单位设置为100。

* *绑定动力学与双链DNA片段分析了SPR配体和抗体作为分析物和计算 K d 值。

1绑定的野生型和突变体双链DNA单链抗体。

4所示。讨论

脯氨酸是一种独特的氨基酸,会影响蛋白质的构象域或甚至一个完整的蛋白质。脯氨酸转换酶活性调节中扮演重要的角色在某些合成或监管途径( 16]。在某些脯氨酸蛋白质活性构象构象开关被激活的酶催化prolyl顺反异构酶。没有抗体有关脯氨酸交换机的数据,直到Feige等人发现了脯氨酸依赖开关控制CH1域折叠引起CH1-CL大会( 17]。Proline-dependent构象的CDR循环中扮演重要的角色塑造antigen-binding网站。

Kappa-chain cis-proline构象L95位置CDRL3循环,有助于保持规范的结构非常稳定,尽管高度的可变性的其他氨基酸残基在这个循环。其他规范CDR循环抗体也可以包含Pro残留物( 18]。此外,在脯氨酸的缺席,CDR序列可以采用non-X-proline顺式构象稳定所需的抗体结合部位( 19]。

已经指出,老鼠脯氨酸残基的比例增加了42%和50%在人类抗体亲和力成熟( 20.]。已知脯氨酸的使用变化主要局限于和弯折区域,提供整体结构稳定性增加,同时减少所需的能量将稳定( 19]。在anti-DNA自身抗体,这种类型的脯氨酸突变(T45P)可以发现,例如,在33的重链。制备单克隆抗体( 21),把地区发生CDRH1和CDRH2之间。

我们的数据表明,果仁糖残基通过体细胞突变发生在收购过程可以发挥重要作用和调制anti-DNA抗体绑定和催化活性。MRL-4, P23获得体细胞突变导致20倍增加自身抗体亲和力的DNA比较抗体变异包含回归生殖系。突变的A23P BV04-01重链导致产出减少DNA结合和完全消除催化活性。23日在重链中的位置是立即下游不变的半胱氨酸残基形成链内的二硫键。变化的灵活性肽键旋转在这样的位置在重链折叠可能影响最终的构象CDRH1并有可能引起其他长途对阵线结构的影响。

发现天然突变可以改变绑定或催化性能anti-DNA自身抗体通过影响阵线结构而非特定antibody-antigen接触关于成熟过程提出了一些重要问题导致发展anti-DNA自身抗体。可用数据表明,dna结合活性逐渐的获得是通过体细胞hypermutation抗体和抗原驱动选择( 1- - - - - - 3, 21]。取代氨基酸,如带正电荷的精氨酸,负责抗体亲和力增加与DNA形成直接联系( 22]。抗原是否代表DNA蛋白质复合物,DNA模仿,或分子与核酸也有待确定( 2, 10]。与此同时,在许多情况下,没有观察到抗原驱动之间的相关性选择和DNA结合蛋白,例如,当一个anti-DNA自身抗体恢复其生殖系显示没有改变DNA结合( 23]。

目前,P23的生理意义的突变形成致病性anti-DNA自身抗体不能确定由于有限的可用数据。例如,文学的分析揭示体细胞突变T24P重链的小鼠可交叉反应的anti-pneumococcal / anti-dsDNA自身抗体( 24]。尽管广泛分析体细胞突变的作用的抗体在DNA结合亲和力和致病性,角色T24P突变没有研究。早些时候,被假定不寻常的体细胞突变在狼疮自身抗体,包括那些发生在FRs,不会出现由于抗原激活,而是反映缺乏负选择B细胞获取autoreactivity通过体细胞突变。这可能导致增强抗体基因的突变分道扬镳的b细胞生存的热点目标( 25]。与突变允许克隆删除机制受损,高亲和性的路线anti-DNA自身抗体可以很短,像MRL-4 P23A生殖系回复突变体显示绑定到DNA水平很低。

为什么P23突变/降级影响这样一个反对否则结构相似的抗体吗?根据P23异构化,结构的CDRH1 MRL-4可以从BV04-01的显著差异,所以可能会影响的整体构象antigen-binding MRL-4。后者可以更加刚性比较BV04-01,由于存在P23强加的限制。笨重W105残留的CDRH3 MRL-4,缺乏BV04-01,可能占antibody-DNA复杂的刚度增加,与DNA通过叠加机制交互或形成与轻链疏水接触。更换由丙氨酸P23 MRL-4可以介绍整个抗原抗体复合物的灵活性,增加某些氨基酸残基的运动包括,例如,W105,从而削弱antibody-DNA,或VH-VL交互,或两者兼而有之。

相反,BV04-01需要antibody-DNA复杂的催化活性保持很大程度的灵活性,作为底物的催化反应意味着初始绑定一种酶,构象重排降低反应所需的能量势垒,和随后的释放反应产物(年代)。可以推测,引入脯氨酸的底部CDR1可以减少它的灵活性,通过“冻结”在特定的构象,因此不仅扰乱His31与DNA的联系( 11),但也阻碍了整体构象变化要求成功的催化磷酸二酯键的乳沟。有趣的是,没有其他的DNA-hydrolyzing抗体与已知序列( 26, 27)包含职业或其他潜在conformation-restricting突变或相邻的立场。3 d结构之间的比较分析MRL-4, BV04-01, VH23突变体可以帮助理解P23突变对dna的影响的机制和DNA-hydrolyzing活动。

广泛寻找anti-DNA自身抗体含有这种或类似的突变和他们的分析将有助于回答而观察到的现象是一个孤立的案例或成熟的一个重要途径的dna结合蛋白和DNA-hydrolyzing自身抗体导致系统性自身免疫性疾病发病机理。

 5。结论

收购高亲和力的DNA自身抗体是继续通过体细胞hypermutation和被认为是抗原驱动。相应的突变残留经常参与DNA直接接触。在这篇文章中,我们描述conformation-dependent调制的DNA结合蛋白同源自身抗体的能力,即改变刚度突变的DNA结合蛋白(MRL-4)抗体阵线或其部分导致显著增加抗体亲和力的DNA。在DNA-hydrolyzing抗体(BV04-01)相同的突变,引入了人工,亲和力、废除了催化活性下降。

突变的效应差异观察提示构象的灵活性的重要性antigen-binding网站的催化抗体。因此,收购DNA结合的途径可以不同结构相似的抗体,和这种差异可能反映了特定条件下抗体成为催化。知识的条件可以帮助开发催化抗体针对目标的特定抗原表位抗原的选择。需要进一步的结构性和统计数据来估计这一现象的作用anti-DNA成熟的自身抗体。

 承认

作者表达自己的感谢教授答:Theofilopoulos MRL-4与杂种细胞类型提供压力。

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